全 文 ：鳖制剂对小鼠核酸蛋白质合成的影响
北京医科大学生物物理系 ( 北京 10 0 0 8 3 黄天贵. 罗艳红二
北京医科大学运动医学研究所
陈 磊…
内祝 良
贺师鹉
黄 力新
陈吉棣 陈志民
摘要 鳖制剂可提高小鼠血浆蛋 白质水 平 , 使 白 蛋 白 由 2 . 67 士 0 . 4 升 到 3 . 25 士 0 . 34 9 / d l ,总
蛋白由 5 . 3 4 士 0 . 8 上升到 6 . 74 士 1 . 38 9 / d l ; 同时鳖制剂也可加快肝 , 脾 D N A 和蛋 白质合成的速
度 , 使肝 D N A ,蛋白质的放射性比活度分别由2 . 4 2 士 0 . 7 1上升 到 3 . 90 土 1 . 41 和由 12 . 8 1 士 5 . 83 上
升到 2 1 . 6 9 士 4 . 8 4 d p m 邝 g ,脾 D N A ,蛋白质的放射性比活度分别 从 1 9 . 0 4 士 1 0 . 5 4上升到 ` 1 . 8 8 土
18
.
47 和由 16 . 34 士 7 . 01 上升到2 3 . 12 士 4 . 3 8 d p 爪 /卜g , 鳌制剂对骨髓细胞的 D N A 合成 和小 鼠血
红蛋白水平无明显作用 , 本文结果为鳌制剂作用机制的研究提供了有价值的资料 。
关健词 鳌制剂 蛋白质合成 核酸合成 白蛋白 血红蛋白
中华鳌 A o y d a 石 en sn fs 又名甲鱼 , 团鱼 , 自古以来就在中国 日本作为食用 , 药用 , 鳖肉
可治疗内脏器官异常 , 具有益气补虚之功效 , 鳖肉入肝经 , 滋阳凉血 , 治骨蒸劳热 lt, 2〕 。 据本
草纲 目载 , 鳖肉性甘 , 平 , 无毒 , 主治伤中 , 益气补不足 , 国家体育运动队队员服用鳖作滋
补剂 , 取得了一定的运 动成绩 , 目前市场上 已有多种中华鳖制剂出售 , 即使如此 , 对鳖制剂
的现代研究报道极少 , 本实验以 B A L B / C小鼠为实验对象 , 重点研究鳖制剂 对 血 浆蛋白和
肝 , 脾 , 骨髓D N A 蛋 白质合成速度的影响 , 为鳖的营养作用提供理论依据 。
1 材料
B A L B / C小 鼠 , 雄性 , 15 一 20 9 , 由北京医科大学实验动物 部提 供 , “ H一亮 氨 酸 ( 吕 H -
L eu )
: 上海原子能所产品 , 比活度 : 5 C i/ m m ol , “ H 一 T d R : 中国原子能科学 研究院产
品 , 比活度 : 2 2 C i / m m o l , W a l l a e 一 14 1 0液闪计数器 。
2 方法和结果
2
.
1 鳌制剂制备 : 根据本草纲目标准 , 选取正常鳌 , 重 0 . 5~ 1 . ok g , 斩头去血 , 去内脏及鳖
脂, 经煎煮制成每毫升含相当于 0 . 59 生鳌的生理盐水制剂 , 一 20 ℃储存备用 。
2
.
2 给药方法 : 采用 自制饮水器 ,将鳌制剂放入小量饮水中供小鼠饮用 , 使每只小 鼠每 日饮
用 狡制剂的量为 0 . 3m l ( 相当于生鳌 0 . 1 59 ) , 饮用完鳌制剂后给予正常饮水 , 保 证 充 足饮
水和正常饲料 , 给药共 l o d 。
2
.
3 实验动物分组 : 实验动物随机分为 6组 , 每组 10 只 , 其中两组用于 3 H 一 T d R掺入肝 , 脾
D N A 实验 , 两组用于 3 H 一 L e u 体内掺入肝 , 脾蛋白质实验 , 实验组给予鳖制 剂 , 对照组给
予相应剂量的生理盐水 。
2
.
4 血红蛋白测定 : 采用临床检验用高铁氰化法 , 血浆 白蛋白测定采用嗅甲酚绿法 (试剂由北
京医科大学怡达公司购得 ) , 总蛋白测定采用考马斯亮蓝法 。
2
.
5 ” H一 L eu 掺入蛋白试验 : ’ H一 L e u 经生理盐水稀释至 12 . 5终C i/ m l ,试验动物给药材 1d0 后 ,
.
