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Effects of Barbary Wolfberry (Lycium barbarum) Polysaccharide on Isolated SkeletalMuscular Fatigue Induced by Electric Stimulation in Toad

枸杞多糖对电刺激离体蟾蜍腓肠肌疲劳的影响



全 文 :FCPS对机体免疫功能低下状态有恢复作用。
表 1  FCPS对 Cy降低的小鼠 DTH作用
组别 剂量
( mg /kg)
动物数 两耳重量差值
( mg)
对照组 - 13 7. 94± 4. 95
Cy 60 12 4. 59± 1. 85*
FCPS+ Cy 200 12 8. 78± 2. 37△
400 14 11. 11± 5. 62△
  与对照组比较: * P < 0. 05; 与 Cy组比较: △ P < 0. 01
2. 2  FCPS对冷水应激所致 DT H低下的恢复作
用:结果见表 2。每日强迫小鼠在冷水 ( 13± 1)℃中
游泳 ,小鼠下沉捞起 ,连续 10 d,应激小鼠的迟发型
超敏反应明显减弱 ,而给药组对低下的免疫功能均
显示有恢复作用。统计学处理虽无显著性差异 ,但反
应程度有明显增加的趋势。
表 2  FCPS对冷水应激所致小鼠 DTH低下的恢复作用
组别 剂量
( mg /kg)
动物数 两耳重量差值
( mg)
对照组 - 9 21. 92± 9. 78
应激 - 9 10. 65± 6. 65#
FCPS+ 应激 100 10 10. 86± 8. 74*
200 7 16. 44± 9. 53*
  与对照组比较: # P < 0. 05; 与应激组比较: * P> 0. 05
3 讨论
迟发型超敏反应是由特异性致敏效应 T细胞
介导的细胞免疫反应 ,其中的 T细胞在移植物排
斥、移植物抗宿主病、自身免疫和肿瘤免疫等方面起
着关键作用 ,是检测细胞免疫功能的常用方法之
一 [2 ]。近年来许多研究表明 ,一些多糖能够提高正常
小鼠的迟发型超敏反应 ,还能恢复免疫功能低下小
鼠的迟发型超敏反应 [ 1]。 FCPS是我室首次从中药
无花果中提取的有效成分 ,实验发现 , FCPS能显著
恢复免疫功能低下小鼠的 DT H反应。 Cy为较强的
免疫抑制剂 ,许多资料表明:它对多种免疫活性细胞
均有抑制作用 ,不同的免疫细胞及免疫细胞的不同
亚型对 Cy的敏感性存在明显差异 , Cy对免疫细胞
的作用与其和抗原应用的时间及剂量有关 ,在用
DN FB致敏前给予较大剂量的 Cy,因其选择性杀伤
TS细胞及前体从而增强 DTH反应 ;而在致敏当天
给予 Cy可导致 DT H反应低下 [4 ]。本实验在致敏当
天连续应用 Cy组可见迟发型超敏反应明显减弱 ,
而 FCPS各剂量组均能拮抗 Cy降低的 DT H,使小
鼠的耳肿胀度超过正常水平。大量研究结果证明 ,急
性应激 ,血循环糖皮质激素含量增高 ,免疫受抑
制 [5, 6 ]。本研究采用冷水游泳的方法造成应激模型 ,
DT H程度减弱 ,而给药组应激后耳肿胀度有所恢
复 ,尽管未达正常水平 ,但亦显示有良好的抗应激作
用。 因此认为 , FCPS对应激、药物造成的免疫功能
低下状态有恢复作用。提示该药很可能具有良好的
免疫调节作用 ,有待更进一步的深入研究。
参 考 文 献
1 向道斌 ,等 . 国外医药 -合成药、生化药、制剂分册 , 1991, 12( 5):
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2 徐叔云 ,等主编 . 药理实验方法学 . 第二版 . 北京: 人民卫生出
版社 , 1991: 1228
3 丁桂风 ,等编译 . 医学免疫学纲要 . 北京:北京医科大学、中国协
和医科大学联合出版社 , 1992: 311
4  M erluzzi V J, et al . Cancer Res , 1979, 39: 3647
5  Justice A. Psych ol Bull , 1985, 98: 108
6  Moni jan A A. Science, 1971, 196: 307
( 1999-09-20收稿 )
枸杞多糖对电刺激离体蟾蜍腓肠肌疲劳的影响△
宁夏医学院 (银川 750004)  彭晓东  沈 泳 李 锋 谭卫星
摘 要 采用脉冲式电流直接刺激蟾蜍离体腓肠肌作为疲劳模型 ,研究枸杞多糖 ( LBP)对离体肌肉的收缩能力 ,
耗竭肌肉组织内脂质过氧化物以及乳酸产生的影响。结果表明 , 6. 4~ 25. 6 mg /m L LBP可使肌肉收缩持续时间下
