全 文 ：广 西 植 物 Guihaia　Oct．２０１５,３５(５):７３３－７４０　　　　　　　　　　 http://journal．gxzw．gxib．cn　
DOI:１０．１１９３１/guihaia．gxzw２０１４１０００３
尹明华,洪森荣,夏瑾华,等．黄独微型块茎低温保存及其萌发苗遗传稳定性研究[J]．广西植物,２０１５,３５(５):７３３－７４０
YinMH,HongSR,XiaJH,etal．LowtemperatureconservationofDioscoreabulbiferamicrotuberandgeneticstabilityofitsgerminationseedling[J]．
Guihaia,２０１５,３５(５):７３３－７４０
黄独微型块茎低温保存及其萌发苗遗传稳定性研究
尹明华,洪森荣∗,夏瑾华,林国卫,王爱斌,柯维忠
(上饶师范学院 生命科学学院,江西 上饶３３４００１)
摘　要:以黄独微型块茎为材料,对其低温保存期间的解剖结构、生理生化指标进行观察,并对其低温保存后
的萌发苗进行遗传稳定性检测.结果表明:低温保存时间越长,微型块茎外围细胞内的淀粉粒消失越多,至
９０d时,淀粉粒消失的细胞扩延到微型块茎中部;低温保存期间,微型块茎的抗氧化酶和淀粉酶活性及其脯氨
酸和可溶性糖含量均呈显著增加趋势.在低温保存的０~９０d内,SOD活性在１８~５４d内持续增加,而在
５４~９０d内基本维持不变;POD活性在１８~３６d内显著增加,在３６~５４d内维持稳定,而在５４~７２d内又开
始显著增加,７２~９０d趋于稳定;CAT活性变化趋势与SOD活性一致,即在１８~５４d内持续增加,而在５４~
９０d内基本维持不变;αＧ淀粉酶和总淀粉酶活性在１８~３６d内快速增加,在３６~５４d内无显著变化,在５４~
９０d内持续显著增加;βＧ淀粉酶活性在１８~５４d内显著增加,在５４~７２d内维持稳定,在７２~９０d内又开始
显著增加;可溶性糖含量在１８~３６d内显著增加,３６~５４d内无显著性变化,５４~９０d又开始显著增加;脯氨
酸含量在１８~３６d内无变化,在３６~７２d内显著提高,在７２~９０d内维持不变.微型块茎低温保存９０d后,
其萌发苗的形态(株高、叶片数、根数和茎节长)、DNA含量、生理指标(总叶绿素含量、SOD活性、CAT活性、
POD活性、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量)及其叶片的光合特性参数(净光合速率、气孔导度、细胞间CO２
浓度、蒸腾速率、气孔限制值、水分利用效率和瞬时羧化速率)和叶绿素荧光参数(初始荧光、最大荧光、PSⅡ最
大光化学效率、PSⅡ潜在光化学效率、PSⅡ实际光化学效率、开放的PSII反应中心捕获激发能效率、光化学荧
光猝灭系数和非光化学猝灭系数),与常温保存的比较均无显著性差异,这表明黄独微型块茎的低温保存不会
造成植株的遗传变异.
关键词:低温保存;黄独;微型块茎;解剖结构;生理生化指标;遗传稳定性
中图分类号:Q９４２．５,Q９４４．５５,Q９４５．７８　　文献标识码:A　　文章编号:１０００Ｇ３１４２(２０１５)０５Ｇ０７３３Ｇ０８
LowtemperatureconservationofDioscoreabulbifera
microtuberandgeneticstabilityofitsgerminationseedling
YINMingＧHua,HONGSenＧRong∗,XIAJinＧHua,
LINGuoＧWei,WANG AiＧBin,KEWeiＧZhong
(CollegeofLifeSciences,ShangraoNormalUniversity,Shangrao３３４００１,China)
Abstract:UsingDioscoreabulbiferamicrotubersasmaterial,theanatomicalstructureandthephysiologicalandbioＧ
chemicalindexesofmicrotubersduringlowＧtemperatureconservationwereobservedandmeasured,thegeneticstabilＧ
ityofgerminationseedlingsafterlowＧtemperatureconservationwasalsotestedinthisarticle．TheresultswereasfolＧ
lows:HEstainingmethodwascomplicated,whoseefectwasdificulttoobserve．ComparedwithHEstainingmethＧ
收稿日期:２０１４Ｇ１０Ｇ１９　　修回日期:２０１５Ｇ０１Ｇ３０
基金项目:国家自然科学基金(３１３６００７２);江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ１４７１３).
