全 文 ：松籽壳酸性多糖生物学作用的研究
白求恩医科大学基础医学院 (长春 130 0 2 1 ) 侯 芳玉 . 孙延波 盛学成
吉林省医药工业研究所 于清华
摘要 通过对松籽壳酸性多糖 (简称S T 。。 ) 生物学活性的研究 , 证明ST 。 。具有较强的抗肿瘤、
抗菌和抗病毒作用 , 能明显抑制小鼠 5 18 0实体瘤的增殖 、 降低鼠伤寒杆菌感染小鼠的死亡 率 、
对 a d y 。、 a d v 7 、 v sv和C B 一感染的FL 细胞有明显的保护作用 。
关健词 松籽壳 多糖 抗肿瘤 抗菌 抗病毒
松树的许多部位或成分都可以入药 , 如松节 、 松叶 、 松油 、 松香 、 松根和松球〔1〕。早在
民间就流传用松籽壳煮水治疗胃癌 , 但未见有关松籽壳及其提取物药理 牛厂的研究报道 。 我
们从长白山区产的松籽壳中提取 一种酸性多糖 , 并对其生物学活性进行初步研究 。
1 材料
细胞 : 人羊膜细胞 (F L 、, 本室保存 。 病毒株 : 腺病毒 3型 (a d v 3) 、腺病毒了型 ‘a小 · 7 ) 、
柯萨奇病毒 B 4 型 ( C B 4 、、 水 泡性口 炎病毒 盯; s 、 ) , 均为本室保存毒株 。 菌株 : 鼠伤寒杆
菌 , 本室保存 。 S ] 8 0 瘤株 : 由吉林省医药工业研究所提供 。 培养液 : IM D M 培养墓 、 美 国
G IB 公司产品 。
动物 : S w is “小鼠 , 体重 20 士 2 9 , 雌雄兼用 , 用本校实验动物部提供 。
药物 : S T 。。系从长白山区采集的松籽壳中提取 , 呈棕色颗粒状 , 由吉林省医药 工 业 研
究所提供 。 将药品用蒸馏水浸泡 , 水浴煮沸 lh , 离心去沉渣 , 然后将上清液调至Z o m g / m l ,
滤过除菌 , 置冰箱备用 。
2 方法
2
.
1 S T
。。对小鼠51 8 。实体瘤的抑制作用 : 小鼠随机分成 5组 。 盐水对照组 , 腹胜注射生理盐
水 0 . 2 m l/ 只 : S T 。。治疗组 : 共分 3个剂量组 , 分别腹腔注射 S T 。。 25 m g / k g 、 50 m g / k g 、
7 5 m g / k g ; 5
一氟脉嚓陡 ( 5一F u ) 组 , 腹腔注射 5一F u 15 o m g / k g , 连续注射 一o d 。 于开始后
第 2天 , 在小 鼠左前腋下接种 5 18 0肿瘤细胞 1 x l。“/ 。. 】m l, 第 1 天杀鼠 , 分分取 肘疤和 胸
称湿重 , 观察S T 。。对小鼠5 1 8 0实体瘤 的影响。
2
.
2 ST
。。对小鼠免疫功能的影响 : a ) S T 。。对荷瘤小 鼠免疫功能的影响。 在杀鼠取肿 瘤 和
胸腺的同时 , 以无菌方法取小鼠脾细胞按常规方法作“H 一T d R 掺入法淋巴细胞转化 试 验 。
b ) 用含不 同浓度的S T 。。营养液作“H 一T d R 掺入法淋巴细胞转化试验〔“〕 , 观察 S T 。。在体外对
小鼠脾细胞转化的影响 。
2
.
3 S T 。。对小 鼠抗菌作少月的影响 : 将不同剂量的S T 。。经腹腔给小鼠注射 , 每日一次 , 连续
8d
, 对照组注射生理盐水。. 2 m l/ 只 , 停药次日用 4 . 5 X l o 7 /0 . l m l鼠伤寒杆菌经腹腔感染小
鼠 , 以小鼠的生存率表示小鼠抗菌能力 。
2
.
