全 文 ：· 药剂与工艺 .
高效液相色谱法测定清火桅麦片中桅子昔的含量
广西 中医学院 (南宁 5 3 0 0 0 1) 刘华钢 辛 陈燕军 毛 健 “
摘 要 利 用反相高效液 相色谱法 , 采用外标 法测定 了清火桅麦 片 中桅子昔 的含量 。 对清火 桅麦
片 中桅子昔 的提取方法 、 测定条件进行 了选择 , 实验结果 显示用 乙醚先洗脱杂质 , 后用 50 % 甲醇超
声波振荡 法提取较好 。 测定 了 5个 厂家的清火桅麦 片样 品 , 桅子昔含 量分别为每 片 0 . 356 、 0 . 4 6 7 、
0
.
9 5 7
、
2
.
9 7 5
、
5
.
3 8 7 m g
, 加样 回收率为 9 7 · 4 % , R S D 为 l · 6 1 % 。
关键 词 清火桅麦 片 桅 子昔 高效液相色谱法 含量测定
清火桅麦片主要 由穿心莲 、 麦冬 、 桅子等
组成 , 具清火 、 解毒 、 凉血 、 消肿 之功效 , 用于
咽 喉肿痛 、 急性扁桃腺炎 、 发热 、 头痛 、 牙痛 、
目赤 、 心火旺盛 、 睡眠不佳等 〔` 〕 。 我们用反相
高效液相色谱法测定 了其 中桅子昔 的含量 ,
分离效果好 、 简单快速 、 准确 , 为控制清火桅
麦片内在质量提供了实验数据 。
1 仪器与药品
.1 1
、
L C
一
8 4 高效液 相色谱仪 ( 日本 岛津 ) ,
S P D
一
6 A V 可见 一紫外检测器 , C R 4 A 数据处
理 机 , 2 0 拜L 定 量 进样 管 , S h im 一 p a e k C L C -
O D S 柱 ( 6 . 0 m m 火 1 5 0 m m ) , U V 一 1 6 0 A 紫外
可见分光光度计 ( 日本岛津 ) 。
1
.
2 对 照品 : 桅子昔 , 由中国药 品生物制品
检定所提供 ; 样品 : 清火桅麦片均为市售 ,分
别 为广西 A 药厂 9 6 0 7 0 6 、 B 药厂 9 6 0 7 0 2 、 C
药厂 9 6 0 3 1 4 与 9 6 0 1 1 0 、 D 药厂 9 7 0 10 5 、 E 药
厂 9 7 0 1 0 9 。
流动相用 甲醇为优级纯 , 提取 、 溶解用为
分析纯 ; 流动相用水为去离子重蒸水 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱条件 : 流动相 : 甲醇 一水 ( 30 : 7 0) ,
柱 温 : 室温 , 流速 : l m L /m in , 测定波长 : 2 4 0
n m
, 记录仪纸速 : 2 . 5 m m /m i n 。
2
.
2 标准 曲线的绘制 : 精密称取 10 m g 桅
子昔 , 以 5 0% 甲醇溶解并定容到 25 m L 。 从
中吸取 0 . 2 5 、 0 . 5 、 1 . 0 、 2 . 5 、 5 . 0 m L 分 别稀
释至 1 0 m L , 于 1 5 0 0 0 r / m i n 下离心 1 5 m i n 。
吸取上清液 , 进样 20 拼L , 以进样量 X 为横坐
标 , 峰面积 Y 为纵坐标作图 ,得回归方程为 Y
= 7 3 4 8 2
.
5 7X + 2 7 1 0
.
2 0
, r = 0
.
9 9 9 4
。 进样
量在 0 . 2一 4 拌g 范围内线性关系 良好 。
2
.
3 样 品测 定 : 称 取去糖 衣的清 火桅麦片
1 0 片 ,其平均素片重为 0 . 25 9 。 称取桅麦片
粉末约 0 . 5 9 ,精密称定 , 用 乙醚于索氏提取
器中提取至乙醚无色 。弃去 乙醚液 , 残渣挥干
乙醚 , 再用 50 % 甲醇超 声波振荡提取 2 次 ,
每次 2 0 m L , 振荡 15 m in ,合并提取液并定容
到 5 0 m L 。 取适量 , 于 1 5 0 0 0 r /m i n 下离心
15 m in
。 吸取上清液进样分析 , 结果见表 1 。
2
.
4 重现性和精密度试验 : 依样品测定项步
骤对 同一批 号 ( C 药厂 9 6 0 3 1 4) 样 品重复分
析 5 次 , 测得每片含量 ( m g ) 分别为 : 0 . 9 8 0 、
0
.
