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[ 3]　国家医药管理局中草药情报中心站编 . 植物药有效成分手册
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手掌参的化学成分研究
李　帅 1 ,王　栋 1 ,匡海学 1 ,冈田嘉仁 2 ,奥山 2
⒇
( 1. 黑龙江中医药大学药学院 ,黑龙江 哈尔滨　 150040;　 2. 日本国明治药科大学 )
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 01 0018 01
　　中药手掌参系兰科植物手掌参 Gymnadenia
conopsea R. Br. 的块茎 ,为少常用中药和常用蒙藏
药。分布于东北、华北、西北等地 [ 1]。中医临床用于补
肾益精、生津止渴、消瘀和理气止痛。 关于该药化学
成分的研究 ,有报道其地上部分成分及块茎中营养
成分的研究 [2, 3 ] ,但尚未见块茎中次生成分的研究报
道。为了寻找该药的有效成分 ,我们对其块茎进行了
化学成分的提取分离和结构鉴定。
将手掌参块茎用 95%乙醇回流提取 ,回收乙醇
后加水悬浮 ,以乙醚、正丁醇依次萃取 ,分别得乙醚
和正丁醇萃取物。乙醚萃取物经硅胶柱层析 ,分得 3
个化合物 ,经结构鉴定分别为十八烷 (Ⅰ )、丁香酚
(Ⅱ )和 β-谷甾醇 (Ⅲ ) ;正丁醇萃取物经硅胶柱层析、
配合硅胶制备薄层 ,分得 4个化合物 ,经结构鉴定分
别为 5-羟甲基糠醛 (Ⅳ )、正丁基 -吡喃果糖苷 (Ⅴ )、
薯蓣皂苷 (Ⅵ )和果糖 (Ⅶ )。
1　仪器与材料
手掌参药材购于黑龙江中药联营公司 ,经黑龙
江中医药大学中药鉴定教研室王喜军教授鉴定为兰
科植物手掌参 G. conopsed R. Br. 的块茎。薄层层
析及柱层析硅胶为青岛海洋化工厂产 ;试剂均为分
析纯。 熔点测定用 X-4型显微熔点测定仪 (温度计
未校正 ) ;紫外光谱仪用岛津 UV-190型 ;红外光谱
仪用岛津 IR-408型 , KBr压片或液膜法 ;核磁共振
仪用 Bruker AM-270GA JF; TM S为内标 ;质谱仪用
JM S-DX30型。
2　提取和分离
手掌参药材 4 kg以 95%乙醇回流提取 4次 ,过
滤 ,合并滤液 ,回收乙醇 ,得浸膏。加水稀释 ,水层分
别用乙醚和正丁醇萃取 ,乙醚层回收溶剂 ,蒸干 ,得
干膏 58 g。正丁醇层减压回收溶剂 ,蒸干 ,得干膏 87
g。乙醚萃取物上硅胶柱 ,以石油醚 -乙酸乙酯梯度洗
脱 ,分得化合物Ⅰ ～ Ⅲ。 正丁醇萃取物经硅胶柱层
析 ,氯仿 -甲醇梯度洗脱 ,配合硅胶制备薄层 ,分得化
合物Ⅳ～ Ⅶ 。
3　鉴定
化合物Ⅰ : 白色蜡状固体 , mp 45. 0℃～ 46. 5
℃ ; EI-M S ( m /z): 284 [M+ ] , 270, 256, 227, 185,
143, 115, 97, 43。 IRν( KBr ) cm- 1: 3 440, 2 900,
2 850, 1 705。1HNMR( CDCl3 )δ: 0. 95( 3H, t , J= 7
Hz, H-18) , 1. 26( 28H, s, 14个 CH2 ) , 1. 63( 2H, m,
H-3) , 2. 34( 2H, J= 8 Hz, H-18)。 13 CNMR( CDCl3 )
δ: 14. 4( C-18) , 22. 7( C-17) , 24. 7 ( C-16) , 28. 0～
31. 0( C-4～ C-15) , 31. 9( C-3) , 34. 1( C-2) , 180. 1
( C-1)。 鉴定为十八烷酸。
化合物Ⅱ : 黄色液体 ,有芳香气味。 EI-M S ( m /
z): 164 [M
+
] , 2; UVλM eOHmax nm: 236, 280; IRν(液膜 )
cm
- 1: 3 400 ( O H) , 2 900, 2 850, 2 760 ( CH3 , CH2 ,
CH) , 1 620( C= C) , 1 590(苯环 )。经与文献 [4 ] EI-
M S,
1
H和 13 CNMR数据对照 ,鉴定为丁香酚。
化合物Ⅲ : 白色结晶 , mp 139℃～ 140℃ , IR,
1HNMR, 13 CNM R和 M S谱经与文献 [ 5]对照 ,鉴定
为 β-谷甾醇。
化合物Ⅳ: 黄色液体 , M olisch反应阳性 ,经与
文献 [6 ]的 EI-M S, 1H和13 CNMR数据对照鉴定为 5-
羟甲基糠醛。
化合物Ⅴ :白色针晶 , mp 153. 5℃～ 154. 5℃ ;
FAB-M S ( m /z): 236 [M
+
]。 EI-M S ( m /z): 205( M
- CH2OH) , 163, 149, 133, 127, 113, 103。Molisch反
应阳性。按文献 [7 ]方法进行酸水解薄层层析 ,以标准
果糖对照 ,样品中具果糖斑点。 1HNM R( CD3OD)δ:
(下转第 38页 )
·18· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 1期
⒇ 收稿日期: 2000-01-10作者简介:李　帅 ,男 , 27岁。黑龙江中医药大学药学院 ,讲师 ,药物化学专业硕士 ,北京中医药大学中药学专业博士研究生 ,日本明治药科大学天然药物学教研室访问学者。 主要从事中药及复方有效成分和中药质量标准方面的研究。 Tel: ( 0451) 2107847
