全 文 ：脂质体包裹对汉防己甲素细胞
毒性影响的实验研究
浙江医科大学
杭州






杭州华东制药厂
杨赛丽一杜英杰 曾昭玉
杨 曦
摘要 观察了汉防己甲素在脂质体包裹前后的细胞毒性改变。 结果显示 , 在
卜



浓度时 , 汉
防己甲素包裹前后对大鼠肺泡巨噬 细胞的酵母吸附功能、 胞浆游离

和

’
含量和细胞骨架调
控能力的影响有明显的不同 。 提示脂质体包裹可减轻汉防己甲素的细胞毒性。 为开发该药的新荆
型作了有益的尝试。
关越润 汉防 己甲素 脂质体 细胞毒性
汉防 己属粉防己科 , 长期来作为祛风止痛 、 利水消肿及调治痈肿恶疮等药物应用 。
 年
代开始 , 我国将汉防己甲素用于治疗矽肺 , 被认为在抑制和逆转矽肺胶原纤维方面有较确切
的作用 , 是一种起效快 , 适用预防和治疗各期的矽肺的药物 。 但由于需长期用药 , 对组织细
胞毒性较大 , 可引起皮肤色素沉着、 肝肿大和肝功能异常等副作用 , 限制了其在临床上的广
泛应用 。 现研究了用脂质体包裹汉防己甲素对大鼠肺泡巨噬细胞毒性作用的影响 , 为探讨开
发该药的新剂型提供实验依据 。

材料



药品与试剂
汉防己甲素








, 简称汉甲
, 由浙江金华制药厂 提供 , 批号





。 卵磷脂由杭州华东制药厂提供 ,



一


殉自 日本 。 考马斯亮兰

 为





进口分装 。 面包酵母由杭州豆制 品工厂提供 。 其余试剂均为国产分析纯 。



动物
健康成年



 大鼠 , 体重
 
左右 , 本校实验动物中心提供。

方法



汉防己 甲素多相脂质体制备
将卵磷脂

 、 吐温一



 和 无水乙醇


于

℃
水浴中溶解 , 得
液 。 胆固醇和油酸各

加热熔融 , 得
。 汉甲



加蒸馏水



, 滴加






盐 酸 , 不断 混匀至汉甲全溶 ,
 ℃水浴中保温 , 得
。 再将
和
合并混匀后 , 加入
·
立即研磨成糊状 , 补充适量蒸馏水 , 经高速捣碎机高速搅拌 , 最后调

至


左右 , 定 容
至




, 呈匀质乳状 , 分装 ,
 ℃水浴




灭菌。 含汉甲


协



, 实验终浓度为

协




。 经超离心法 , 测得包封率为



。



肺泡巨噬细胞



培养
用木室常规法 , 放血处死大鼠 , 进行支气管肺泡灌 洗 ,
所得细胞悬液离心









,





, 沉淀用


尹
液反 复洗 涤
次 , 用









培养液
含

胎牛血清 ,



青霉素


,


卜
链霉素



制备细胞悬液 ,

℃
下含




加湿的空气中培养


 , 贴壁纯化得单层

供试 。



测定







酵母吸附率
采用改良爬片法〔
〕, 以


沪个


密度的细胞悬液 , 贴壁 纯 化
后 , 使

与药物在

℃共育



, 再与而包酵母




 , 个



接触



,

经






染色 , 镜检 。






 ,








,























,












本研究选用能引起细胞明显中毒的大剂量

 件盯

 对

处理后 , 见到此剂量下的汉甲能
明显阻抑

的吞噬功能 , 使细胞吸附酵母的能力大大降低 , 严重扰乱了细胞内环境渗透压
的平衡 , 使胞内

’
激增 , 而

骤降, 高度损伤细胞对骨架修饰调控 的能力 , 使细胞骨架
网络丧失率明显下降 。 本文中汉甲对细胞功能和形态的毒性作用与文献报道是一致的。
近年来 , 随着制剂技术的革新 , 出现了新的释药系统 , 脂质体就是其中之一 。 它能将药
物包裹起来 , 通过细胞的内吞 、 融合 、 吸附和脂质交换的作用特点, 使药物具有能使用最小
剂量 , 降低到最小副作用 , 而发挥最大疗效的优点〔
〕, 本研究结果表明 , 脂质体能将汉甲包
裹而成为汉甲的药物载体。并发现 , 制备而成的汉甲多相脂质体可 以明显减轻原有游离汉甲的
细胞毒性 。 脂质体包裹后 , 改善了汉甲对细胞吞噬功能的影响 , 使细胞对酵母的吸附率明显
增加 , 削弱了汉甲对细胞内环境渗透压的扰乱 , 使细胞

