全 文 ：2. 4　养正合剂对大鼠脾细胞产生 IL-Ⅱ的影响:
Wista r大鼠 ,雄性 ,制备脾细胞悬液 ,以 RPM I1640
洗涤 3次后 ,配成 5× 106 cfu /mL悬液 ,加入 ConA
5μg /m L,将含 ConA的细胞悬液分为 5份 ,分别为
空白对照和养正合剂 2. 5, 50, 100, 200μg /mL,置
37℃ 含 5% CO2的培养箱中培养 72 h,吸取上清
液 ,置 - 20℃保存备用。采用 MT T比色法检测 IL-
Ⅱ活性 ,将 CTIL细胞洗涤后配成 2. 5× 105 cfu /mL
悬液 ,在微孔培养板中每孔加入 50μg ,将待测样品
及 IL-Ⅱ标准品作 2倍连续稀释 ,稀释标本再加于
微孔培养板中 ,每孔 100μL,每一稀释度均为复孔 ,
培养 36 h后 ,每孔加 MT T( 5μg /m L) 10μg ,再培
养 4 h,加酸化异丙醇溶解甲 结晶 ,然后将微孔板
放入酶标仪作比色分析 ,测定波长为 570 nm,参比
波长为 630 nm,每孔两个波长处的吸光度 ( A )之差
即为该孔的实测 A值。将待测样品与参比标准品同
时作倍比稀释 ,分别测出二者使检测细胞达到最大
增殖 50%的稀释度 ,按下式计算 IL-Ⅱ活性单位 ,结
果见表 6。
样品 IL-Ⅱ活性单位 ( U /mL)= (样品使检测细
胞达最大增殖 50%时的稀释倍数 /标准品使检测细
胞达最大增殖 50%时的稀释倍数 )×标准品 IL-Ⅱ
活性单位
3　讨论
实验发现养正合剂对调节机体免疫功能及肿瘤
所致的免疫功能降低具有明显恢复作用 ,使正常小
表 6　养正合剂对大鼠脾细胞产生 IL-Ⅱ的影响
(x± s, n= 5)
组别 质量浓度 (μg /mL) IL-Ⅱ活性 ( U /m L)
对照组 - 1. 30± 0. 23
养正合剂 200 2. 95± 0. 81* *
100 1. 58± 0. 06*
50 1. 36± 0. 23
25 1. 55± 0. 44
　　与对照组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
鼠 K、X 值明显升高 ;可明显对抗环磷酰胺所致小
鼠碳粒廓清速率低下 ,使 K、X值恢复至正常水平。
大剂量养正合剂可明显增加荷瘤小鼠低下的 DTH。
养正合剂还显著增强接种 S180瘤株小鼠低下的血清
溶血素含量 ,并明显促进大鼠脾细胞的 IL-Ⅱ生物
活性。综上所述 ,养正合剂可提高机体的体液免疫和
细胞免疫功能 ,对临床用于癌症患者的辅助治疗有
一定的实际意义。
参考文献:
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生出版社 , 1991.
墓头回诱导脐血基质细胞形成及分泌 GM-CSF的实验研究
赵　丽 ,李兴玉 ,马海珍
⒇
(兰州医学院血液病研究所 ,甘肃 兰州　 730000)
摘　要: 目的　应用细胞培养技术检测了墓头回水提物对人脐血基质细胞生成及其分泌粒系造血刺激因子的实验
研究。 方法　将不同浓度的墓头回水提物与脐血共同培养 14 d,检测基质细胞上清液中的 GM-CSF活性。结果　
墓头回水提物对人脐血基质细胞具有促进形成的作用 ,最高峰为 0. 01μg /m L,为了检测基质细胞上清液中的 GM-
CSF活性 ,进行了 GM-C FU实验 ,结果表明 ,实验各组数据与对照组比较 ,具有非常显著性差异 (P < 0. 01)。结论　
墓头回水提物不仅是一种强烈的抗癌药物 ,也是一种造血祖细胞促进剂。
关键词: 墓头回 ;基质细胞 ; GM-CSF
中图分类号: R285　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 01 0056 03
·56· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
⒇ 收稿日期: 2000-08-18作者简介:赵　丽 ( 1963-) ,女 ,云南省巍山县人 ,硕士学位 ,现任兰州医学院第一附属医院血液科副主任医师 ,副教授。 1984年至今从事血液病的临床、教学及科研工作。研究白血病细胞耐药逆转及外周血造血干细胞移植治疗恶性肿瘤的基础与临床。
Tel: ( 0931) 8625200转 6251　　 E-mai l: lil y jin sh an@ sina. com
