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Studies on the Effect of Chinese Beauty berry (Callicarpa cathayana) on Antilipid Peroxidation

紫珠草抗脂质过氧化作用的实验研究



全 文 :P r o g
r e s s io n
,
1 9 8 2
,
2 8
: 4 1
W i l l ,a m N H a i t
, e t a l
.
J C l i
n O n e o
,
1 9 8 6
,
4 ( 6 )
:
9 9 4
张遂坡 , 等 . 生物化学与生物物理学报 , 19 8 , 20 ( 1 ) :
1 3
张金红 , 等 . 南开大学学报 ( 自然科学版 ) , 19 9 6 , 2 9
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张金红 ,等 . 细胞生物学杂志 , 19 9 7 , 1 9 ( 2 ) : 7 6
徐小华 ,等 . 中国肿瘤临床 , 2 9 94 , 2 1 ( 1 ) : 9
张金红 ,等 . 中草药 , 1 9 9 7 , 2 5 ( s ) : 4 8 3
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甘肃省卫生局编 . 临床检验手册 . 北京 : 人民卫生出
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徐淑云 . 药理学实验方法 , 北京 : 人 民卫生出版社 ,
1 98 2
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陶来宝 , 等 . 中国免疫学杂志 , 1 9 9 6 , 1 2 ( 6 ) : 3 7 7
张建中 , 等 . 中国免疫学杂志 , 1 9 96 , 1 2 (6 ) : 3 74
( 1 9 9 7

1 0

2 1 收稿 )
E f f e e t o f B e r b a m i n e D e r i v a t i v e ( E B B ) o n A n t i e a n e e r
Z h a n g Ji n h
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,
M
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a n i in 3 0 0 0 7 1 )
A b s t r a C t E B B 1
5
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u n e F u n e t i o n o f T u m o r

b e a r i n g M i e e
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C h e n J ia t o n g ( I n s t it u t e f o r M
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,
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-
a
b
e r b a m in e d e r iv a t i v e d e v e lo p e d i n o u r la b o r a t o r y
d
e m o n s t r a t e d a s a n e w a n d s t r o n g e a lm o d d li n a n t a
沪 b y s t r u e t u r a l
g o n is t
.
P r e v i
o u s
m o d if i e a t io n o f
s t u d i e s s h o w e d
t h
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e a n s t r o n g ly i
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e p r o li f e r a t i o n o f t u m o r e e l ls
.
E f f
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o n t h
e a n t ie a n c e r a n d im m u n e
f
u n e t i o n o f 5 1 5。

b e a r i n g m i e e w a s p r e s e n t e d i n t h e p r e s e n t p a p e r
.
E x p e r im e n t a l r e s u lt s s h o w e d t h a t t h e e王f e e t
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o n i n h i b it i o n o f t u m o r a n d p r o l o n g a t i o n o f li f e
一 s p a n w
e r e e o m p a r a b le t o m i t o m y e in

C ( M it

C ) o r e y
-
e l o p h s p h a m id e ( C P A )
.
I t a l s o s h o w e d t h a t a e o m b i n e d u s e d o f b o t h E B B / M it

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.
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a s a l s o f o u n d t h a t E B B e a n im p r o v e im m u n e f u n e t io n o f 5 1 5
。 -
b e a r i n g m ie e
,
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s i g n if ie a n t in e r e a s e o f t h e in d e x o f t h y m u s
.
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a n t ie a n e e r e o m P o u n d
.
K e y w o
r d s a n t ie a n e e r E B B 5
15。一 b e a r i n g m i e e
紫珠草抗脂质过氧化作用的实验研究
浙江工业大学医院 (杭州 31 。。 1 4) 黄夏琴 熹
浙江医科大学药学院 . 蒋惠娣 徐 庆 杨 怡
摘 要 紫珠草水提液可明显抑制大鼠肝 、 心 、 肾 、 脑匀浆脂质过氧化及由过氧化氢引发的小鼠红
细胞脂质过氧化及溶血过程 ;小鼠 19 水提液 1 9 / k g · d ,连续 6 d ,全血谷胧甘肤过氧化物酶活力显
著高于正常对照组 (尸 < 。 . 05 ) 。
关键词 紫珠草 组织匀浆 脂质过氧化 红细胞 溶血 谷胧甘肤过氧化物酶
马鞭草科紫珠属植物紫珠草 ca il ca rP a
ca ht ay an
a
.H .T C h
a n g
,传统用于治疗出血 、
疮疖 、 痈肿 ,但应用并不广泛 〔, 〕 。 几十年来国
内外对紫珠草的研究甚少 , 但最近有研究表
明 ,紫珠草水提液能显著减轻由 C 1C 4 引起的
原代培养大鼠肝细胞损伤及整体动物 C 1C 4
急性肝损伤 , 其体内外护肝降酶作用均不亚
于 传统护肝 中药丹参 、 田基黄 , 优于 女 贞
子比 3 〕 。 根据 自由基学说 , C 1C 4 肝损伤与 自由
基引发的脂质过氧化反应有关 〔 4〕 , 因此推测
紫珠草可能具有抗脂质过氧化反应的作用 ,
而 目前国内外尚无此报道 。 我们研究探讨了
A d d r e s
s :
H u a n g X i a q i n
,
T h e H o s p i t a l o f Z h e ji o f T e e h n o
黄夏琴 大学本科 ,学士 ,主管药师 。 专业研 药用植物的提取 ,
H a

