全 文 :· 药理实验与临床观察 ·
不同剂量黄蔑组方的复方六一汤抗衰老的实验研究△
皖南医学院 (芜湖 2 4 1 0 0 1) 王国勤 米 吴敏毓 孙瑞元
摘 要 研究了不 同剂量黄茂组方的复方六一汤 (F )对小鼠衰老方面的影响 。 结果表明 :黄蔑和 F
均能强壮机体 ;大剂量和 原剂量组的 F 具有抗 自由基损伤作用 , 而小剂量组则无此作用 。 结果还揭
示 , F 中的黄茂含 量高 , F 抗衰老作用效果更显著 。
关键词 应激反应 复方六一汤 超氧化物歧化酶 过氧化脂质
复方六一汤 (简称 F )出 自《外科正宗 》卷 续 用药 7 d 后 , 各分别 腹腔注射 (i p ) 0 . 1 %
三 , 其组成 : 黄蔑 1 8 9 、 甘草 4 . 5 9 、人参 3 9 , K C N o . z m L / k g , ZON a N O , , 0 . 1 2 5m L / k g , 记
具有“益气生津 、排脓生肌 ”等功能 。 实验通过 录其生存时间 。
灌服 (i g )小鼠不同剂量黄茂组方的 F 来研究 2 . 3 红细胞超氧化物歧化酶 (S O D )活性测
其对小 鼠自由基及化学缺氧性应激反应的影 定 : 小鼠连续 19 Fo . 1 m L /l 0 9 14 d 后 (对照
响 , 以便从药理学 角度探讨不 同剂量黄茂组 组 19 等量 N S )眼眶取 血 50 拌L , 加入 s m L
方的 F 对机体衰老方面的影响 , 并定量分析 N S 的刻度离心管 , 混匀 、离心 , 弃上清液 , 加
黄蔑在方中的量效关系 ; 用现代 医学 手段来 预冷蒸馏水 。. 2 m l二 , 溶血后 , 加预冷 9 5 % 乙
证明古代方剂中君 、臣 、佐 、使配伍的合理性 , 醇 0 . 1 m l , 振荡片刻 , 再 加预冷的氯仿 0 . 1
君药剂量与药效间科学的辩证关系 。 m IJ , 置混合器 上抽提 1 一 2 m in , 5 0 0 0 r 离心
1 实验材料 5 m in , 得 S O D 抽提液 ; 再按试 剂盒说 明操
1
.
1 硫代巴比妥酸 (T B A ) : 上海试剂二厂 ; 作 。
S O D 活性测定试剂盒 : 海军抗衰老 中心 ; 1, 2 . 4 血清过 氧化脂质 (L PO )产物 测定 方
l
,
3
,
3
一
T e tr a e t ho x yp ro p a n e (T E P ) S ig m a 法〔, 〕 : 小 鼠连续 ig F (对照组 19 N S )O· 1 二L/
e o
.
; K e N
、
N a N ()
2 均为化学纯 ;黄蔑 、人参 、 1 0 9 1 4 d 后 , 摘 眼球取血. , 离心 , 取 血清 O · 2
甘草购于皖南医学院 , 并经鉴定 。 。I一 加 0 . 0 5 m o l/ I一 H CI 2 . 0 tn L , T B A (4 6
2
.
2 动物 : S w is S 小鼠 , 雌雄随机 , 体重 2 0 士 m o l/ IJ )溶 液 8 . 0 m IJ , 9 5 ‘C一 0 0 ℃水 浴 6 0
2 9
, 安徽 医科大学实验动物中心提供 。 m in , 冷却 后加 3 . 0 m IJ 正 丁醇 , 振荡抽提 2
2 方法 m in , 3 0 0 o r 离心 1 5 m in , 有机 层在 5 3 2 n m
2
.