A d d r e s s
:
H
u a n g T i a n g u i
,
B e i j i n g M e d i c a l U n i
、 , e r s i t y , B e i j i
n g
. * 广西右江民族 医学院生化教研室
二 中 北京医科大学 8 级专题生
·
1 3 8
·
禁食不禁水 2 1h, 每只动物腹腔注射 3 H 一 L e u o . 4m l ( 5卜C i ) , Z h 后 ,断脊髓处死动物 , 取肝 ,
脾 , 按 P a ul 所述方法进行“ H 一 L e u 掺入蛋白试验 , 并加修改 , 取组 织 按 l : 9 ( W /V ) 加入
10 %三氯乙酸 ( T C A ) , 匀浆 , 离心 , 弃上清 ; 1 0% T C A 洗沉淀一次 , 0 . 3 m o l / L N a 0 H
溶解后再以 10 % T C A 沉淀 , 之后 5% T C A , 肠% 乙醇各洗沉淀一次 , 沉淀经 甲酸消化为无色
透明液体 , 取一定体积加闪烁液测定其放射性强度 , 另取一定体积采用考马斯亮蓝法测定蛋
白量 , 并计算出单位质量蛋白中的放射性活度 d p m /件g 。
2
.
6 吕 H一 T d R 体内掺入肝 , 脾 D N A 实验 : 给予 “ H 一 T d R 之前处理 同“ H一 L e u掺入蛋白质实
验 , 每只小鼠给予 , H 一 T d R S卜C i , Z h后 , 断脊髓处死动物 , 取肝 ,脾组织按 S一 T 方法 〔 5〕进行
D N A 提取 ,具体如下 , 将组织放入 5倍体积 S S C溶液 (含 o . z 4m o l / L N a C I , o . o l m o l / L N a -
C i t r a t e
,
p H 7 ) 4℃下匀浆 , 离心 , 弃上清 , S S C液洗沉淀一次 , 沉淀 悬 于 5 倍 体 积 0 . 1 5
m o l / L N a C I
, 0
.
l m o l / L E n T A p H s
.
o溶液中 , 再倒入匀浆器 中磨细加入 1 0% S D s ,使其
终浓度达 1% , 加入 3m ol / L N a C I使其终浓度达 ! m ol / L , 37 ℃ 水浴 3 h , 加入等体积氯仿一异
戊醇 ( 24 : 1 ) 混合液 , 充分振荡 , 离心分层 , _ L层水相含 D N A 。 取水相重复提取一次 , 取
水相加入 2倍体积 95 % 乙醇 , 可见网状 D N A 出现 , 捞取 D N A , 75 %乙醇冲洗 ; 0 . 1 X S S C溶
解D N A , 溶解后加入 1 0 x S S C使其成为 , x s S C溶液 , 取一定体积分别进行放 射 性 测 定和
D N A二苯胺法定量 , 计算出单位质量 D N A 上的放射性计数 d p m /协g 。
2
.
7 a H 一 T d R体外掺入骨髓细胞实验 : 动物经 1 d0 给药后 , 处死动物 , 取股骨 , 用 H a n k 氏
液冲出骨髓 , 离心 , 用含 10 %小牛血清的 H a n k氏液稀释骨髓细胞 , 使其浓 度 达 1~ 2 X l o V
m l
, 选取细胞活力在 95 % 以上者实验 , 使每管细胞数在 0 . 7 ~ 1 . 2 X I沪之间 , 每管体积为 0 . 5
m l
, 加 3 H 一 T d R z件 C i , 3 7℃ 7\J 浴凌h , 多头细胞收集器收集细胞 , 10% T C A , 无水 乙醇 , 无
水乙醚冲洗 , 测定各管放射性计数并换算成每百万细胞的放射性计数 。
实验数据采用成组资料 t检验 , 实验结果
分别见表 1一 3 。 可见鳖制剂粉显著提高血浆
白蛋白 , 总蛋白水平 , 加速肝 ,脾D N A , 蛋白
质的合成 , 但没有提高小 鼠血红蛋 白水平 ,
并表现为对脾 D N A , 肝蛋白合成速度 提 高
更明显 。 “ H 一 T d R 体外掺入骨髓实脸结果是
对照组 3 0 0 3 0士 8 2 3 5 , 实 验 组 为 27 48 2士
] 3 0 5 5 e p m / 1 0
“细胞 , 没有显著性差异 。
表 2 井制剂对。 N A合成速度的影响
表 1 盆制荆对血液成分的影晌
对照组 鳌制剂组
血 红蛋白 g( / d l )
白蛋白 ( g / d l )
总蛋 白 ( g / d l )
1 6
.