4 S T 。。抗病毒作用 : a ) 毒性剂量 的测定 : 用含 20 %小牛血清的IM D M分别配制 S T 。。不
同浓度的维持液 , 培养F L 细胞4 8 h , 光镜下观察细胞生长状态并按中性红染料摄入法〔”〕测
定各浓度下 F L细胞存活量 , 选择对 F IJ细胞无毒剂量 S T 。。作实验 。 b ) 实验方法 : 将事先选
*
A d d r e s s
.
H o u F a n g y u
,
D e Pa r t m e n t o f M ie r o b io l o g y
,
N o r 。飞a n B e t h u ‘l e U n i v e r si t y o f
M
e d ic a l S e ie n e e s
,
C h a n g c h u n
《中草药 》1 9 9 5年第26 卷第 4 期 · 19 3 ·
择好对FL 无毒剂量的sT 。。用20 %小牛血清 IM D M配制成维持液 , 加入到培养的F L细 胞 孔
内 , 18 h 后以病毒 l o 0 T C ID S。 ( 50 %感染单位 ) 0 . lm l攻击 , 同时设病毒对照组和 正常细胞
对照组 , 每组均设 10 个平行孔 , 2 4 ~ 48 h后 , 待病毒对照孔出现病变材 + 一 * 十 + + 时 , 以中性红
染料摄入法测定其在波长5 40 m m 下的O D 值 , 观察S T 。。对病毒增殖的影响 , 结果以对细胞保
护率来表示〔‘〕。
3 结果
3
.
1 S T
。。对小鼠S , : 。实体瘤有明显抑制作用 , 50 m g / k g 、 75 m g / k g组小鼠体重增长比 盐水
组快 (尸 < 0 . 05 ) , 5一F u 组小 鼠体重增长与盐水组相 比没显著差异 ( 尸 > 。. 0 5 ) , 5一F u 十
S T
。。组小 鼠体重增长比 5 一F u 组快(尸< 0 . 0 5 ) 。 5 一F u 和 S T 。。治疗组小 鼠的瘤重明显低于 盐水
组 (尸 < 0 . 0 1 ) , 但 5一F u 组胸腺明显缩小 (尸< 0 . 05 ) 。 5 一F u + S T 。。组较单纯 5 一F u组抑 瘤
作用增强 , 胸腺增大 , 接近盐水组 (表 1 ) 。 表明sT 。。不仅单独使用有抑瘤作用 , 而且 还 可
以加强 5 一F u 的抑瘤作用 , 拮抗 5 一F u对胸腺的抑制作用 。
表1 ST 。。对小限5 18 0实体启的抑制作用
药物与剂量 (m g / k g ) n 体重 ( g ) 瘤重 (也g ) 胸腺重 ( m g ) 抑瘤率 ( % )
生理盐水。. 2 m l
S T o
o
2 5
5 0
7 5
5
一
F u 2 5 0
S F u + S T
o o
( 1 5 0 + 5 0 )
1 0 2 5
。
7 土 4 2 2 1 1 。 3 士 3 6 3 。 8 。 1 1 士 0 。 0 3
.⋯,O盛任了二nJ,任匀1 01 0l 0
1 0
2 8
。 2 士 4 。2
2 9
。
1 土 2 . 5 .
2 9
。 6 士 2 。3 .
2 3
。
3 士2 。7
1 4 7 7
。
4 士 4 1 6 。 9 . *
1 2 2 4
。
5 士3 7 3 。 8 * *
1 1 6 1
。
4 士 2 2 4 。 2 * .
1 0 8 3
。
7 士 2 9 1 . 6 * .
0 。 1 4 士 0 。 4 1
0 。 1 2 土 0 。0 2
0
。
1 4 土 0 。0 3
0 。0 5 士0 。 0 1 *
10 2 6
.
