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王明安 , 等 高等学校化学学报 , , !
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袁玉英 , 等 药学学报 , ,
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一 一 收稿
一 一 修回
木霉在药用植物病害防治上的应用
中国医学科学院
中国协和 医科大学药用植物研究所 北京
丁万 隆 今 程惠珍 张国珍
摘 要 概述了木霉在药用植物土传病害生物防抬上的应用及今后的研究方向 。
关镇词 木霉 药用植物 病害防治
近年植物病害发生了很大变化 , 其主要
特点是土传病害或根部病害的日趋严重 。 如
美国土传病害造成的损失占整个作物损失的
以上 〔,〕 。土传病害加重的原因十分复杂 ,
但主要是追求高产而改变传统耕作栽培方
式 , 破坏了原有的生态平衡所致 。由于土壤条
件相对稳定 , 造成土传病害的经常 、持续性为
害 , 难以培育出抗根病的作物品种 , 又不便进
行药剂防治 , 对侵染菌源也难于有效控制 。因
此 , 对其进行生物防治研究 日益受到重视 。
木 霉属 月人。 ‘。 真菌
属于半知菌亚门 , 丝抱纲 , 丝抱目 , 丛梗抱科 ,
是一类普遍存在的真菌 。 在土传病害生防因
子中 , 对木霉的研究最多 。 据统计 , 全世界
个国家和美国 个州生物防治研究课题中 ,
有 是有关木霉的研究 。 在 年召开
的第六届国际植物病理学大会上 , 主要以木
霉为主的有关土传病害生物防治的论文占总
数的 〔〕。 研究的内容主要有 木霉对植
物病原菌拮抗作用评价 木霉次生代谢产物
的研究 木霉生物学及分子生物学研究 ,木霉
‘ ,
,
《中草药 》 年第 卷第 期
生态学及微生态学研究 生物防治与农业措
施相结合 , 研究木霉 一病原菌一寄主植物间相
互关系等 。
木霉在植物病害生物防治中之所以受到
重视 , 原因之一是由于它对于那些化学杀菌
剂防治效果差的土传植物病原菌具有很好的
防治效果 。这些病原菌有立枯丝核菌 、
、齐整小菌核 、
镰 刀 菌 、 核 盘菌 !∀# ∃% ∃&
∋( )
∗ 、 疫 霉 菌 p 勺toP ht h~ sP p
. 、 腐 霉 菌
巧才hi u m s p p . 等 。 它们寄主范围广 , 适应性
强 , 能在土壤中长期存活 , 防治极为 困难 , 可
侵染几乎所有栽培植物 , 造成根部及苗期病
害 。随着生物技术的发展 , 木霉作为生防因子
的地位更显重要 。
1 木霉在药用植物病害防治上应用研究
1.1 研究现状 :近年来 , 国内外对木霉有较
深入细致的研究 。 木霉对多种植物病害的防
治已取得良好的效果 , 如美国用哈茨木霉熬
皮制剂田间处理由立枯丝核菌引起的棉苗立
枯病 , 发病率降低 了 60 % , 并提高出 苗率
Plant, C h i n e s e A e a d e m y o f M e d i e a l Sc i e n e e s a n d C h i n e s e
.
