全 文 ：3讨论
3
.
1多次层析法是基于样品中被鉴别的成
分甚微 , 且此成分在前几次展开中位于原点
不动 ,而其它非鉴别的成分则随展开系统展
开 , 如此反复多次 ,可以在原点保留了较多的
需鉴别的成分 ,而又排除了其它成分的干扰 ,
最终达到鉴别的目的 。
3
.
2 多次层析法不同于一次性层析 ,一次层
析无法使样品点样太多 , 对于含有被鉴别成
分甚微的样品是难以鉴 别的 ,而且样品中杂
质成分随着样品点样量的增加而增多 , 加大
了干扰 ,而多次层析法恰恰克服了一次层析
这两个缺陷 。多次层析法既不同于一次层析 ,
又不同于多次展开 。 多次展开仅增加了样品
分离的手段 ,而不增加样品的点样量 , 不能有
效地鉴别样品中含量甚微的成分 。
3
.
3 多次层析法用于加味西黄丸 ,蟾酥在其
中的含量为 。 . 17 % ;对于含蟾酥更少的中成
药制剂也可用此法鉴别 , 只是展开剂系统可
以根据组方药味及蟾酥量的不同进行选择 。
3
.
4 由于多次层析的效果好 , 斑点边缘清
晰 、 杂质成分干扰少 ,可以采用薄层扫描法进
行含蟾酥成分的含量测定 。
致谢 : 本文承蒙魏吉城研究员指导 。
( 1 9 9 6
一
0 4一 0 5 收稿 )
薄层一导数荧光分光光度法测定香连丸 、
左金丸中小巢碱 、 巴马亭的含量
江苏省江宁县人民医院 ( 2 1 1 1 0 。 )
中国药科大学
陶美英 带
赵金慧
摘 要 香连丸 、 左金丸其主药均为黄连 , 主要有效成分为小壁碱 、 巴马亭等生物碱 。 采用薄层 一导
数荧光法测定该类药中的有效成分 ,检出灵敏度高 ,点样量少 , 回收率好 。
美御词 香连丸 左金丸 薄层 一导数分光光度法 小璧碱 巴马亭
香连丸 ,左金丸都具有清热化湿 ,行气止
痛的作用 。 其主药黄连中的有效成分是小壁
碱 、 巴马亭等生物碱 。该类药的含量测定文献
报道不多〔`一的 ,用薄层一导数荧光法测定尚未
见报道 。 我们选择了较合适的展开系统 , 进行
一导数荧光测定 ,杂质或共存物的干扰 , 可以通
过波长和求导条件的选择加以清除 。
1 仪器与试药 :
仪器 : 605 型 一 60 多功能荧光计 ; 2 5 3 7 人
紫外分析仪 , H 6 60 2 5 ) 超声清洗机 ,薄层 自动
铺板仪 。 试剂均为分析纯 ,硅胶 G (青岛海洋
化工厂 ) ;对照品小璧碱 、 巴马亭 由中国药科
大学金蓉莺教授提供 。 药品 : 原料药黄连 、 吴
茱 英 、 木香 由南京市药材公司提供 ;香连 丸
(批号 8 8 0 4 0 5 , 8 7 1 2 0 1 , 8 6 0 7 0 5 )黄石制药厂 ;
左金丸 (批号 8 4 0 1 1 3) 武汉市中联制药厂 。
2 方法与结果
2
.
1 样品液的制备 : 香连丸 、 左金丸 、 黄连 、
吴茱英 、 木香粉碎 ,恒重 ,并同时炮制吴茱英 、
制黄连 。 精称上述药品 , 置索氏提取器中 ,
9 0 %乙醇提取至无色 , 并定容到一定体积备
用 。
2
.
2 样品测定用薄板系统的制备 : 薄板的制
备 : 0 . 7 % CM C 一 N a ; 硅 胶 G 和粘合剂的比
例 : 1 : 3 ; 板厚 0 . 6 m m ; 10 5 ’ C活化 1 . s h ,干
燥器中冷却备用 。
·
A dd
r e s s :
`
T a o M
e iy in g
.
