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铁皮石斛多糖的提取、分离和分析



全 文 :铁皮石解多糖的提取 、 分离和分析
中国科学院华南植物研究所 广州    。
中山医科大学肿瘤研究所
黄 民权  黄 步汉
蔡体育 刘庆伦 李 端 陈爱珍
摘英 从铁皮石解中提取制备一种水溶性多糖物质 , 具有显著性增强免疫功能的效应。 其单糖组
分由 一木糖 、  一阿拉伯糖和 一葡萄糖组成 , 多糖含量达    。
关键询 铁皮石解 名糖  一木糖  一阿拉伯糖  一葡萄糖 多糖含量
石解是一种贵重的中药 , 《药性论 》谓石解益气除热 , 补肾益精 。 《本草 》谓石解益精
强阴 , 壮筋补虚 。 中药石解是指金钗石解     佃   !等多种同属植物的茎 。产于 安徽
霍山的“霍山石愈” 向来被认为是石解的上品。近年的研究已证实  “霍山石解” 实际上是包
括铁皮石解       “        !  等在内的  种石解属植物〔〕。
石 解药用有效成分的研究 , 已分离出石解碱           , 并对其生物碱方面作了
大量研究工作〔一 〕。 但尚未见其他学者关于该属植物水溶性多糖的研究报道 。
石解药用强壮的功效引起了我们对其水溶性多糖类的兴趣 。 我们对铁皮石解进行了提取
分离 , 分析及药理试验 。 药理试验结果证实它能增强机体的免疫功能 。 本文首先报道在化学
方面的一些研究结果 。
 材料
所有植物材料采集于华南植物园兰圃 。 薄层层析用硅胶 系青岛海洋化工厂产品。 化学
鉴定采用标准的单糖样品对照 。
 方法
   铁皮石解多糖的提取 、 分离和制备  风千植物材料粉碎后甲醇回流除去杂质 , 药 渣热
水提  次 , 合并水提液 , 减压浓缩 , 加  倍  乙醇静置过夜 , 分出沉淀物溶于 蒸 馏水 ,
    法脱蛋白〔〕。 上清液加  倍 乙醇 , 收集沉淀物依次用无水乙醇、 丙酮 、 乙 醚 洗
涤 。 挥去溶剂 , 真空千燥得粗制品 , 收得率为风千材料重的  。 粗制品溶于热水 , 滤去不
溶物 , 滤液用嗅化十六烷基三甲胺     络合精制〔幻 , 得精制品供分析及药 理 试验 。
   红外光谱测定  使用  一 仪器 , 样品用嗅化钾压片法测定 。
   多糖的单糖组分的分离和鉴定  样品用    硫酸水解 , 碳酸钡中和 , 滤液 浓 缩
后作薄层层析和高压液相色谱分析 。 薄层层析法用硅胶 以      一 调糊 , 按常规制
板   、     ,   ℃活化  。 使用  对不同的展开剂   醋酸乙酷 醋酸一甲醇一水   ,
      ,  氯仿一甲醇一水        。 苯胺一邻苯二甲酸显色 , 对照标准样 品 的 , 值
定性 。 高压液相色谱法采用            仪 , 酪专用分析柱少        , 流动
相 乙睛一水   。    , 流速        , 柱温   ℃ 。 在相同的色谱条件下对照糖的标 准
样品的保留时间定性 。 各单糖组分的相对百分含量根据其积分的峰面积计算 。
   铁皮石解多糖含量的测定  取风千样品粉碎 , 精密称取样品 , 经石油醚     ℃ 
脱脂  次 。 挥去溶剂 , 经多次  乙醇热浸提除去醇溶性糖等 , 水浴温度 ℃ , 直至浸出液
·                   ,                           ,                         ,
        
用硫酸蕙酮试剂检查呈无糖反应为止 。 再将残渣用热水反复多次浸提 , 水浴温度 ℃左右 ,
至热水 浸出液用硫酸葱酮试剂检查呈无糖反应为止 。 合并所有的热水浸提液 , 在  ℃ 水 浴
上真空浓缩至适当浓度 , 加  活性炭脱色 , 过滤 。 滤液定容配制成样品的待测分析液 。 采
用硫酸葱酮试剂比色法测定其多糖的含量  以相当于葡萄糖的量表示 川 。 使用   分 光光
度计 , 葡萄糖标准样品作对照测定标准曲线 。 同时测定样品的含水量 , 多糖的含量 以绝对千
物质计 。
美花石解           ! , 兜石解   少 “ 以同样的方法测定其多糖的含量 。
 结果与讨论
   铁皮石解多糖的理化性质  呈灰白色粉末 , 易溶于水 , 不溶于甲醇、 乙醇 、 丙酮 和 乙
酸 乙醋等有机溶剂 。 本品在水解前与裴休  比    试剂呈负反应 , 水解后与裴林试剂呈
正反应 。 取本品  的水溶液微量 , 点于滤纸上 , 用高碘酸一希夫    试剂染色 呈 红
紫色斑点 。 红外光谱显示典型的多糖的特征吸收 。
   铁皮石解多糖的单糖组分分析样品以  个不同的展开剂系统进行薄层层析均显 示  个
斑点 , 其 , 值分别同 一木糖 、  一阿拉伯糖和 一葡萄糖 的标准样品一致 。 高压液相 色 谱 分
析得到  个单糖组分的峰 , 在相同的色谱条件下 , 其保留时间分别同标准的 一木糖 ,  一 阿拉
伯糖和  一葡萄糖一致 。  个单糖组分的相对百分含量分别为 一木糖 工    ,  一阿 拉 伯 糖
    ,  葡萄糖     。
   铁皮石解水溶性多糖的含量高达     , 同时测定的其它种石解属植物 的水 溶 性多
糖含量如下  美花石解     , 兜石解     。 由此可见铁皮石解多糖的含量相 对 来 说 是
较高的 , 无怪乎铁皮石解长期以来被作为珍品 “霍山石解” 的原植物之一 。
   从担子菌 、 地衣及高等陆生植物中发现一些多糖具有免疫增强作用〔 〕。 我们的药理实
验也证实了铁皮石解多糖具有明显地增强机体免疫效应的功能 。
致谢  程式君副研究员为本项研 究鉴定和提供植物材杆 。
参 考 文 献
 唐振绷 , 等  植物研究 , 拍  ,   
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 黄文魁  化学学报 ,    ,         
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《中草药 》1 9 9 4年第 25 卷第3期