全 文 ：q : 组分 i的比转化速率 〔 ( C ) m o l · C一 m o l一 ` · h一 ,〕
R
, 组分 i 的消耗速率〔C 一m (,l · I 一 ’ · h 一 ’ 〕
V 细胞活性
Y
I , 组分 i转化为组分 J 的收率 〔C 一 m o l · ( C ) m o l一 ’〕
希腊字母 拌 比生长速率 h( 一 ` )
角标 S 葡萄搪 ; X 生物 量
参 考 文 献
B r o d
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li u s P
, e t a l
.
F E B S I e t t
, 19 7 9
,
1 0 3 : 9 3
R o s e v e a r A
, e t a l
.
A d y B i o
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m E n g B i o t e e h n o l
, 1 9 5 6
,
3 1
: 3 7
L in d s e y K
, e t a l
.
F E I巧 I _ e t t , 19 8 3 , 1 5 5 : 14 3
A n o n y m o u
s .
B i o t e e h n o l N e w s w a t e h
, 1 9 8 2
,
2
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M
e G r e g o r W C
, e t a l
.
In M e m b r a n e eS p
a r a t i o n s i n
B i o t
e e
h n o l
.
I n e N e w Y o r k
, 19 8 6
.
3 0 3
元英进 〔博士论文 〕 . 夭津大学研究生毕业论文 . 天津 . 夭
津大学 , 1 9 9 1
李绍芬 . 化学与催化反应工 程 . 北京 : 化学出版社 , 19 8 6
V a n G u l i k W M
, e t a l
.
B i o t e
e
h n o l B i o e n g
, 19 9 2 , 4 0 : 8 6 3
aB i l
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, e t a l
.
B i o e h e m i e a l E n g in e e r i叩 F u n d a m e n -
t a l s
,
M e G r a w
一
H i l l
,
N e w Y o r k
, 1 9 7 7
.
3 9 6
( 1 9 9 5
一
0 7一 1 2 收稿 )
S t u d y o n I m m o b i l i z a t i o n P l a n t C e l l C u l t u r e a n d R e l e a s e o f I n t r a e e l l u l a r M e t a bo l i t
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,
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a s 7一 s m m t h ie k . S t a in le s s 一 s t e e l
s e r e e n ( 8 0拌m ) w a s s u i t a b le f o r i m m o b l l iz a t io n o f C . r o s e s e e ll . P r e s s u r e p u l s e e a n e n h a n e e t h e r e l e a s e o f in t r a -
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u l e r m e t a b o l i t e s
.
A m e t h o d t o d e t e r m in e a ll o w a b le e e ll l a y e r t h i e k n e s s w a s d e v e lo p e d
.
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a t e d v a lu e
a g r e e d w
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ll w i t h
e x P e r im e n t a l r e s u lt s
.
薄层刮板一荧光分析法在中药复方制剂
质量控制中的应用
第二军医大学药学院 (上海 2 0 0 4 3 3) 李 玲 . 刘明珠 徐卫 明
摘 要 用薄层刮板 一荧光分析法检测中药复方制剂之君药丁公藤 E cyr i加 ob tsu ￡fo li a eB nt h 的有
效成分东蓖若亭 ( sc 叩 ol et in) 的含量 ,克服了薄层色谱干扰 ,取得了准确 、 可靠的结果 。 本文的研究
为中药复方制剂的质量控制提供了一种较好的分析手段 。
关镇词 丁公藤 东蓑若亭 薄层刮板 一荧光分析法 中药复方制剂
如何解决中药复方制剂的质量控制问
迈 ,一直是药物分析工作者 比较关注的课题 。
特别是中药制剂组分繁多 , 成分复杂 ,如果不
经分离或适当处理 , 很难获得准确可靠的结
果 。 本课题在研究中药制剂藤络宁胶囊的质
量标准时 ,采用薄层刮板一荧光分光光度法 ,
对组方成分之一丁公藤的有效成分东蓑若
亭〔`一 ` 〕进行 了含量监 测 ,克服 了用薄层扫描
测定含量误差大 、 用 H P L C 法直接进样对色
谱柱污染大等缺点 , 排除了复杂组分相互间
的干扰 ,取得了准确可靠的结果 。
1 材料与方法
1
.
1 仪器与试药 : 日立 3 0 0 0 荧光分光光度
计 ; XW一 s o A 旋涡混合器 ; 8 0一 2 离心沉淀器 。
化学试剂均为分析纯 。
藤络宁胶囊 由本院植化教研室提供 ; 东
·
A d d r e s s
:
L I I
矛
i n g
,
C o l le g e o f P h a r n 飞a e y , T h e S e e o n d M ili t a r y M e d ie a l C o ll e g e
,
S h
a n g l l a i
《中草药 》 1 99 6 年第 27 卷第 5 期 · 2 7 5 ·
蓑若亭对照品由本院植化教研室提供 , 经红
外光谱 、 核磁共振确认 , 用 H P L C 检查 , 纯度
为 10 0 % 。
1
.