明显回升 , 而

么
明显返落 , 并
减轻了汉甲对细胞骨架修饰调控能力的损伤 , 使细胞骨架网络丧失率明显下降。
总之 , 用脂质体作为汉甲的药物载体 , 能明显减轻汉甲原有的细胞毒性 。 这对解决 目前
汉甲治疗矽肺中出现较严重的组织细胞毒性作用具有重要意义 , 是一项具有实用价值的新尝
试 。 汉甲脂质体到达机体后是否能保持汉甲对矽肺的疗效 , 而又明显降低对肝、 肾等组织细
胞的毒性 , 我们的动物实验也取得 了阶段结果
另文
, 值得进一步探讨 。
参 考 文 献
杨赛丽 , 等
浙江医科大学学报 ,
 。,












。









了


















,



,







陈宁蒙 , 等
卫生研究 ,
 ! ,






陈宁蒙 , 等
卫生研究 ,

 ,







伴竞生 ,





林东海 ,



洪巨伦 ,
等
北京医科大学学报 ,


 ,





等
沈阳药学院学报 ,
 ,




等
中国药理学报 ,

 , ,












一

一

收稿

越桔叶中熊果贰的分离与鉴定
黑龙江中医学院
哈尔滨
 !
马英丽 田 振冲 郭桂彬
王 刚
越 洁叶为杜鹃花科值物越桔犷


, 沁

 卜






的叶 , 异名 “熊果叶 ” 。 近年来 临 床
上将其做成制剂治疗气管炎和肺心病 。 发现具有较
好的镇咳和平喘作用
王刚
全国第一届中西医结
合呼吸病学术交流会论文汇编