作者简介:尹明华(１９７３Ｇ),女,江西永新人,硕士,副教授,主要研究方向为生物技术,(EＧmail)yinminghua０４＠１６３．com.
∗通讯作者:洪森荣,硕士,副教授,主要研究方向为植物生物技术,(EＧmail)hongsenrong＠１６３．com.
od,safraninfastgreenstainingwasmuchsimpler,whoseefectwasbetter．Therefore,SafraninＧfastgreenmethodwas
moresuitableforstainingofD．bulbiferamicrotubers;Withoutlowtemperatureconservation,thestarchgrainsin
thecelsaroundD．bulbiferamicrotuberhasnotbeguntobeexploitedandbestilconserved．WhenD．bulbifera
microtubertreated withlowtemperature,thestarchgrainsinthecelssurrounding microtuberbeganto
disappear．Thelongertheconservationtimeis,themorethecelnumberwithnostarchgrainsalsoincreased．The
starchgrainsincelshadstartedtotranslateintoothersubstancesforcellifeactivitiesduringlowtemperaturestorＧ
age．Whenconservingfor９０d,thecelwhosestarchgrainsdisappearedextendedtothemiddleofthemicrotuber;
Duringthelowtemperatureconservationperiod,theantioxidase,theamylaseactivity,theprolinecontentandthesolＧ
ublesugarcontentofD．bulbiferamicrotubersalshowedanincreasingtrend;DuringthelowtemperatureconservaＧ
tionofD．bulbiferamicrotubersfor０－９０d,SODactivityduring１８－５４dcontinuedtoincrease,andSODactivity
during５４－９０dstilremainedunchanged;PODactivityincreasedsignificantlywithin１８－３６d,maintainedstability
within３－５４d,increasedsignificantlyduring５４－７２d,keptstableagainin７２－９０d;CATactivitytrendsisconsistＧ
entwiththeSODactivity,whichcontinuedtoincreasein１８－５４d,andremainunchangedin５４－９０d;αＧamylaseand
totalamylaseactivityincreasedrapidlyin１８－３６d,hadnosignificantchangein３６－５４dandcontinuouslyincreased
significantlin５４－９０d;βＧamylaseactivityincreasedsignificantlyin１８－５４d,maintainedstabilitywithinthe５４－７２
d,andbegantoincreasesignificantlywithinthe７２－９０d;Solublesugarcontentincreasedsignificantlywithin１８－３６
d,hadnosignificantchangewithin３６－５４d,andbegantoincreasesignificantlyduring５４－９０d;Prolinecontenthad
nochangein１８－３６d,increasedsignificantlyin３６－７２d,andremainedunchangedin７２－９０d．TherewasnosignifＧ
icantdiferencebetweentheseedlinggerminatedfromD．bulbiferamicrotubersstoredatlowtemperaturefor９０d
andtheseedlinggerminatedfromD．bulbiferamicrotuberswithoutlowtemperatureconservationinmorphology
