全 文 ：金水宝片质量标准的研究
江西省药 品检验所 (南 昌 3 30 0 4) 6
江西金水宝制药有限公司
许 妍
梅玲华
摘 要 用薄层 色谱法鉴别金水宝片 中氨基酸 、 甘露醇 , 用反相 高效液相色谱法测 定其腺昔含量 ;
本品现行卫生部药品标准测定方法操作较繁 , 误差较大 , 采用本 文方法后 ,定性 、定量方法简便 、 灵
敏 、 准确 。 表明建立的方法对控制本品质量更 为完善 。
关键词 金水宝 片 腺昔 反相高效 液相 色谱法 薄 层色谱法
008兑甘-20·1
金水宝片为发酵虫草菌粉经加工制成 的
片剂 , 临床上 具有补 肾保 肺 , 秘精益 气之功
能 。 本品为单 味制剂 , 其原料发酵虫草菌粉
( C s
一
4 ) 与天然冬虫夏草有相 似的化学成分 。
据研究 ,本品主要含有以 下 5 种化学成分 : ①
核昔类化合物和腺昔等 ;②幽醇类化合物 ; ③
糖及糖醇类化 合物如甘露醇等 ; ④氨基酸类
化合物 : 游离 氨基 酸 15 种 , 水解 氨基 酸 18
种 ;⑤其它类化合物 。 药理实验表明 lj[ ,腺昔
为发酵虫草菌粉的活性成分之一 , 有 明显的
抗缺氧 、 降血脂等作用 。
1 仪器与试药
W at er
s 2 0 9 系列高 效液 相色谱 仪 , 5 01
泵 , 4 8 6 紫外检测器 , 7 4 0 积分仪 。试剂均为分
析纯 , 腺昔对照 品由江西省药品检验所制备
与鉴定 , 含量 ) 98 % 。 甘露醇对照品为分析纯
试剂 , 氨基酸对照品为生化标准制剂 。 金水宝
片 由江西金水宝制药有限公司提供 。
2 鉴别试验
2
.
1 氨基酸 : 供试品溶液的制备 : 取本品 , 去
薄膜衣 ,研细 ,取约 1 . 2 9 , 加水 10 m L , 加热
至沸 ,滤过即得 。
对照品溶液的制备 : 取亮氨酸 、 丙氨酸和
撷氨酸对照品 , 加水制成 l m工J 含亮氨酸和
丙氨酸各 l m g 、 绷氨酸 0 . s m g 的混合溶液
即得 。
吸取上述供试 品溶液 3 拌L 对照 品溶液
2 拜L , 分别点于同一 以梭 甲基纤维素钠 为粘
合剂的硅胶 G 薄层板上 , 以 正丁醇 一冰醋酸 -
水 (4 : 1 : 1) 为展开剂展开 , 取出晾干 , 喷以
0
.
2 %苟三酮 乙醇试液 ,热风吹至斑点显色清
晰 。 供试品色谱中 ,在与对照品色谱相应位置
上 , 显相 同颜色的斑点 ( 图 1 ) 。
2
.
2 甘露醇 : 供试品溶液的制
备 : 取含量测定项下 的供试 品
溶 液 1 5 m L , 蒸 干 , 加 5 0% 乙
醇溶液 5 m L 使溶解 , 即得 。
对照 品溶 液的制备 : 取 甘
露醇对照品 ,加 50 % 乙醇溶液
制成每 l m L 含 g m g 的溶液 ,
即得 。
吸 取 上 述 供 试 品 溶 液 3 1 . 氮基酸 对照
匹 , 对照 品溶 液 2 ; L , 分别 点 竺 2 · 华试品于 同一硅 , 。 、 层板上 , 以 异瞿斗嚣霭丙醇 一乙 酸乙 醋 一水 (9 , 6 ’ 2) 的 T L c 图谱
为展 开剂展开 ,取 出 , 晾干 , 喷
以茵香醛试液 , 在 1 3 0℃烘至斑点显色清晰 。
供试 品色谱 中 ,在与对照品色谱相应的位置
上 ,显相 同颜色的斑点 ( 图 2) 。
3 金水宝片的含 , 测定
3
.