9 5 5
、
0
.
9 8 3
、
0
.
9 3 5
、
0
.
9 5 0
,
R S D 为
2
.
1 3 %
, 表明重现性较好 。 -
取 标 准 品 适 量 用 50 % 甲 醇 溶 解 , 于
A d d r e s s
:
L i u H u a g a n g
,
G u a n g x i C o lle g e o f T r a d i t i o n a l C h in e s e M e d i e i n e
,
N a n n in g
刘华钢 女 , 1 98 2 年毕业于广西 中医学院药学系 , 获 医学 学士学位 。 1 9 8 4 年 9 月一 19 8 6 年元 月在中国药科大学进修 ,
1 9 8 7 年 9 月一 1 98 8 年 7 月在广西 大学 电算英语 培训班学 习 , 1 9 9 6 年 3 月 ~ 1 9 9 7 年 6 月在广西 中医学院中医药硕士研究生班学习 , 1 9 9 7 年 12 月晋升为中药药 剂学 教授 ,现 任广西医科大学副校长 。 研究方 向为 中药 、 民族药 的新 制剂 、 新 剂型 开发及
质量控制 。 主要科研成果有开发转让保健食品 3 次 , 药械用品 1 项 , 发表 “ 银黄片的体外 溶出速率研究 ” 及 “ H P L C 法测定芒果止咳片中芒果昔的含量 ” 等论 文 40 余篇 , 主编或全编 “ 中成药学 ” 等教材及教学参考 书 7 本 。
` “ 本校九三级实习生
《中草药 》 1 99 8 年第 2 9 卷第 12 期 . 8 0 3 ·
1 5 0 0 0 r /m in
复 进 样 5 次 ,
下离心 1 5 m i n , 进样 2 0 拜L , 重
测 得 峰 面 积分 别 为
1 5 2
、
5 6写 。
3 0 9 6 9
、
3 1 0 8 4
、
3 2 1 8 6
,
3 1 3 3 8
、
R S D 为
说明仪器精密度 良好 。
表 1 清火桅麦片中桅子昔的含 t
测定结果 (n 一 3)
厂家 批号 每 片含量 王
A
B
C
D
9 6 0 7 0 6
9 6 0 7 0 2
9 6 0 3 14
9 7 0 10 5
9 7 0 10 9
0
.
3 4 5
0
.
4 6 3
0
.
9 3 5
2
.
9 4 8
5
.
6 3 5
( m g )
0
.
3 7 0
0
.
4 5 3
0
.
9 8 0
2
.
9 3 8
5
.
2 8 8
0
.
3 5 3
0
.
4 8 5
0
.
9 5 5
3 0 3 8
5
.
2 3 8
( m g )
0
.
3 5 6
0
.
4 6 7
0
.
9 5 7
2
.
9 7 5
5
.
3 8 7
3
.
5 1
2
.
3 6
1
.
8 5
4
。
0 1
2
.
5 加样 回收率实验 : 称取去糖衣的清火桅
麦片 ( C 药厂 9 6 0 1 10 ) 粉末 5 份 ,每份约 0 . 2 5
g
, 精密称定 , 同时加 人 .l O m g 桅子昔标 准
品 ,依样品测定项步骤进样分析 。其结果平均
回收率为 97 . 4 % , R S D 一 1 . 61 % 。
2
.
6 稳定性实验 : 取去糖衣的清火桅麦片粉
末 0 . 5 9 ,依样 品测定项步骤制备样品 , 每隔
l h 进样分析 , 共 5 次 。 测得其峰面积分别为
2 1 6 1 0
、
2 2 4 6 4
、
2 2 3 5 6
、
2 2 6 1 0
、
2 2 8 7 5
, 平均
为 2 2 3 8 3 , R S D 为 2 . 1 2 % 。 表明样品 4 h 内
稳定 。
3 讨论
3
.
1 检测波长的选择 : 紫外可见分光光度计
扫描桅子昔的最大 吸收波长为 2 39 . 2 n m , 同
时也参考 了一些 文献 〔 2一 ’ 〕 , 确定本方 法的检
测波长为 2 4 o n m 。
3
.
