全 文 ：理气药对荷瘤小鼠 TN F 和N K 细胞活性的影响
北京医科大学生化教研室 ( 10 00 8 3 ) 叶 加 钱伯文 .于 尔章 二
8
人体气机调畅通达是五脏六腑功能协调统一的
基础 , 气机失调 , 是肿瘤发生发展 的重 要 因素之
一 , 故调理气机在中医药治疗肿瘤 中有其 重要意
义 。 目前国内有关理气抗肿瘤方面的基础研究尚未
深入开展 ,本文拟通过观察理气药对荷瘤小鼠 T N F
和N K 细胞活性的影响 ,探讨理气药的抗肿瘤作用 。
1 材料与方法
1
.
1 动物与模型 : B A L B / C小鼠 , 雄 性 , 体重
18 ~ 20 9
。 由上海市计划生育研究所提供 。 小鼠腹
水型 5 18 0瘤株由中国科学院药物研究所提供 。 接种
2 x 10
。个瘤细胞于小鼠右液皮下 。 2 4 h后理 气药灌
胃治疗 , 生理盐水对照 。
1
.
2 药物与试剂 : 理气药以八月札 、 广 木 香 、 佛
手为主组成 , 水煎浓缩至 10 m l含生药 2 50 9 , 用量
6 0 9 k/ g
·
d
。 重组 T N F 标准品及 L 。 : 。细胞由上海第
二医科大学微生物室提供 , Y A C一 1细胞株 由 中国
科学院上海药物研究所提供 , ` ” I一U P R , 中国科
学院北京原子能研究所出品 。
1
.
5 方法 : T N F测定法〔 1〕 : 小鼠尾静脉注射 L P S
2 0卜g / 1 0 . 2 m l后 1 . 5 h 取血清备检 。将 L 。 : . 细胞配制
成 3 . 5 x 10 弓 / m l细胞悬液 , 接种于培养 板 , 3 o7 C ,
5肠C O : 培养 24 h , 加不同稀释度的待 测 标 本 , 以
重组 T N F作阳性对照 。 不加标本作阴 性 对照 , 各
加 2卜g才m l的放线菌素 D l o o时继续培养 24 h 。 结晶
紫染色 。 冲洗后加 i 写 s D S , s 7 o C 3 o m i n , 置酶标
分析仪 6 3 0 n m 波长处测 O D值。 N K 细胞活性 测 定
法〔幻 : 无 菌 取小 鼠脾脏 , 制成 l x 10 7 / m l细胞悬
液 , 将传 代 Y A C 一 1细胞调至 1 x 10 。 / m l , 各取 0 . 1
m l于培养板中 , 3 7 “ C , 5 % C O : 培养 1 6 h后离心 ,取
上清于 9 6孔平底板 ,每孔 o . i m l , 酶反应液 o . l m l ,
25
O
C 3 0m i n
, 用酶反应检测仪于 4 9 o n m 处检测 。
2 结果
2
.
1 理气药对荷瘤小鼠 T N F活性的影响 : 小鼠接
种5 1 8 0后 , 用理气药治疗 12 d , 测其血清 T N F活性
今
高达 13 7 . 9 0 士 2 7 . 45 u /扭 l , 而对 照组 仅 13 . 46 土
4
.
o 7 u / m l
, 差异显著 ( 尸 < 。 . 00 1 ) , 可见 理气药
能提高荷瘤小鼠T N F活性。
2
.
2 理气药对荷瘤小鼠N K细胞活性的影响: 小鼠
接种 5 180 , 用理气药治疗 14 d , 测定其脾脏 N K细胞
活性达 7 5 . 2 0 士 2 5 . 15写 , 明显高于对照 组 遵一 9 6 土
12
.
10 肠 (尸 < 0 . 0 5 ) 。 表 明 理气药能提高荷瘤小鼠
N K细胞活性 (表 ) 。
表 理气药对荷瘤小鼠丫N F和 N K细胞活性的影晌
N K细胞活性 (% )
理气组
对照 组
T N F ( u / m l )
玉3 7 。 9 0 士 2 7 。 45
1 3
。
4 5 士 4 。 0 7
78
。
2 0 土 2 3 。 1 8
4 4
。
9 6士 1 2 。 1 0
尸 < .0 0 1 一 百.0 05
3 讨论
T N F是迄今发现 的直接杀伤肿瘤作用最强的生
物学活性因子之一 , 且能与其它生物学因子协调 ,
扩大抗肿瘤强度和范围 , 有重要的应用前景 。 研究
发现 , T N F虽然在体外对正常组织细胞无毒性 .但大
剂量外源性 T N F在体内可引起 一系 列 毒性反应 ,
限制临床实际应用 。 而内源性 T N F在体内维持时
间长 , 且能在循环中维持 相当水平 〔 3〕 。 实验 一中 ,
我们以理气药作为诱导剂 , 促使体内M小增 生和 活
化 , 以产生大量内源 性 T N F , L P S为释放 剂 , 使
M小分泌 T N F 重血清 , 所以理气药 的 功 能是诱导
荷瘤小鼠M小产生T N F 。 结果 表 明 理气药有较好
的诱导荷瘤机体产生 T N F 的 作 用 。
机体内N K细胞活性的高低与肿瘤的发 生发展
和转移有密切联系 , 激活 N K细胞功能在防止癌转
移上有一定意义 。 我们发现小鼠荷瘤后脾脏 N K 细
胞活性明显降低 。 荷瘤后用理气治 疗 2周 , 其脾脏
N K细胞活性明显高于对照组 , 说明理气药能促进
有瘤机体 N K 细胞活性上升 , 提高机体非特异性免
疫功能 , 从而达到抗肿瘤作用 。
1 余伟明 , 等 。 肿瘤死因子相关细胞毒素 . 上 海 :
上海科技出版社 , 1 9 91 .
2 石 卫 , 等 . 中国免疫学杂志 , 1 9 86 ( 2 ) : `
考 文 献
8 B a r t h o l e v n s J
, e t a l
.
I n F e e t l m tn u n
一
1 9 8 7
( 5 5 ) : 2 2 3 0
( 1 9 9 4
一 0 4一 1 8收稿 )
今上海中医药大学 . 穿上海第 一 医科大学附属肿 瘤医院
.
2 7 2
.