1 色谱条件与适应性实验 : 色谱柱 : 国产
YW G
一
C
1 8柱 ( 4 . 6 m m X 3 0 0 m m ) ; 柱 温 : 室
温 ;流动相 : 2% 四氢吠喃的磷酸缓冲溶液 [.0
0 6 6 m o l / L K H
Z
P O
4一 0
.
6 6 m o l /L N a
Z
H P O
4
, .
A d户” s : x u y a乎 , J i a n g x i rP o v in e i a l I n s t i t u t e f o r Dr u g c o n t or l , N a n e h a n g` _ 好 _ 妍 _ 198 8 年毕业于中 国 药科大学 中药 系 , 获理学士学位 , 一直 在江西省药品检验所工 作 , 任主管药师 ,从事中药鉴足和质量标准的研究 , 已 发表论文数篇 。
《中草药 》 1 99 9 年第 3 0 卷第 7 期 · 5 0 3 ·
甘露醉 对照品
2 供试品
( 4
: 6 ) 〕 , 流速 l m L /m i n , 检
测波长 26 0 n m 。 理论板数按
腺 昔 峰 计 算 , 应 不 低 于 3
0 0 0
。
3
.
2 线性关系的考察 : 精密
称取 1 05 ℃减压 干燥 至恒重
的腺 昔对照品 10 m g 置 1 0 0
m L 量 瓶 中 , 用 50 % 乙 醇 溶
解并稀释至刻度 , 摇匀 。 吸取
2
.
5 m L 于 1 0 m L 量瓶中 ,加
流动相稀释至刻度 ,摇匀 。 吸
m L 的腺昔 对照 品溶液 2 0 拌L , 重复 进样 6
次 ,测定峰面积值 ,计算得到 R S D 一 0 . 6% 。
3
.
6 重现性试验 : 取 同一批号样品 6 份 ,分
别依法提取制成供试品溶液 ,进样 20 拜L 测
量峰面积并计算含量 。 结果表明 , H P L C 进样
分析很好 , R S D 一 0 . 9% 。
3
.
7 回收率试验 : 取已 知含量 的样 品 6 份 ,
精密称定 ,分别加入腺昔对照品 ,依法制成供
试 品 溶 液 , 并 测 定 其 峰 面 积 。 结 果 为
9 8
.
9 1%
,
R S D ~ 1
.
3%
。
3
.
8 样品的测定 : 分别精密吸取对照品溶液
与供试 品溶液各 2 0 拌L , 照上述色谱条件测
定 (色谱 图见 图 3 ) , 按外标一点 法计算腺昔
含量 , 同时用薄层紫外分光光度测定法作对
照试验 ,结果见表 1 。 从表 1 可知 , H P L C 法
和紫外分光光度法所测定腺昔含量比较无显
著性差异 。
氨基 酸 的 T L C
0000口
O
圈 2 金水宝片 取 2 . 5 、 5 、 1 0 、 1 5 、 2 0 m L 分别
中 甘 礴 醉 的 置 25 m L 量瓶 中 , 分别 以 流
TL c 图谱 动相稀释至刻度 , 摇匀 。 精密
吸取各稀释液 20 拌L 注人 液相 色谱仪 , 以 峰
面积 Y 为纵坐标 , 腺昔量 X 为横坐标 , 得到
一近似通过原点的直线 , 计算得 回归方程为 :
Y一 3 3 9 4 3 3 4X 一 2 4 1 2 8 , r 一 0 . 9 9 9 6 。 结果表
明 ,腺昔量在 s x l o 一 ”一 l o x l o 一 2 拜g 范围 内
与其峰面积呈现 良好 的线性关系 。
3
.