(averageplantletlength,averageleafnumber,averageinterstemlengthandaveragerootnumber),DNAcontent,
physiologicalindex(totalchlorophylcontent,superoxidasedismutaseactivity,catalaseactivity,peroxidaseactivity,
solublesugarcontentandsolubleproteincontent)anditsleafphotosyntheticcharacteristicsparameters(netphotoＧ
syntheticrate,stomatalconductance,intercelularCO２concentration,transpirationrate,stomatallimitationvalue,
wateruseeficiencyandinstantaneouscarboxylationrate)andchlorophylfluorescenceparameters(initialfluoresＧ
cence,maximalfluorescence,themostphotochemicaleficiencyofPSII,thepotentialphotochemicaleficiencyofPS
II,theactualphotochemicaleficiencyofPSII,capturedexcitationenergyeficiencyofopenPSIIreactioncenter,phoＧ
tochemicalfluorescencequenchingcoefficientandnonＧphotochemicalfluorescencequenchingcoeficient),whichindiＧ
catedthatlowtemperatureconservationofD．bulbifera microtubercouldnotcausegeneticvariationofthe
seedling．
Keywords:lowtemperatureconservation;DioscoreabulbiferaL．;microtuber;anatomicalstructure;physiological
andbiochemicalindex;geneticstability
　　黄独(Dioscoreabulbifera)为薯蓣科薯蓣属植
物,其地下块茎药性苦寒,具有散结消瘿、清热解毒、
凉血止血的作用,主治瘿疾癌肿(牛成伟等,２０１４).
现临床上主要用于治疗各种原因引起的甲状腺疾病
以及癌症、血液系统疾病、妇科病和皮肤病等(李玉
娟等,２０１３).薯蓣属植物容易形成微型块茎(俗称
零余子,形态学称之为珠芽),它是薯蓣属植物试管
苗在腋芽处形成的变态块茎,具有较强的光温抗性,
且易移栽成活,能降低生产成本,可取代试管苗种植
(苗利娟等,２０１４).目前关于微型块茎的研究主要
集中于诱导形成(李明军等,２００８)、化合物提取(屈
亚娟等,２０１４)、休眠破除(苗利娟等,２０１４)、愈伤组
织诱导(郭君丽等,２０１３)、产量和品质分析(吴小玲
等,２０１３)等方面.而关于微型块茎的低温保存却少
见报道.韦本辉等(２００４)研究了低温干燥、干沙埋
藏及室温自然放置三种贮藏方式对淮山微型块茎出
苗及苗期生长的影响,结果表明低温干燥处理的微
型块茎出苗率高达１００％,而且低温干燥贮藏的微
型块茎很饱满,表面光滑,无明显的失水皱缩现象,
而室温自然放置贮藏(２０~２８℃)的微型块茎由于
失水而严重皱缩.因此,研究薯蓣属微型块茎的低
温保存很有意义.在国外,对黄独微型块茎的体外
驱虫性(Adeniranetal．,２０１３)、产量影响因子(OsＧ
uagwuetal．,２０１３)、提取物药理学作用(Mbiantcha
４３７ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３５卷
etal．,２０１１)、萌发极性(Passametal．,２０１３)等方
面研究较多.本课题组从２０１４年开始对黄独微型
块茎的诱导形成(洪森荣等,２０１４)进行了研究.然
而,正如Balogun(２００９)指出薯蓣属植物基因资源
通过大田种植、试管苗、花粉和种子进行保存的手段
分别会受到土地空间、继代费用以及不规律开花的
影响,而对试管苗诱导的微型块茎进行低温保存是
薯蓣属种质资源保存的一种较佳途径.目前,关于
黄独微型块茎的低温保存国内外少见报道.本研究
以低温保存的黄独微型块茎为对象,观察其解剖结
构,测定其生理生化指标,并对低温保存后的萌发苗
进行遗传稳定性检测,旨在为黄独微型块茎低温保
存的可行性提供理论依据.
１　材料与方法
１．１材料
黄独脱毒苗离体诱导的成熟微型块茎(由上饶
师范学院植物组织培养室提供).