2 土 3 。 通‘ 7 0 3 . 2 土5 2 0 . 7助 0 。 1 0 士 0 。 0 3她
与盐水组相比 中尸< 。. 05 * . 尸< 。. 01 与5 一F u 组相比。尸< 0 . 05 。尸< 。. 01
3
.
2 S T
。。对荷瘤小鼠的免疫功能有明显的促进作用 。 治疗组小鼠脾细胞对有丝分裂原刺激
的反应性显著高于对照组 ( 尸< 0 . 0 1 ) , 25 、 50 m g / k g 组与对照组比 自发转化率显著 高 于
对照组 ( 尸 < 0 . 0 1 ) 。 表明S T 。。对荷瘤小 鼠T 、 B 淋巴细胞的增殖有促进作用 。 而 5一F u 治
疗组小 鼠脾细胞对 C o n A 和 L PS的反应性低 , 5 一F u + S T 。。组小 鼠脾细胞对有丝分裂原的反
应性 比单纯 5一F u 组反应性显著增高 ( 尸< 0 . 0 1 ) , 表 明S T 。。可以拮抗 5一F u 对小鼠免疫功能
的抑制作用 ( 表 2 ) 。
3
.
3 S T
。。在体外对小鼠脾细胞转化有明显的促进作用 。 S T 。。在体外脾细胞培养中可显著 增
强C o n A 和 L P S的有丝分裂原作用 , 50 和 10 0协g / m l剂量具有丝分裂原效应 , 可使脾细胞自发
转化率增高 , 说明s T 。。对 T 、 B 淋巴细胞的功能有促进作用 ( 表 3 ) 。
3
.
4 鼠伤寒杆菌感染后 , 小 鼠的死亡情况 ( 表4 ) 。 用鼠伤寒杆菌感染小 鼠后 , 给药组小鼠
生存率为 70 %和 80 % , 而对照组小鼠生存率仅为 20 % , 重复实验结果相近 , 证明s T 。。能提高小
鼠抗感染能力。
3
.
5 毒性剂量测定结果表明S T 。。在 1 0 0 0件g / m l浓度 以内均未见到对F L细胞生长 有 抑 制 作
用 , 在 80 ~ 15 8 林g / m l浓 度 范围内 , 细胞生长状态 、 活细胞数略多于正常细胞对照组 ( 图 1 、
图 2 ) 。
3
.
6 先加入 S T 。。 ( 10 。卜g / m l) 培 养F L 细胞 1 8 h后再感染不 同病毒 。 细胞存活的量和生长
. 工9 4 .
巴细胞的分化和繁殖 。 T 细胞是执行细胞免痊功能 , 其 ‘卜T c 亚群可直接杀伤肿瘤细胞 ; T H亚群
功能增强 , 可使 IL 一 2分泌增加 , 而IL 一 2能保持 T 细 胞 存活与增殖 , 促进T 细胞产 生 淋巴因子 ,
增加诱导杀伤性 T 书袍 、N K 夕邵胞 、 L A K 细胞 的活性 , 这些细胞对肿瘤细胞都具有杀伤作用〔5 〕。
5 一F u 虽然对小 鼠5 1 8 0实沐瘤有抑制作用 ,但小鼠体重减轻 , 胸腺明显缩小(尸< 0 . 0 1) , 说明
对小鼠的增长和免疫器宫有抑制作用 , 这不利于小鼠发挥其抚病能力 , 恢复健康 。 sT 。。与 5 一F u
合并使用可拮抗 5一F u 对免疫器官的抑制作用 。 S T 。。具有抗菌和抗病毒作用 , 可明显降低鼠伤
寒杆菌感染后小 鼠的死亡率 , 这种抗菌作用也与增强小鼠免疫功能有关 。在体外培养的F L 细
胞中 , 在营养液中加入 S T 。。后可 , 保护F L 细胞抵抗 a d v 3 、 a d y , 、vs v和 C B ‘的感染, 特别是
对vs v 和 C B ‘感染的保护作用更佳 、许多人研究证明多种中药可促进干扰素等细胞因子的产生
〕, S T 。。抗病毒作用 沉理是阻止病毒复制的某环节还是促进细胞产生干扰素 , 有待进一步研
究 。 目前病毒性疾病尚缺乏有效 的治疗药物 。本研究结果初步为 sT 。。临床应用提供一条线索 。
参 考 文 献
2
吕
江苏新医学院编 . 中药大辞典 . 上册 。 上海 : 上
海科学技术出版社 , 1 9 8 5 . 12 5 2 .
