全 文 ：表明 Aβ诱导的神经元凋亡是通过一些凋亡相关基
因表达的改变来实现。
调心方由党参、桂枝、茯苓、远志、菖蒲等组成 ,
党参补益元气、安神益智 ,为君 ;桂枝温通经脉、振奋
心阳为臣 ;茯苓益气凝神、化痰强记 ,远志安神、益
智、开窍 ,二药为佐 ;菖蒲豁痰通窍增智为使 ,全方共
奏益心气、振心阳、化痰浊、通心窍之功效。研究发现
调心方能减轻 Aβ诱导的神经元凋亡 ,使细胞存活
率增加 ,这可能是调心方临床发挥疗效的机制之一。
研究还发现调心方可降低 Caspase-3的表达 ,
对凋亡相关的 Caspase-3途径进行调控。在凋亡相
关基因的 m RNA表达研究中心发现 ,调心方可提高
bcl-2表达 ,降低 bax和 c-jun的表达 ,通过对这些凋
亡相关基因表达的调控 ,来抑制 Aβ诱导的神经元
凋亡。 实验中调心方对 c-fos表达的调控作用不明
显 ,可能是由于 c-fos属于即刻早期反应基因 ,处理
24 h后其表达变化的高峰已过。
参考文献:
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海嘧啶抗肿瘤作用的实验研究
季宇彬 ,高世勇 ,孔　琪 ,张秀娟 ,杨宝峰
(哈尔滨商业大学 制药工程系 ,黑龙江 哈尔滨　 150076)
摘　要: 目的　研究海嘧啶的抗肿瘤作用。 方法　采用 M T T实验和集落形成实验观察海嘧啶的体外抗肿瘤作用 ;
通过海嘧啶对 FC小鼠和 S180、 H22荷瘤小鼠瘤重和生存时间的研究 ,观察了海嘧啶的体内抗肿瘤作用。结果　海嘧
啶对 8种人癌细胞具有一定的杀伤作用 ,以对 BGC-823、 Eca-109、 HCT-8细胞的抑制作用最强 ;对 BGC-823、 Eca-
109、 HCT-8细胞的集落形成有明显的抑制作用 ,以对 Eca-109细胞集落形成抑制作用最强 ;可明显抑制 FC小鼠和
S180小鼠瘤体的生长 ,明显延长 H22荷瘤小鼠的生存时间。 结论　海嘧啶由中药复方和 5-Fu两部分复合而成 ,其抗
肿瘤作用与二者相比具有明显的协同作用 ,使抑瘤率大幅度提高。
关键词: 海嘧啶 ;荷瘤小鼠 ;抗肿瘤作用
中图分类号: R979. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 06 0524 04
Experimental studies on antitumor activities of Haimiding
JI Yu-bin, GAO Shi-yong , KONG Qi, ZHANG Xiu-juan, YANG Bao-feng
　　 ( Depa rtment o f Pharmaceutica l Engineering , Harbin Commercial Univ er sity , Harbin Heilong jiang 150076, China)
Abstract: Object　 To study the antitumor activ ities o f Haimiding . Methods　 The in vit ro anti tumo r
action w as observ ed by M T T and colony fo rmation, i ts in vivo effects were studied by observ ing tumo r
w eight and surv iv al time of FC, S180 and H2 2 mice. Results　 Haimiding is a pow erful anti tumo r agent in 8
kinds of human cancer cell line, especially on BGC-823, Eca-109 and HCT-8, wi th Eca-109 being the most
susceptible. Haimiding also inhibits the g row th o f cancer cells of FC and S180 mice and prolong s the survival
time of H22 mice. Conclusion　 Haimiding is a compounded preparation consisted o f 5-Fu and Chinese
medicine, they show ed obvious synergistic effect to inhibi t the g row th rate of tumo rs.