Ji a n g s u P r o v i n e ia l J ia n g n in g C o , I n t y P e o p l e
’ 5
H
o s p计a l , J ia n g n i n g
。
2 7 8
.
薄板的处理 : 正丁醇每升用 2 9 N a O H 、
1 9 A g N O
3 回流重蒸 ,冰醋酸重蒸处理 ,水为
重蒸水 。 用上述处理过的正丁醇一冰醋酸一水
(7
: 1 : 2) 跑空板 (未点样的薄层板 ) ;跑到顶
端后取出晾干 , 1 0 5℃活化 3 0 m i n 。
展开系统 : 展开系统所需的正丁醇 ,冰醋
酸 ,水的处理同上 。 其比例为 : 正丁醇 一冰醋酸
一水一三乙胺 (7 : l : 2 , 1) 。
2
.
3 薄层检查样品 : 在 同一块板上点样 , 展
开 , 在 2 5 3 7人紫外分析仪上观察荧光 , 见图
1
。
表 1 小架玻的波长组合
皮长 玩m F垂
入i = 5 0 9 0 . 0 1 7
从= 5 1 3 0 . 0 1 6
入3 = 5 6 0 0 . 0 0 7
从= 5 6 4 0 . 0 0 6
△ F空 △ (△F空 ) F称
0
。
4 5 8
一 0 。 0 0 1
0
.
4 9 8
0
0
。
4 5 9
一 0 . 0 0 1 0 . 0 2 7
0
。
4 3 2
△F标 △ (△F标 )
0
。
0 4 0
0
。
0 6 7
F 垂白 : 指在相应小粟碱处取一块大小相当的硅胶 ,经平
行操作而得溶液的荧光强度 。
F嵘: 指标准品所得斑点 , 经上述操作后的所得溶液的
荧光强度 。
表 2 巴马亭波长组合
皮长玩m
入一 4 9 5
F奎
0
.
0 2 0
△ F空 △ (△F空 ) F标 △F标 △ (△F标 )
0
.
1 7 5
0
。
0 4 6
入2一 4 9 9 0 . 0 2 0 0 。 2 2 1
0
.
0 72
入3一 5 6 5 0 . 0 0 8 0 . 3 7 4
一 0 . 0 2 6
…, !
1 2 3
图 1
4 5 6
样品 T L C
1
一香连丸 2一左金丸 3一黄连
6一巴 “石亭 7一小粟碱
图
4一吴茱英 5一木香
2
.
4 一阶荧光导数测定波长的选择 : 精密吸
取小巢碱标准乙醇溶液 l( . 0 m g /m L ) , 巴马
亭标准 乙醇液 l( . o m g /m L )点板 , 展开 , 定
斑 ,刮斑于具塞离心玻璃管中 , 加无水乙醇 5
m L
,超声波振荡 Z h ,离心 15 m in , 吸取上清
液于 比色杯中 , 在 6 50 型一 60 荧光计上测荧
光强度 。
荧光条件 : 单色光狭缝 2 . 1 n m ;激发波
民 入E x : 3 5 5 n m (小璧碱 ) ; 入E x : 3 4 4 ( 巴马亭 ) ;
发射波 一长入Em : 均为 4 8 0 n m一 6 0 0 n m ; 每隔 l
m in 测定 1 次 。 经选择得出波长的组合见表
l
、
2
。 所以小璧碱的 碗 x ( n m ) : 3 5 5 ;入Em ( n m ) :
5 0 9
、
5 1 3
、
5 6 0
、
5 6 4
。 巴马亭的 瓜 x ( n m ) : 3 4 4 ;
碗m ( n m ) : 4 9 5 、 4 9 9 、 5 6 5 、 5 6 9 。
2
.