张惠芸 , 等 . 中国中药杂志 。 1 9 9 2 。 1 7 ( ‘ ) : 3 0 7
常雅萍 , 等 。 中国中药杂志 , 1 9 8 , , “ ( 2 ) : “
侯云德 , 等 。 干扰索及临床应用 。南京 : 江苏科
学技术出版社 , 1 08 1 。 1 8 9
B ra a k m a s e t a l
。
C a llu la r Im m u n o l o g y
,
19 8 6 , 9 9 4 7 6
( 1 9 9 4一0 4
一 0 9 收穗 )
(上接第 18 6页)
随机按就诊先后分治疗组和对照组。 治疗 组97 例 ,
其中男63 例 , 女34 例 , 年龄最大61 岁 , 最小2岁半 ,
病程1 ~ 7 d , 皮损主要在暴露部位 , 其中57 例合并有
继发性感染 。 对照组 35 例 , 其中男21 例 , 女 14 例 ,年
龄‘. 0一 5 7 岁 , 病程 i一 7 d , 继发性慈染 1 5例。
5
.
2 治疗方法 : 治疗组用蛇参止痒剂 , 3 ~ 6次/ d 讣
擦 : 对照组用 3 0 %酒精 , 3 一 6次 / d 外擦 , 观察2 周。
疗效评定标淮 : 参照江苏省卫生厅编著 “疾病
临床诊断和疗效标准 ” 。 治愈 : 全部消退 , 不痒 ,
可有暂时性色素沉着 。
5
.
3 治疗效果 : 治疗组97 例全部治愈 。 治愈 时 间
平均 3 . d d 。 感染带脓患者治愈较慢。 治愈 病 例 中
对84 例1个月后随访 , 未见复发 。 对照组 35 例 , 经
30 写酒精治疗 1周 , 止痒只有一过性作用 , 病情未
能控制 , 仅 1 例搔痒减轻 。 两组疗效经统计 学 处
理 , 差异非常显著 ( P < 0 . 0 1 ) 。
6 讨论
蛇参止痒剂内含苦参 , 蛇床子 , 百部 , 花椒等
中草药 , 具有清热解毒 , 凉血祛风 , 止痛消肿 , 燥
湿等作用 。 对虫咬皮炎有消炎止痒 , 收敛 , 减少渗
出 , 防止感染 , 促进创面愈合等作用 。 通过临床观
察 , 治疗组明显优于对照组 , 能缩短病程 , 有的病
人用药3 ~ s m in 即可见效 。 具有明显的消炎止痒作
用 , 对合并化脓性感染也有效果 。 此方剂不仅对虫
咬伤皮炎有效 , 同时对 I一 I 。 烧伤有效果 , 对足
癣亦有一定的作用 , 且无明显副作用 。
(1 9 9 4一0 2一2 5收稿)
《贵阳中医学院学报 》征订启事
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床 , 提高兼顾普及 , 辟有 ‘学术探讨” 、 “老中医经验” 、 aI 右床经验 ” 、 “针灸” 、 “医案 医话 , 、
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一
19 G -
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( o ri g in a l a r t ic le o n Pa g e 1 8 3 )
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·
h e n a n d e u lt iv a t e d T a id a n g s h e n
.
