全 文 ：营养成分的释放 , 同时增加物体表面积加快
酶解速度 。
5
.
2 提高原材料 (五步蛇 )利用率 : 在传统蛇
酒制作中 , 经长期浸泡的蛇体一般不再加 以
利用 ,原 因是误以为长期浸泡后的蛇体不再
具有营养价值 ,其实不然 , 实验证 明 , 长期浸
泡仅仅可将蛇体中一部分醇溶及水溶物质转
移到酒中 , 而大量 的营养物质依然存在 于蛇
体之中 , 用蛋 白酶水解则可以将蛇体 中的全
部营养物质转移到溶剂 中 ,从而大大提高 了
原材料的利用率 。
5
.
3 缩短生产周期 : 传统生产五步蛇酒一般
需费时 3 个月以上 ,而采用酶解法生产五步
蛇酒 , 可以在数小时内将原先不溶于酒与水
的蛇肉 、 蛇皮 、 内脏等转变成氨基酸 、 多肤等
小分子物质 , 即可在短时间内将蛇体中的营
养成分释放到溶剂中 ,从而缩短了生产周期 ,
提高了生产效率 。
5
.
4 提高产品质量 : 首先 , 通过酶解可使五
步蛇酒中的主要营养成分以氨基酸 、 多肤等
小分子的形式存在 , 可减少甚至消除传统浸
泡法生产的五步蛇酒在贮藏过程中因蛋白质
等大分子集聚而产生的沉淀 ,酒体澄清透明 ,
色泽纯正 ,从而提高了五步蛇酒的外观质量 ;
其二 ,通过高压蒸煮及适量使用除臭剂可消
除令人生厌的蛇腥味 , 再利用矫味剂 与酶解
产生的氨基酸赋于五步蛇酒以独特的风味与
舒适 的口 感 ,从而提高了五步蛇酒的商品价
值 。
参 考 文 献
1 黄美华 , 等主编 . 五步蛇 . 北京 : 科学出版社 , 19 8 3 . 1 58
2 谢俊杰 , 等 . 食品科学 , 1 9 9 5 , 1 6 ( 8 ) : 4 5
3 方晓阳 . 蛇志 , 19 9 6 , 8 ( 3 ) : 7
4 江苏新医学院 . 中药大辞典 . 上 海 : 上海科 学技术 出版
社 . 1 9 8 5 . 7 1 3
( 1 9 9 7
一
0 2
一
2 1 收稿 )
N e w T e e h n i q u e i n P r o e e s s i n g o f L o n g
一 n o d e d P i t V IP e r ( A g k i s t or d o n a cu t u s )W i
n e
F a n g X i
a o y a n g
A
n e
w P
r o e e s s f o r t h e P r o d u o t 一o n o f I o n g 一 n o ` l e d p i t v i p e r ( A g k i s t o d
o , a o u t u s ) w i
n e
w
a s d e v e lo l ) e 〔 l , w i t h
t h e u s e o f e n z y m a t ie d e g r a d a t io n
,
w h ie h s h o r t e n e d t h e p r o d u e t io n p e r io d
, r e s u lt e d i n a m o r e e f f ie ie n t u t i li z a
-
t i o n o f
r a
w m a t e r ia l a n d i m p r o v e d t h e ( l u a li t y o f t }1 15 m e d i e i n a l w i n e
.