Experimental studies on the formation of cord blood stromal cell and secretion of
GM-CSF induced byPatrinia scabra
ZHAO Li, LI Xing-yu, M A Hai-zhen
　　 ( Hemopa thic Institute o f Lanzhou Medical Co lleg e, Lanzhou Gansu 730000, China )
Key words: Patrinia scabra Bge. ; stromal cel l; GM -CSF
　　墓头回俗称脚汗草 ,为败酱科植物 ,有糙叶败酱
及异叶败酱之分。 有镇静、镇痛和增强免疫力作
用 [1 ] ,还有治疗血小板减少性紫癜 [2, 3 ]和抗白血
病 [4, 5 ]的作用。近来我们发现墓头回可促进脐血基质
细胞的形成及诱导其产生粒系祖细胞集落刺激因子
生成的作用。
1　材料与方法
1. 1　药物:甘肃庆阳产墓头回原植物 ,经本院药学
系中草药教研室鉴定为败酱科败酱属植物糙叶败酱
Patrinia scabra Bge. 实验用墓头回为水提物。
1. 2　脐带血单个核细胞的制备:将肝素抗凝的脐带
血加在淋巴细胞分离液上层 , 2 000 r /min离心 30
min,取出富含单个核细胞的液面层 ,用 RPM I 1640
液洗涤 2次 ,计细胞数 ,待用。
1. 3　墓头回水提物对脐血基质细胞层形成实验:将
1× 106 /mL单个核细胞 , 20%小牛血清和不同质量
浓度 ( 0. 1, 0. 01, 0. 001μg /mL)的墓头回水提物混
合并接种于 35 mm培养皿中 ,置 37℃、饱和湿度和
5% CO2培养箱中培养 14 d,视基质细胞层形成时终
止培养。然后用 0. 25%的胰蛋白酶消化基质层细
胞 ,直接计基质细胞数。
1. 4　墓头回基质细胞上清液 ( M TH-Placenta
Stroma cell super natant , M T H-PSCS)的制备: 按
1. 3方法将培养体系加入 35 mL的组织培养瓶中 ,
置 37℃、饱和湿度和 5% CO2培养箱中培养 14 d,
收集基质细胞上清液 , - 20℃冰箱保存待用。
1. 5　粒系集落刺激因子生物活性检测: 将 2× 105 /
m L单个核细胞、 20%的新生小牛血清、 40 ng /mL
GM-CSF( Schering-Plough)、 1640培养液、终浓度
为 0. 3%琼脂和不同浓度 MT H-PSCS混匀后接种
于 35 mm培养皿中 ,置 37℃、饱和湿度和 5% CO2
培养箱中培养 7 d,倒置光显微镜下计≥ 50个粒单
祖细胞组成的集落数。
1. 6　统计学处理:采用 t检验 ,数据以 x± s表示。
2　结果
2. 1　墓头回水提物对人脐血基质细胞层形成的影
响:见表 1。
结果可知 ,墓头回水提物对人脐血基质细胞具
有促进生成的作用 ,其峰值为 0. 01μg /mL,该细胞
数与对照组比较 ,具有显著性差异 ( P < 0. 05)。
表 1　墓头回水提物对脐血基质层细胞层形成的影响
药物质量浓度 (μg /m L) 基质细胞数 (× 104 )
对照 7. 28± 0. 80
　　　　　　 0. 1 　　　　 6. 70± 0. 69
0. 01 13. 80± 0. 39*
0. 001 9. 20± 0. 68*
　　与对照组比较: * P < 0. 05
2. 2　 M TH-PSCS对粒单祖细胞生成作用的影响:
见表 2。
表 2　MTH-PSCS对脐血粒系祖细胞集落的影响
M TH-PSCS 集落数
对照 13. 67± 5. 51
5% 151. 67± 7. 57*
10% 278. 00± 7. 00*
20% 179. 33± 3. 06*
30% 74. 00± 5. 29*
　　与对照组比较: * P < 0. 01
结果提示 ,脐血基质细胞具有分泌 GM-CSF的
作用 ,对照组为 13. 67± 5. 51,而在 10%的实验组
GM-CSF高达 278. 00± 7. 00,与对照组相比具有显
著性差异 ( P < 0. 01)。
3　讨论
墓头回抗肿瘤的研究已有 20多年历史。为了进
一步研究其药理作用 ,我们应用墓头回与人脐带血
共同培养 ,观察到了在剂量较低时墓头回可诱导基
质细胞的形成 ,当剂量加至 0. 01μg /mL时 ,基质细
胞形成达高峰。 实验中我们还发现当墓头回剂量大