4 7 士 1 . 5 4
2
。
67 士 0 。 4 4
5
。
3 4 士 0 。 8 8
1 5
。
9 3士 1 。 0 1
3
。
2 5士 0 。 3 4 “ .
6
。
7 4土 1 . 3 8 “ `
尸< 。 . 0 5 ` “尸 < 0 . 0 1 ( 下同 )
表 3 狡制剂对蛋白质合成速度的影响
. . . . . . . . . . . . . . 门. ` . 州“ 一 ~ ~一 一 . . . . . . . . . 目 . . . . . .对照组 鳌制剂组
3
.
9 0士 1 。 4 1二
对 照组 鳖制 剂组
肝 D N人 ( d p m /卜 g )
脾D N A ( d P m /协 g )
2
。
4 2 士 0 。 7 1 1 2 . 8 1士 5 。 8 3 2 1 。 6 9土 4 。 8 4
1 9
。
0 4 士 1 0 。 5 4 4 1 。 8 8 士 1 8 。 4 7
肝蛋 白 ( d P m /卜 g )
脾蛋 白 ( d P m / 卜g ) 1 6 . 3 4 土 7 。 0 1 . 2 3 。 1 2 士 4 。 3 8
3 讨论
从实验结果可 以看出鳌制剂可显著地提高血浆 白蛋白和总蛋 白水平 , 其幅度分别为 0 . 85
和 1 . 40 9 / dl , 这与符世纯报道的用甲鱼炖大蒜治疗肝硬化腹水 , 可提高病人白蛋白水平相一
致〔幻 , 鳌制剂没有促进骨髓 D N A 合成 , 骨髓 D N A 合成未加快 , 红细胞生成不 增 加 , 故血
红蛋白水平未见提高 。 本文利用 “ H一 T d R , “ H一 L e u掺入技术 , 对 D N A和蛋白 质分 别 进行
《 中草药 》 1 9 9 5年第 26 卷第 3 期 1 3 9
提取和多次洗涤 , 准确地反映了 D N A , 蛋 白质的合成速度〔 7〕 , 实验证明鳖 制 剂 加 速 肝脏
D N A 和蛋白质的合成 , 这有利于细胞更新 , 肝脏可以合成更多的蛋 白质进入血 液 , 表 现为
血浆蛋白水平升高 , 这对从事剧烈活动的人员如运动员的应急和体力恢复是有益的 , 鳖制剂
亦加速了脾 D N A 和蛋白质 的合成 , 这就有可能提供更多的免疫细胞和分泌更多的 免 疫球蛋
白 , 增强机体免疫力 , 郑宝灿等曾有过中华鳖多糖增强免疫力的报道〔“ 〕 , 本实云验用 鳖 制剂
为多种成分 的全营养液 , 不仅含有蛋白质 , 还含有多糖及多种矿物质 cl, 8〕, 作 者以 为鳖的
这些成分除直接 作为常规原料 , 掺与 D N A , 蛋白质的合成外 , 还有其它生物活性物质在其
中起重要作用 。
参 考 文 献
江苏 新医学 院编 . 中药 大辞典 . 上海 : 上海人民 出
出版社 , 1 9 7 7。 2 7 2 5
禾川 , 等 。 国外医学一中医 中药 分册 , 1 9 8 3 , 3 : 57
李时珍 , 本草纲 目 . 北京 : 人民卫生出版社 . 19 8 1 ,
4 r 2 5 0 2
P a u l H 5 e t a l
。
J C l i n I n v e s t
,
1 9 8 0
,
6 5
,
1 2 8 5
蔡武成 , 等编 。 生物物质常用分析法 . 北京 : 科
学出版社 , 10 8 2 . 1 1 1
符世纯 , 河南中医 , 19 9 2 . 1 2 ( 5 ) : 2 3 6
黄天贵 , 等 . 中华 医学杂志 , 1 9 9 3 . ” (
3 0 8
郑宝灿 , 等 . 中国药学杂志 , 19 91 , 26 (
27 5
( 2 9 9 4 一0 4一 0 2收稿 )
金樱根治疗小儿脱肛32 例.
