全 文 :纤维素酶用于中药提取的初步研究
辽宁省药物研究所沈阳 马田 田 帝
摘要 用黄柏提取小 一 碱之前经纤维素酶进行预处理 , 可提高小菜碱收率 , 进而可否将纤维素酶
用于其它天然产物的提取 。
关键词 纤维素酶 酶解 盐酸小莱碱
近年来 , 纤维素酶在国外的工业化用途已屡见不鲜 , 例如食品工业 、 饲料工业 、 制取各
种糖类以及在提取天然产物中的应用 , 然而我国目前工业化用酶仍是空白 怀斯曼 主编
酶技术生物手册 北京 科学出版社 , 。大部分 的中药材的细胞壁是由纤维素构成 ,
植物的有效成分往往包裹在细胞壁 内。 纤维素则是日一 一葡萄糖以 , 一日葡糖背 键连结 , 用
纤维素酶解可破坏卜 一葡萄糖键 , 进而有利于有效成分 的提取 。 根据这一原理 , 我们选 用
黄柏提取小梁碱 , 并与未加酶的提取进行对比实验 。
实验材料与药 品
纤维素酶粗品 活力单位 左右 , 沈阳农业大学植物生化教研室提供 盐 酸 小果碱
对照 品 , 中国药品生物制品检定所提供 黄柏为沈阳市药材公司购进 。
实验方法与结果
酶解实验 将药材饮片洗净捣碎用倍量水浸泡 , 以硫酸调 一 , 加 一 纤维素
酶充分搅拌 , 置 ℃ 恒温箱内保持 。
盐酸小栗碱提取工艺 沈阳药学院主编 中草药化学 了 黄 柏 原 料 酶 解
纬 ‘ ,
〔提取 〕
热石灰乳 。
些, 水溶液 石灰乳 , 一 碱溶液 饱和 , 调 〔碱化 〕 〔盐析 〕 粗品
一 碱溶液 , 一结晶萎髦些子一精品爪辈鬓号一 一成品
薄层层析 将加酶与未加酶工艺得到的提取物与盐酸小粟碱对照品于硅胶 薄 层板上
展开 , 紫外灯下观察 , 比较 。
展开剂 正 丁 醇一醋酸 一水 , 氯仿一丙酮一二 乙胺 , 展 距
。
对照 品 盐酸小栗碱 , 样品 加酶提取物 , 未加酶提取物 。 层析结果见图 。
收率与提取结果的比较 见表 、 。 一 · 表 加醉与未加醉法提取小果碱收率
加酶法
展开剂
小案碱收
率
。
。
。
。
。
未加
酶法
小璧喊收
率
。
。
。
。
训,拼自娜户叹约八,南蟹拐
戮姗
州⋯月一卜。。。川
如色自甘
展开剂 ,
田 层析图谁
下转第 页
, 吕 ,
《中草药 》 年第 卷第 期
寻忽雾乏途才计乙
讨论
本实验首先对前胡水煎剂及种 前 胡提
取物的作用进行定性筛选 。 发现前胡水煎剂
具有明显的舒张肺动脉环作用 种 提 取物
中只有 对肺动脉呈现显著 的 舒 张作
用 而其它提取物如氯仿提取 物 、 乙 酸 乙
酷提取物及 乙醇提取物对肺动脉均呈现轻微
的收缩作用 其余提取物对肺动脉儿无作用 。
实 验结果 表 明 一 和 均 有 显
著 的三舒 张肺 动脉作用 , 且作用相似 , 强度
相近 、 一 “ 一 与 一 均
相当于含生药。 , 提示前胡发挥舒张肺
动脉作用的有效成分可能为石油醚提取物
此外 一 对 收缩肺动脉的剂量反应曲
线为非竞争性拮抗 , 且减弱 收缩肺动脉
浓度 〔一 名 价 〕
圈 一 对 收缩肺动脉皿效曲线的影晌
一对照组 一 。 一 “ 一 预处理组
一 一 “ 一预处理组
的作用强于减弱 收缩肺 动脉的作用 , 提示前胡舒张肺动脉平滑肌可能与阻断 相关 ,
这一点与 饶曼人〔’〕等 的 实验 报道 “前胡丙素及前胡 的钙拮抗作用及对血管阻力的影响”
一致 。 等报 道〔”, 〕, 前胡 乙醚提取物具有抑制乙酞胆碱和组胺收缩豚 鼠 小 肠 平 滑
肌的作 用 及在 十去极化 所 致细胞膜通透性亢进时 , 在细胞外给 ‘能自由供给细胞内收
缩蛋白的标本中 , 具有竞争性地抑制 ’ 所引起的收缩 , 并用放射 十进一步证实了前胡
乙醚提取物的 丰 今拮抗作用 。 尽管本实验所 用的是 一 , 与前述的 乙醚提取物在成分上
尚有一些不同 , 但主 要 有效 成分均为香豆素类〔‘ 〕。 因此 , 可初步确定 为前胡发挥
舒张肺动脉作用的有效成分 , 其舒张肺动脉血管的作用可能是拮抗 十作用的结果 。 但 由
于 仍为一混合物 , 内含多种成分 , 所以我们今后将进一步深入研究 , 从石油醚提取
物中再提取出具有显著 舒张肺动脉作用的单体物质 。
今
饶曼人 , 等 中国药理通讯 ,
, 。 , 色
, ,
, ! 。 J P h a r m a e o b i o 一 d y n ,
1 9 8 5 ( 8 )
:
2 5 7
考 文 献
5 Petsor, e t a l 。 C o m P M e d E a s t w e s t ,
1 9 7 9 ( 6 )
t
1 2 9
6 C h
e n Z X
,
e t a l
。
A c t
a
P h
a r
m s i n
,
1 9 7 9
( 1 4 )
*
4 8 6
7 刘习11红 , 等 。 中草药, l , 5 9 , 2 0 ( i ) : e
(
1 9 9 3
一0 3刁5收稿 )
( 上接 第223页 )
表 2 2种不同工艺提取结果的比较
加酶法 未加酶法—t值 尸值戈 1 5 1 义 1 5 11 5 6 0 。 1 5 2 0 。 8 7 0 0 1 1 6 3 。 2 9 < 0 . 0 5提取率 t。 . 。 。 ( 8 ) = 2 . 3 0 63 小结与讨论《中草 药 》 1 9 9 4年第25 卷第3期
从对低活性纤维素酶的实验研究中 , 初
步看出在纤维素酶的作用下 , 提高了小栗碱
的收率 , 尸值小于 。.05 , 2 种方法对比 , 有显
著性差异 。 能否将其用于其它天然产物的提
取 , 需考虑酶的浓度 、 底物的浓度、 温度、
酸碱度、 抑制剂和激动剂等对提取物有何影
响 , 有待进一步深入研究 。
(
1 9 9 3 一 2 1一3 0 收稿 ). 又39 .