于 0. 1μg /mL,其基质细胞形成减少 ,提示墓头回对
脐血基质细胞形成有剂量依赖关系。同时我们还观
察到在 7～ 10 d时基质层细胞呈椭圆形 , 15～ 17 d
时则各种细胞交织成片 ,形成了基质细胞层 ,其中大
部分细胞为巨噬样细胞 ,为造血实质细胞提供了造
血诱导微环境。文献报道 ,基质细胞可产生 M-CSF、
GM-CSF、 G-CSF、 IL-1、 IL-4、 IL-6、 IL-7、 IL-11、
SCF、血小板衍生生长因子和 bFGF等各种细胞因
子 ,它们对于维持造血具有重要作用 [6, 7 ]。 为此我们
检测了基质层细胞上清对粒系祖细胞刺激生成的作
用 ,研究结果表明 ,脐血基质细胞确有分泌 GM-
CSF的作用 ,对照组 GM-CFU为 13. 67± 5. 51,而
·57·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
在 10%的实验组 GM-CFU高达 278. 00± 7. 00,与
对照组比较具有显著性差异 ( P < 0. 01)。
墓头回与其他许多中草药一样 ,具有“双向”调
节作用 ,当剂量大时具有杀伤肿瘤细胞的效果 ;而剂
量小时却能诱导基质细胞的形成 ,通过分泌造血刺
激因子促进造血。
以上结果提示 ,墓头回水提物不仅是一种强烈
的抗癌药物 ,也是一种造血祖细胞促进剂。这对于临
床治疗白血病和血小板减少性紫癜提供了依据 ,同
时也为墓头回治疗再生障碍性贫血奠定了基础。
参考文献:
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速效救心丸治疗顽固性头痛
李　伯 ,毛效军
⒇
(北京军区总医院 中医科 ,北京　 100700)
中图分类号: R285. 6　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 01 0058 01
　　速效救心丸是治疗冠心病的常用药物 ,已经应
用多年 ,深受广大冠心病和心绞痛病人的欢迎。我们
在一次偶然的机会发现其有较好的缓解头痛的作
用 ,尤其对那些顽固性头痛效果更佳 ,是其他镇痛药
物所不能比拟的。1997年 6月～ 2000年 6月将其用
于治疗顽固性头痛 47例 ,取得了较好疗效。
1　临床资料
47例中男性 18例 ,女性 29例 ;年龄 22～ 63
岁 ;病程 1～ 21年 ;头痛性质:烧灼样痛 9例 ,搏动性
痛 17例 ,刀割样痛 10例 ,头顶沉重样痛 11例。辩证
分型:痰浊上扰 13例 ,瘀阻脑络 12例 ,气血亏虚 11
例 ,肝肾阴虚 7例 ,肝阳上亢 4例。所有病人治疗前
均作 CT或核磁共振检查 ,排除了脑部肿瘤引起的
头痛。高血压病人则在控制平稳后方可入组治疗。舒
张压大于 13. 3 kPa( 100 mmHg ) ,收缩压大于 20. 0
k Pa ( 150 mm Hg )时 ,同时配合服用降压药。
2　治疗方法
速效救心丸 (天津第六中药制药有限公司出
品 ) ,每日 3次 ,每次服 5粒 ,治疗期间不用任何止痛
药物。 7 d为 1个疗程 ,应用 2个疗程后统计治疗效
果。 治疗期间禁止吸烟和饮酒。
3　疗效标准
参照 1994年国家中医药管理局颁布的《中医病
症诊断疗效标准——头风》的标准。治愈:头痛消失 ,
各项实验室检查正常 ;好转:头痛减轻 ,发作时间缩
短或周期延长 ,实验室检查有改善 ;未愈:头痛症状
及血压等无变化。
4　结果
观察治疗 47例 ,其中治愈 35例 ,占 74% ;好转
9例 ,占 20% ;无效 3例 ,占 6%。
5　讨论
头痛是临床常见的症状 ,可以由多种疾病引起 ,
也可以是一个独立存在的症状 ,而病因不清 ,现代医
学认为病因与神经血管因素相关。 头痛属于中医的
头风范畴 ,是由于肝阳上亢和痰瘀互结而致清阳不
升 ,或浊邪上犯及清窍失养所致。在临床上辩证治疗
效果并不明显 ,往往还需配合一些镇痛药物。速效救
心丸是临床上用于治疗冠心病及心绞痛的药物 ,其
说明书并无治疗头痛的内容。 但其主要成分是川芎
(下转第 62页 )
·58· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
⒇ 收稿日期: 2000-08-25作者简介:李　伯 ( 1949-) ,男 ,天津武清人 ,副主任医师 , 1977年毕业于上海中医学院 ,从事心脑血管疾病的治疗研究工作。
Tel: ( 010) 64076840