广州市黄埔区人民医院 ( 5 10 7 0 0
武警广西梧州市消防支队卫生所
陈才衣高
郊 洪
用金樱根治疗小儿脱肛 32 例 , 疗效满意 。
1 临床资科
本组男 14 例 , 女 18 例 。 年龄 1 ~ 2 岁 9 例 , 2
一 5 岁 16 例 , 5 一 9 岁 7 例 。 病程最短 10 d , 最 长
2 年 4 个月 。 按实用儿科学划分 : 仅有粘膜脱垂的
称不完全性脱肛者 9 例 , 肠管各层完全翻出称完全
性脱肛者 23 例 。
2 洽疗方法
每天用金樱根干片 30 9 , 文火水煎后取煎液 加
适量白糖分 4一 5次饮服 ,连用至痊愈后再继续服 3 d ,
以巩固疗效 。
3 洽疗结果
服煎液至脱肛痊愈 , 仅连用 3 d者 9 例 , 4 d s
例 , 6 d 4例 , 6 d 4 例 , 7 d 及 g d 各 2 例 , s d 3
例 , 1 2 d l 例 , 有 2 例患儿不合作 , 灌服量很少而
无效 , 其余 30 例均治愈 , 治愈率9 3 . 7 5环 , 无副作
用 。
4 典型病例
。
1 4 0
·
蔡 x x , 女 , 4 岁半 。 3 个 月 前 患肠炎半月
之久 , 每天腹泻淡黄色水样便 7 ~ 10 次 , 数天后伴
便时脱肛 , 经治疗后虽止泻 , 但脱肛持续不愈 , 每
次便后要用手托回 , 甚是痛苦。 诊断完全性脱肛 。
经每天用金樱根 30 9水煎 , 取煎液加少量白糖分 4
~ 5 次饮服 , 连服 6 d后脱肛痊愈 , 继续 服 3 d ,
随访半年 , 未见复发 。
5 讨论
金樱 是 野 生 的常绿攀缘灌木 , 其果实为金樱
子 。 金樱根乃挖掘其根洗净后切片晒干供药用 , 功
用与金樱子同样具有收敛固下以治下焦虚损之滑脱
不禁病证 , 可治脱肛 、 子宫脱垂 、 腹泻 、 崩漏等 。
从药源来说 , 四季可采其根 , 比用其果实更具来源
丰富 、 制作简单之优点 。 实践证明金樱 根药 性 平
和 , 用法简单 , 价格低廉 , 治疗小儿脱肛疗效好 ,
且无副作用 , 值得推广 。
( 1 9 9 4
一 0 4一 0 5 收稿 )
Qi
。 n h u。 ( P
.人 a r r夕 · s脚 * i人 i` a v r. :“ `夕 z。 6 r。 , ) 。 n d B a i h u a Q i a n h u ( P .夕 r 。 e r u夕亡o r 。 。 ) w a s c a r r一e d
o u t . R
e s u l t s r e v e a l e d t h a t t h e f o r m
e r t育 0 Q i a n h u p r o d u c e d i n G a n s u a r e s im i l a r t o B a i h u a
Q i a n h u i n t h e i r m a i n i n g r e d i e n t s
.
T h u s t h e t w o Q i
a n h u a r e w o r t h y f o r f u r t h e r r e s e a r c h a n d
d e v e l o P m o n t
.
A t t h e s a m
e t i m e
,
i t w a s o b
: e r v e d t h a t B a i h u a Q i
a n h u P r o d u e e d i n G a n s u 15
o f i n f e r i o r q u a l i t y a n d t h e c o n t e n t o f E t 0 H e x t r a c t o f i t s r o o t 15 s l i g h t l y l o w e r t h a n t h a t
f r
o m e l s e w h e r e i n C h i n a
.
( o r ig i n a l a r t i e l e o n P a g e 1 2 9 )
D e t e r m i n a t i o n o f S c h i z a n d r i n A a n d T a n s h i n o n e E ^ i n W u l i n g w a n w it h
T L C一 S e a n n e r M e t h o d
W a n g X i
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u a n , G u o H u i f a n g
,
W a n g Ji a n P
o , e t a l
T L C
一 s c a n n e r m
e t h o d w
a s u s e d t o d e t e r m i
n e t h e c o n t e n t o f s c h i z a n d r i n A
a n d t a n s h i n o n e
n ^ i n W
u l i n g w a n
.
T h e a v e r a g e r . c o v e r y o f b o t h s c h i z a n d r i n A a n d t a n s h i n o n e l 人 a r e
g a
.
3么% ( C V 二 2 . 1 % ) a n d , , . 1 5% ( C V = 1 . 1% ) r e s P o c t i v e l y 。 T h i s m e t h o d 1 5 s i m P l e a n d r a p i d 。 I t s
r e P r o d u c i b i l i t y 15 s a t l s f a c t o r y
.