流动注射分析测定小儿清热解毒口服液中黄酮含量
沈阳第一制药厂 (l 10 0 2 3) 林瑞红 沐 张少辉 李显林
摘 要 介绍采用流动注射分析技术 , 以 N a N O : 、 lA ( N 0 3 ) 、 、 N a( ) H 溶液为流动相 , 测定小儿清热
解毒口服液中总黄酮的分析方法 。 该法克服了经典分析 方法分析时间长 , 反应时间不好控制等缺
点 , 其分析速度达 150 次 / h , 以芦丁 为对照 品 , 在 50 一 25 0 拌 g /m l 内呈良好线性关系 , 其方程为 : C
一 8 . 4 O7 X I O一 S H 一 3 3 . 8 8 , r 一 0 9 9 9 7 ;样品测定的回收率为 10 0 . 5 % (n 一 5 ) 。
关键词 流动注射分析 黄酮 小儿清热解毒口服液
小儿清热解毒 口服液是 由 18 味中药组 成的中药制剂 ,用于治疗流感 、 上呼吸道感染
,
A dd
r e s s : l
一
i n R u i h o n g
,
S h e n y o n g F i r s t P h a r m
a e e u t ie a l F a e t o r y
,
S h
e n
林瑞红 1 9 9 1 年毕业 j飞沈阳药科大学巾药 系 ,理学学 十: `学位 , 毛程师 。 专业研 究
·
5 9 4
·
y a ll g方向为新药的研制与开发
等疾病 , 具有清热解毒的功效 。其 中黄芬是主
要成分 ,控制黄酮含量十分必要 。 目前测黄酮
的 方法 主要 有紫外分光 光 度 法 .(1 2 , 、 极谱
法〔 2〕 、 薄层扫描法 以〕 、 H P L C 法 〔 5 , ;经典分析
方法有 A IC 13 、 C H 3C O O K 显色法和 N a N O 3 、
A I ( N O
。
)
。 、
N a O H 比色法 , 其 中以后者为最
好 〔 6〕 。 这种分析方法以芦丁为对照品 , 需先用
N a N O
Z 还原 6 rn i n , 再加 A I ( N O 3 ) , 络合 6
m i n
, 最后加 N a O H 溶液显色 1 5 m i n , 产生红
色化合物进行比色测定 〔7 , 。 其测定时间长 ,操
作时间不好控制 。 流动注射分析 ( IF A ) 问世
以来 , 在药物分析中已有应用 ,但在中药复方
制剂中的应用还未见报道 。 我们采用 IF A 样
品分析技术 ,将此一系列化学反应集同一在
线系统中 , 消除了样品与对照品测定时间不
一致造成的误差 ,测定速率为 1 50 次 h/ ,将之
应用于小儿清热解毒 口服液中黄酮的含量测
定 , 结果很好 。
1 实验部分
1
.
1 仪器和试剂 : 仪器 : U V 一 2 40 分光光度
计 ( 日本岛津 ) ; W F Z 一 8 0 0 D 3 分光光度计 (北
二光 ) ; IF A 分析仪 (沈 阳 电影 反光镜厂 ) ;
H P 3 3 9 0 A 自动 积分 记 录 仪 ( 美 国 惠普公
司 ) 。
试剂 : 芦丁对照品 ( 中国药品生物制品检
定所 ) ; 小儿清热解毒 口 服液样品 (沈阳第一
制药厂 ) ; 其它试剂均为分析纯 ;蒸馏水 。
1
.
2 F I A 流路及操作 IF 八 线路 见图 1 。
S
N aN认 ( 1 5% )
月 ( N O , ) , ( 1 0% )
N a O H ( 8 % )
1 7
1 3 二甲一 ” 7 ’ 厂
4 2 十 /
3 6
、 户
图 1 F I A 流路图
P 一蠕动泵 , V 一进样 阀 ( 3。 讨 ) , M 卜 3一反应盘管 , (F 二-
流通池 ( 18 1, ) , w 废液 , s 一样 品溶液
按 图 1 连接好流路 , 启动分光光度计和
蠕动泵 ,通入各种试剂 ,待记录仪得一稳定基
线后 ,分别注入一定浓度的样品和对照品 ,记
录峰高 。 根据峰高与样品浓度成正 比计算含
祠磅舜骊两亏不百靡厄『恶靡~ 而 ~丽
量 。
L 3 条件试验
1
.
3
.
1 测 定波 长的确定 : 向 F I A 流路 中定
量注入 10 0 拌g /m L 的芦 丁对 照品溶液 , 以
4 0 0一 5 8 0 n m 每隔 5 n m 改变分光光度计的
波长 , 测定 。 试验表明在 4 2 0 n m 和 5 1 0 n m
处有最大灵敏度 。 我们选择 5 10 n m 为测定
波长 。
1
.
3
.
2 F I A 条件的选择 : 经考查 , N a 0 H 溶
液在 2%一 12 %浓度范围内对测定灵敏度没
影响 , 我们选择 8 %浓度 为 实验浓 度 。 而
N a N ( )
2 、
A I ( N o
3
)
。 浓度和 3个反应盘管长度
M
I一 3利用正交设计条件试验法 ,选择 L 1 6 ( 4 5 )
表进行优化试验 ,正交试验结果见表 1 , 2 。 结
果表明 ,这 5 个因素不同水平均有显著性差
异 , A I ( N O 3 )。 浓度对测定灵敏度影 响最显
著 。
1
·
.3 3 线性范 围 : 在选定 的试验条件下 ,分
别注入 5 0 、 7 5 、 10 0 、 1 2 5 、 1 5 0 、 1 7 5 、 2 0 0 、 2 2 5 、
25 0 拼g /m L 芦丁对照品溶液 ,测得峰高与浓
度 的关 系方程 为 C 一 8 . 4 07 x 10 一 S H 一 3 .