2 提取方法 的优选 : 直接用清火桅麦片水
提液进样分析 , 结果显示桅子昔峰无法 与杂
质峰分离 。 我们先将样品用乙 醚索氏提取除
去大部分脂溶性的杂质 , 而桅子昔在 乙 醚中
溶解度极小 , 提高了分离效果 , 同时也在一定
程度上保护了色谱柱 。
用蒸馏水 、 乙 醇和 5 0环甲醇分 别提取 ,
结果发现 5 0% 甲醇提取效果较好 ,分析纯乙
醇提 取液桅子昔分离效果不好 ,水提取含量
较低 。
乙醚去杂质后 ,分别采用索氏提取 、 加热
回 流 、 超声 波振荡法 ( 皆用 50 % 甲醇 ) 提取 ,
结果显示后者效果较好 ,提取较完全 。
分别采 用超声波振荡 提取方式 , 50 % 甲
醇振荡 2 次 ( 2 0 、 2 0 m I J ; 1 5 分 /次 ) 、 振荡 3 次
( 2 0
、
1 0
、
1 0 m L ; 1 5 分 /次 ) 及振荡 4 次 ( 1 0 、
1 0
、
1 0
、
1 0 m L ; 1 5 分 /次 ) ,结果显示无明显 区
别 ,故选择 2 次提取的方式 。
3
.
3 本文流动相水与 甲醇的 比例与某些有
关桅子昔的文献 〔“一 7〕记载有些差异 。 甲醇比
例相对高些 ,方 可在本文分析条件下取得较
短的保留时间 , 同时又可与杂质峰分开 。
3
.
4 经测定 ,理论塔板数按桅子昔峰计算为
2 6 3 4
, 说明柱效 良好 。
3
.
5 实验结果表明 , 不同厂家不同批号清火
桅麦片中桅子昔 的含量相差甚远 。 分析其原
因可能因原料来源 、 加工 、 原料贮藏 、 厂家生
产质量把关程度不 同 , 影响其 中含量 。 因此 ,
建议制定原料药桅子 中桅子昔的含量标准 ,
以利于生产投料参 考 ; 规范清火桅麦 片生产
工艺 , 从而更好地控制清火桅麦片的质量 。
参 考 文 献
1 广西药 品标 准 . 1 9 8 4 : 2 4 9
2 赵 淑杰 . 中国中药 杂志 , 19 9 4 ; 1 9 ( 10 ) : 6 0 1
3 赵 淑杰 . 中草 药 , 1 9 9 5 ; 2 6 ( 4 ) : 18 2
4 赵 淑杰 . 中药 材 ; 1 9 9 4 ; 1 7 ( 1 2 ) : 24
5 韩 晋 . 中国药学 杂志 , 19 9 5 ; 3 0 ( 3 ) : 1 6 6
6 刘 燕 . 中国中药杂志 , 19 9 3 ; 18 ( 5 ) : 2 9 8
7 刘华钢 . 中成药 , 1 9 9 5 ; 1 7 ( 5 ) : 3
( 1 9 9 8
一
0 5
一
0 6 收稿 )
D e t e r m i n a t i o n o f g e n i P o s id e i n Q i n g h u o Z h im a i T a b l e t s b y H P L C
一
D e n s i t o m e t r y
L i
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H
u a g a n g
,
C h e n Y a n j u n
a n d M
a o J ia n (G u a n g x i C o l l e g e o f T r a d it i o n a l C h in e s e M
e
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,
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5 3 0 0 0 1 )
A b s t r a e t C
o n t e n t o f g e n i p o s id e i n Q i n g h
u o Z h im a i t a b l e t ( Q ZM ) w
a s d e t e r m i n e d b y R P
一
H P L C w i t h
t h e u s e o f e x t e r n a l s t a n d a r d
·
C o n d it i o n s fo r t h e e x t r a e t io n a n d d e t e r m in a t i o n o f g e n ip o s id e f r o m Q ZM w
e r e
o p t im iz e d
.
R e s u l t s s h o w e d t h a t t h e s a m p le s s h o u l d b e w a s h e d w i t h e t h y l e t h e r t o r e m o v e f a t t y im p u r i t ie s a n d
.
8 0 4
.
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e n o x t r a e t e d w i t h 5 0 % m
e th a n o l w it h t h e a id o f u l t r a s o n i e w a v e
.
S
a m p le s f r o m f iv e d if f e r e n t m a n u f a e t u r e r s
w e r e d e t e r m i n e d
.
T h e i r g e n ip o s id e e o n t e n t s v a r i e d f r o m 0
.
3 5 6 m g / T
a b
,
0
.
4 6 7 m g / T
a
b
,
0
.
9 5 7 m g / T
a
b
,
2
.
9 7 5 m g / T
a
b
a n d s
·
3 8 7 m g /T
a b
·
T h e a v e r a g e r e e o v e r y w a s 9 7
.
4 %
a n
d R S D = 1
.
6 1 %
.