2 薄层色谱条件 : 展开剂 : 苯一乙醚 (1 . 1 :
1 ) ; 薄层 板 : 硅 胶 H ( 4 0 拌 1 0 火 2 0 。 m , 厚
0
.
6 m m )
。
1
.
3 荧光测定条件 : 激发光波长 3 4 7n m ; 荧
光光谱波长 4 2 o n m ;温度 2 5士 l ℃ 。
1
.
4 标准液和样品制备
1
.
4
.
1 标准液配制 : 精密称取经 10 5℃干燥
至恒重的东食若亭对照品适量 , 用氯仿溶解 ,
定量稀释成每 l m l 中含 80 林g 的溶液备用 。
1
.
4
.
2 样品液制备 :取本品 20 粒 , 去壳后称
重 ,精密称定相当于 5 粒胶囊的重量 ,溶解在
5 0m l 0
.
5% H
2
5 0
4 溶液中 , 用氯仿提 取 3 次
( 5 0
、
3 0
、
3 0 m l )
, 合并提取液 , 回收氯仿至干 ,
精密加入 5 . o m l 氯仿 , 溶解后作为供试品溶
液 。
1
.
5 测定方法 : 取上述两种溶液各 3 . 。川 ,
分别点于同一硅胶 H 薄层板上 ,用展开剂展
开 , 取出 , 凉干 ,置紫外灯 ( 3 6 5n m )下检视 , 画
出与对照品色谱相应位置上显相同颜色的荧
光斑点 , 定量刮取置离心管 中 , 用无水乙醇提
取 2 次 ( 3 、 1 . s m l ) , 每次在旋 涡混合器上混
合 l m i n , 置离心机 中 , 以 Z 0 0 0 r / m i n 离心约
l om in
,合并上清液置 s m l 量瓶中 ,用无水乙
醇稀释至刻度 ,摇匀 , 照荧光分析法 (药典附
录 27 页 ) , 在激发光波长 3 4 7n m 与荧光光谱
波长 4 2 0 n m 处测定荧光 ,读数 ,计算 , 即得 。
2 结果
2
.
1 线性关系 : 精密吸取东蓑若亭对照品溶
液 1 · o 、 2 . 0 、 3 . 0 、 4 . 0 和 5 . 0拜l ,按照含量测定
方法 中薄层色谱法点样 、 展开 、 刮板 、 提取和
荧光分析法测定含量 ,结果表明点样浓度在
0
.
08 ~ 0
.
4拌g /川内线性关系 良好 , 回归方程
为 Y = 8 . 8 又 1 0 一 ` + 2 . 0 2 又 1 0 , X ,相关系数 r
= 0
.
9 9 9 8 ( n = 5 )
。
2
.
2 回收率 : 取 巧 份样品 ,其中有 5 份分别
加入东蓑若亭对照品 1 0即 g ;有 5 份分别加
入 2 0 0拌g ; 另外 5 份分别加入 3 0 0拌g , 同时做
.
2 7 6
·
样品对照 ,提取和测定方法等同 ,结果回收率
分别为 1 0 0 . 7 2% , R S D = 1 . 5 0% ; 1 0 0 . 4 0% ,
R S D = 1
.
2 8% ; 1 0 0
.
1 0%
,
R S D = 0
.
5%
。
2
.
3 测定方法的重现性 : 取一定量的东食若
亭对照品置棕色瓶 中 , 用无水 乙醇溶解 , 置
5 ℃下储 存 , 按前述荧光分析法分别测定天
内 、 天 间 、 5 天 、 10 天以及重复 5 次的透光值
(见表 ) , 测定结果表明此法重现性良好 。
2
.
4 稳定性试验 :将待测样品溶液置棕色瓶
中 , 分别在 室温和 5℃下储存 , 定期测定含
量 。 结果表明 , 样品置室温下储存 d3 之内稳
定 , 置 5 ℃下储存 2 周没有明显变化 。
表 测定方法的三现性
方法 透光值 R S D (% )
重复 5 次
5 6
.
9 1
5 6
.
8 9
5 7
。
2 7
5 6
.
9 6
5 7
.
0 1
5 6
。
4 5
5 6
。
78
5 6
.
4 1
5 7
.
3 7
0
.
6 9
0 2 7
0
.
74
0
.
