全 文 ：·1886· 中草药ChineseTraditionalandHerbaIDrugs第36卷第12期2005年12月
项下操作，由回归方程计算样品中各对照品的量，鼓
槌菲、毛兰菲、毛兰素、鼓槌石斛素、鼓槌联苄及1，
2，5一三羟基一7一甲氧基一芴酮的平均回收率(”=6)分
别为95．9、97．0、101．6、96．0、97．2、94．0，RSD分别
为2．54％、1．86％、2．30％、1．62％、1．87％、
1．65％。
2．9样品测定：按色谱条件，以鼓槌菲、毛兰菲、毛
兰素、鼓槌石斛素、鼓槌联苄和1，2，5-三羟基7甲
氧基一芴酮为对照品，考察不同采收时间的鼓槌石斛
中各成分量变化(n一3)，结果见图1，表1。
1 A
^^凡
5
．八八
———1———1———1———1———_1———]———十
0 10 20 30
r／rain
l一毛兰菲21。2，5三羟基7甲氧基药酮3鼓槌石斛素
4毛兰紊5鼓槌菲6鼓槌联苄
1 conlusarin2 dendroflorin3 ehrysotoxine4 erianin
5chrysotoxene6 chrysotoblbenzyl
围1对照品(A)和样品(B)HPLC色谱围
Fig．1HPLCchromatogramofreferencesubstances
(A)andsample(B)
3讨论
流动相的选择：由于石斛中的组分相当复杂，各
组分达到理想分离较为困难，经过多次实验优选，本
表1不同采收期鼓槌石斛中酚类化合物的测定(”一3)
Table1 DeterminationofphenolsinD．chrysotoxum
collectedindifferenttime抽=3)
实验选用甲醇一水(58：42)为流动相进行分离，取得
较好效果。
检测波长的选择：联苄、菲及芴酮类化合物的最
大吸收波长在210、270及257nm左右，在237rim
处各化合物均有较强的吸收，经综合考察并结合参
考文献选择237rim为检测波长。
从表1可以看出不同采收期的样品各成分总量
有明显差异，3月时量最低，从4月开始各成分量逐
渐增高，以后分别在6月、9月及11月达到3个高
峰，其中11月量达到最高。从总体上讲这几种对照
品在春季2～4月量最低，秋冬季量相对较高，由此
可以看出传统上石斛药材的采收时间定于秋冬季是
有科学道理的。
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胡黄连质量评价方法的研究
邬国庆，张小茜
(北京市药品检验所，北京100035)
胡黄连为我国传统中药，为玄参科植物印度胡
黄连Picrorhizakurooa”o”RoyleexBenth．的干燥
收稿日期：2005—02一i0
根茎，一向依赖进口。20世纪60年代，在西藏和云
南西北部发现同属植物西藏胡黄连P．
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月· 887·
scrophulariifloraPennell，并栽培作为印度胡黄连
的代用品“]。本研究的对象是《中国药典))2005年版
收载的胡黄连，为国产西藏胡黄连。其性寒，味苦。具
清湿热，除骨蒸，消疳热的功效。用于湿热泻痢，黄
疽，痔疾，骨蒸潮热，小儿疳热。现代研究证明胡黄连
具有清热利湿、保肝利胆，降酶的作用。
据文献报道，胡黄连中的主要活性成分为环烯
醚萜苷类，以胡黄连苷I、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ
为主[2]。本研究采用薄层色谱法与高效液相色谱法
分别对胡黄连苷I、胡黄连苷Ⅱ进行鉴别和定量测
定。建立了科学、可行的质量控制方法。
I仪器、试剂与样品
仪器：岛津10A高效液相色谱仪，试剂：甲醇为
色谱纯；磷酸为优级纯；其他试剂均为分析纯。对照
品：胡黄连苷I、胡黄连苷Ⅱ，由北大世佳研究中心
提供(质量分数均大于98％)。
硅胶GF。。薄层板(烟台化学工业研究所)。
胡黄连产地分别为西藏(5份)、四川(3份)、云
南(2份)、广西(i份)，另有2份为市售品，共计13
份，经本所赵惠萍主任药师鉴定为胡黄连P．
scrophulariifloraPennell。
2薄层色谱鉴别
取本品粉末0．2g，加甲醇10mL，超声处理20
min，滤过，滤液作为供试品溶液；另取胡黄连苷I、