降 (P < 0. 01) ;肌乳酸含量下降 (P < 0. 05) ;对肌肉收缩幅度没有影响 ;对脂质过氧化物含量无明显影响。提示 LBP
对离体蟾蜍腓肠肌在电刺激条件下引发的收缩疲劳有促进作用。
关键词 枸杞多糖 离体蟾蜍腓肠肌 肌肉疲劳 脂质过氧化物 丙二醛 乳酸
·356· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2000年第 31卷第 5期
Address: Peng xiaodong, Ningxia Medical Col leg e, Yinchuan彭晓东 男 , 1989年毕业于西安医科大学药学系 ,现任宁夏医学院药理学教研室讲师 ,硕士。 主要从事神经药理研究。曾参与国家自然科学基金项目“宁夏枸杞的药理研究” ,获宁夏自治区科技进步三等奖。△国家自然科学基金资助课题 ( 39160029)
Effects of Barbary Wolfberry (Lycium barbarum) Polysaccharide on Isolated Skeletal
Muscular Fatigue Induced by Electric Stimulation in Toad
  Depar tment of Pha rmaco lo gy , N ingxia Medical Co lleg e ( Yin chuan 750004)  Peng Xiaodong , Shen Yong , Li Feng and
Tan Weixing
Abstract   The ef fects o f Lycium barbarum poly saccharide ( LBP) , obtained from Lycium barbarum
L. , on isolated toad gast rocnemius muscular fa tigue induced by elect ric stimulation w ere investiga ted. The
dura tion and ampli tude of cont raction, as w ell as the lipid peroxidation products and lactate concentrations
o f the stimula ted muscle w ere determined. Results show ed tha t, LBP at concentrations of 6. 4~ 25. 6 mg /
m L, can cause a decrease o f the muscular cont raction time and lower the content of lactate in the fatigued
muscles, but wi thout ef fect on the amplitude o f cont raction, and amount of lipid peroxidation products.
These results indicated tha t LBP can potentiate muscular fa tigue in v it ro induced by elect ric stimula tion.
Key words   Lycium barbarum po lysaccharide ( LBP)  iso lated toad gastrocnemius  muscula r
fatigue  lipid perox idation  MDA  lactic acid
  近年来研究发现 ,许多天然物质具有清除自由
基、抗脂质过氧化物和抗疲劳的作用 [1, 2, 6 ]。 中医认
为枸杞 Lycium barbarum L. 具有滋肝补肾、强壮筋
骨的作用。现代医学研究表明 ,枸杞具有增强免疫
力、抗衰老、抗氧化和抗疲劳的作用 [ 3~ 5]。我们以脉
冲式电流直接刺激离体蟾蜍腓肠肌作为疲劳及产生
自由基的模型 [6 ] ,研究宁夏枸杞的有效成分枸杞多
糖 ( LBP)对一次性耗竭运动过程中肌肉的收缩幅
度、收缩持续时间、肌肉中丙二醛 ( MDA)的产生和
肌乳酸 ( lactate)含量的影响 ,以期了解 LBP的抗疲
劳作用。
1 材料
1. 1 药品:枸杞多糖购自宁夏中药厂。临用前以生
理盐水制成 200 mg /mL( pH= 7)。
1. 2 动物:中华大蟾蜍 ( Bufo bufo gargarizans ) ,
50~ 80 g ,西安医科大学实验动物中心提供。