Key words: Haimiding; tumo r bea ring mice; anit tumor activi ty
·524· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期
收稿日期: 2001-01-11基金项目:国家科委生命中心博士基金资助 (项目号: 96-901-06-10) ;中国优秀博士后基金资助 (中博号 [ 1999 ]17号 ) ;黑龙江省杰出青年基金资助 ( J9906) ;黑龙江省自然科学基金项目资助 (项目号: D9801)作者简介:季宇彬　男 ,博士 ,教授 ,硕士、博士研究生导师 , 44岁。多年来一直致力于中药药理、肿瘤药理、分子药理学研究 , 1999年进入哈尔滨医科大学博士后工作流动站工作。
* 哈尔滨医科大学博士后导师
　　海嘧啶是由抗癌药 5-Fu ( 5-fluorouraci l)和中
药海藻、昆布、黄芪、苦参提取的有效成分组方而成
的中西药复方抗癌制剂。在国内外首次将中西药复
方用于抗癌药领域 ,其组方思路具有创新性。本研究
从体内、外抗肿瘤两方面观察了海嘧啶的抗肿瘤
作用。
1　材料
1. 1　药品:海嘧啶注射剂 ( 10 mL /支 )批号 980606,
中药复方注射液 (不含 5-Fu的海嘧啶注射剂 )批号
980507,由哈尔滨商业大学药物研究所药剂室制备 ;
5-Fu由上海海普药厂提供 ,批号 990304。
1. 2　肿瘤细胞系:人口腔上皮癌 KB、人食管癌 Eca-
109、人胃癌 BGC-823、 A549人肺腺癌、人结肠癌
HCT-8、人乳腺癌 MCF-7、人卵巢癌 A2780、人肝癌
Bel-7402均由中国医科院药物研究所药理室提供。
1. 3　动物:昆明种小鼠由哈尔滨医科大学动物医学
部提供 , 615纯种小鼠由中国医学科学院药物研究
所提供。
1. 4　瘤株: FC小鼠、 S180 A小鼠、 H22小鼠均由中国
医学科学院药物研究所提供 ,体重 ( 20± 2) g ,同一
性别。
1. 5　试剂: 小牛血清和 RPM I-1640培养基均为
Gibco产品 , M TT为 Sigma公司产品。
1. 6　主要仪器设备: 超速离心机 HITACH 85p72
(日本 ) ,二氧化碳培养箱 LN A-Ⅲ型 (日本 ) ,酶标仪
EL311(美国 BIO-TEK公司 )。
2　方法
2. 1　体外抗肿瘤作用
2. 1　 MT T实验 [1 ]: 采用 96孔培养板 ,每孔接种
1 200个细胞 , 24 h后加入受试药物 ,同时设溶剂对
照 ,每个剂量设 3个平形孔 ,置 37℃、 5%湿化的
CO2培养箱中培养 4 d后 ,向每孔加入 MT T储液
10μL( 5 mg /mL) ,振荡混匀后 ,继续培养 4 h ,加入
10%酸化的十二烷基磺酸钠 ( SDS) 100μL ( pH=
4. 7) ,过夜用 EL311型酶标仪测其吸光度 ( A) ,测
定波长 570 nm,参考波长 630 nm ,计算对细胞抑制
50%的药物浓度 ( IC50 )。
2. 1. 2　集落形成实验 [2 ]:将实验所用细胞接种于直
径为 35 mm的塑料培养皿中 ( 100个细胞 ) , 24 h后
加入受试药物 ,第 9天弃去培养液 , PBS冲洗 3遍 ,
10%甲醛固定 , 0. 25%龙胆紫染色 ,显微镜下计数每
皿大于 50个细胞的克隆数 ,对照组以溶剂代替受试
药物。
2. 2　体内抗肿瘤作用
2. 2. 1　海嘧啶对 FC小鼠瘤重的影响: 615系 FC
小鼠进行肿瘤细胞移植 ,取接种 9 d并生长良好的
FC小鼠 ,超净工作台里在冰盘上取出生长良好的瘤
组织剪成小块 ,用玻璃匀浆器进行匀浆 ,用灭菌生理
盐水制成肿瘤细胞混悬液 ( 5. 6× 106 /mL) ,按常规
方法 [3 ] ,在无菌条件下接种于 615系小鼠右侧腋窝
皮下 (每只 0. 2 mL)。24 h后称重 ,随机分组: 海嘧啶
为分高、中、低 3个剂量组 ,分别 ip 27. 05, 13. 53,
6. 76 g /kg (相当于原生药量 )的海嘧啶注射剂 ,每日