１．２方法
１．２．１低温保存　将黄独脱毒苗离体诱导的成熟微
型块茎用滤纸吸干表面水分,直接放入２５０mL的
三角瓶内,用封口膜封口,橡皮筋扎紧后放入冰箱的
冷藏室内,调节温度为４℃,保存时间９０d.每隔
１８d取出部分微型块茎进行解剖结构观察和生理
生化指标测定.９０d后再取出剩下的微型块茎,均
匀埋于细沙中,用自来水浇湿,放入(２５±１)℃培养
箱中进行萌发成苗实验(苗利娟等,２０１４),并对其萌
发苗进行遗传稳定性检测.
１．２．２低温保存后微型块茎的解剖结构观察　从低
温保存不同时间(１８、３６、５４、７２、９０d)的微型块茎中
分别取样,制作大小为０．５cm×０．５cm×０．５cm样
片,采用常规石蜡切片法制片:FAA固定液固定,乙
醇脱水,二甲苯透明,浸蜡,包埋,KDＧ１５０８Ｇ３B型冷
冻石蜡两用切片机(浙江省金华市科迪仪器设备有
限公司)切片(厚度８~１０μm),HE染色或番红—
固绿染色,Olympus光学显微镜下观察并拍照.
１．２．３低温保存后微型块茎的生理生化指标测定　
过氧化氢酶(CAT )活性测定参照 Knörzeretal．
(１９９６)的方法,稍作修改.过氧化物酶(POD)活性
测定参照 Maehlyetal．(１９５４)的方法,稍作修改.
超氧化物歧化酶(SOD)活性测定采用氮蓝四唑
(NBT)法,可溶性糖含量采用蒽酮比色法测定,可
溶性蛋白含量测定采用考马斯亮蓝GＧ２５０染色法,
脯氨酸含量采用茚三酮显色法测定,总叶绿素含量
测定采用丙酮比色法(李合生,２０００).淀粉酶活性
测定参照植物βＧ淀粉酶(βＧamylase,βＧAL)试剂盒
(上海哈灵生物科技有限公司)的方法,稍作修改.
１．２．４低温保存后微型块茎萌发苗的遗传稳定性检
测　对照组:将成熟微型块茎用滤纸吸干表面水分
后埋入细沙内室温保存１８０d,放入培养箱内培养,
６０d后取其完整的萌发苗.
低温保存组:在对照组成熟微型块茎埋入细沙
内室温保存９０d后,取出也埋入细沙内,放入培养
箱内培养,６０d后取其完整的萌发苗.
取对照组与低温保存组的萌发苗进行遗传稳定
性检测.检测内容涉及形态学(包括株高、叶数、茎
节长、根数等)、生理学、细胞流式检测以及光合特性
参数和叶绿素荧光参数的测定.其中:细胞流式检
测参考Otto(１９９０)的方法,将采集的黄独苗嫩叶在
BDFACSCalibur流式细胞仪上进行DNA含量检
测.光合特性参数测定参考洪森荣等(２０１３)的方
法,用LIＧ６４００便携式光合仪于上午９:００－１１:００
测定第３片叶的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、
细胞间CO２浓度(Ci)、蒸腾速率(Tr)等参数,并计
算气孔限制值(Ls)、水分利用效率(WUE)和瞬时羧
化速率(CUE).叶绿素荧光参数测定参考洪森荣
等(２０１３)的方法,包括初始荧光(Fo)、最大荧光
(Fm)以及Fm′、Fs及Fo′.并计算PSⅡ最大光化
学效率(Fv/Fm)、PSⅡ潜在光化学效率(Fv/Fo)、
PSⅡ实际光化学效率(ΦPSⅡ)、开放的PSII反应中
心捕获激发能效率(Fv′/Fm′)、光化学荧光猝灭系
数(qP),非光化学猝灭系数(NPQ).
１．２．５统计分析　实验均重复３次,所有数据表示为
Mean±SD,数据用SPSS１９．０软件进行 OneＧWay
ANOVA分析,再进行LSD法检验,P＜０．０５为有
统计学差异显著性.