4 6
日隔间510
3 讨论
图 l 薄层色谱图
A 样品 B 对照品
众所周知 , 中药成分
十分复杂 , 而本方由 6 味
中 药 组 成 , 如 果 选 用
H P L c 法 直 接进 样 测 定
含 量 , 理 论 上是 可行的 ,
但提 取液 中几十种组分
对色谱柱 污染严重 ,代价
昂贵 ; 如果选用薄层色谱
扫描法测定含量 , 由于该
法重 现性差而 带来较大
误差 。 因此本文尝试了选
用薄 层色谱法分离提纯 ,
经刮板 后再 用 荧光分析
法 测定含量 的色谱一光谱
ō一。
ó口写ēó吕目一、
联用法 ,取得较为理想的测定结果 。
本文试验成败的关键是薄层色谱的分离
和荧光光谱的确定 。 如果薄层色谱分离的不
好 ,将会增加刮板的难度和误差 。 因此本文反
复筛选了几十种展开剂 , 最后确定用苯 一乙醚
(1
.
1 : )l 作为展开剂 ,取得非常满意的结果
(图 1 ) 。 由于制剂中东蓑若亭含量较低 , 对刮
板后的提取液进行紫外扫描 ,基本见不到吸
收峰 。而东蓑营亭具有较强的荧光 , 考虑到荧
光分析法灵敏度高 ,取样 量少 , 只要控制好测
定温度 , 既能提高测定方法的专属性 , 又能解
决含量低测定难度大的问题 ,但荧光分析法
主要应注意的是在获得较强荧光的同时要避
开溶剂 R a m a n 散射光的干扰 。 本文试验的结
果表明东蓑若亭的 乙醇溶液荧光最强 , 此溶
液的激发光谱 (图 2 )显示在 2 3 6 、 2 5 6 、 3 0 0 和
3 4 7n m
,分别用这 4 个波长作激发光源 ,所得
到的荧光光谱 ( 4 2 0n tn ) 完全相同 ( 图 3 ) , 尤
其以 3 4 7 n m 作为激发光源测得的荧光强度
最强 ,而且还避开了无水 乙醇 R a m an 散射光
( 3 8 9n m )的干扰 (图 4 ) 。 因此本文最终确定
用无水 乙醇作溶剂 ,在激发光波长 3 4 7n m 和
荧光光谱波长 4 2 0n m 处测定东艾若亭的含
量 。从含量测定的方法学考察结果 (见结果项
下 ) 可以看出 ,本文采用的薄层刮板一荧光分
析法不仅避免了复杂组分之 间的相互干扰 ,
而且还提高了分析方法的灵敏度和准确度 ,
在中药复方制剂的质量控制中 , 本文的方法
不失为一种可借鉴的好方法 。
6价.竹420八..二....皿..己叭?9卜
侧裸茱狱妞翻报椒
波 长入 ( n m ) 被长入 ( 。 )
. 2 东直营亭的激发光光谱 图 3 东蓖营亭的荧光光谱
(激发光波长 3 4 7 n m )
参 考 文 献 3 郑宏业 , 等
叶惠珍 ,等 . 中草药 , 1 981 , l 2( 5) : 5 4 朱惠兰 ,等
陈泽乃 ,等 . 中草药 , 19 5 6 , 17 ( 9 ) : 2
波长人 ( 。 )
图 4 无水乙醉的 R a m an 散射
光光谱 (激发光波长 3 4 7 n m )
. 药检工作通讯 , 1 9 7 9 , 9 ( 6 ) ; 2 9 2
. 中草药 , 1 9 5 4 , 2 5 ( 1 0 ) : 3 0
( 1 9 9 5
一
1 0
一
3 1 收稿 )
A P P l i c a t i o n o f T h i n L a y e r C h r o m a t o g r a P h
一 F l u o r e s e e n t M e t h od i
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Q u a l i t y C o n t r o l o f H e r b a l P r e P a r a t i o n s
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e o n t a m in a t io n i n H P L C
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u o r e s e e n e e s P e e t r u m o f 4 2 o n m a n d a t e m p e r t u r e o f 2 5
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t h e a v e r a g e r e e o v e r y w a s 9 8
.
5 2 % ~ 1 0 2
.
6 7% w i th R S D < 1
.
5% (
n = 5 )
.
之召 是名 屯台是弓 是宙弓名习 6 弓 S 是召是有 之召 易名是弓寻名寻召是召是冬是有 是弓 是召 ;多S 是名是宙是谷召台易盆是 沪名是召屯户盆是召名客是召是台屯台是台之召召宙寻台是台是台是召
更正 :本刊第 3 期第 169 页文题中的 “ 金钱莲 ” , 应为“ 金线莲 ” ;右倒数第 14 行《中草大辞典》应为《中药大
辞典 》 ;中文 目次页中右半栏第 1 行中 “ 金钱莲 ”应为“ 金线莲 ” 。
《中草药 》 1 9 96 年第 27 卷第 5 期 · 2 7 7 ·