I F 制备 :黄茂按经典方的剂量递增和递 比色定量 , 以标准 T E P 〔分子量 2 20 . 3 , 含量
减 3 倍 ,分别为 5 4 9 、 18 9 、 6 9 , 而人参 、甘 一草 98 % , 配成 4 . 86 拜m ol /1 标 准应用液 (l m g /
剂量不变 , 组成 3 个剂量 (大 、原 、 小 )组的方 L )〕代替样品作为标准管 , 同时作 一试剂空
剂 ,将方药制成含黄茂去药量为 5 4 % 、 18 % 、 白管 。
6 %的 F 。 3 结果
2
.
2 化学缺 氧性应激反应川 : 小鼠 19 F o . 1 3 . I F 对小鼠化学缺氧性应激反应的影响 :
m L / 10 9
, 对照组 19 等量 生理盐水 (NS) , 连 表 1 表明 , 与对照组 比较 , 各用药组可使小鼠
来 A d d r e s S : w
a n g (; u o q in
,
w
a n n a n M
e d ie a l c o lle g e
,
w
u h u 现在安徽省药品检验所 (合肥 2 3 0 0 6 1 )
△ 国家自然科学基金会资助课题
.
1 5 4
·
K C N
、
N aN O
: 中毒后 生存时间显著延长 (p 3 . Z F 对小 鼠红细胞 S( )D 活性的影响 : 表
< 0
.
05 或 p < 0. 0 1 ) , 说明不同剂量黄茂组 2 表 明 , 与对照组比较 , 大 、原剂量组可使小
方的 F 均有抗化学缺氧性应激反应的作用 ; 鼠红细胞 S O D 活性增强 (尸< 0 . 0 1 ) ; 小剂量
大 、原 、小剂量组相互 比较 , 黄茂在方中所占 组使 S O D 活性相对减弱 (尸< 0 . 01 ) 。 用药组
份量大 , 其抗化学缺氧性应激反应的作用越 相互 比较 , 方中黄茂含量越大的组 , 其 S O D
强 , 呈现明显的量效关系 。 活性较强 。
表 1 不同剂量黄蔑组方的 F 对小鼠化学缺氧性应激反应的影响 (x 士 : )
组别 用药量 黄茂用量 例数 Kc N 中毒生存时间 Na No Z 中毒生存时间
(m l 门 0 9 ) (m g / k g ) (n ) (m in ) (m in )
大剂量组 0 . 1 5 4 0 1 5 3 . 6 7士 0 . 5 1 ‘ 拓 △ △ 2 7 . 6士 3 . 4 “ △
原剂量组 0 . 1 1 8 0 1 5 2 . 9 5士 0 . 5 4 ‘ ’ 24 . 1士 4 . 1 “
小剂量组 0 . 1 6 0 1 5 2 . 4 4士 0 . 5 0 ‘ ’ △ △ 20 . 5士 3 . 0 ‘ △△
对照组 0 0 1 5 1 . 8 1 士 0 . 4 6 1 7 . 3士 3 . 0
与对 照组 比较 ‘ 尸< 0 . 0 5 “ 尸< 0 . 01 ; 与原 剂量组比较△ 尸< 。. 05 △ △尸< 。. 01 (下同 )
表 2 不同剂量黄蔑组方的 F 对小鼠红细胞
S ()I) 活性的影响 (x 士 、)
用药量苏茂用 例数 S( )D 活性组别 (tn L / 里‘m g / (n ) (u / g H b )
1 0 9 ) k g )
大剂量组 0 . 1 5 4 0 1 0 一5 3 0 . 7 士一3 5 . 6 “ △
原剂量组 0 . 1 1 8 0 1 0 1 4 0 7 . 7 士 1 3 2 · 8 ’ ‘
小剂量组 0 . 1 6 0 1 0 1 0 1 8 . 3 士 1 2 4 . 5 “ △ △
对照组 0 0 1 0 1 1 6 1 . 4 士 1 0 2 . 0
3
,
3 F 对小 鼠血清 L PO 产物 的影响 : 表 3
表明 , 与对照组比较 , 大 、原剂量组可使小 鼠
血清 L PO 产物显著减少 (P < 0 . 01 ) , 小剂量
组使 小 鼠血清 L PO 产 物相 对 增 多 ((P <
0
.