8 8
, r 一 0 . 9 9 9 7 。
1
.
3
.
4 回收率试验 : 按小儿清热解毒 口服液
的处方分别称取黄答以外的其它原药 ,进行
工艺提取 ,然后加入芦丁对照品 ,制成模拟试
样 , 测其含 量 , 求得 回收率为 10 0 . 5% , R s D
为 0 . 7 2 % ( n = 5 ) 。
1
.
4 样品测定 : 精密称取芦丁对照品 (扣除
水分 ) 2 5 m g ,置 1 0 0 m x一 量瓶中 ,用 6 0%的乙
醇溶液溶解并稀释到刻度 ,取此溶液用 20 %
乙 醇溶液分别稀释成 50 一 20 0 拜g /m l J 的标
准液 , 分别注入 FI A 系统 , 求得峰高与浓度
的线性方程 。
表 1 正交试验因素水平表
因素
水平 N a N ( ) 2 A I( N O 3 ) 3 M l M Z M 3
(% ) (% ) ( m m ) ( m m ) ( m m )
1 5 0 0
.
5 10 0 1 0 0 6 0 0
2 10
.
0 1 0 3 0 0 3 0 0 90 0
3 15
.
0 5
.
0 5 0 0 5 0 0 12 0 0
盛 2 0 . 0 10 . 0 7 0 0 7 0 0 15 0 0
.
5 9 5
.
农 2方位分析结果
方差来源 变差平方和 自由度 方差估计值 F值 F0 ( .5 0 , f , , f Z ) 显著性 最优水平
N a N O : 浓度 0 . 0 1 1 3 0 . 0 0 3 6 6 7 2 9 . 3 4 3 . 2 4 , A 3
A I ( N 0 3 ) : 浓度 0 . 7 6 7 3 0 . 2 55 7 2 0 4 5 . 5 0 3 . 2 4 , , B ;
反应管 M , 长度 0 . 4 6 7 3 0一 55 7 1 2 4 5 . 6 0 3 . 2 4 , C :
反应管 M Z 长度 0 . 3 0 9 3 0一 0 3 0 8 2透. 0 0 3 . 2 4 , D s
反应管 M : 长度 0 . 0 2 8 5 0 . 0 0 9 3 3 3 7 4 . 6 6 3 , 名4 , E :
试脸误差 0 . 0 0 2 1 6 0 0 0 0 1 2 5
精密量取试样 1 m L , 置 25 m L 量瓶中 ,
用 2 0% 乙醉稀释到刻度 ,摇匀 ;精取此溶液 2
m L 置 s m L 量瓶中用 20 % 乙醇稀 释到刻
度 。 将此溶液注入 IF A 系统 ,测得峰高 。 将峰
高代入标准工作曲线方程求得以芦 一了计算的
总黄酮的量 。 (表 3 ) 。
农 3 样品测定结果位 ~ 。 . 05 , n 一 3)
批号 F I A 法 ( m g /m l ) 经典法 ( m g / m l )
9 1 0 7 0 1 8
.
6 5士 0 . 0 9 8 . 5 7士 0 . 16
9 1 0 7 0 2 8
.
4 9士 0 , 1 0 8 . 5 2士 0 , 1 1
9 10 7 0 3 1 0
.
7 3士 0 . 0 8 1 0 . 6 5士 0 . 2 3
9 10 8 0 1 9
.
4 1士 0 . 1 1 9 . 3 3士 0 . 1 7
2 讨论
2
.
1 在实验中 , 我们选择较高浓度的 N a 0 H
溶 液 , 目的是 将络 合剩 余的 lA “ , 转 化为
A IO牙 , 而不生成 A I (O H ) : 沉淀 , 影响测定结 -
果 。 我们按经典分析方法在 4 0 .0 一 60 0 n m 范
围 内绘制波长吸收谱图 , 其在 51 0 n m 处有
最大吸收峰 , 与 IF A 最大吸收点一致 ,证明
F I A 系统中化学反应与经典方法中的化学反
应基本一致 。 小儿清热解毒 口服液被稀释后
显浅黄色 ,我们选定 5 10 n m (红色区 )为测定
波长 ,可降低干扰 。
2
.