２　结果与分析
２．１低温保存后微型块茎的解剖结构
２．１．１HE染色或番红－固绿染色方法的比较　图１
表明,HE染色(左)程序复杂,且效果难以做出来,
而番红－固绿染色相对来说,比较简单且效果较好.
因此,在后续实验中,我们均采用番红－固绿染色法.
２．１．２低温保存后微型块茎的解剖结构比较　图２
５３７５期　　　　　　　　尹明华等:黄独微型块茎低温保存及其萌发苗遗传稳定性研究
表明,未进行低温保存的微型块茎周围细胞内的淀
粉粒保留较多,说明细胞内的淀粉还未开始被利用.
而当微型块茎进行低温保存时,其周围细胞内的淀
粉粒开始消失,保存时间越长,淀粉粒消失的细胞数
量增多.说明在低温保存期间,细胞内的淀粉粒已
开始转化为其它物质用于细胞的生命活动.
２．２低温保存对微型块茎生理生化指标的影响
由图３可知,微型块茎在低温保存０~９０d内,
SOD活性在１８~５４d内持续增加,而在５４~９０d
内基本维持不变;POD活性在１８~３６d内显著增
加,在３６~５４d内维持稳定,而在５４~７２d内又显
著增加,７２~９０d趋于稳定;CAT活性变化趋势与
SOD活性一致,即在１８~５４d内持续增加,在５４~
９０d内基本维持不变;αＧ淀粉酶和总淀粉酶活性在
１８~３６d内快速增加,在３６~５４d内无显著变化,
在５４~９０d内持续显著增加;βＧ淀粉酶活性在１８~
５４d内显著增加,在５４~７２d内维持稳定,而在
７２~９０d内又显著增加;可溶性糖含量在１８~３６d
内显著增加,３６~５４d内无显著性变化,在５４~９０
d又显著增加;脯氨酸含量在１８~３６d内无变化,在
３６~７２d内显著提高,而在７２~９０d内维持不变.
２．３低温保存对微型块茎萌发苗遗传稳定性的影响
黄独微型块茎经低温保存后,可直接萌发成苗
(图４).我们对低温保存后及未低温保存的黄独微
型块茎萌发苗的形态指标、生理指标、DNA含量以
及光合特性参数和叶绿素荧光参数进行比较.结果
表明,两者的株高、叶片数、根数和茎节长无显著性
差异(图５).两者的总叶绿素含量、SOD 活性、
CAT活性、POD活性、可溶性糖含量以及可溶性蛋
白含量均无显著性差异(图６).两者的净光合速
率、气孔导度、细胞间CO２浓度、蒸腾速率、气孔限
制值、水分利用效率和瞬时羧化速率基本相同,差异
不显著(图７).两者的初始荧光、最大荧光、PSⅡ最
大光化学效率、PSⅡ潜在光化学效率、PSⅡ实际光
化学效率、开放的PSII反应中心捕获激发能效率、
光化学荧光猝灭系数和非光化学猝灭系数虽有变
化,但变化均不显著(图８).两者植株叶片经细胞
流式仪检测,其细胞峰值相同,表明其DNA含量一
致(图９).从这些指标来看,低温保存没有造成黄
独微型块茎萌发苗的遗传变异.
３　讨论
薯蓣属在我国约有４９个种,其中多数种具有医
疗、保健和食用功能.该属多个种可在叶腋处形成
微型块茎.微型块茎除可食用外,还具医疗价值.
此外,零余子易成活,易进行种质交换,繁殖系数高,
是薯蓣属重要的繁殖器官 (龙雯虹等,２００６).
Dikshit(１９９８)研究参薯微型块茎发育过程中多糖、
蛋白质和淀粉等代谢物的分布,发现多糖主要以淀
粉粒形式积累在基本组织细胞中.本研究通过对黄
独微型块茎解剖结构的观察也验证了这一观点.
