全 文 ：兔耳草的化学成分研究
兰州医学院药学系( 730000) 封士兰 潘 宣
甘肃省医药管理局 张晓光
圆穗兔耳草 L agotis ramalana Batalin 是玄参
科兔耳草属植物。生于海拨5 300 m 高山、草地、冰
河、水坡。分布于青海、甘肃及四川西北部。兔耳草
为常用藏药[ 1] ,藏名洪连。商品有 4种兔耳草, 圆穗
兔耳草是其中之一。洪连味苦、性寒,有清热、凉血、
解毒功能,用于五脏有热、血分热毒、体虚潮热、高血
压、急慢性肝炎、痔疮, 有体外抑菌、抗炎和降血糖的
药理作用。为探讨圆穗兔耳草的化学成分。我们对
其进行了化学成分的研究。首次从中分离得到 4 个
化合物。经理化常数和光谱分析,鉴定为葫芦素 B
( cucurbitacin B, Ⅰ)、葫芦素 D ( cucurbitacin D,
Ⅱ)、葫芦素Ⅰ( cucurbitacin Ⅰ,Ⅲ)和对-甲基苯酚
( 4-methylphenol, Ⅳ)
1 仪器和材料
熔点用 XT -4双目显微熔点测定仪测定。质谱
( EI) : VG2AB-HS 仪。核磁共振谱: Br uker AM-400
FT -NMR 仪, 1H NMR: 400 MHz, 13 C NMR: 100
MHz, CDCl3做溶剂, T MS 为内标。园穗兔耳草采自
青海那曲,药用植物室潘宣副教授鉴定。
2 提取和分离
阴干圆穗兔耳草地上部分粗粉2 090 g,用 95%
乙醇回流提取 3 次, 回收乙醇得浸膏 250 g。分别用
石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。
氯仿浸膏71 g, 硅胶柱层析,氯仿、氯仿-乙酸乙酯
梯度洗脱,得20个组分。第八、九个组分经小柱纯化后
分别得到化合物Ⅰ( 17 mg )、Ⅱ( 21 mg )。第七个组分
再多次硅胶柱层析, 石油醚-丙酮、氯仿-乙酸乙酯-丙醇
洗脱,得到化合物Ⅲ( 14 mg )。第二个组分反复硅胶柱
层析,环己烷-异丙醇洗脱, 得化合物Ⅳ( 9 mg)。
3 鉴定
化合物Ⅰ:无色针状结晶, mp 179. 5℃～182. 5
℃; EI-MS ( m/ z) : 558( M + ) , 498( M - HCOCH3 ) ,
403( M - 侧链) , 385, 369, 111, 96; 13CNMR( DEPT)
给出 32 个碳信号 CH3COO+ 7×C+ 8×CH+ 4×
CH2+ 8×CH3+ 3×CO,推得分子中还有 3 个羟基。
不饱和度为 10。从1HNMR6. 50和7. 06(各1H , d,
J= 15. 6 Hz) ,推测分子中有一反式双键, 另一个双
键 5. 80( 1H, dd, J = 3. 2 Hz)。Libermann 反应阳
性, M olish反应和FeCl 3反应都是阴性。指示化合物
Ⅰ为四环三萜。根据HMQC 和HMBC,将化合物Ⅰ
的1HNMR和13C NMR进行了归属,见表 1。它的13
CNMR (表 1)与文献 [ 3]报道葫芦素 B 一致, 化合物
Ⅰ鉴定为 cucurbitacin B。
表 1 化合物Ⅰ～Ⅲ的13CNMR
碳号 Ⅰ
1HNMR HM BC
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
1 2. 75( 2H , br. , J= 18 Hz) 33. 1 34. 0 115. 2
2 4. 44( 1H , dd, J= 6, 2. 9 Hz) C-3 71. 7 71. 0 144. 8
3 212. 0 212. 4 198. 9
4 48. 1 49. 5 48. 0
5 140. 6 140. 3 138. 0
6 5. 80( 1H , dd, J= 3. 2 Hz) C-10, C-14 121. 0 120. 0 120. 5
7 1. 44( 2H , br. ) 25. 3 23. 6 23. 8