2 本方法具有分析速度快 , 测定精度高 ,
线性范 围宽等优点 , 适用于大批量样品的测
定和生产监测 ,最低检出限为 10 拌g / m L 。
参 考 文 献
z 李守拙 . 中成药研究 , 2 9 8 8 “ ) : 1 5
2 王椒香 . 哈尔滨医科大学学报 , 1 989 , 2 3 ( 4) : 2 5 4
3 徐礼梁 , 等 . 药物分析杂志 , 1 98 8 , 8 ( 4 ) : 2 2 3
4 胡 梅 , 等 . 药学学报 , 2 9 8 9 , 24 ( 12 ) : 9 28
5 孔德云 , 等 . 中草药 , r 9 8 , . 19 (一1 ) : 1 5
6 姚蕴英 . 西北药学杂志 , 1 9 8 7 , 2 ( 4 ) : 3
7 R u z ik a J
, e t a l A n a C h i z n A e t a
, 19 7 5
.
7 5
:
1 4 5
( 1 9 9 6
一
1 0
一
1 5 收稿 )
D e t e r m i n
a t i o n o f F l a v o n o i d s i n L i q u o r X i a o e r q i n g r e j i e d u W i t h F I A
I
,
in R u ih
o n g
,
Z h
a n g S h a o h u i
,
I
,
1 X i
a n li
n
A m e t h o d f o r t h e d e t e r m in a t i o n o f f la v o : 1 o i d s in l iq u o r X i a o e r q i n g r e ji
e d u w i t h f lo w i n j
e e t io n a n a l y
s is w a s
r e P o r t e d
.
S o l
u t i o n
s o f N
a
N O :
,
A I ( N O 3 ) : a n d N a O H w e r e u s e d a s th e m o b il e P h a s e
.
T h i
s m e t h o d o v e r e a m e th e
s h o r t e o m i n g s o f e l a s s i e a l m e t h o d
,
w h ie h n e e d e d a l o n g e r a r一a ly t ie o l t im e w i t h d i f f ie : l l t l y e o n t r o ll e d r e a e t i o n
t im e
.
A n
a ly t ie a l s p e e d o f t h e m e t h o d a t t a in e d 1 5 0 t im e s p e r h o t一r
.
Wh
e n r u t in w
a s u s e
d
a s e x t e r n a l s t a n d a r d
,
t h e e a li b r a t i o n e u r v e w a s l in a r o v e r t h e r a n g e o f 5 0~ 2 5 0 并g /m L . E q u a t io n w a s C 一 8 . 4 0 7 又 1 0 一 S H 一 3 3 . 8 8 , r
~ 0
.
9 9 9 7
,
T h
e a v e r a g e r e e o v e r y w a s 1 0 0
.
5 %
.
《全国中草药汇编 )( 修订版 )等已经出版
本书由谢宗万主编 ,共 3 册 (两册文字 ,一册中草药彩色照片图集 ,共 1 0 0 0 余张 ) ,收载中草药 4 0 0 0余种 ,
并 附墨线图 3 0 0 幅 ,每种中草药均按序号 , 正名 ,别名 ,来源 , 形态特征 (或药材性状 ) ,生境分布 ,栽培 (或饲
养 )要点 ,采集加工 ,炮制 ,化学成分 ,药理作用 ,性味功能 , 主治用法 ,附方 ,制剂及附注等项顺序编写 ,书后有
中文索引 ,拉丁学名索引等 。 (修订版 )对品种学名 , 化学成分 ,药理作用和附注作了重点修改 ,文献资料截止
到 1 9 9 3年 7 月 , 反映了 90 年代先进水平 , 邮购价 5 32 元 。 另有《中国药材学 》 (徐国钧主编 ) , 邮购价 5 52 元 ;
《中药辞海 》 (4 册 4 万条 目 ) ,邮购价 1 10 0 元 。 邮购地址 :北京百万庄路 24 号中国报道社北京书刊发行部 张
继霞收 ,邮编 : 1 0 0 0 3 7 ,开户行 :招商银行展览路办事处 ,帐号 : 0 91 2 0 3“ 10 0 01 ,户名 : 中国报道社北京书刊发行
部 ,电话 : ( 0 1 0 ) 6 83 2 6 6 4 4一 2 1 2 3 。
.
5 9 6
·