5 0 5
-
田间施用 112一 140 kg / 10‘ m , 哈茨木
霉鼓皮制剂 , 可以连续 3 年控制花生 白绢病
的发生〔3 , 。在国内 , 从水稻叶面分离并筛选到
对白绢病菌 Scl erot iu m rolfs i 有强烈拮抗作
用的哈茨木霉菌株 , 并用其防治茉莉白绢病 ,
在花房期每盆用木霉鼓皮培养物 50 9 , 防治
效果达 90 % 以上〔。 。
利用 已有的研究结果 , 拓展木霉在药用
植物病害防治上的应用是十分必要的 。 从环
境 、寄主植物 、病原物三者关系分析 , 药用植
物与其他栽培作物具有许多相同点 。在土壤 、
大气环境条件基本相同的情况下 , 药用植物
的某些土传病害的病原物与栽培植物的为近
似种甚至同种 ;药用植物与某些栽培植物为
同科乃至同属 。因此 , 可选择与 已获成功的栽
培植物具相 同点的药用植物进行针对性研
究 。 如棉花立枯病的防治方法可以在多种药
用植物苗期病害上进行生物防治试验;甜椒 、
茉莉白绢病的研究方法 , 可以在对黄连等药
用植物 白绢病进行生 防研究时加以借鉴 。
有关木霉在药用植物病害生物防治上的
研究仅在国内偶见报道 。 利用哈茨木霉防治
白术根腐病 , 取得 了很好效果 。我们在木霉防
治西洋参立枯病研究方面也获得了成功 〔5 , 。
首先 , 从有机质丰富的东北人参产区土壤 中
分离到多个木霉菌株 , 并从中筛选出对立枯
丝核菌具有强抑制作用的优良菌株 , 并用它
在 室 内做 了对西洋参根腐病菌 F us ari um
sP . 、西洋参疫病菌 p勿toP ht hora ‘ac t~ m 、
西洋参锈腐病菌伪lind~ arP on sP .、西洋参
黑斑病菌 A lte rn ari a pan ax 的拮抗作用 。 结
果表明:该菌株除了对西洋参立枯病菌有强
抑制作用外 , 对这 4 种西洋参主要病原菌均
有不同程度的拮抗作用 。温室盆栽试验 , 以木
霉鼓皮制剂占盆土重量的 0.3% 为好 , 防治
效果达 7 .8% 。 田间试验 , 用 10 9 /m “ 木霉
鼓皮制剂处理表层土 , 防治效果即可达 60 %
以上 。 此法与农业措施紧密结合 , 简便易行 ,
木霉用量少 , 药效高且持续时间长 , 只需每年
早春参苗出土前结合松土施用一次即可 〔” 。
.
5 0 6
·
1
.
2 应用前景 :据统计 , 约有 70 % 的药用植
物以根或根茎入药 , 它们几乎毫无例外地遭
受到一种或几种土传病原菌 的危害 ;即使那
些以全草 、花等其他部位入药的种类 , 也几乎
难免受到土传病原菌的侵染 。 药用植物由于
施用化学农药造成的残毒已日益引起人们的
重视 , 生物防治是解决这一难题的有效途径 ,
而木霉则是病害生防因子中之首选 。
虽然不同种类的药用植物根际微生物有
区别 ,这需加以详细研究 ,但它们均发生土传
病害这一共同特点 , 使木霉在药用植物上的
应用前景十分广阔 。 在弄清某种药用植物土
传病害种类及病原菌的基础上 , 进行适当的
室内及温室试验 , 以摸清并确定对病原菌适
宜的木霉菌株及用量等 , 即可直接用于 田间
进行病害的防治 。 这些病害包括全部苗期立
枯病及部分种类的根腐病 、白绢病 、灰霉病及
菌核病等 , 例如 , 人参 、西洋参立枯病 、根腐
病 , 白术 、黄连的 白绢病 , 三七 、贝母的灰霉
病 , 丹参 、 白术 、三七的根腐病以及丹参 、人
参 、西洋参的菌核病等 , 在此不 一一例举 。
2 木霉在药用植物病害生物防治中需深人
研究的问题
2.1 优良木霉菌株的筛选 :利用特殊培养基
从土壤及根围定性分离木霉菌株 , 并用这些
菌株对 目标病原菌进行拮抗作用测定 , 以确
定对某种病原菌有特效的木霉菌株 , 并探索
对某些特殊土传病原菌如西洋参锈腐病菌的
测定方法 。
通过在培养基中加入杀菌剂并逐级筛选
存活的个体 , 培育出耐高浓度杀菌剂的菌株 ,
这些菌株还应在生长 、繁殖能力 、在土壤中的
竞争力 、定殖能力以及对目标病原物的致死
力等方面优于野生菌株 。另外 , 通过紫外光照
射选育突变菌株也是可行的方法 。 目前已培
育出耐 50 一 50 0 m g /L 苯菌灵的哈茨木霉菌
株 , 野生菌株的耐受浓度仅为 0.5 m g/L 。 培
育比野生菌株产生更多的抗生素如胶毒素的
菌株 , 也是研究方向之一 。
2
.