01 ) ;用药组相互 比较 , 方中黄 茂含量越大
的组其 L PO 产物较少 。
表 3 不同剂量黄蔑组方的 F 对小鼠
血清 L PO 产物的影响 (x 士 : )
组别 紧是暮黑臀 、器笼) ‘
1 0 9 ) k g )
大剂 量组 0 . 1 5 4 0 一0 2 . 2 7士 0 . 3 4 ‘ ’ △△
原剂 量组 0 . 1 1 8 0 1 0 2 . 8 0生 0 . 5 5 ”
小剂 量组 0 . 1 6 0 1 0 4 . 0 4士 0 . 5 8 ‘ ’ △△
对 照组 0 0 ] 0 3 . 3 8士 0 . 3 7
4 讨论
中医学把人体机能活动及其防御和清除
各种有害因素的作用 , 总称为 “正气 ” 。 F 及黄
茂具有 “益气生津 、排脓生肌 ”等功能 , 可以调
节或改善机体 “脏腑 、气血 ”的生理活动 , 提高
《中草药 》1 9 9 7 年第 28 卷第 3 期
机体抗病能力 , 延缓人体的衰老 , 这与我们的
实验报道基本一致 。
K CN 可使机体呼吸链中断 、 N a N O : 可
引起高铁血红蛋 白症 (而高铁血红蛋白失去
携带氧的功能 ) , 二者均 可使机体中毒 , 最终
导致死亡 。 本实验中不同剂量黄蔑组方 的 F
均具有抗化学缺氧性应激反应的作用 ;黄茂
含量越大的组 , 其作用就更强 , 呈现 明显的量
效关系 , 这些结果与文献报道 : 黄蔑 、人参 、甘
草具有抗应激反应的作用相一致 , 说明黄蔑
及 F 具有强壮机体的作用 。
H ar m a n 提出的 自由基衰老学说认为与
年龄有关的变化是 由于 自由基和脂质过氧化
作用造成细胞 , 特别是膜和遗传结构 中的大
分子损伤的累积所致 〔3 〕 , 致使机体衰老 ;脂质
过氧化也会产去 自由基 ;在体内自由基是通
过歧化反应而清除 , S O D 可催化 此反 应 , 防
止活性氧 的生成和蓄积 〔4〕 , 减缓机体病理性
损害 。在本实验中 , 大剂量和原剂量黄茂组方
的 F 可使 小 鼠红细胞 SO D 活性增强 , 血清
LP O 产物减少 ; R ob er ts 〔5〕认为凡能降低血液
LP O 和增强 S O D 活性的药物具有抗 自由基
损伤作用 , 故我 们认为二者具有抗自由基损
伤作用 , 也即二者具有抗衰老的作用 ,这就预
示 F 中黄茂 1 80 一 54 0 m g / k g 时具有抗 自由
基损伤作用 , 且剂量大 、效应强 ;而 方中黄蔑
60 m g /k g 无抗 自由基损伤作用 。
·
1 5 5
·
参 考 文 献
李仪奎 . 中药药理实验 方法 学. 卜海 : 卜海 科技 出版社 ,
1 9 9 1
.
2 1 2
王振华 , 等 . 卜海 医学检验杂志 , 1 991 , 6 (4 ) : 2 01
H a r m a n D
.
Fr e e R a d ie a ls in B io lo g y
.
V o l s
,
N e w Y
e r k
:
A e a d
e
m i
e Pr e s s
,
19 8 2 (9 )
: 2 3 5
4 T h a m
s o n J A
, e t a l
.
P r e g e a r d i〔)v d s D is , 19 8 6 , 2 8 : 4 0 9
S R
()
b
e r t s M J
, e t a l
.
I a n e e t
, 1 9 9 0 , 2 1 : ] 4 3
(1 9 9 5
一
0 3
一
0 3 收稿
1 9 9 6
一
1 0
一
0 9 修回 )
St u d ie s o n th e A n ti
一 a g in g E ffe c t o f Fu fa n g liu yita n F o r tifie d w ith D iffe r e n t
D o s e s o f M o n g o lia n M ilk v e tc h (A s tra g a lu s m o n g h o licu s )
W
a n g G u o q in
,
W
u
M i
n y u a n d X u n R u iy d a n
E ffe e t s o f Fu fa n g liu y zt a n g (F )
, a e o m p o s ite o f : i, : in o n e d e e o e tie n
, a n d th a t fo r tifie d w it h d iffe r e n t d o s e ,
o f A s z r a g a lu s m o n g h o lie u s B g e
.