1次 ,每次每只小鼠 0. 4 mL; 5-Fu组: ip 25 mg /kg
5-Fu注射液 ,每日 1次 ,每次每只小鼠 0. 4 mL;中
药复方: ip 13. 500 g /kg (相当于原生药量 )的中药复
方注射液 ,给药方式、给药体积同海嘧啶给药组 ;对
照组:按种 24 h后每天 ip生理盐水 ,每次每只小鼠
0. 4 mL。 接种第 11天停药 ,次日处死动物 ,剥瘤称
重 ,按公式计算抑瘤率 ,进行统计学处理 (进行 3次
重复实验。
抑瘤率 (% ) = 对照组平均瘤重 -治疗组平均瘤重对照组平均瘤重 × 100%
2. 2. 2　海嘧啶对 S180小鼠瘤重的影响:昆明种小鼠
进行肿瘤细胞移植 ,取接种 7 d生长良好的 S180 A小
鼠 ,无菌条件下抽取腹水 ,在冰浴条件下用灭菌生理
盐水 4∶ 1稀释、混匀制成肿瘤细胞混悬液 ( 5. 8×
106 /mL) ,癌细胞混悬液应为乳白色半透明状态 ,若
有血性腹水不可使用 ,接种于昆明种小鼠右侧腋窝
皮下 (每只 0. 2 mL) ,接种按《全国抗肿瘤药物体内
筛选规程进行》 [ 4]。 24 h后小鼠称重 ,随机分组 ,分
组、给药、剥瘤、称重、计算抑瘤率同 2. 2. 1。
2. 2. 3　海嘧啶对 H22小鼠生存时间的影响:昆明种
小鼠进行肿瘤细胞移植 ,取接种 7 d生长良好的 H22
小鼠 ,无菌条件下抽取腹水 ,在冰浴条件下用灭菌生
理盐水 4∶ 1稀释 ,混匀制成肿瘤细胞混悬液 ( 6. 0×
10
6
/mL)接种于昆明种小鼠腹腔体内 ,每只 0. 2
mL, 24 h后称重 ,随机分组 ,分组、给药同 2. 2. 1,停
药后观察记录各组小鼠的死亡数。 各组小鼠全部死
亡后 ,计算生命延长率 ,重复 3批实验。
生 命 延
长率 (% )=
给药组生存天数 -对照组生存天数
对照组生存天数 × 100%
3　实验结果
3. 1　海嘧啶体外抗肿瘤作用
3. 1. 1　对人肿瘤细胞的细胞毒作用: 结果见表 1。
海嘧啶对 8种人癌细胞具有一定的杀伤作用 ,以对
BGC-823、 Eca-109、 HCT-8细胞的抑制作用较强 ,
·525·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期
并具剂量依赖性 ,经直线回归计算出海嘧啶对
BGC-823、 Eca-109、 HCT-8的 IC50分别为 25. 28,
12. 78, 28. 29 mg (生药量 ) /m L。
3. 1. 2　对 BGC-823、 Eca-109、 HCT-8细胞集落形
成的影响: 结果见表 2。 海嘧啶对 BGC-823、 Eac-
109、 HCT-8癌细胞的集落形成有明显的抑制作用 ,
以对 Eca-109细胞集落形成抑制作用最强 ,并呈量
效正相关。
表 1　海嘧啶对人肿瘤细胞的细胞毒作用 (MTT)
药物 　
KB
　
BGC-823
　
A549
IC50 (mg /mL)
MCF-7 A2780
　
Bel-7420
　
HCT-8
　
Eca-109
海嘧啶 　　 83. 89 　　 25. 28 　　 292. 41 　　 34. 14 　　 16. 84 　　 36. 57 　　 28. 29 　　 12. 78
5-Fu 0. 12 0. 06 0. 19 0. 10 0. 08 0. 09 0. 08 0. 04
中药复方 428. 58 274. 90 685. 70 365. 00 124. 65 295. 60 187. 58 100. 42
表 2　海嘧啶 BGC-823、 Eca-109、HCT-8细胞集落形成的影响 (x± s ,n= 8)
药物 剂量 ( mg /mL) 集落形成百分率 (% )
BGC-823 HCT-8 Eca-109
海嘧啶 10. 00 　　　　 72. 18± 7. 29△ 　　　　 83. 19± 9. 01 61. 58± 4. 12*
20. 00 50. 21± 5. 18△△ 59. 45± 6. 78△ 22. 43± 3. 65△△
40. 00 28. 43± 3. 42△△ 30. 15± 4. 20△△ 　　 0