8 1. 98( 1H , br. ) C-6, C-5, C-18, C-19 36. 3 42. 1 41. 5
9 48. 2 48. 2 48. 4
10 2. 25( 1H , m) C-2, C-5, C-3, C-1 39. 4 35. 8 35. 0
11 213. 0 213. 2 211. 9
12 2. 69( 1H , d, J= 14. 6 Hz) C-11, C-13 48. 9 47. 8 48. 1
3. 25( 1H , d, J= 14. 6 Hz) C-14, C-18
13 50. 0 47. 9 48. 4
14 50. 9 50. 6 51. 0
15 1. 96( 1H , d, J= 7 Hz) C-22, C-17 45. 0 45. 3 45. 6
1. 45( 1H , d, J= 7 Hz) C-16, C-20
16 4. 38( 1H , t) C-20, C-25 71. 0 70. 9 70. 1
17 2. 50( 1H , d, J= 7 Hz) C-22, C-20 58. 6 57. 1 58. 0
C-16, C-14, C-18
18 1. 10( 3H , s) C-17, C-19, C-8 20. 2 20. 0 19. 8
19 1. 34( 3H , s) C-8, C-15 18. 6 17. 9 19. 5
20 79. 0 78. 0 78. 6
21 1. 44( 3H , s) C-22, C-18, C-17 29. 6 23. 8 24. 0
C-16, C-13
22 202. 6 202. 2 201. 8
23 6. 50( 1H , d, J= 15. 6 Hz) C-20, C-22 120. 8 119. 0 119. 4
24 7. 06( 1H , d, J= 15. 6 Hz) C-20
C-22, C-26, C-17 151. 5 155. 6 155. 8
25 78. 8 70. 7 70. 8
26 1. 55( 3H , s) C-24, C-25, C-27 21. 7 28. 6 29. 2
27 1. 60( 3H , s) C-24, C-25, C-26 21. 0 29. 2 29. 6
28 1. 35( 3H , s) 19. 9 20. 2 21. 0
29 0. 97( 3H , s) C-3 23. 3 28. 0 27. 6
30 1. 28( 3H , s) 23. 2 21. 5 20. 5
25OA c 170. 6
2. 01( 3H , s) C-24 26. 5
·500· 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2000 年第 31卷第 7期
封士兰 女,副教授,学士, 1982年毕业于兰州医学院药学系, 1982年至今在兰州医学院药学系做教学科研工作,主要从事中草药有效成分的提取、分离、鉴定、含量测定,中药有效部位的提取工艺研究。发表论文数篇
化合物Ⅱ和Ⅲ都是无色针晶, L ibermann 反应
都是阳性, mp 分别为 151. 0 ℃～153. 0 ℃和 147. 0
℃～150. 0 ℃。EI-M S ( m / z) : Ⅱ: 516( M + ) , 403( M
- 侧链) , 385, 219;Ⅲ: 514( M + ) , 401( M - 侧链)。表
明Ⅲ比Ⅱ多一个双键, 403和 401碎片峰说明Ⅱ和
Ⅲ也是四环三萜。Ⅱ是Ⅰ的去乙酰化物。Ⅱ、Ⅲ的
13CNMR(表 1)与文献 [ 2]报道的葫芦素 D、Ⅰ一致,
化合物Ⅱ鉴定为 cucurbitacin D, 化合物Ⅲ鉴定为
cucurbitacin Ⅰ。
化合物Ⅳ: 白色针状结晶, mp 35. 0 ℃～37. 0
℃; L ibermann 反应和 Molish 反应都是阴性, FeCl 3
反应阳性。EIMS ( m / z) : 108, 93, 90, 75; 1H, 13 C