n g z h o u
药效学研究以及各种制剂 。 现主要研究 : 绞股蓝总皂贰的提取以及成分分析 , 纹股蓝 口服液的制备以及定性 ,定量的质量标准制定及药理作用研究 。
·
2 4 6
-
M DA生成抑制率 。
1. 2
.
3 紫珠 草对 HZ O :引起红 细胞 (BR C )
损伤的保护作 J 1 }〔 6〕 :小鼠眼眶取血 , 以肝素抗
凝 ,抗凝血立即 以 2 s o o r /m i n 离心 5 m i n ,
以 P B S ( 1 0 m m ol / L 生理盐水磷酸盐缓冲
液 , p H 7 . 4) 洗 2 次 ,后 以 P B S 制成血红蛋白
( H b) 含量为 5%的红细胞悬液 。 将 H ZO : 以
P B S 稀释 成 3 0 0 m m o l / L , 取 0 . 5 m L 该
H
Z
O
: , 加入 0 . 1 m L 上述红 细胞悬液及 0 . 1
m L 不 同浓度的紫珠草水溶液或 P B S , 最后
以 P B S 补充至 1 . 5 m L , 37 ℃ 士 0 . 5 ℃恒温振
荡反应 Z h ,按 1 . 2 . 2 法测 M D A 含量 , 计算
M D A 生成量及生成抑制率 ;按文献 〔的 法测
溶血度 , 并以同体积红细胞悬液 在蒸馏水中
的溶血为 1 0 %计 ,计算溶血率及溶血抑制
率 。
1
.
2
.
4 紫珠 草对 小 鼠 G S H 一 P x 活性 的影
响 : 小鼠随机分成对照组及给药组 ,给药组 19
紫珠草水提液 1 9 k/ g · d , 连续 6 d ,对照组
给以 同量生理盐水 , 至第 7 天 , 尾静脉取血
1 0 拼L , 以 D T N B 直接法〔 8〕测定 G S H 一 P x ,规
定每毫 升全血每分钟扣除非酶反应的 19
〔G S H 〕降低后 , 使 19 〔G S H〕降低 1 为一个酶
活力单位 。
2 结果
2
.
1 紫珠草对大鼠离体组织脂质过氧化的
影响 : 见表 1 。
表 1 紫珠草对大鼠离体组织 M D A 生成的影响
组织 浓度 ( g / )L M D A (n m ol / g 组织 ) M D A 生成抑制率 (% )
.27985制3
制.80523
4 02
.
1士 53 . 3
3 10
.
8士 35 . 4 “
8 6
.
5士 11 . 3 祷 “
2 68
.
7士 30 . 5
2 12
.
3士 2 1 . 4 “
1 8
.
2士 6 . 5 书 畏
4 46
.
4士 6 6 . 9
3 6 6
.
0士 4 8 . 7
8 7
.
0士 6 . 5 毋 书
14 9
.
2士 2 3 . 8
11 9
.
1士 2 1 . 7
25
.
2士 7 . 1 朴 衬
0叱25肠05nU八óUù1n曰八口以é曰肝心脑肾
紫珠草对各种组织体外脂质过氧化反应及对
体内谷胧甘肤过氧化物酶 ( G S H 一 P x) 活力的
影响 。
1 材料和方法
1
.
1 材料
1
.
1
.
1 实验动物 : S D 雄性大鼠 ( 2 0 0 一 2 5 0
g )
,
N IH 小鼠 ( 1 8一 2 5 9 ) , 雌雄各半 , 由本校
实验动物中心提供 。
1
·
1
·
2 药品及试剂 : 紫珠草由浙江省中医院
中药房购得并经本系生药教研室薛祥骥老师
鉴 定 , 四 乙 氧基丙烷为 iS g m a 产 品 , D T N B
为 F l u k a 产品 , 其余试剂均为国产分析纯或
生化试剂 。
.1 .1 3 仪器 : T H Z 一 80 型恒温振荡器 (上 海
跃进医疗器械一厂 ) , 8 0一 2 型离心沉淀器 (上
海手术器械一厂 ) , 72 2 型分光光度仪 (上海
第三分析仪器厂 ) 。
1
.
2 方法
1
.
2
.
1 紫珠草的提取 : 紫珠草粉碎后过 40
目筛 ,加 9 倍量水回流 2 次 , 每次 1 . s h , 合并
两次滤液浓缩至 1 : 1 药液 ,加 2 倍量 95 %
乙醇 ,过滤除去杂质 , 回收 乙醇 , 制成 0 . 5 9
生药 /m L 水溶液 , 临用前稀释至所需浓度 。
1
·
.2 2 紫珠草对离体组织脂质过氧化的抑
制作用 〔 S J : 大鼠禁食 16 h 后断头放血 ,迅速
取出所需组织 , 肝脏取出前用预冷至 4℃的
生理盐水经门静脉灌流 至土黄色 , 其余组织
以生理盐水冲去表面残血 , 各组织以生理盐
水制成 5%匀浆 , 每试管取匀浆 1 . 5 m L , 加
入 .0 1 m L 不 同浓度的紫珠草溶液或同体积
生理盐水 , 匀浆于 37 ℃ 士 0 . 5℃恒温振荡反
应 Z h , 加入 20 %三氯醋酸 1 . 5 m L 终止反
应 , 3 5 0 0 r /m i n 离 心 l o m i n , 取 上清液 2
m L
, 加 0 . 67 %硫代巴比妥酸 ( T B A )1 . 5 m L ,
9 5℃水浴 1 5 m i n , 取出后冷却 , 于 7 2 2 分光
光 度计 5 35 n m 测 吸 收 度 , 标准 管 以 10
n m ol / L 四 乙氧基丙烷代替组织匀浆 ,重复上
述操作 ,计算脂质过氧化产物丙二醛 (M D A )
含量 ,扣除未经孵育时组织中 M D A 含量 ,即
为每克组织 经孵育 Z h 产 生的 M D A ,计算
《中草药》 1 998 年第 29 卷第 4 期
牙士 : n 一 4 , 与浓度为 。 . 0 0 时比较 , 畏 尸 < 。 . 05
. 任 尸 < 0 . 0 1
由表 1 可知 , 不同组织匀浆经孵育后产
生的 M D A 依次为脑组织 > 肝脏 > 心脏 > 肾