5-Fu 0. 04 61. 18± 4. 27△ 68. 70± 5. 15* 69. 27± 5. 48*
中药复方 19. 63 90. 51± 7. 42 82. 15± 7. 92 78. 29± 6. 25*
空白对照 - 98. 27± 6. 58 95. 68± 9. 12 97. 14± 8. 26△
　　　　与空白对照比: * P < 0. 05;　与中药复方比: △ P < 0. 05　△△ P < 0. 01
3. 2　海嘧啶体内抗肿瘤作用
3. 2. 1　对 FC小鼠瘤重的影响:结果见表 3。海嘧啶
对 FC小鼠的瘤体生长有显著的抑制作用 ,剂量与
效果呈正相关 ,海嘧啶 13. 53 g /kg (含 5-Fu 25 mg )
的抑瘤作用比 5-Fu 25 mg /kg的作用要强 ,并有统
计学意义 ( P < 0. 05)。
表 3　海嘧啶对 FC小鼠瘤重的影响
药物 剂量 ( g /kg ) 给药途径 动物数 (n ) 平均瘤重 ( g, x± s ) 抑瘤率 (% )
海嘧啶 27. 05 ip 30 　　　 0. 42± 0. 21* * △△ 76. 92
13. 35 ip 30 0. 58± 0. 30* * △△ 68. 13
6. 76 ip 30 0. 88± 0. 34* 51. 65
中药复方 13. 50 ip 30 1. 21± 0. 45 33. 52
5-Fu 0. 03 ip 29 0. 89± 0. 40 51. 10
生理盐水 - ip 30 1. 82± 0. 43
　　　　与中药复方比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01;　与 5-Fu比: △△ P < 0. 01
3. 2. 2　对 S180小鼠瘤重的影响:结果见表 4。海嘧啶
对 S180小鼠的瘤体生长有显著的抑制作用 ,剂量与
效果呈正相关 ,并有统计学意义 ( P < 0. 01, P <
0. 05)。
表 4　海嘧啶对 S180小鼠瘤重的影响
药物 剂量 ( g /kg ) 给药途径 动物数 (n ) 平均瘤重 ( g, x± s ) 抑瘤率 (% )
海嘧啶 27. 05 ip 30 　　　 0. 28± 0. 10* * △ 73. 33
13. 35 ip 30 0. 40± 0. 15* 61. 91
6. 76 ip 30 0. 49± 0. 31* 53. 33
中药复方 13. 50 ip 28 0. 79± 0. 33 24. 76
5-Fu 0. 03 ip 28 0. 54± 0. 21 48. 57
生理盐水 - ip 29 1. 05± 0. 32△△
　　　　与中药复方比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01;　与 5-Fu比: △ P < 0. 05　△△ P < 0. 01
3. 2. 3　对 H22小鼠生存时间的影响: 结果见表 5。海
嘧啶对 H22小鼠的生存时间有显著的延长作用 ,剂
量与效果呈正相关。海嘧啶 13. 53 g /kg (含 5-Fu 25
mg)对 H22小鼠的生命延长作用比 5-Fu( 25 mg /kg )
单用的作用强 ( P < 0. 05) ,同时也比不含 5-Fu的中
药复方作用强 (P < 0. 05)。
4　讨论
海嘧啶是一个中西药复方抗癌注射剂 ,经大量
抗癌实验表明: 该制剂具有显著的抗癌作用 ,体外实
验中 ,我们采用 MT T方法和细胞集落形成法对 8
种人类肿瘤细胞 (人口腔上皮癌 KB细胞、人食管癌
Eca-109细胞、人前胃癌 BGC-823细胞、人肺腺癌
A549细胞、人结肠癌 HCT-8细胞、人乳腺癌 MCF-7
细胞、人卵巢癌 A2780细胞、人肝癌 Bel-7402细胞 )进
·526· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期
表 5　海嘧啶对 H22小鼠生存时间的影响
