全 文 ：1. 3. 5　稳定性实验:取盐酸水苏碱标准曲线项下的
斑点 ,每隔 0. 5 h扫描 1次。结果盐酸水苏碱峰面积
值在 5 h内基本不变 , RSD= 1. 24% 。斑点在 5 h内
基本稳定。
1. 3. 6　重复性实验:取同一批号的样品 ,分别精密
称取 5 g ,共 5份 ,按上述方法提取 ,点样 ,展开 ,显色
后扫描测定各斑点 , RSD= 2. 25% (n= 5)。
2　讨论
2. 1　在样品定量时 ,糖的干扰很大 ,所以去糖是关
键。试用硅藻土 ,糖被大量吸附时 ,生物碱也被吸附
了。 本文采用超声提取法 [3 ] ,效果较为理想。
2. 2　薄层扫描时 ,背景较深 ,校正背景时选择测定
波长为 580 nm,效果最好。
2. 3　用薄层色谱法对新生化冲剂中的水苏碱进行
定性、定量分析 ,方法简便、快捷、可靠 ,利于提高新
生化冲剂的质量控制指标。
参考文献:
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纤维素酶在葛根总黄酮提取中的应用
邢秀芳 1 ,马桔云 1 ,于宏芬2 ,于喜水1
⒇
( 1. 黑龙江省中药研究所 ,黑龙江 哈尔滨　 150040;　 2. 黑龙江康尔药业股份有限公司 ,黑龙江 哈尔滨　 150040)
中图分类号: TQ461　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 01 0037 02
　　葛根为豆科植物野葛 Pueraria lobata ( Willd. )
Ohwi或甘葛藤 P. thomsonii Benth. 的干燥根 ,系
常用中药。葛根在我国分布广泛 ,资源丰富 ,具有多
种药理和临床作用 [1, 2 ]。 葛根中含有多种有效成分 ,
主要为异黄酮类 [3 ]。近年来 ,纤维素酶在国外广泛应
用于各领域 ,马田田将纤维素酶用于黄柏提取小檗
碱的实验中 ,小檗碱的收率有显著提高 [4 ]。本文将纤
维素酶用于葛根总黄酮的提取中 ,为纤维素酶在中
药提取中的应用提供依据。
1　材料与药品
纤维素酶粗品 (活力单位约 2 000 U /g )为海林
万力达集团公司提供 ;葛根购于黑龙江省药材公司 ;
葛根素对照品购于中国药品生物制品检定所 ;所用
试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　酶解实验:将药材饮片粉碎约 1 cm左右 ,用 3
倍量水浸泡 ,用盐酸调 pH4,加 0. 5%纤维素酶充分
搅拌 ,置 40℃恒温水浴内保温 1. 5 h。
2. 2　葛根总黄酮提取工艺:见图 1。
2. 3　葛根总黄酮含量测定
2. 3. 1　标准曲线绘制:精密称取干燥至恒重的葛根
素 5 mg于 25 mL容量瓶中 ,加 95%乙醇溶解并稀
释至刻度 ,精密吸取 0. 2, 0. 4, 0. 6, 0. 8, 1. 0 mL置
图 1　葛根总黄酮提取工艺流程图
10 mL容量瓶中 ,精密加水稀释至刻度 ,摇匀。 同时
精密吸取 1 mL 95%乙醇 ,加水至 10 mL做空白对
照 ,在 250 nm波长处测定吸光度。回归方程: A= -
0. 054 4+ 0. 087 78C , r= 0. 999 8。
2. 3. 2　葛根提取物中总黄酮的测定:将 2. 2中所得
总黄酮精密称取一定量 (相当于 20 g生药 ) ,加 60%
乙醇溶解 ,置 100 mL容量瓶中定容 ,摇匀 ,精密吸
取 0. 2 mL至 50 mL容量瓶中 ,加水至刻度摇匀。同
时吸取 1. 0 mL 95%乙醇加水至 10 mL的溶液做空
白对照 ,在 250 nm波长处测定吸光度。从标准曲线
上换算出葛根总黄酮的含量。
·37·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
⒇ 收稿日期: 2000-01-10
2. 4　收率与结果见表 1, 2。
表 1　加酶与未加酶提取葛根总黄酮的收率
加酶法 葛根总黄酮收率 (% ) 未加酶法 葛根总黄酮收率 (% )
1 8. 40 1 7. 73
2 8. 82 2 8. 03
3 8. 85 3 7. 84
4 8. 92 4 7. 06
5 8. 41 5 7. 76
表 2　 2种不同工艺提取结果比较
加酶法
x1 s1
未加酶法
x 2 s2
t值 P值
提取率 8. 68 0. 253 7 7. 684 0. 367 9 4. 98 < 0. 01
　　 t 0. 01 ( 8)= 3. 355 4
2. 5　薄层层析: 将加酶、未加酶得到的提取物与葛
根素对照品分别点于同一硅胶 G板上 ,以氯仿-甲
醇 -水 ( 7∶ 2. 5∶ 0. 5)为展开剂 ,展开 ,展距 10 cm ,
在 254 nm紫外灯下观察荧光。薄层色谱见图 2。
3　讨论
3. 1　用葛根提取总黄酮 ,我们进行了加酶与不加酶
的对比实验 ,从用纤维素酶提取葛根总黄酮的实验
中 ,在纤维素酶的作用下 ,葛根总黄酮的收率提高了
1-葛根素　 2-加酶提取物
　 3-未加酶提取物
图 2　葛根 TCL图
13% ;经 t检验 ,两种提取方
法的 P < 0. 01。
3. 2　从薄层层析结果显示 ,
加酶与不加酶提取出的成分
一致 ,说明酶解没有破坏葛根
的成分。可以认为纤维素酶可
以用于葛根总黄酮的提取。
3. 3　由于中药材存在着质地
和成分等差别 ,因此把纤维素
酶广泛应用于中药材的提取
中 ,值得进一步深入研究。
参考文献:
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范围的影响 [ J ]. 山东医学院学报 , 1984, 22( 3): 9-17.