2 4 7
.
脏 , 紫珠草水提液对上述组织体外脂质过氧
化均有很强 的抑制作用 ,且抑制作用的大小
与浓度有关 。 紫珠草对肝脏脂质过氧化的抑
制作用强干其它组织 。
2
.
2 紫珠草对 H : 0 2 引发的 R B C 损伤的保
护作用 : 见表 2 。
表 2 紫珠草对 H 2 0 : 引发的小鼠 R B C
脂质过氧化及溶血的抑制
浓度 (创 L ) M D A 生成抑制率 (% ) ` 溶血抑制率 ’
1
.
0 0 7 1 0 3 6
.
5
0
.
5 0 5 3
.
7 16
.
1
0
.
0 1 10
.
8 5
.
e
,
R B C 悬液 不加紫珠草水提液孵育后产生 M D A 为 72 7 . 。
士 1 9 . 4 n m o l / 9 H b ,溶血率为 7 3 . 6% 士 6 . 7% , ( 、 = 4 )
由表 2 知 , 紫珠草可 明显抑 制 由 H户 2
引发的小鼠 R B C 脂质过氧化及溶血作用 ,其
抑制作用表现出明显的量效关系 。
2
.
3 紫珠草对小鼠 G s H 一 P 、 的影嗬: 见表 3 。
表 3 紫珠草对小鼠全血 G S H 一 P x 活力的影响
组别 月 G S H 一 P抓单位 )
对照组
紫珠草组
2 2
.
8 3 士 5 . 58
2 8
.
9 3士 6 . 6 2 补
与对照组 比较 , 尸 < 。 . 0 5
从表 3 可知 , 小 鼠 19 紫珠草水提液 1 9 /
k g
·
d
,连续 6 d , 全血 G S H 一 P 、 活力显著高于
正常对照组 (尸 < 0 . 05 ) 。
3 讨论
3
.
1 近年来的研究证实 ,不少疾病的发生均
与自由基引发 的脂质过氧化反应有关 〔8〕 , 因
而从某种意义 上说抑制脂质过氧化反应便可
大大减少这类疾病的发生 。 紫珠草对大鼠肝 、
心 、 `肾、 脑匀浆脂质过氧化均有明显的抑制作
用 ,提示紫珠草对这些组织可能有很好的保
护作用 。 在较高浓度时紫珠草对肝脏脂质过
氧化的抑制作用更为突出 , 推测紫珠草对肝
脏的保护作用更佳 。
.3 2 H
2
0
2 中含活性氧在一定条件下可生成
活性更强的 ’ O H , 红细胞膜中含有大量的不
饱和脂肪酸 , 因而 H ZO : 可引发红 细胞膜发
生脂质过氧化 ,使红细胞遭到破坏 ,从而发生
溶血川 。 紫珠草对上述过程有很强的抑制作
用 ,说明紫珠草对红细胞有很好的保护作用 。
3
.
3 谷胧甘肤过氧化物酶是体内抗氧化酶
性保护系统主要成员之一 , 它可以清除 H : O :
和脂质过氧化物 , 对该酶活力的测 定是研究
体内脂质过氧化反应的常用方法之一 , 紫珠
草可 以显著提高小 鼠全血 G S H 一 P x 活力 , 提
示紫珠草在体内也具有抗脂质过氧化能力 。
研究结果表明 ,紫珠草水提液在体内显
示 了很强 的抗脂质过氧化作用 ,提示 紫珠草
在对抗由自由基引起的疾病方面大有前途 。
参 考 文 献
1 熊文愈 , 等 . 中国木本药用植物 . 上海 : 上海科技教育
出 版社 , 1 9 9 3 . 7 17
` 王立明 , 等 . 浙江医科大学学报 , 1 9 4 , 2 3 ( 3 ) : 10 9
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0 1

