全 文 ：高效液相色谱法测定粘膜溃疡粉中
靛蓝的含量
天津市药品检验所 ( 30 0 07 ) 0张兰茶 介 吕归宝
摘 要 以 H P LC 外标法测定粘膜溃疡粉中靛蓝的含量 。 · 方法灵敏 、 准确 、重现性好 ,不受样品中
其它组分干扰 。
关扭词 粘膜溃疡粉 靛蓝 高效液相色谱法
粘膜溃疡粉是根据验方配制而成的散
剂 , 具有清热解毒 , 消炎止痛 ,促进溃疡愈合
的作用 。 多年来临床反应效果 良好 。 该品种
已被收载于 《天津市药品标准 》1 9 9 0 年版 , 并
已推荐收入卫生部部颁标准 。 但目前尚未建
立控制本品质量的含量测定方法 , 为此采用
高效液相色谱法测定粘膜溃疡粉中靛蓝的含
量 , 以作为控制本品质量的方法 ,进一步完善
质量标准 。
l 仪器及药品
日本岛津 1 0 A 型高效液相色谱仪 , 岛津
C R SA 数据处理机 。
对照品 : 靛蓝化学对照品由中国药品生
物制品检定所提供 ,含量为 92 . 17 % 。
样 品 : 粘膜溃疡粉 (天津市第五中药厂 ) 。
试剂 : 甲醇 , 醋酸均为分析纯 , 水为重 蒸
馏水 。
2 色谱条件
色谱柱 : I r r e g u l a r 一 H e l 。 ( 1 0 拌m , 2 5 0 只
4
.
5 m m )( 天津三维公司 ) 。 理论板数按靛蓝
峰计不小于 1 6 0 0 。
检测波长与灵敏度 : 检测波长 2 80 n m ,
A U F S 0
.
0 0 7
。
流 动相 : 甲醇 一水一醋酸 ( 6 5 , 3 2 , o · 5 ) ,
流速 1 m L /m i n 。
柱温 40 ` C ,纸速 2 m m /m in , 阀进样 ,每
次 1 0 拜I , , A T T E N = o 。
3 测试液的制备
3
.
1 靛蓝对照溶液的制备 : 精密称取靛蓝对
照 品适量 , 加氯仿溶解 , 超声处理 l h ( 5 0 /
6 o H : 45 ℃ ) ,取 出放至室温 ,定容至刻度 ,摇
匀 。 制成每 1 m L 含 。 . o 06 m g 的溶液 。
3
.
2 样品溶液的制备 : 精密称取粘膜溃疡粉
3 0 m g
,置 1 0 0 m L 烧瓶中 , 加氯仿 7 0 m L ,加
热 回流 l h ,取 出 ,放至室温 , 定容至刻度 ,摇
匀 。
3
.
3 考察回收率的测试液 : 分别精密称取 8
份粘膜溃疡粉样品 , 1~ 5 号样品中分别精密
加入对照溶液 50 m I J ,氯仿 20 m L ,与 6 ~ 8
号样品一起 ,照样品溶液的制备方法 , 同法制
成测试液 。
3
.
4 空白溶液的制备 : 依据粘膜溃疡粉的处
方 , 按 比例配制不含青黛的样品粉末 , 混匀 ,
精密称取 30 m g , 照样品溶液的制备方法 , 制
成空白溶液 。
4 实验结果
4
.
1 提取方法的比较 : a) 不同温度下超声振
荡处理 , 随温度升高 , 提取率提高 ,温度影响
较大 , 见表 1 。 b) 相 同时间 , 回流提取比超声
振荡提取率高 。 见表 2 。 。 )不同的回流时间 ,
对提取结果也有影 响 , 见表 3 。 实验结果表
明 , 加热回流 l h , 可将样品中的靛蓝提取完
全 。
竺 八叫 r e “ “ : Z h a n廷协 n l in g · T , a n ji n I n 、 t i t u t e f o r C o n t r o l D r u g , T io n i in
_ 张兰今 19 8 6 年 8 月毕业十 大律 第二医学院药学 系 ,药师 , 在天津市药品检脸所中药室主要从事中药的质量分析及方法研究工作 。
《中草药》 1 9 9 7 年第 2 8 卷第 1 1 期
表 1 超声处理温度 、 时间对含量影响 ( n lg / g )
30m i n 6 0m i
n9 0m i n
室温 (] 8℃ ) 3.9 4 3. 05 3. 0 8
45 ℃ 3.1 2 3. 28 3. 2 4
6 0℃ 7 .5 27 .7 5 8 .1 8
表 2相同时间不同提取方式对含盘影响m (g / g )
30m i n 6 0m i n
回流提取 8 . 409 9 · 0 4 6
超声振荡 60℃ 7 .5 27 .75
表 3回流提取时间对含量影响 (m g / g )
4
.