胡黄连昔Ⅱ对照品，分别加甲醇制成各含1mg／mL
的溶液，作为对照品溶液。吸取上述3种溶液各10
pL，分别点于同一硅胶GF：。。薄层板上，以水饱和醋
酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，再以氯仿甲醇
醋酸乙酯(7：3：5)为展开剂，展开，取出，晾干，置
紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照
品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图1。
i胡黄连苷I 2-胡黄连苛I3～I5样品
1 pficrosideI 2 pricrosidel 3】5-samples
田1胡黄连样品的TLC图谱
Fig．1TLCehromatogramsfP．scrophulariiflora
3 HPLC法测定
3．1 色谱条件：色谱柱：Alhechc18柱(250mm×
4．6mm，5／zm)，流动相：甲醇一水一磷酸(35：65：
0．1)。体积流量：1．0mL／min。检测波长：275nm。
柱温：40℃。色谱柱的理论板数按胡黄连苷Ⅱ峰计
算应不低于3000。分离度：大于1．5。见图2。
曩
=
～二～且⋯～豆⋯一～
B 豢
譬 窘
，L⋯。k一基．．
图2胡黄连苷l、胡黄连苷Ⅱ对照品溶液(A)
和样品(B)的HPLC图谱
Fig．2HPLCehromatogramsfreferencesubstances
solutions(A)andample(B)ofpricroside1
andpricrosideⅡ
3．2对照品溶液的制备：精密称取胡黄连苷I、胡
黄连苷Ⅱ对照品各10mg，置同一50mL量瓶中，加
甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取imL，置
5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。
3．3 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)
0．1g，精密加入甲醇50mL，称定质量，超声处理30
rain，放冷，用甲醇补足质量，摇匀，滤过，精密量取
续滤液1mL，置5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，
摇匀，用微孔滤膜(o．45bem)滤过，取续滤液，即得。
3．4线性关系考察：精密称取胡黄连苷I对照品
4、，。⋯*．1ll』{醵眭汁Ⅱ对照品6．18mg，置50mL量
鼽rIt．㈨Iff醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取
0．。、1．0、2．0、3．0、4．0、5．0mL，分别置5mL最瓶
中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取10“I。，
注入液相色谱仪，再精密量取对照品溶液(胡黄连苷
I 4．85mg一50mL，胡黄连苷Ⅱ6．18mg一50
ml，)15beL，注入液相色谱仪，记录峰面积，以进样
量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果
表明胡黄连苷I在0．097～1．455beg线性关系良
好，其回归方程为：Y=一60．4573+5737．8307
x，r一0．9999；胡黄连苷Ⅱ在0．1236～1．8540pg
线性关系良好，其回归方程为：Y一94．7922+
11601．9337X，r=0．99997。
3．5稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液(西藏
1)10beL，分别于配制后0、1、3、7、11、20h依法测
万方数据
·1888· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月
定，结果表明，供试品溶液在20h内基本稳定，胡黄
连苷I峰面积的RSD1．77％，胡黄连苷Ⅱ为RSD
1．42％。
3．6精密度试验：精密吸取同一供试品溶液(西藏
1)，进样10L，重复进样5次，结果胡黄连苷I峰