0 4 收稿 )
S t u d i e s o n t h e E f f e e t o f C h i n e s e B e a u t y b e r r y ( C a l l i e a rP a e a t h ay
a n a ) o n A n t i l i P i d P e r o x
-
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u a n g X i a q i r i ( T h
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o s p i t a l o f Z h
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,
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J ia n g H u i d ,
,
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,
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,
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A b s t r a e t L l l〕一d p e r o x id a t i o n o f t is s u e h o m o g e n a t e o f li v e r , k i d n e y , h e a r t a n d b r a in o f r a t
.
li p i d p
e r o x id a
-
t io n a n d h
e m o l y s is o f r e d b lo o d e e l l r e d u e e d b y h y d r o g e n p e r o x id e w e r e in h ib i t e d m a r k e d l y b y t h e w a t e r e x
-
t r a e t o f (
、 a l l i c a rP
a e a th卿 a n a H . T . C h a n g . M ie e p r e t r e a t e d w i t h t h i s e x t r a e t i o n s u e e e s s i v e l y f o r s i x d a y s , r e -
s u
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e d i n a s ig n i f ie a n t i n e r e a s e o f 讨 h o l e b lo o d g l u t a th io n e p e r o x id a s e a e t iv it y a s e o m p a r e d w it h t h a t o f t h e
e o n t r o l
.
.
2 4 8
-
K e yW
o r d s C al l i
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c a at h即 n a a T is s u e ho mo g e n at e L ip id p e ro x id at io n B lo o d e e lhle mo l ys is
(子 lu t at h io ne P e ro x id as e
历节片的抗炎镇痛作用
吉林省中民中药研究院中药所 (长春 1 3 0 0 1 2)
古林省人民医院
长春中医学院中药系
师海波 夸
刘大同
刘大有
刘 威 苗艳波 周重楚
汤 日杰
摘 要 应用多种炎症及疼痛实验动物模型观察历节片的抗炎 、镇痛作用 ,结果发现历节片对急 、
慢性炎症及大鼠 A rt h us 反应均有明显的抑制作用 ,且有明显的镇痛作用 。