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围的影响 [ J ]. 中国心血管病杂志 , 1985, 13( 3): 175-178.
[3 ]　左春旭 ,丁杏苞 ,刘　翎 . 葛根非黄酮成分 [ J] . 中草药 , 1987,
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[ 4 ]　马田田 . 纤维素酶用于中药提取的初步研究 [ J ] . 中草药 ,
1994, 25( 3): 123.
　　 (上接第 18页 )
0. 95( 3H, t, J= 7. 2 Hz, H-1) , 1. 40( 2H, m , H-2) ,
1. 50 ( 2H, m, H-3 ) , 3. 5 ( 2H, m , H-4)。 13 CNMR
( CD3OD)δ: 14. 4 ( C-1) , 20. 5 ( C-2) , 33. 4 ( C-3) ,
61. 7 ( C-4) , 63. 5 ( C-6′) , 65. 2( C-1′) , 70. 6 ( C-3′) ,
71. 1( C-5′) , 71. 6( C-4′) , 101. 6( C-2′)。综合解析该
化合物为 β-D-正丁基 -果糖苷。
化合物Ⅵ : 白色针晶 , mp 306. 0℃～ 307. 0℃ ;
Liebermann-Burchard反应绿色 ,示母核中有甾类;
Molisch反应阳性 ,示为苷类化合物。按文献 [ 7]方法进行
酸水解薄层层析 ,以标准 β -D-葡萄糖、α-L-鼠李糖对照 ,
确定糖部分具有 β -D-葡萄糖、α-L-鼠李糖。 IRν( KBr)
cm- 1: 3 450( O H) , 2 940( CH2、 CH) , 1 630( C= C)。
1 HNM R( CD3OD)δ: 0. 78～ 1. 32 ( 18H, 6× CH3 ) ,
1. 50～ 2. 20( 24H, m ) , 3. 27～ 4. 20( 17H, m ) , 4. 40
( 1H, m , H-3) , 4. 50( 1H, J= 7. 5 Hz, glc H-1) , 4. 75
( 1H, rha H-1) , 4. 85( 8H, s,糖上 8个 OH) , 5. 20
( 1H, d, J= 1 Hz, rha H-1) , 5. 37( 1H, brs)。 13CNMR
( CD3OD)δ: 苷元部分: 14. 9 ( C-21) , 16. 8 ( C-18) ,
19. 8( C-19) , 22. 0( C-11) , 30. 8( C-2) , 32. 2( C-15) ,
32. 5 ( C-23) , 32. 8( C-7) , 32. 8( C-8) , 38. 1( C-10) ,
38. 6 ( C-1) , 39. 6( C-4) , 41. 0( C-12) , 41. 5( C-13) ,
42. 9( C-20) , 51. 8( C-9) , 57. 8( C-14) , 63. 8( C-17) ,
79. 3 ( C-3) , 82. 2( C-16) , 110. 6 ( C-22) , 122. 7 ( C-
6) , 141. 9( C-5) ;糖部分: glc: 62. 0 ( C-6) , 76. 6( C-
3 ) , 78. 1 ( C-5) , 79. 3( C-4) , 80. 0 ( C-2) , 103. 0( C-
1) ; rha: 18. 0( C-6) , 70. 7( C-5) , 72. 4( C-3) , 72. 5( C-
4) , 74. 1 ( C-2) , 102. 3( C-1) ; rha: 17. 9( C-6) , 69. 8
( C-5) , 72. 2( C-2) , 72. 2 ( C-3) , 73. 8( C-4) , 100. 5
( C-1)。 FAB-M S m /z: 869( M+ H) , 723( M- rha) ,
613, 569, 415, 397, 309, 139, 126, 119, 115。综合解析
上述数据 ,并与文献 [8 ]对照 ,该化合物鉴定为薯蓣皂苷。
化合物Ⅶ : 为果糖。
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