R e su lt s sh o w e d t h a t ta n sh e n o sid e 1 in c u lt iv a t e d L u d a n g
-
s h e n d e e r e a s e s w ith in c r e a s e d y e a r s o f c u ltiv a t io n h is to r y w h ile t h a t 10 c u lt iv a t e d T a id a n g s
-
ih e n 15 slig h t ly lo w e r t h a n t h a t o f L u d a n g sh e n o f t h e s a m e y e a r s o f e u ltiv a t io n
.
T a n s h e n o s
·
d e 1 in w ild T a id a n g s h e n 1 5 a l so lo w e r t h a n t h a t in e u lt iv a te d T a id a n g s h e n
。
( o r ig in a l a rt ic le o n p a g e 1 8 5 )
St u d y o n B io lo g ic a l E ffe e t s o f So n g z ik e A e id ic P o lys a c c h a r id e
H o u Fa n g y u
,
Y u Q i n g h u a
, e t a l
T h e b io l o g ic a l e ff e c t s o f S o n g z ik e a e id ie p o ly sa c e h a r id e ( S T g o ) , e r e st u d i e d i n v iv o a n d
v it r o
。
It w a s f o u n d t h a t S T 9 0 h a d d i sr in c t a n ti n e o Pla st ie
, a n t iba c t e r ia l a n d a n t iv ir a l e ff e c t s
。
, 1 m a rk e d ly i n h ib it s Pr o lif e r a t io n o f 5 1 5 0 s o lid tu m o r i n m ic e a n d r e d u c e s t h e m o r t a lit y o f
m ic e in f e c te d b y S a lm o ”e lla *夕Ph‘沉“ r ‘“ m , a n d s h o w s a Pro t e c tiv e e ffe e t o n F L c e lls i n f e e t ·
e d w it h a d y 一 、 a d y , , v s v a n d C B 一 。
( o r ig in a l a r t ic l. o n Pa g o 1 9 3 )
P r o t e e t iv e E ffe c t o f T e a Po lyPhe n o l o n R a t My o e a rd ia l
In ju ry In d u c e d by Iso Pr o te
r e n o l
T a n g S h e n g x in g , Y . T i n g
,
Z h a o Z h e n g d o n g
I : e tr e a t功 e o t w it h t e a P o ly Ph e n o l ( T P ) a t a d o s e o f z o m g / k g ip t o r a t s fiv e d a y s b e fo r e
i so Pr o t e r e n o l ( 1 5 0 ) e h a ll e n g e ( i m g / k g
s e , f o r tw o d a y s )
, r e su lt e d in d e e r e a s e o o f m a l o n y d
-
ia一d e h y d e e o n c e n t r a ti。 n , c r o a ti n e p h 。 : p h 。 ki n a s e , la 。t ic d e h y d r o g e n a o e ( L n H ) a n d Lb H : ,
a c t iv it ie s , i n c r e a s e d L D H
:
/ L D H
, ra t io a n d in h ib it e d t h e e x re n t o f m y o c a r d i a l i n ju
r y
, s im il
-
a r t o th e a c t io n o f P r o P r a n o l
.
A t t h e s a m e t im e T P d e c r e a s e d r a t Pla s m a r e n in a c t iv it y
。
T h e r e s u lts s u g g e s te d th a t t h e m e c h a n i s m b y w h ic h T P Pr o t e c t s h o a rt fr o 位 1 5 0 一 i n d u e e d m -
y o c a rd ia l in j
u r y 15 d u e to it s a n t io x y g e n fr e e r a d ic a l a n d i n h ibit io n o f r e n in a e t iv it ie s
.
( o r ig in a l a rt ie le o n P a g e 1 9 7 )
E ffe e t s o f E m o d in o n t he C yto Pla sm ie fr e e C a
么+
in P e r it o n e a l M a c r o Pha g e s F r o m Mie e
C 、1 1 R o n g f e n , L i n X iu z ll e n
.
2 24
.