K e y w o
r d s Q i
n g h u o Z h im a i t a b l e t s (Q Z M ) g
e n ip o s i d
e
R P
一
H P L C
用均匀设计法优选侧柏叶中棚皮昔的提取纯化工艺
中国药科大学 (南京 2 10 0 0 9) 曾 诊 沐 易登录 吴洪元 黄炳生 ` “
摘 要 用均匀设计法优选 了侧柏 叶中棚皮昔 的提取纯化 工艺 。 结 果表 明 : 乙醇浓 度 、 用 量 、 浸 泡
时 间以及 水的用量 、 萃取溶剂体积对棚皮昔 得率都有直接 的影 响 ;而 氛化钠及 p H 值对得率影 响不
大 。
关键 词 均匀设计法 侧柏 叶 懈皮昔 双波长薄 层扫描法
侧柏叶性 味苦 、 涩 , 微寒 , 有凉血止血作
用 。 据报道侧柏叶中的止血活性成分是棚皮
昔 〔` 〕 。 我们用均匀设计法研究懈皮昔提取纯
化工艺 〔2 , 3 〕 。 采用双波长薄层扫描法来测定侧
柏叶中各设计方案 中懈皮昔的含量 。 该研究
将使均匀设计法在对优化提取有效成分得率
上提供了一些参考数据 。
1 实验部分
1
.
1 药材 : 侧柏叶 1 9 97 年 4 月及 1 9 9 7 年 5
月分别采于中国药科大学校 园和南京市中山
陵 , 经 鉴 定 为 侧 柏 p l a t夕 c l a d u s o r i e n t a l i s
( L
.
) F ar
n c 。 的干燥枝梢及叶 。
懈皮 昔 q u e cr it ir n 对 照品 : 华西 医 科 大
学提供 。
其余试剂均为分析纯 。
1
.
2 仪器 : 岛津 C S 一 9 0 0 0 型 双波 长薄层 扫
描仪 , 十万 分之 一分 析天 平 ( R ZO OD , S a r t o -
r i u s r e s e a r e h )
,
U V
一 亚型三用紫外分析仪 (北
京凯星电讯设备研究所 ) 。
2 实验方法
2
.
1 优选提取纯化工艺
2
.
1
.
1 提取方法的选择 : 比较了水提与醇提
取侧柏叶中的懈皮昔的含量 , 以醇提含量高 。
又在生药量 、 醇的浓度 、 醇的体积及提取后的
纯化步骤完全相 同情 况下 , 比较了热回 流提
取法 、 索氏提取法 、 渗流法 、 室温浸渍法对有
效成分 的影响 。 实验结果 以渗辘法提取棚皮
昔含量较高 (表 1 ) , 且杂质少 , 确定 以渗流法
作为均匀设计的提取方法 。
表 1 不同提取方法对侧柏叶 中
彬皮昔含且的影响 (n 一 3)
提取方法 索氏提取 渗流 室温浸渍
榭皮昔 (% )
热回流
0 13 59 0
.
1 28 7 0
.
14 80 0
.
1 15 2
水提取
0
.
0 75 83
2
.
1
.
2 优选提取纯化工艺 : 经试验选用渗渡
法作 为均匀设计提取方法 , 以懈皮昔为检测
指标 , 设计侧柏叶的提取纯化工艺 。首先以乙
醇浓度 、 用量 、 浸 泡时 间考察侧柏 叶提取 工
艺 , 根据所得 的最优条件 ,选择 加水量 、 加氯
化钠 量 、 调 p H 值 及萃取溶剂体积 4 个 因素
再次运用均匀设计探讨这些 因素对纯化工艺
的影响 , 提取纯化 的因素水 平表见 表 2 。 U S
( 5
4
)试验及结果见表 3 。
2
.
2 侧柏叶中懈皮昔的测定
2
.
2
.
1 标 准 曲线 的绘制 : 精密称取棚 皮昔
1
·
8 6 m g
, 配成 1 · 86 m g /m L 的醇液 ,精密吸
取 1 . 0 、 2 . 0 、 4 . 0 、 5 . 0 、 6 . 0 、 8 . 0 、 1 0 . 0 拜L 点于
薄 层板 上 , 以 乙 酸乙 醋 一丙酮 一甲酸一水 ( 80 :
1 5 , 5 , 5 )为展开剂 , 展开 , 晾干 , 紫外灯 2 54
A d d e r s s
:
Z e n g Q
u a n , C h in a P h a r m a e e u t i e a l U n i v e r s i t y
,
N a n ji n g
, 二 本校 97 届毕业生
《中草药 》 1 9 9 8 年第 2 9 卷第 1 2 期 · 8 0 5 ·