化学成
分预试 , 越桔叶含有 贰 , 黄酮 , 鞋质等成分 。 我
们对其贰类成分进行分离得一白色针晶 , 经鉴定为
熊果贰






 。 文 献 〔张银娣
药学学报 ,


 ,






 〕报道 , 它具有镇咳作用 。

提取和分离
取干燥越桔叶
采 自黑龙江省大兴安岭 , 经本
院中药系王迪副教授鉴定
粗粉 , 用乙醇回流提取

次 , 每次

, 提取液减压回收乙醇 , 浓缩至膏状 ,
加水溶解 , 滤除水不溶物 , 用乙酸乙醋萃取


次 ,
将萃取液合并 , 浓缩 , 得萃取物用甲醇溶解 , 拌人
本院 中药系舫届毕业生
聚酞胺粉

 , 经低压聚酞胺柱依次用不同浓 度 的
乙醇洗脱 , 得
个部分 。 将

乙醇洗脱部分 再 经
硅胶柱分离 , 用氯仿一甲醇一水






洗脱 ,
得白色结晶 , 用无水乙醇重结晶 。

鉴定
白色针晶 ,









 , M o l i s e h 反 应
阳性 , 与a一蔡酚浓H :5 0 ‘反应在溶液界面出现紫色
环 。 与F eC I.试剂呈淡蓝绿色。 将结晶溶于无水 乙
醇中 , 加醇性K O H 出现白色沉淀。 以上化 学 反 应
提示此化合物为酚贰类 。 U v 人黔” n m : 2 25 、
8 2 5
;
I R v聋宾cm 一 , : 1 2 2 0 ( e 一。 一e ) , 1 ‘50 ,
1 5 2 0
( 苯环 ) , 2 8 7 5 , 2 9 5 0 ( C H ) , 3 5 5 4 C O H ) 。
M S m /
z : 2 7 2 ( M
+
)
, 主要碎片峰162 ( 糖基 ) 。
由U V , I R 及M S等光谱可知该化合物基本母 核 为
苯环 , 加上主要碎片峰质量162 , 2 3 9 。 用分子离子
( 下转第455页 )
·
4 7 2
·
一 s e a n n i n g
.
F 6
u 全 d i室r ere n t p ro c ess。。 匆七t e c o 也p a red . R . suir sh o 下e d th a t P r o c e s s e 二a 。
th . b . s t a m o n g a l l。
( o
r i g i n a l
a r t i c l e o n p a g . 4 6 3 )
P r e p a
r a t i o n o f C u i
r u Q f a l L i q u i d
M a S h
u a n g c h o n g
,
N i L
o n g
,
C h e n D e e h a 叮 g
C u ir u o ra l l iq u id ( C O L ) f o r t加 prom otio n of la cta*ion 15 prepared fro m a n a queo、. 5
e x t r a c t o f A ”g e l f c a 5 1 ”e ”s l’s , A s t r o g a l“ : 用e 爪b r a补a e e u s ( F isc h . ) B g o . , R e 扮沉b ”. i a 9 1“ t公”o s a L ib o s ·
e h . , e t a l
。
I t s f o r m
、,
l
a
t i o n
a n d P
r o c e s s i
n
g w e
r e
b
r
i e f l y d
e s c r
i b
o d
,
a n d t h
e
q
,: a l i t y s t a
n
d
a r
d
a n
d
s t a b i l i t y
o
f
t h e f i
n
i
s
h e d P
r o
d
u c t w e
r e s t : d i e d
.
R
e s u
l
t s s h o 下ed t h a t t h e f o r m u la t io n
P r o c e s si n g a n d s ta b il it y o f C O L w e r e s , : i t a b l o f o r c l i n i c a l t r i a l . M o r e o v e r , i r s P h a r m a c o l o g y
下 a s b r ie f ly d e s e r ib e d .
( o r ig in a l a r ti c le o n P a g e 4 6 5 )
E x p e r im e n t a l S t u d ie s o n L ip o 、o m e E n e 名P su la t io n in C y to t o x ic it y
0 f T e tra n d r in e
Y a n g Sa ili, Y 泣n g X i , e t a l
C b
a n g
e s
i
n t h e
e
y t
o t o x i
c
i t y
o
f t
e t r a n d
r
i n
e
b
e
f
o r e a n
d
a
f t
e r
l i p o
s o
m
e e n c a p s
‘,
l a t i
o n o n
r a t a l v
e o
l a r m
a e r o
P h
a
g
e s
i
n v
i t
r o
w
e r e o
h
s e r v e
d
.
R
e s
、、l t s s u g g e s t e d t h a t t h e r e , a s a s i g i n ·
i f i c a n t d i f f e r e n t i a t i o n o n t h e a d s o r P t i v e e a P a e i t y t o y e a s t
, a n
d t h
e
l e v e l i n c y t
o
P l
a s
. i
c
f r e
e c ‘ l e i u m a n d p o t a s s i u m , a n d t h e e y t o s k e l e t a l e o n t r o l o f m a e r o p h a g e s a t t h e c o n 心e n ·
t r a t i o n o f ‘0卜g / rn l . E x P e r im e n t s s h o w e d t h a t liP o s o m e e n e a P s u la tio n m a y a t te n u a to c y to -
t o x ie it y o f t e t r a n d r in e 。
( o
r i g i 仙1 artiele o n Page 470 )
S tud ie s o n N a rrow lea f Sib ira e a ( S ib‘r a e a a o g u s ta ta ) i。
R e g u la t in g L IP o id M e t a b o l is m
W a n g X ia o li , G 」 0 J i位in g , Y a n g B i n g x , n
L i
u
T
e a
( 5 i b i
r a e a a ” g “s t a t a )
T C a n d e l e v a t e H D L
一
C l e v e l s o f
a t d o s o s o f 5
.
5 a n d 1 5
.
0 9 / k g 1 9
c o ,
l d
r e
d
, e e
T G
, 日一 L P ,
n o r 位a l o r h yP e rliP o id em ia ra t。 I n v i t r o e x P e r i m o n t s i n d -
c a t e d t h a t 5
.性 住 g :: s l a t a 也 l y p ro tn o t。
s e r u 口 sh o , e d 台ig n if ic a n t e l. v a t io n
th e e 飞 r压b J l i , 吐 。 f F F A . T h o e o n t e n t s o f F F A i n r a t
i n s . a ” g u s t a t a t r e a t o d g r o “ P s a 名 c o 单P a r ed , i t h _
t h e e o n t r o l
.
I n a d d i t i o n
,
f
a t e e l l * w e
r e s
m
a
l l e
r
i n s
.
a ”g “s t a t a t r e a t e d
c h a n g e s c o u l d b . s e e n u n d e r m i c r o s e o P e
。
T h e s . r e s
, l
l t
s s ,
g g e
s t e d t h
a t
s
。
i e 吕。 l a t e t h e 也 etab o lism o f liP o id .
ra ts a n d
a ”g “s 才a t a
m u C 0 id
C o u ld
( o r ig i n a l a r t ie l e o n P a g e 4 7 3 )
P h a r m a e o lo g ie a l A c t iv it y o f N e s t o f S ilv e s t r i ( M a c r o t o r n :e : a n , : a o d a l o i )
B e i W
e i j i
a n , C h e n Y
o n
g
,
C h
e n C h
a o s
h
, , e t a l
E
x
P
o r
i m
e n t s s h
o
w e d t h
a t t h
e n e s t o f
M
a e r o
t
e r 州e s a ””a n d a l e i ( S i l v e s t r i ) h a d r h e a c t i v -
1 t y o f r e l i e v i n g e o g h , e l i m i n a t i n g
.
P h l
e
g m
, a n
d b
a o t e r i
o s t a s i
s
.
I t
e o ‘l d a l s o P r o m o t e t h e
P h a g o e y t o s i s o f n 一a e r o P h a g e s , e n h a n e e t h e r r a n s f o r m a t i ‘) n o f T
一 c e l l o f l y m P h o e y t e a n d r a
·
5 i e t h e r a t i o o f A N A E e e l l o f l y m P I一o e y t c 1 11 n i i e e
.
( 0 r i g i n a l a r t i c l e o n p a 压e 4 7 6 )
一 每0 4 .