( o r j g i n a l a i t i c l e o n P a g e 1 3 1 )
E f f e c t o f E x t r a e t Z h o n g h u a b i e ( A m夕 d a s ` n e n s i s ) o n S y n t h e s e s o f
D N A a n d P r o t e i n i n Mi c e
H
u a n g T i a n g u i
,
T a o Zh u l i a n g e t a l
E x t r a e t A 拼 y d a : i ” J n s i s r a i s e d t h e l e v e l s o f P l a s 沮 3 P r o t e i n s . P l a s 吐 a a l b u m i n w a s
r a i s e d r r o m 2
.
6 7 士 0 . 4` t o 3 . 2 5 土 0 . 3 4 9 / d l a n d t h e t o r a 一 p l a s m a p r o t e i n f r o m 5 . 5 4 士 o . s a t o
6
.
7遵士 1 . 3 5 / d l . 3 H 一 T d R a n d . 3 H 一 L o u c i n e i n c o r p o r a t i o n t e c h n i q u e s w e r e u s e d t o m , a s u r e t h e
s y n t h e s e s r a t e o f D A N a n d P r o t e i n
.
T h e r a t e s w a s a e c e l e r a t e d
.
T h e s P e e i f i c a c t iv i t i e s o f D N A
a n d P r o t e i n o f l i v e r g o t u P t o 3
.
9 0 士 1 . 4 1 f r o m 2 . 4 2 t o . 7 1 d P m /卜 g , a n d 2 1 . 6 9士 4 . 8 4 f r o m 1 2 . 8 1
士 5 . 5 3 d p m /卜: g , r e s p e e t i v e l y
.
T h o s e o f s P l e e n s o t u P t o 4 1
.
8 8 士 1 8 . 4 7 f r o m l , . 0魂士 1 0 . 5 4 d P m /卜 g
a n d 2 5
.
1 2士 4 . 3 5 f r o m 1 6 . 3 4士 7 . 0 1 d P m /协 g , r e s P e e t i v e l y
.
E x t r a c t A 协 y j a s i o e ” s ` 5 h a d n o e f f -
e c t o n D N A s y n t h o s i s o f b
o n e m a r r o w c e l l s a n d d i d n o t r a i s e t h e h e 血 o g l o b i n l e v e l i n m i c e .
T h e r o s u l t s s u g g e s t t h a * E x t r a e t A 爪夕d a s f ” e o s i s h a s b i o a e t i v e s u b s t a n e e t h a t a c c e l e r a t e
s y n t h c s e s o f D N A a n d P r o t e i n
。
( 0 r i g i n d l a r t i e l e o n P a g e 1 3 8 )
E f f e e t s o f S i n i D e e o c t i o n o n l s c h e m i c ( A
n o x i e ) E l
e c t r o c a r d i o g r a m
W
u
W
e i k a n g J i n W o
n t a o , L u o C a n h u a
, e t a l
E f f e e t s o f S i n i d e e o e t io u ( S D ) o n i s e h e m i e ( a n o x i c ) e l e c t r o e a r d i o g r a m ( E C G ) a n d p o s s
-
i b l
e a c t i o n m
e c h a n i s m
o f S D w e r e s t u d i e d
。
R
e s u l t s i n d i c a t e t h a t S D s i g n i f i c a n t l y i爪 P r o v e s r h e P i t u i t r i n i n d u e e d i s e h e m i e E C G o f
r a b b i t s
, s i g n i f i c a n t l y P r e v e n t s S
一
T s e g m e n t f r o m d
e s c o n d i n g a n d s u P P r e s s e s t h e e l e v a t i o n o f
T w a v e , S D e a n a l s o l e n g t h e n s i g n i f i e a n t l y c a r d i o e l e c t r i e a e t i v i t y t i m e o f a n o x i c m i
e e 。 T h e
P丁 o t e e t i v e e f f e e t s o f S D o n i s e h e m i c ( a n o x i c ) m y o c a r d i u m m a y b e r e l a t e d t o t h e s i g n i f i c a n J
i n c r e a s e o f m y
o e a r d i a l n u t r i t i o n a l b l
o o d f l o w i n d u c e d b y a d m i n i s t r a t i n g S D
。
( o r i g i n a l a r t i c l e o n P a g e 1 4 1 )
S t u d i e s o n t卜e P h a r m a e o ! o g y 时 C a j a n i n P r e Pa r a t i o n
S u n S h a o m
e i
,
S o n g Y
u
m e三, L i u J i a n , e t a l
C
a
j
a n i n P r e P a r a t i o n c o u l d s i g n i f ic a n t l y r e d u c e t h e m o
u s e p i n n a i n f l a m m a t i o
n iu d u c e d
一
1 6 8
·