3 供试品溶液的制备 : 取本品 1 0 片 ,去薄
膜衣精密称定 ,研细混匀 ,精密称取 L 2 9 置
5 0 m L 量瓶中 , 加 5 0% 乙醇 溶液约 3 0 m L ,
超声处理 30 m in , 取 出放冷 , 用 50 写乙醇溶
液稀释至刻度 , 摇匀 。 取 25 m L 置 10 o m L 量
瓶中 , 加流动相稀释 至刻度 , 摇匀 , 静 置 , 过
滤 ,弃初滤液 , 取续滤液 用 0 . 45 拌m 的微孔
滤膜过滤 , 收集滤液即得 。
3
.
4 提取方法 : 提取溶剂及时 间的考察 , 曾
用过乙醇回流提取后再用硅胶柱和多种大孔
树脂柱处理的方法 、 乙醇超声法 、 乙醇超声后
再硅胶等柱除杂的方 法 , 经液相 色谱分析显
示 , 图谱相近 , 因此采用 乙 醇超声液 直接进
样 ,方法简便 ,结果稳定 。 据文献 z[, 3〕报道 ,核
昔类化合物易溶于水和 乙醇 ,难溶于其 它有
机溶剂 ; 而水煎煮液杂质较 多 , 采用 50 %乙
醉溶液为溶剂提取效果最好 。 通过试验不同
的超声时间 ,结果表明超声时间 3 0 m in 最为
合适 。
3
.
5 精密度试验 : 精密 吸取浓 度为 10 拜g /
.
5 0 4
-
l
, 腺 昔对照品 2 . 供试品
图 3 金水宝片中腺普的
H P L C 色谱图
鉴别 是对 本 品 中含
量 较 多 的氨 基酸 的
斑点进行 了归属 , 使
薄层 鉴别 的信 息增
加 , 更具 鉴 别 意 义 。
原部 颁 标准 中规定
不少 于 5 个斑点 ,但
由于 有 些斑 点 是不
常见氨基酸 , 归属有
一定困难 , 因此只对
亮 氨 酸等 3 个 斑点
进行 了斑点鉴别 。
表 1 对照试验结果 (n ~ 3)
批号
HPLC 法
(毫克 /片 )
R S D (肠) 萦外分光光度法 (毫克/片)
尺S D (% )
97 1 20 7
9 712 0 8
97 1 20 9
0
,
67
0
.
59
0
.
63
: :
: ::
: ;
原部颁标准用纸层析鉴别甘露醇 ,斑点
易扩散 ,操作难 以掌握 , 现改用薄层鉴别 , 斑
点圆整 、集 中 ,效果更好 。
参 考 文 献
1 吕瑞绵 , 等 . 徽生物学通报 , 1 9 8 3 , 9 ( 4 ) : 1 6 6
2 章观德 , 兮 . 药物分析杂志 , 19 8 7 , 了( 1) : 6
3 林启寿 . 中草药成分化学 . 北京 : 科学 出版社 , 1 9 7 7 : 9 1
L 1 9 9 8
一 i 之一七己 收稿 )
薄层扫描法测定真心平胶囊中延胡索乙素含量
天津市药 品检验所 ( 3 。。。 7 。 ) 王 杰 索 李 建 吕 归 宝
摘 要 采 用硅胶 G 薄层层析 对含 有延 胡索 、 丹参等 7 味药材 的制剂 中延 胡索 乙素进行分离分
析 , 得到分离度高 、 背景干扰小 的薄层层析图谱 。 建立 了含量测定的方法 , 平均 回收率为 10 . 58 % ,
R S D 为 2 , 3 % ( n ~ 5 ) 。
关键词 真心平 胶囊 延胡索 乙素 薄层色谱法
真心平胶囊 由延胡索 、 丹参 、 括楼等 中药
组成 。延胡索为主药 ,其主要成分 为延胡索乙
素 , 该制 剂质量标 准研究 中选择 了延胡索乙
素为含量测定成分 。 本方法采用氨水碱化后
直接 乙醚提取 , 利用硅胶 G 薄层层析对样品
进行分离分析 , 建立了真心 平胶囊 中延胡索
乙素含量测定方法
1 实验部分
1 1 仪器 与试剂 : 岛津 C S 一 9 0 0 0 型 薄层扫
描 仪 , 定量 毛细管 ( C A M A G 公 司 ) ; 延胡索
乙 素对照 品 ( 中国药品生物制品检定所 ) ; 真
心平胶囊 由天津万通药业有 限公 司提供 ; 试
剂均为分析纯 。
1
.