微型块茎成熟后一般有较长的休眠期,在农业
生产上常常需要打破微型块茎的休眠.１~１０
mg􀅰LＧ１PP３３３水培(龙雯虹等,２０１１)和２％~５％的
双氧水(苗利娟等,２０１４)能显著打破零余子的休眠.
但在本研究中,发现黄独的微型块茎经过９０d低温
保存后能 １００％ 直接萌发成苗,这与韦本辉等
(２００４)在淮山微型块茎上的研究结果一致.龙雯虹
等(２０１２)也发现３~１０℃低温处理６０~８０d能使
山药微型块茎在采收后较短时间内发芽.因此,低
温保存既可保存微型块茎的种质,也能破除其休眠,
起到一举两得的作用.
本研究通过对黄独微型块茎低温保存不同时间
的解剖结构进行比较,发现没有进行低温保存的对
照组微型块茎由于处于休眠期,其外围细胞的淀粉
粒保持完整.当进行低温保存后,黄独微型块茎外
围细胞内的淀粉粒开始逐渐消失,低温保存９０d
时,中部细胞内的淀粉粒也开始消失.这个解剖结
构上的变化似乎在暗示,低温保存后黄独微型块茎
的休眠可能与其细胞内的淀粉粒开始利用有关.本
研究进一步对低温保存的黄独微型块茎进行生理生
化指标检测,发现经过低温保存后,黄独微型块茎的
淀粉酶(包括αＧ淀粉酶、βＧ淀粉酶和总淀粉酶)活性
在０~９０d内均呈显著增加趋势,淀粉酶的活性增
加直接导致了黄独微型块茎在低温保存期内可溶性
糖含量的显著增加,同时由于低温保存是一种逆境,
黄独微型块茎为了避免冷藏伤害,细胞内的抗氧化
酶开始显著增加,一些保护性的渗透性物质如脯氨
酸的含量也显著提高(于飞等,２０１４;王晓晓等,
２０１４).这些因素综合作用,可能是黄独微型块茎低
温保存破除休眠的直接原因.本研究结果与陈艳乐
等(２００５)对浙江瑞安大白薯的低温保存结果相似.
在其他植物变态茎的低温保存中也发现了类似结
果.LangensＧGerritsetal．(２００３)发现,低温保存也
可打破百合组培小鳞茎的休眠,促进其发芽.在百
合鳞茎 (涂淑萍等,２００５)和马铃薯块茎 (王合理,
６３７ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３５卷
图１　黄独微型块茎(未进行低温保存)　HE染色(左)和番红－固绿染色(右)(１０×)
Fig．１　D．bulbiferamicrotubers(withoutlowtemperatureconservation)　HEstaining(left)
andsafraninefastgreenstaining(right)(１０×)
图２　黄独微型块茎低温保存后的解剖结构比较 (４０×)　aＧf．０、１８、３６、５４、７２d和９０d的低温保存时间.
Fig．２　AnatomicalstructurecomparisonofD．bulbiferamicrotubersafterlowtemperatureconservation(４０×)　
aＧf．Lowtemperatureconservationtimefor０,１８,３６,５４,７２dand９０drespectively．
１９９９)低温保存期间,鳞茎内的淀粉酶(αＧ淀粉酶和
βＧ淀粉酶)活性增加,淀粉酶的活性与糖分的积累呈
正相关.
低温保存实际上是一种温度胁迫,这种低温胁
迫有可能作为一种选择压对不同基因型的植物材料
产生选择效应,并产生一些生理及遗传的影响.因
此,有必要对低温保存后的材料作遗传稳定性检测.
本研究对低温保存后和未低温保存的黄独微型块茎
萌发苗进行了形态学、生理学和DNA含量等方面
的比较,结果表明两者虽有差异,但无显著性变化.
因此,黄独微型块茎的低温保存是可行的.当然,黄
独微型块茎萌发苗的遗传稳定性还需进一步从分子
方面进行检测(如RAPD和AFLP分析等),这也是
本文将继续努力的方向.