2 木霉基因工程研究 :通过木霉菌菌丝原
生质体的分离 、融合及基因克隆等生物技术 ,
可将两个菌株的基因修饰成为新的 、更具优
点的菌株 。 这一研究领域将成为今后热点之
一 。 新菌株在产生拮抗物质数量及质量上的
增加 , 使其能够同时对两种 以上土传病害有
效 , 而且具有生长好 、定殖快 、更能适应不 良
环境的特点 , 从而对目标病原菌更具效果 。
2
.
3 木霉处理与农业措施有机结合 :据报
道 , 单以木霉分生抱子处理土壤 , 对土传病害
无防治效果〔3〕 , 这与我们在西洋参上的试验
结果相同 。一些在室内具有抑菌作用的菌株 ,
往往田间施用效果不好 , 主要原因就是营养
条件不具备 , 加入土壤中的个体不能很好地
定殖并形成优势种群 。 因而应当对有机物及
添加剂等木霉营养成分及种类加以研究 。 与
有机物同时施入土壤中的这些添加剂 , 可为
木霉菌提供营养 , 成为其营养载体 , 从而提高
木霉在土壤中的各种能力 , 使其成为优势种
群.同时 , 这些有机物也刺激土壤中原有木霉
菌的大量繁殖 , 与加入的木霉菌一起对病原
菌的生存繁殖形成巨大的抑制作用 〔6〕。 这些
有机物还可以提高作物的抗病性 , 并促进其
生长 。
2
.
4 其他方面 :木霉菌处理药用植物种子 ,
防治土传病害 , 可借鉴农作物上 已成功的先
例 , 结合药用植物种子的特殊性进行有针对
性研究 。
开发木霉菌剂发酵 、培养 、生产新工艺 ,
提高其 田间应用效果 ;注意木霉制剂与化学
杀菌剂的竞争力 , 如毒性 、注册费用与时间及
农民的认可性 。
参 考 文 献
1 Lew isJ A , e t a l . C r o p P r o t e e t i o n , 1 9 9 1 , 1 0 : 9 5
2 洪传学.植物保护 , 1 9 9 3 , 1 9 ( 5 ) : 3 5
3 P
a p a v i幼s G C .A nn R ew P hyt oPathol , 1 9 8 5 , 2 3 : 2 3
4 李 良 , 等.浙江农业大学学报 , 2 9 5 3 , 9 ( 3 ) ; 2 2 1
5 丁万隆 , 等.中草药 , 1 9 9 4 , 2 5 ( 4 ) : 9 1
6 周新根 , 等.上海农业学报 , 2 9 9 4 , 1 0 ( 4 ) : 5 3
( 1 9 9 6
一 0 8 一 2 9 收稿)
现代薄层色谱技术及其在生药分析中的应用
镇江市药检所(212003) 胡逸琴 陈 黎 刘勤超 辛
薄层色谱技术 (T L C )目前 已 日趋成熟 ,
并得到广泛应用 。 其在生药分析研究中亦有
很重要的地位 , 这点仅从《中国药典 》1995 年
版 一部中 45 % 的品种收载薄层鉴别就可见
一斑 。随着色谱技术的不断发展 , 尤其是现代
T L C 在生药分析中愈来愈广泛 的运用 , T L C
具有更高的应用价值 。 笔者仅就现代薄层色
谱发展技术及其在生药分析中的应用作一综
述 。
1 吸附剂
1.1 高效薄层色谱 (H PT L C ):采用更细 (粒
子范围 5一10 拼m ) 、更均匀的吸附剂作为固
定相 , 其板厚度 10 。一 250 产m , 点样量 仅需
o· 1 一 o · 2 拼L , 展 3一 6 ern , 展开时 间 3一 20
m in , 最小检测量 0.1一 0.5 产g , 较经典 T LC
可改善其分离度 , 提高灵敏度和重现性 。其预
制板尤其适用于定量测定 。 应用 M erc h 高效
硅胶板鉴别国产麻黄中麻黄生物碱类化合
物 , 成功地分离了 3 对立体异构的 6 种生物
碱 , 而用常规薄层板则不能将其很好分离 〔‘, 。
比较了高效板和普通板对阿片中 20 余种生
物碱的薄层色谱鉴定 , 前者可检出 13 一 17 个
斑点 , 后者仅能检出 7一n 个斑点 〔幻 。 对 14
种蛇胆中胆 汁酸成分进行了 H P T L C , 认为
, 郑州瑞达制药有限公司
《中草药》19 9 7 年第 28卷第s期 5 0 7