(A M )
o n s e n ility o f m le e w e r e s t u d ie d
.
R e s u lt s s h o w e d th a t b o th F a n d AM
,
b e s id e th e ir p o t e n e y t o s t r e n g t h e n t he bo d y
, a ls o p la ye d the r o le a s a fr e e r a d ie a l s e a v e n g e r
,
b u t F w it h le s s e r
a m o u n t o f AM w
a s d e v o id o f s u e h e ffe e t
.
F fo r t ifie d w ith 1 8 0 m g / k g 一 5 4 0 m g / k g o f AM s h o w e d a n a n ti一a g -
in g e ffe e t in rn ie e
.
T h e h ig h e r t he a d d e d A M
, th e m o r e o bv io u s th e e ffe e t
.
当归对辐射损伤后小鼠卵泡影响的定量研究
湖北医科大学组胚教研室 (武汉 4 3 0 0 7 7) 张端莲 带 王松山 ‘ ’ 余墨声 ’ ‘ 张 玲
摘 要 应用当 归注射液对 60 C 。 一了射线辐射损伤后的小 鼠卵巢给予治疗 , 对治疗后卵巢组织做常
规切片染色 , 全自动图象分析仪检测其卵巢 内卵泡数 目及 平均面积 , 进行了统计学分析 , 结果表
明 , 当归可使辐射损伤后的小鼠卵泡数 目恢复正常 , 卵泡平均面积增加 。
关键词 当归 卵巢 了射线 定量
卵巢是女性生殖系统的重要组成 , 卵巢 辐射损伤的卵巢功能提前进入恢复期 、卵泡
可产生卵 , 同时又具有 内分泌功能 。卵巢的实 数 目恢复正常 , 卵泡平均面积增加 。
质 内有许多发育不同时期的卵泡 , 卵泡的生 1 材料与方法
长发育与女性发育成熟 ,衰老有密切关系 。 而 采用成年健康雌性小鼠 2 14 只 , 鼠龄 为
卵 巢是对 辐射 较 为敏感的器 官 , 有资料报 3 一 4 个月 , 体重 24 一28 9 。将动物随机分为 3
道 〔1〕 ,辐射能导致卵巢组织损伤或破坏 , 处于 组 。 正常对照组 : 正常小 鼠不采用 6℃。 一y 射线
迅速增殖 的卵泡细胞对辐射有高度敏感性 。 照射 。 实验对照组 : 将小 鼠用 6 o C o 一y 射线照射
有学者认为〔2〕 , 当归对免疫器官及细胞 的再 后 , 不作任何处理 。 实验用药组 : 用 石℃ o 一 y射
生以及染色体的修复有促进作用 , 与机体免 线照射后 2/l h 后开始给药 , 每只小鼠每日腹
疫细胞 、子宫及肝细胞核 内的遗传物质合成 腔注射当归注射液 0 . s m ! , , 按每天每公斤体
有密切关系 。 为研究当归对辐射损伤后卵巢 重 20 m L 给药 , 连续给药 30 d 。
组织结构 的恢复 , 在 实验 中我 们应用 IB A S 实验对 照组和实验用药组动物各为 93
全 自动 图像分析仪测试 了小 鼠卵泡量 的变 只 , 正常对照组为 28 只 。 该 3 组小鼠分别于
化 。 结果表明 , 当归具有辐射保护作用 , 使受 照射后第 1 、 5 、 10 、 15 、 20 、 25 、 30 天分 7 批用
, A dd r e s s : Z h a n g D u a n lia n
,
D e p a r tm e n t o f任s t o lo g y a nd E m br yo io g y , H u b e iM e d ie a lU n iv e r sity ,W u h a n
“湖北 医科大学附属第 一医院
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