5 标准曲线的制备及范围 : 小粟碱 : 标准
液浓度 1 . 06 3 m g /m L 。 回归方程为△ (△ F )
《中草药》 1 9 9 7 年第 28 卷第 5 期
一从一 5 69 .0 0 8 .0 34 8 二 J= 0 . 0 1 2 4 X + 0 . 0 0 5 6 , r = 0 . 9 9 8 8 ( X 为点样
量 ) ,线性范围为 : 2 . 6 6 拌g一 6 . 9 1 拌g 。
巴马亭 : 标准液浓度 73 0 m g / L 。 回归方
程为△ (△ F ) = 0 . o l o ZX 一 0 . 0 3 0 5 3 3 , r ~
0
.
9 9 8 7 ( X 为点样量 ) , 线性范围为 : 4 . 38 拌g
~ 7
.
3 拌9 0
2
.
6 回收率试验 : 精密称取香连丸 、 左金丸
粉末适量 3 份 ,其中二份分别加定量的小桨
碱和巴马亭 , 另一份留作空白 。在同前面一样
的条件下用 60 m L 90 %乙醇平行提取 12 h ,
浓缩到 5 m L 。
在同一块板上各点标准品 3 、 7 . 5 产L 二
份及相 同体积 的上述样 品提取液 , 展开 ,刮
板 ,洗脱 ,测出荧光强度 。 得小璧碱和 巴马亭
的回收率如 下 : 巴马亭的回收率 (n 一 3 ) ,香连
丸 98 · 3 8肠 , 左金丸 98 . 5% 。 小璧碱的回收率
( n 二 3 ) ,香连丸 9 6 . 4% ,左金丸 1 0 0 . 3% 。
2
.
7 样品的含量测定 : 分别称取研细混匀的
香连丸 , 左金丸粉末适量 , 同前处理 , 测得含
量见表 3 。
2
.
8 稳定性试验 : 测定程序同前 : 结果表明 ,
在 24 h 内巴马亭和小粟碱的含量不变 。
3 讨论
3
.
1 提取条件的选择 : a) 提取方法 : 分别考
.
2 7 9
.
察了冷浸 ,超声波振荡 , 索氏提取器提取等方
法 。 结果表明索氏提取器提取最快 ,最完全 。
表 3 样品中各组分的含量 ( % )
(9 o % ) 乙醇最好 。
c )荧光条件 : 由于荧光分析法灵敏度很
,配制溶液的溶剂 、容器都要影响荧光的测
,所以我们对溶剂和玻璃仪器均进行了处
高量理123456
3 平均值 ( % )
3Q一st了2移自rdo月h04八j孟,口ō,曰.…,dJO乙ng月左且八」72059阴沁弘25.32343
批号
8 6 0 7 0 5
8 7 12 0 1
8 8 0 40 5
组分
小璧碱
巴马亭
小粟碱
巴马亭
小粟碱
巴马亭
小璧碱
巴马亭
3
.
6 17
3
。
0 1
3
。
42
2
。
2 7
3
.
3 2
2
.
9 4
4 2 6
3
.
3 8
3
。
4 9
3
.
2 5
3
。
4 6
2
.
5 6
3
。
3 5
8 4 0 1 1 3
:{;:
b )提取溶剂 : 分别考察了甲醇 、 乙醇 、 盐
酸 一甲醇 (一 1 0 0 ) 、 盐酸 一乙醇 ( 1 : 1 00 ) 等提
取溶剂 , 因 甲醇毒性大 , 价格贵 , 而盐酸 一甲
醇 , 盐 酸一乙 醇 提取 液 杂质太 多 , 故选 用
参 考 文 献
焦庆方 , 等 . 中国药科大学学报 , 19 87 , 1 8( 3) : 1 7 9
杨维稼 , 等 ` 中草药 , 19 8 6 , 17 ( 6 ) : 4 7
张秀琴 , 等 . 中成药研究 , 19 87 , ( 2) : 14
徐国钧 , 等编 . 生药学 . 北京 : 人民卫生出版社 , 19 87 . 178
于如暇 , 等编 . 分析化学 . 下册 . 北京 : 人民卫生出版社 ,
1 9 8 6
.