关键词 历节片 抗炎 镇痛
厉节片是 由青风藤 、 桑寄生 、 秦芜 、 杜仲 、 1 . 3 动物 : 昆明种小鼠 , W i st ar 大鼠本院动
丹参等 24 味中药组成的复方制剂 , 系吉林省 物室饲养 , 每次实验体重差异大鼠不超过 30
人民医院中医科刘大同主任治疗风湿 、 类风 g , 小鼠不超过 3 9 , 抗急性炎症 实验用雄性
湿关节炎经验方 , 多年临床应用取得较好疗 大鼠 ,余者雌雄不拘 。
效 , 且无明显毒副作用 。 作者报道其抗炎 、镇 1 . 4 仪器 : 7 52 型紫外分光光度计 , 上海分
痛作用 。 析仪器三厂 。热板仪 ,浙江宁海白石电子仪器
l 实验材料 厂 。
1
.
1 药物 : 历节片为深棕色粉末 , 每克含生 2 方法与结果
药 3 . 6 9 , 由长春中医学院中药系提供 。 厄痹 2 . 1 对急性炎症的影响
冲剂辽 宁省 本 溪 第三制 药厂 生 产 , 批号 2 . 1 . 1 对大鼠蛋清性足肿胀的影响 : 取大鼠
9 3 0 5 3 3
,临用时以蒸馏水配成所需浓度 。 46 只 ,随机分 5 组 , 按表 1 所示剂量连续 馆
1
.
2 试剂 : 角叉菜 、 巴豆油为沈阳药学院产 给药 7 d ,对照组给同体积 (2 0 m L k/ g ) 蒸馏
品 . H : 7 R V 人型结核 菌 、 磷酸组织胺购 自中 水 , 末次给药后 l h 每鼠右后足肠 sc 鲜蛋清
国药 品生物制品检定所 , 马血清由中国人民 0 . 1 m L 致炎 ,以每鼠左右后足躁关节 圆周和
解放军农牧大学提供 。 之差作为肿胀程度 ,结果见表 1 。
表 1 历节片对大鼠蛋清性足肿胀的影响 ` 士 : )
组别 剂量 动物数
( g / k g
·
d ) (只 )
致炎后不同时间 ( h) 足肿胀程度 ( m m )
对照
厄痹冲剂
历节片
2
.
5 9
1 2 5 9
1 8
.
4士 2 . 2 7 1 7 . 5士 2 . 3 7 15 . 1士 1 . 5 2 1 3 . 6土 1 . 5 8 1 1 . 1士 1 . 3 7
1 5
.
9士 2 . 9 8 1 5 . 2士 2 . 6 4 14 . 3士 3 . 0 0 1 2 . 0士 2 . 34 9 . 7士 2 . 1 8
1 4
.
6士 2 . 9 6 甘 . 1 4 . 0士 2 . 5 0 普 份 1 2 . 8土 1 . 7 2 资 甘 1 1 . 3士 2 . 9 2 书 9 . 1士 2 . 0 9 .
1 5
.
0 士 1 . 5 0 朴 赞 1 4 . 1士 2 . 2 0 赞 赞 1 3 . 1士 1 . 6 2 餐 1 1 . 3士 2 . 0 0 . 9 . 9士 1 . 0 5 ,
1 5
.
6士 2 . 07 朴 1 4 . 4士 2 . 6 9 “ 1 3 . 1士 2 . 4 7 “ 1 1 . 8士 2 . 2 2 9 . 9士 1 . 4 5
9
.
7士 1 . 2 5
8
.
8士 2 . 0 5
7 7士 2 . 1 7 件
7
.
7士 1 . 4 1 朴 铃
7
.
8士 0 . 9 7 否 否
与对照组比较 : ’ 尸 < 。 . 0 5 ’ “ 尸 < .0 01

A d d r e s s
o f C h in e s e M a t e r i a M e d i e a
,
J i l i
n A e a d e m y o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i e in e a n d M a t e r i a
师海波 1 9 8 7 年毕业于 延边医学院药学系 , 学士学位 ,现为吉林省中医中药研究院助理研究员
药理研究工作 曾参加国家自然科学基金 、 新药基金 、地方科委等多项课题研究工作 , 发表论文 10 篇 ,项 (主要完成者 ) ,参加编 写《现代中药药理学 》 。
《中草药 》 1 9 9 8 年第 29 卷第 4 期
主要 抗炎 、 免疫二等奖 1
·
2 4 9