1. 3 仪器: YSD-4型药理生理多用仪 (华南师范大
学无线电厂 ) ; LMB-2B型二导生理记录仪 (成都仪
器厂 ) ; JH-IB-100型力位换能器 (成都仪器厂 ) ; 721
型分光光度仪 (上海仪器厂 )。
2 方法
2. 1 标本制作:分离腓肠肌 ,去除坐骨神经 ,用含糖
任氏液 ( Ringer s so lution)冲洗 ,去血污后 ,浸于任
氏液中 ,静置 10 min后使用。
2. 2 肌肉收缩能力的测定 [6 ]: 蟾蜍腓肠肌标本浸泡
在有电磁搅拌的石蜡肌槽中 ,并加入 25 mL的任氏
液 ,肌肉接坐骨神经端 ,用细线固定于肌槽上 ,另一
端经细线联于换能器上 ,调节肌肉处于恒定的张力
状态作为基线描记 ,银电极轻触肌肉表面 ,给予连续
方波刺激 ,在二导生理记录仪上描记肌肉收缩曲线。
刺激参数: DC 20 V, 波宽 0. 3 ms, 频率 1 Hz。
在给予刺激后 ,肌肉收缩幅度约 30 s后达到最
大值 (Cmax ) ,停止刺激 ,给药组加入相应体积的 LBP
溶液达实验所需浓度 ,对照组加入等体积的任氏液 ,
使肌槽中的总体积均为 25 mL。搅拌下浸泡 15 min
之后 ,复给予相同刺激。记录收缩幅度下降到最大收
缩幅度的 50%时的时间为 t0. 5 ,下降到 10%的时间
为 t0. 1 ,时间记录以 s为单位。 实验用同一蟾蜍的两
块腓肠肌标本 ,随机分为对照组和给药组 ,肌槽温度
20℃。实验中药物抑制了肌肉的收缩能力 ,以 Ic-It /
Ic为公式计算抑制率。其中 Ic为对照组指标 , It为给
药组指标。如果用药后改善了肌肉的收缩能力 ,则以
It / Ic计算增加收缩能力的倍数。
2. 3 肌肉匀浆的制备和 MDA及肌乳酸含量的测
定:将实验完毕的腓肠肌标本用 1. 15% KCl溶液室
温下清洗后 ,用定性滤纸吸去血污 ,去肌腱后复用
1. 15% KCl溶液在冰浴中制成 20% ( g /mL)匀浆 ,
- 20℃保存 , 1周后依法进行 MDA和肌乳酸含量
测定 [7, 8 ]。
3 结果
3. 1  LBP对肌肉收缩幅度 Cmax的影响。对照组与
给药组浓度 6. 4~ 25. 6 mg /mL范围内 Cmax无显著
性差异 ( P> 0. 05) , 其中 25. 6 mg /mL浓度组在浸
泡约 3 min后肌肉发生痉挛 , 其后 , 记录基线恢复。
3. 2  LBP对肌肉收缩持续时间的影响: 见表 1。
LBP浓度在 6. 4~ 25. 6 mg /mL范围内 , 对肌肉收
缩产生不同程度的抑制作用 , 给药组与对照组相
比 , 肌肉收缩持续时间 t0. 5 , t0. 1下降 (P < 0. 01)。
3. 3  LBP对肌乳酸和肌 MDA含量的影响: 见表
2。由 6. 4, 14. 7, 25. 6 mg /mL 3组浓度的 LBP的实
验标本测定肌乳酸和肌 MDA的含量 ,给药组与对
照组相比 ,肌乳酸含量减少 ( P < 0. 05) , 14. 7和
·357·中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2000年第 31卷第 5期
25. 6 mg /mL两组 MDA含量变化不显著 ( P>
0. 05) ,但 6. 4 mg /mL组 MDA含量增加。
表 1  LBP对离体蟾蜍腓肠肌收缩持续时间的影响 (x-± s )
LBP
( mg /mL)


t0. 5( s)
对照组 给药组
抑制率
(% )
t0. 1( s )
对照组 给药组
抑制率
(% )
6. 4 7 415± 44 323± 61* * 22. 2 1 009± 265 656± 118* 35. 0
10. 0 5 361± 46 266± 58* * 35. 7 769± 30 583± 90* * 26. 8
14. 7 6 370± 30 199± 56* * 48. 1 965± 95 465± 88* * 51. 8
25. 6 7 330± 17 191± 28* * 42. 1 1 082± 298 362± 74* * 66. 5
  与对照组相比较: * P> 0. 05 * * P < 0. 01
表 2  LBP对蟾蜍腓肠肌标本肌乳酸及肌 MDA
含量的影响 (x-± s )
LBP
( mg /mL)
例数
肌乳酸 ( mmol /g组织 )
对照组 给药组
M DA( nmol /g组织 )
对照组 给药组
6. 4 7 28. 40± 3. 44 22. 53± 2. 19* * 5. 27± 1. 51 7. 88± 1. 46* *