6 8
李 玲 , 等 . 中草药 , 1 9 9 6 , 2 7 ( 5 ) : 2 7 5
( 1 9 9 6
一 1 0
一
2 2 收稿 )
鸡内金 、 鸽内金 、 鹤鹑内金淀粉酶活力比较
南京中医药大学 ( 2 1 0 0 2 9 )
镇江市中药厂
潘金火
欧阳臻
鸡 、 鸭 、 鹅等家禽内金是常用的 助消化 良药 。 据
有关文献报道 , 鸭内金的淀粉酶活力是鸡内金的 6
倍 ;鹅内金的淀粉酶活力是鸡内金的 7 . 5 倍 〔 , 二。 其它
禽类动物的内金是否亦具有相似的淀粉酶活力 , 这
必将引起人们的关注 . 我们选择了 一在农村具有较大
养殖规模的肉鸽和鹤鹑作为考察 对象 , 测定 了鸡 内
金 (来自家鸡 G a z z Z,、 g a z z ,` 、 J o m e s t i` u 、 B r i s s o n 的千
燥砂囊内膜 ) 、 鸽 内金 (来 自家鸽 〔 ’“ : , n添 、 il 初 d 。 -
m
e st 女 a G m el in 的干燥砂囊内膜 ) 、鹤鹑内金 (来自鹤
鹑 〔为 z u r n i x 。 o z u阴 i x 尹 p o , , i e a 的干燥砂囊 内膜 ) 的
淀粉酶活力 , 并计算了各 自的比活力 , 现将实验方法
和结果报道如下 :
1 实验材料 、 仪器和试剂
1
.
1 材料 : 鸡内金 2 0 9 购 自南京中 医药大学门诊
部 ; 鸽内金 、鹤鹑内金 各 50 个由大丰县大中镇多种
经营服务公司提供 。 各药材均经中药鉴定室刘训红
副教授鉴定 。
1
.
2 仪器 : 上海产 7 5 1G 型可见一紫外分光光度计 ,
恒温水浴箱 。
1
.
3 试剂 :底物溶液 : 1% 马铃薯支链淀粉溶液 ( 以
p H 5
.
6 的磷酸缓冲液配制 ) ; 显色剂 : 3 , 5一二硝基水
.
2 8 0
.
杨酸溶液 ( l · 6 0 9 N a ( ) H 溶于 7 O m L 水中 , 再加入
l
· 。 9 3 , 5一二硝基水杨酸及 3 . 0 9 酒石酸钾钠 , 用水
稀释 至 10 0 m L ) ;标准溶液 : 麦芽糖溶液 ( 36 . 0 m g
麦芽糖加水至 1 0 0 m l , 一拌m o l麦芽糖 /m 一J ) 。
2 方法和结果
将鸡内金 、 鸽内金 、鹤鹑内金分别粉碎后 , 过 60
目筛 , 6。 亡左右烘至恒重 ,精密称取上述 3 种药材细
粉各约 0 . 5 9 置 OJ m L 容量瓶中 , 加 p H 5 . 6 的磷酸
缓冲液至刻度 , 摇匀后静置 30 m in 。 取 4支试管按下
表 1 操作脚 , 当对 3 种样品进行测定后由下式分别
计算各自的 比活力 Q :
Q 一少奇线黔架荔臀罗丝 又 2 0 (倍 )
实验结果见表 2 。
3 讨论和小结
肉鸽与鹤鹑是近儿年兴起的具有较大经济价值
的家禽类 ,在我省大丰 、东台 、射阳等地 已规模饲养 ,
仅大丰 一县 1 9 9 4 年肉鸽 、 鹤鹑的产量合计约 10 万
只 , 盐城地 区每年都要向东南亚地区 出口 大堡家禽
肉类罐头 ,鸽内金 、 鹤鹑内金产量很大 , 由于 用药习
惯问题 , 这些家禽内金基本上当废物丢弃 。 通过 以上