2 供试液 的制备 : 取真 心平胶囊 内容物
10 9 精密称定 , 置 2 5 0 m L 棕色锥形瓶中 ,加
入浓氨水 4 0 m L ,摇匀 ,超声提取 2 0 m in ,精
密加人乙 醚 1 0 m L , 精密称定重量 ,超声提
取 Z h , 放至室 温 , 精 密称定重 量 , 用 乙 醚补
足重量 。 摇匀 ,倾 出上清液 , 精密吸取 50 m L ,
减压浓缩至干 。 用氯仿转人 s m L 容量瓶中 ,
加氯仿至刻度 ,摇匀 , 作为供试品溶液 。
1
.
3 对照品溶液的制备 : 精密称取延胡索乙
素对照品 , 用抓仿溶液使成 1 m g /m L 溶液 ,
作为对照品溶液 。
1
.
4 薄层层析及扫描 : 分别定量吸取供试品
溶液 1 0 拜L ,对照品溶液 2 、 4 拼L , 分别点于 同
一含梭甲基纤维素钠的硅胶 G 薄层板上 , 以
苯 一丙酮 (8 : 2) 为展开剂上行展 开 , 展距 10
c m
, 取出 , 晾干 , 喷以 改 良碘化秘钾试液 , 用
冷 风吹干 , 双 波长锯 齿扫 描 , 测 定波 长 5 0
n m
, 参 比波 长 5 7 0 n m , 狭 缝 1 . 0 m m X 1 . 0
m m
,
S x 一 3 , 灵敏度 X l ,按外标两点法计算
得供试品液 中延胡索乙素含量 。
2 结果
2
.
] 提取方法的选择 : 据文献报道延胡索乙
素溶于 乙醚和氯仿 ,提取前先用浓氨水进行
碱化 , 使延胡索乙素游离 , 然后用乙醚提取 。
2
.
2 提取时间的考察 : 选用同一批号样品 ,
分别进行 1 5 、 2 、 2 . 5 、 3 h 超声处理 , 点在同
一板上 , 测定延 胡索 乙 素的含量 , 结果见表
1
。
表 1 提取时间的考察
时间 ( h ) 1 . 5 2 2 . 5 3
含量 ( m g / g ) 0 ` 2 7 0 · 2 2 0 · 2 2 0 · 15
测定数据表明 , 选定提取时间为 Z h 。
2 3 碱化方法 的选择 : 开始选用浓氨水 20
m L 碱化 , 但在实验中发现 ,加浓氨水后样品
很快成膏状 , 加人 乙醚提取时 , 膏体不能充分
梦弩sl者辈粱金舞带鬓毅黯翠嗽聂军望续馨瑞程颤事新药审批 、 药 品。 , 以及各级标准的起草 , 主要论 文《厚朴中季胺碱的研究 》〔日本 N a t u r a l M e d i e in e s , 1 9 9 6 , 5 0 ( 6 ) : 4 1 3 ] , 《气 相色谱法侧定 开元 活血贴 中樟脑 、 冰片的含 t 》 [中药新药 与临床药理 , 1 9 9 8 , 9 ( 2 ) 〕等 。
《中草药 》 1 9 9 9 年第 5 0 卷第 7 期 . 5 0 5 .