药物 剂量 ( g /kg ) 给药途径 动物数 (n ) 生存时间 (d, x± s ) 生命延长率 (% )
海嘧啶 27. 05 iv 27 　　　 21. 1± 1. 6* △ 74. 4
13. 53 iv 28 18. 6± 2. 9* △ 53. 7
6. 76 iv 30 17. 1± 3. 2* 41. 3
中药复方 13. 50 iv 30 15. 8± 2. 5 30. 6
5-Fu 0. 03 iv 29 14. 6± 2. 7 20. 7
生理盐水 - iv 30 12. 1± 3. 1
　　　　与中药复方比: * P < 0. 05;　与 5-Fu比: △ P < 0. 05
行了抑制作用的预测 ,结果表明 ,海嘧啶均有一定的
抑制作用。综合两种实验方法的实验结果 ,对其中的
人胃癌 BGC-823细胞、人食管癌 Eca-109细胞、人
结肠癌 HCT-8细胞的杀伤力最强 ,并具有剂量依赖
性。这一结果与本方在临床上治疗噎膈与反胃是相
吻合的。同时这一结果揭示海嘧啶对消化道肿瘤 (胃
癌、食管癌等 )具有较强的敏感性。在体内抗肿瘤实
验中 ,我们采用动物体内移植肿瘤的方法 [ 3] ,观察了
海嘧啶对 3种小鼠肿瘤 (小鼠胃癌 FC、小鼠肉瘤
S180、小鼠肝癌 H22 )生长的影响。实验结果表明 ,海
嘧啶对 FC、 S180小鼠的瘤体生长具有显著的抑制作
用 ,且药物剂量与效果具正相关性。对于 H22小鼠的
生命延长作用有一定意义 ,但作用强度不及对 FC、
S180的强度大 ,提示海嘧啶对实体瘤的抑制作用要优
于对腹水癌的抑制作用。这一结果也与本方在临床
对胃癌、食管癌效果好 ,而对腹水期肝癌疗效较差的
临床效果是一致的。
海嘧啶注射剂是由两部分构成 ,一部分是中药
复方部分 ,另一部分为西药部分 ( 5-Fu) ,我们在研
究中均设立了中药复方组、西药组 ( 5-Fu)做对照 ,
结果显示在抗肿瘤作用方面 ,海嘧啶中西药复方后
其作用远远大于中药复方、 5-Fu单独使用时的作用
(等同剂量 )。根据上述结果我们认为中药复方部分
与 5-Fu复合成海嘧啶后其抗肿瘤方面产生了明显
的协同作用 ,使抑瘤率大幅度提高。
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广枣总黄酮对阿霉素引起大鼠心肌过氧化损伤的保护作用
乌日娜 1 ,张昕原 1 ,张维兰 2 ,王　哲 2 ,王玉莹 1 ,李宝山 1
( 1. 内蒙古民族大学 西区中心实验室 ,内蒙古 通辽　 028041;　 2. 内蒙古民族大学 附属医院检验科 ,内蒙古 通
辽　 028041)
摘　要: 目的　通过广枣总黄酮 ( TFCA)对阿霉素 ( ADR)引起大鼠心肌过氧化损伤保护作用的研究 ,进一步证实
广枣疗效可能与 TFCA抗氧化作用有关。 方法　动物分为空白组、 ADR组和实验组 ( ADR+ TFCA 100, 150, 200
mg /kg组 )。以“心酶谱”、抗氧化酶做为检测指标。结果　 ADR组心酶谱、 MDA均比空白组高 ,而抗氧化酶活性均
比空白组低。 TFCA干预后“心酶谱”、 MDA下降 ,抗氧化酶活性上升。结论　 T FCA能抑制 ADR所引起大鼠心肌
过氧化损伤。
关键词: 广枣总黄酮 ;心酶谱 ;抗氧化酶 ;丙二醛 ;阿霉素
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 06 0527 03
Protective effect of total flavonoids of Choerospondias ax illaris
on rat myocardiac peroxidation injury caused by adriamycin
·527·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期
收稿日期: 2000-10-26基金项目:内蒙古自然科学基金资助 ( NO. 9713031)作者简介:乌日娜 ( 1956-) ,女 (蒙古族 ) ,内蒙古科右中旗人 ,现任内蒙古民族大学实验中心实验师。 主要从事蒙药药理学研究工作。