,W
a n g S
u
q i n g
,
e t a l
N
e o r a
b d
o s i n ( I )
,
o d o n i
c i n ( 1 )
, e
f f u
s a n i n A ( 1 )
, n e r v o s a n i n A ( IV )
a n d . f f
u s a n i n E
( V ) w
e r o
i
s o l a t e d f
r o
m R
a
b d
o s i
a ”e r 口 o s a ,
IV P
r o v o d t
o
b
e a n e w n a t
u r a l c
o
m P
o u n
d
。
( o r i g i
n a l a r t i c l e
o n p a g e 1 1 5 )
S t u d i e s o n t h e C h e m i c a l C o m p o n e n t s o f H a l n a n r u i m u
( K
o 夕sia ha‘na n e o s is )
1 . Is o la tio n a n d ld e n t ific a t io n o f M o n o m e r ic In d o le
A 1k a !o ld s fro m lt s R o o t
Y u n W en h u i, C h e n Y u w u a n d F e n g X i a o z h a n g
F r o m
t h
e t o t a l
a
l k a l o i d
s o
f t h
e r o o t o f
K
o夕sfa 式a £刀a ”e ”s f s T s i a n g , e i g h t e o m P o u n d s w e r e
i
s o l a t e d
a n d i d
e n t i f i
e
d
a s c o r o n a r i d i
n e
( I )
,
h
e
y n
e a n
i
n e
( 1 )
,
t a
b
e r s o n
i n e ( 1 )
,
1 1
一
m
e t h o
-
x y t a b e r s o
n i n e ( IV )
, s c a n d i
n e
( V )
,
N
一 耳 e t七。又 y e a r t o n y l 一 1 1 , 1 2 一 m e t h y l e n e d i o x y k o P s i n a l i n e
( VI )
,
k o P
s
i n i
n e
( 姐 ) a n d N 一 m e t h o x y c a r b o n y l 一 1 2 一m e t h o x y k o P s i n a l i n e ( 粗 ) b y 功ea n s o f P h y si-
c a l c o n stan ts a n d sP e ctra l an a ly sis 。
( O
r i g i n a l a r t i c l e o n p a g e 1 1 8 )
P r e l i m l n a
r
y S t u d y o f E x t r a e t i n g C h i
n e s e T
r a d i t ! o n a l
M e d i e i n e w i t h C
e
l l u ! a
s e
M a T i a
n t i a n
T h e y i e l d o f b
e r b e
r i n e e a n b e i n e r e a s e d b y P
r e 一 t r e a t i n g P h e l l o d e n d r o n a m
u r e n s e w i t h e e
·
l l u l a s e b e f o r e e x t r a c t i n g
。
I t 1 5 s u g g e s t e d t b a t t h e u s e o f e e l l u l a s e f o r t h e e x t r a e t i o n o f o t h
-
e r n a t u r a l P r o d u c t s m
a y b e w o r t h e o n s i d e r a t i o n
。
( 0
r i g i n a l a r t i e l e o n p a g e 1 2 3 )
A N e w M e t 卜od fo r t h e E x t ra e t ;o n o f T e a 一P o ly p h e n o ls
G e Y iz h a n g a n d J in H o n g
人 n ew m et h o d f o r th e ex rra etio n o f te a · P o l y P b e n o l s ( T P ) f r o m t e a u s i o g A I C I : a s P r e e -
i P i t a t i n g a g
e n t s w a s P r o P o s e d
.
C o 功 p a red 下 it h t h e t r a d it io n a l e x tr a c t io n zn e t h o d u s in g o r g a -
n i c s o lv e n t s , i t 1 5 s h o w n t b a t t h e n e w 功e tl o d 15 5 1巧 P le a 幻 d e a n b e o P e r a t e d e a s i l y . T h e e x -
t r a c t i o n r a t e o f T P b y t h e n e w m e t h o d e o u l d r e a e h 1 0
. 5 % a n d t h o c o n t e n t o f t h e e f f e c t i v e
i n g r e d ie n t s o f T P c o u l d r e a c h o v e r 9 9
. 5 % .
( o r i g i n a l a r t i c l e o n P a g e 1 2 4 )
. 1 6 6
.