14. 7 6 31. 81± 1. 03 25. 67± 4. 49* 5. 16± 2. 32 6. 12± 2. 72*
25. 6 7 29. 59± 2. 45 24. 17± 4. 72* * 5. 45± 2. 80 5. 94± 1. 03*
  与对照组相比较: * P> 0. 05 * * P < 0. 05
4 讨论
研究表明 , LBP在浓度 6. 4~ 25. 6 mg /mL范
围内对离体蟾蜍腓肠肌标本在电刺激条件下引发的
收缩疲劳有促进作用 ,表现为给药组肌肉标本收缩
持续时间短于对照组 ( P < 0. 01)。
现代医学认为 ,自由基损伤是肌肉疲劳的重要
原因之一 [7 ] ,且损伤程度与运动强度有关 [10 ] ,而多
种天然抗氧化物质具有抗疲劳的作用 [ 1, 2 ]。文献报
道 , LBP可降低体外氧化体系中大鼠线粒体膜
MDA水平 [ 9] ,对小鼠耗竭性运动的恢复有利 [5 ]。 但
从本实验结果看 ,对于离体肌肉标本一次性衰竭收
缩运动所产生的疲劳 ,在所有的浓度范围内 LBP无
对抗作用 ,与在体实验的结果有差别。
文献报道 [ 3, 5] ,在体实验条件下 , LBP可增加血
液和肌肉中的 SOD水平 ,对小鼠耗竭运动的恢复有
利 , LBP有潜在的抗疲劳作用。本文 LBP对离体肌
肉的收缩能力有抑制作用 ,使肌肉收缩的疲劳产生
加快 ,提示 LBP对电刺激条件下引发的肌肉收缩有
抑制作用。肌乳酸含量降低 (P < 0. 05) ,可能与无氧
供能减少有关。 其与在体实验结果不同的原因有待
进一步研究。
参 考 文 献
1 郑荣梁 ,等 .中国应用生理学杂志 , 1991, 7( 3): 285
2 郑荣梁 ,等 .中国药理学报 , 1993, 14(增刊 ) : 47
3 戴寿芝 ,等 .老年学杂志 , 1987, 7( 1): 45
4 黎雪茹 ,等 .中华微生物学和免疫学杂志 , 1984, 4( 6): 395
5 高天顺 ,等 .宁夏医学院学报 , 1994, 16( 2): 101
6  Suarez-Kur tz G. Am J Physiol , 1981, 241: 98
7 莫 简 . 医用自由基生物学导论 . 北京:人民卫生出版社 ,
1989: 59
8 杨奎生 ,等 .中国运动医学杂志 , 1983, 2( 2) : 40
9 黄元庆 ,等 . 自由基生命科学进展 ( v ol 2) . 北京: 原子能出版
社 , 1994: 97
10  Lovin R. Eu r J Appl Physiol, 1987, 56: 313
( 1999-06-24收稿 )
穿心草 酮抗氧化作用初探
中山大学生命科学学院药学系 (广州 510275)  杨东梅  唐孝礼* *  张奕强 许实波
摘 要 以正常大鼠组织匀浆、线粒体为材料研究穿心草 酮 ( 1, 6-二羟基 -3, 5-二甲氧基 酮 , Cansco ra
Xanthon, CX )抗脂质过氧化作用。 以丙二醛 ( MDA)为指标 ,观察 CX对组织匀浆、线粒体体外脂质过氧化产
物 MDA生成量的影响。以吸光度 ( A)值为指标 ,观察 CX对邻苯三酚自氧化产生的 O÷2 及 Cu2+ -V it C自由基
产生系统产生的· O H的清除作用。 结果 CX抑制正常大鼠脑、肝、心、肾匀浆的体外过氧化脂质生成 ,抑制
Vit C和 FeSO4激发的线粒体膨胀。 提示 CX能清除 O÷2 ,· O H。
关键词 穿心草 酮 丙二醛 脂质过氧化  O÷2 · O H
  穿心草 Canscora lucidissima ( Lev l. et Vant. )
Hand. -Mazz.分布于广东、广西等地 ,资源丰富。民
间全草常用来治疗肝炎、黄疸、胃痛等疾患 [1 ]。 穿心
草中含有多种活性成分 ,其药理作用极少见报道。穿
心草口山酮是中山大学化工学院天然有机室从穿心
草全草中分离出来的口山酮化合物 (属黄酮类 )。本文
首次报道穿心草口山酮 ( 1, 6-二羟基 -3, 5-二甲氧基口山
酮 ,简称 CX)的体外抗氧化实验研究。 其结构式如
·358· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2000年第 31卷第 5期
Address: Yang Dongmei , Department of Ph armacy, Collgeg of Life Sciences, Sun Yat-sen Universi ty, Guang zh ou杨东梅 女 , 1997年毕业于中山大学生命科学学院药学系 ,获硕士学位 ,曾在广东省医学实验动物中心负责技术工作。现在广东药学院工作。
* * 现在中山医科大学药理室读博士后