面积的RSD1．86％，胡黄连苷Ⅱ为RSDl．42％。
3．7重现性试验：取同一批样品(西藏1)5份，按
样品方法制备、测定，结果含胡黄连苷I为
11．21％，RSD1．27％；含胡黄连苷Ⅱ为8．31％，
RSDl．18％。
3．8回收率试验：精密称取已知量的同一批样品
(西藏1，胡黄连苷I11．21％，胡黄连苷Ⅱ8．31％)
约0．05g，分别精密加入对照品溶液(胡黄连苷I
1．8608 mg／mL，胡黄连苷11．5032mg／mL)3
mL与甲醇47mL，按供试品溶液的制备方法制备
并测定，计算回收率，结果胡黄连苷I平均回收率为
100．90％，RSD为1．32％，胡黄连苷Ⅱ平均回收率
为99．85％，RSD为1．74％。
3．9样品测定；按上述方法，共测定13批胡黄连药
材，结果见表1。
表1样品测定结果抽一2)
Table1 Determinationof$8nlpleS(n=2)
编产地胡黄连胡黄连
编
产地
胡黄连胡黄连
号’“苷I／％苷1／％号
⋯
苷1／蹦苷l／％
1西藏112．28 9．10 8四川3 8．33 6 95
2西藏210．98 6．40 9云南1 0．55 12．15
3西藏313．11 6．67 10云南2 3．42 6．34
4西藏41102 7．32 11广西 1I86 7．15
5西藏51046 7．2112购自安国4．785．61
6四川1 8．14 10．1813购自湖北 9 s．96
7四川2 6．78 6 22
4讨论
4．1 曾采用①甲醇一水一36％醋酸(45：55；1)、②
甲醇水一36％醋酸(40：60：1)、③甲醇一水(35：
65)为流动相，结果①、②不能同时测定两个成分，③
的分离效果不理想，故最终采用甲醇一水一磷酸(35：
65：0．1)为流动相，可同时测定胡黄连苷】与胡黄
连苷Ⅱ，且分离良好。
4．2检测波长的确定：取胡黄连苷I与胡黄连苷Ⅱ对
照品的甲醇溶液，分别在200～400nm波长进行扫
描，记录其吸收光谱，结果胡黄连苷I在275Dm处有
最大吸收，胡黄连苷Ⅱ在263．5与292．5Dm处有最
大吸收，经比较上述3个测定波长，在275Ylm处胡
黄连苷I有最大吸收，胡黄连苷Ⅱ有较大吸收，可同
时测定两个成分。故采用275nm作为检测波长。
4．3实验条件的选择
4．3．1提取溶剂的选择：以不同浓度的甲醇、乙醇
为溶剂，采用超声提取的方法，测定同批样品，结果
表明，采用甲醇为溶剂，提取较完全。
4．3．2超声处理与加热回流的比较：以甲醇为溶
剂，采用超声处理与加热回流的方法，测定同批样
品，结果表明，采用超声处理30rain，提取较完全。
4．3．3提取时间的选择：以甲醇为溶剂，分别超声
处理15、30、45min，测定同批样品，结果表明，采用
甲醇为溶剂，超声处理30min可提取完全。
4．4从多数样品的测定结果看，胡黄连苷l与胡黄连
苷Ⅱ的量大体相当，但个别样品的胡黄连苷I量较低。
4．5水分、总灰分、酸不溶性灰分的测定：为更好地
控制药材质量，还采用烘干法测定了药材中的水分，
并按照《中国药典))2005年版中的灰分测定法测定
了13批样品的总灰分与酸不溶性灰分。见表2。
表2水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物硼定结果
Table2 Determinationofwatercontent，totalash，
acid．insolubleash，andxtracts
编号 产地 水分／％总灰分／％酸不溶性灰分／％浸出物／％
4．6浸出物测定：本品主含环烯醚萜苷类成分，在
乙醇中有较好的溶解度，因此认为用醇溶性浸出物
能够起到控制胡黄连质量的目的。采用热浸法，以乙
醇为溶剂，测定了13批样品的浸出物，其中最高值
为49．66％，最低值36．33％。见表2。
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万方数据
胡黄连质量评价方法的研究
作者： 邬国庆， 张小茜
作者单位： 北京市药品检验所,北京,100035
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(12)
被引用次数： 9次

参考文献(5条)
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