NMR 数据与 Sadt ler Standard图谱对照, Ⅳ鉴定为
对-甲基苯酚。
参 考 文 献
1 中国医学科学院药用植物研究所 . 中药志 . 第 4册 . 北京:人民
卫生出版社, 1998: 532
2 Vin cen t V V and David Lavie. T et rahedron, 1983, 39( 2) : 317
3 Mesbah U A, En amal M and Ranj it R S , et al. Ph ytochem ist ry,
1994, 36( 2) : 421
( 1999-05-12收稿)
空心莲子草的化学成分研究
上海中医药大学肝病研究所( 200032) 熊卫国
深圳市三九集团生产部 刘雅士
湖北中医学院植化教研室 刘焱文
空心莲子草 A lternanthera philox eroides( M a-
rt . ) Griseb 为苋科莲子草属植物, 是一种民间中
药,具有清热解毒、利尿凉血的功效 [ 1]。现代药理实
验证明空心莲子草有良好的抗病毒作用, 毒副作用
小[ 2, 3]。为了寻找其抗病毒的有效成分,我们从空心
莲子草全草中提取分离到 6 个化合物, 其中 4 个分
别鉴定为齐墩果酸 ( oleanolic acid )、焦谷氨酸
( pyrog lutamic acid)、硝酸钾和甜菜碱( betaine) ,另
2 个化合物正在进一步的研究。焦谷氨酸和甜菜碱
是首次从莲子草属植物中分离得到。
1 材料与仪器
空心莲子草采自湖北省武汉市武昌区沙湖湖
畔,经本院鉴定教研室黄先石教授鉴定,实验用其全
草。WC- 1型显微熔点测定仪(温度计未经校正)。
MOD1106型元素分析仪。NICOLET 170SXFT 红
外光谱仪。JEOL-500 MHz核磁共振仪。732# 阳离
子交换树脂(郑州化学试剂厂)。柱层析用薄层硅胶
G为中国青岛海洋化工厂生产。所用试剂均为分析
纯。
2 提取分离
干燥空心莲子草全草 15 kg 加水煎煮 2 次,煎
煮液加适量的 95%乙醇, 使含醇量为 65% ,静置 48
h,过滤,滤液减压回收乙醇,得浸膏1 280 g。浸膏用
500 g 硅藻土拌匀, 低温烘干, 粉碎,置于索氏提取
器中,依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、乙醇提取。各
提取液减压回收溶剂, 得到石油醚提取物 1. 4 g、乙
醚提取物 3. 4 g、乙酸乙酯提取物 68 g、乙醇提取物
103 g。
乙醚部分经低压硅胶柱层析,用石油醚-乙酯乙
酯( 7∶3)梯度洗脱, 得到化合物Ⅰ。乙酸乙酯部分经
低压硅胶柱层析, 用氯仿-甲醇( 8∶2)梯度洗脱, 得
到化合物Ⅱ。乙醇提取液放置得到化合物Ⅲ。乙醇
部分用蒸馏水溶解, 调节 pH 至 5～6, 然后通过
732# 阳离子交换树脂柱。先用蒸馏水冲洗至中性,
再用 5%氨性乙醇洗脱,收集 5%氨性乙醇部分, 减
压浓缩至干,残留物用水溶解,再用水饱和正丁醇萃
取,减压回收正丁醇,得到浸膏 3 g。将此浸膏经低压
柱层析,用氯仿-甲醇-水( 7∶3∶1)梯度洗脱,流份 1
～4进行制备性薄层层析分离, 得到化合物Ⅳ和Ⅴ。
107～109流份再经过硅胶柱析纯化, 得到化合物
Ⅵ。
3 鉴定
化合物Ⅰ:白色针晶(石油醚-氯仿) , mp 307 ℃
～309 ℃, L ieberman-Burchard 反应阳性。IR 光谱
与文献报道的齐墩果酸的标准图谱一致,与齐墩果
酸混合熔点不下降, 共 TLC Rf值一致,故确定化合
·501·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2000 年第 31卷第 7期
熊卫国 助理研究员, 1998年于湖北中医学院获医学硕士学位,植物化学专业。主要从事中药及其制剂的有效成分研究和新药的研究与开发工作。曾参与多项新药的研究与开发。