2. 4　收率与结果见表 1, 2。
表 1　加酶与未加酶提取葛根总黄酮的收率
加酶法 葛根总黄酮收率 (% ) 未加酶法 葛根总黄酮收率 (% )
1 8. 40 1 7. 73
2 8. 82 2 8. 03
3 8. 85 3 7. 84
4 8. 92 4 7. 06
5 8. 41 5 7. 76
表 2　 2种不同工艺提取结果比较
加酶法
x1 s1
未加酶法
x 2 s2
t值 P值
提取率 8. 68 0. 253 7 7. 684 0. 367 9 4. 98 < 0. 01
　　 t 0. 01 ( 8)= 3. 355 4
2. 5　薄层层析: 将加酶、未加酶得到的提取物与葛
根素对照品分别点于同一硅胶 G板上 ,以氯仿-甲
醇 -水 ( 7∶ 2. 5∶ 0. 5)为展开剂 ,展开 ,展距 10 cm ,
在 254 nm紫外灯下观察荧光。薄层色谱见图 2。
3　讨论
3. 1　用葛根提取总黄酮 ,我们进行了加酶与不加酶
的对比实验 ,从用纤维素酶提取葛根总黄酮的实验
中 ,在纤维素酶的作用下 ,葛根总黄酮的收率提高了
1-葛根素　 2-加酶提取物
　 3-未加酶提取物
图 2　葛根 TCL图
13% ;经 t检验 ,两种提取方
法的 P < 0. 01。
3. 2　从薄层层析结果显示 ,
加酶与不加酶提取出的成分
一致 ,说明酶解没有破坏葛根
的成分。可以认为纤维素酶可
以用于葛根总黄酮的提取。
3. 3　由于中药材存在着质地
和成分等差别 ,因此把纤维素
酶广泛应用于中药材的提取
中 ,值得进一步深入研究。
参考文献:
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1994, 25( 3): 123.
　　 (上接第 18页 )
0. 95( 3H, t, J= 7. 2 Hz, H-1) , 1. 40( 2H, m , H-2) ,
1. 50 ( 2H, m, H-3 ) , 3. 5 ( 2H, m , H-4)。 13 CNMR
( CD3OD)δ: 14. 4 ( C-1) , 20. 5 ( C-2) , 33. 4 ( C-3) ,
61. 7 ( C-4) , 63. 5 ( C-6′) , 65. 2( C-1′) , 70. 6 ( C-3′) ,
71. 1( C-5′) , 71. 6( C-4′) , 101. 6( C-2′)。综合解析该
化合物为 β-D-正丁基 -果糖苷。
化合物Ⅵ : 白色针晶 , mp 306. 0℃～ 307. 0℃ ;
Liebermann-Burchard反应绿色 ,示母核中有甾类;
Molisch反应阳性 ,示为苷类化合物。按文献 [ 7]方法进行
酸水解薄层层析 ,以标准 β -D-葡萄糖、α-L-鼠李糖对照 ,
确定糖部分具有 β -D-葡萄糖、α-L-鼠李糖。 IRν( KBr)
cm- 1: 3 450( O H) , 2 940( CH2、 CH) , 1 630( C= C)。
1 HNM R( CD3OD)δ: 0. 78～ 1. 32 ( 18H, 6× CH3 ) ,
1. 50～ 2. 20( 24H, m ) , 3. 27～ 4. 20( 17H, m ) , 4. 40
( 1H, m , H-3) , 4. 50( 1H, J= 7. 5 Hz, glc H-1) , 4. 75
( 1H, rha H-1) , 4. 85( 8H, s,糖上 8个 OH) , 5. 20
( 1H, d, J= 1 Hz, rha H-1) , 5. 37( 1H, brs)。 13CNMR
( CD3OD)δ: 苷元部分: 14. 9 ( C-21) , 16. 8 ( C-18) ,
19. 8( C-19) , 22. 0( C-11) , 30. 8( C-2) , 32. 2( C-15) ,
32. 5 ( C-23) , 32. 8( C-7) , 32. 8( C-8) , 38. 1( C-10) ,
38. 6 ( C-1) , 39. 6( C-4) , 41. 0( C-12) , 41. 5( C-13) ,
42. 9( C-20) , 51. 8( C-9) , 57. 8( C-14) , 63. 8( C-17) ,
79. 3 ( C-3) , 82. 2( C-16) , 110. 6 ( C-22) , 122. 7 ( C-
6) , 141. 9( C-5) ;糖部分: glc: 62. 0 ( C-6) , 76. 6( C-
3 ) , 78. 1 ( C-5) , 79. 3( C-4) , 80. 0 ( C-2) , 103. 0( C-
1) ; rha: 18. 0( C-6) , 70. 7( C-5) , 72. 4( C-3) , 72. 5( C-
4) , 74. 1 ( C-2) , 102. 3( C-1) ; rha: 17. 9( C-6) , 69. 8
( C-5) , 72. 2( C-2) , 72. 2 ( C-3) , 73. 8( C-4) , 100. 5
( C-1)。 FAB-M S m /z: 869( M+ H) , 723( M- rha) ,
613, 569, 415, 397, 309, 139, 126, 119, 115。综合解析
上述数据 ,并与文献 [8 ]对照 ,该化合物鉴定为薯蓣皂苷。
化合物Ⅶ : 为果糖。
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