8空白试验考察 :经对空白溶液与靛蓝对
照溶液测定结果 一比较 , 空白溶液在相应的位
置上无吸收峰 ,表明样品中其它组分对靛蓝
测定无干扰 。 ( 见图 l)
回流时间 ( m in ) 3 0 4 5 6 0
C样 ( m g / g ) 8
.
4 0 9 B
.
8 6 5 9
.
0 4 6
4
.
2 线性关系及 回归方程 : 靛蓝的进样量在
0
.
09 2一 2 . 3 拌g 之 间 , 其浓度与峰面积呈 良
好的线性关系 , 数据经 回归处理相关系数 r
= 0
.
9 9 9 9
, 回 归 方 程 Y = 3 5 9 4 7 9 . O6 X 一
9 3
.
3
。
4
.
3 回收率考察 : 以加入法测定 5 份样品 ,
实验结 果平均 回 收率 为 9 . 03 % , R S D 一
1
.
6 5 %
。
4
.
4 重现性考察 : 对同批样 品分别取样 , 进
样 5 次实验 , 测得结果经统计处理 , 其靛蓝的
平均含量为 0 . 0 2 3 3 2 ( g / g ) , R S D 一 1 . 1 3%
4
.
5 稳定性考察 : 将靛蓝 对照 液放置 30
m i
n , 1
.
s h
,
2
.
s h
,
3
.
s h
,
4
.
s h
,
s h 后 ,进样
测定 ,其 S = 1 7 0 . 5 8 , R S D = 0 . 5 5% , 表明本
品在 s h 内测定 ,结果稳定 。
4
.
6 进样精密度考察 : 将靛蓝对照液连续进
样 6 次 , 测得 峰面积 ,其 S = 1 0 5 . 7 2 3 7 , R S D
~ 0
.
3 5 %
。
4
.
7 样品测定结果 : 采取本文所述方法测定
了三批粘膜溃疡粉样品 ,结果见表 4 。
表 4 样品测定结果
永一 _一社扒
节 自 试听 ’ 标准 洋品
批号 9 1 1 2 0 5 94 0 90 3 94 0 30 2
含量平均值 ( g / g ) 0 . 0 2 3 2 6 0 . 0 1 5 14 0 · 0 14 5 6
图 1 样品 H IP 尤 图谱
S 讨论
5
.
1 青黛的主要化学成分为靛蓝及靛玉红 。
在本法中 ,二者虽能很好的分离 ,但由于靛玉
红含量很低 ,靛蓝与靛玉红不能同时测定 ,故
靛玉红暂不作为控制质量的指标 。
5
.
2 文献报道 H P L C 法测定靛蓝时 , 常用
溶剂系统为甲醇一水 ( 70 : 3 0 ) 〔` , 2 〕 , 靛蓝峰有
拖尾现象 ,拖尾因子为 0 . 76 ,经加入 。 . 5%醋
酸 ,使靛蓝峰成对称峰 ,拖尾因 子为 1 。
4
.
3 本方法具有样品预处理简单 , 重现性 、
精密度好等特点 ,可以作为控制质量的指标 。
参 考 文 献
l 《中国药典》 1 9 90 年版一部 . 170
2 李海生 , 等 . 中草药 , 一9 9 2 , 弓( 2 3 ) : 2 4 4
( 1 9 9 7
一
0 1
一
2 7 收稿 )
安徽高校联合培训部
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5 1 1 2 9 4 9
。
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6 6 2
.