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EffectsoflowＧtemperatureonbiophysiologicalandbiochemical
７３７５期　　　　　　　　尹明华等:黄独微型块茎低温保存及其萌发苗遗传稳定性研究
图３　黄独微型块茎低温保存后的生理生化变化　
Fig．３　PhysiologicalandbiochemicalchangesofD．bulbiferamicrotubersafterlowtemperatureconservation　
图４　黄独微型块茎低温保存后的萌发
Fig．４　GerminationofD．bulbiferamicrotubersafterlowtemperatureconservation　a．１２d;b．１５d;c．２０d;d．２８d．
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８３７ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３５卷
图５　黄独微型块茎低温保存与未低温保存萌发苗的
形态指标比较　１．平均株高;２．平均叶片数;３．平均茎节长;
４．平均根数.
Fig．５　Comparisonofmorphologicalindexesbetween
plantletsgerminatedfromD．bulbiferamicrotuberswith
andwithoutlowtemperatureconservations　１．Average
plantletlength (cm);２．Averageleafnumber;３．Average
interstermlength(cm);４．Averagerootnumber．
图６　黄独微型块茎低温保存与未低温保存萌发苗的
生理生化指标比较　１．总叶绿素含量;２．POD活性;３．SOD
活性;４．CAT活性;５．可溶性糖含量;６．可溶性蛋白含量.
Fig．６　ComparisonofphysiologicalandbiochemicalinＧ
dexesbetweenplantletsgerminatedfromD．bulbifera
microtuberswithandwithoutlowtemperatureconservaＧ
tions　１．Totalchlorophylcontent(μg􀅰１０gＧ１);２．PODactivity
(nmoltetraguaiacol􀅰minＧ１􀅰mgＧ１protein);３．SODactivity(U􀅰
mgＧ１protein);４．CATactivity(nmolH２O２􀅰minＧ１􀅰mgＧ１protein);
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图７　黄独微型块茎低温保存与未低温保存萌发苗的
光合特性参数比较　１．净光合速率;２．气孔导度;３．细胞间
CO２浓度;４．蒸腾速率;５．气孔限制值;６．水分利用效率;７．瞬
时羧化速率.
Fig．７　ComparisonofphotosyntheticcharacteristicpaＧ
rametersbetweenplantletsgerminatedfromD．bulbifera
microtuberswithandwithoutlowtemperatureconservaＧ
tions　１．Pn(μmol􀅰mＧ２􀅰sＧ１);２．Gs(１００􀅰μmol􀅰mＧ２􀅰sＧ１);
３．Ci (μmol􀅰molＧ１);４．Tr (mmol􀅰mＧ２􀅰sＧ１);５．Ls (％);
６．WUE (μmol􀅰mmolＧ１);７．CUE (mmol􀅰mＧ２􀅰sＧ１)．
图８　黄独微型块茎低温保存与未低温保存萌发苗的
叶绿素荧光参数比较　１．初始荧光;２．最大荧光;３．最大光
化学效率;４．潜在光化学效率;５．实际光化学效率;６．捕获激发
能效率;７．光化学猝灭系数;８．非光化学猝灭系数.在图中表示
为百分比.
Fig．８　ComparisonofchlorophylfluorescencepaＧ
rametersbetweenplantletsgerminatedfromD．bulbＧ
iferamicrotuberswithandwithoutlowtemperature
conservations　１．Fo;２．Fm;３．Fv/Fm;４．Fv/Fo;５．ΦPS
Ⅱ;６．Fv′/Fm′;７．qP;８．NPQ．Expressedaspercentagesin
thefigure．
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９３７５期　　　　　　　　尹明华等:黄独微型块茎低温保存及其萌发苗遗传稳定性研究
图９　黄独微型块茎低温保存与未低温保存萌发苗的细胞峰值直方图　低温保存后的萌发苗(左);未低温保存萌发苗(右).
Fig．９　HistogramofcelpeakvaluesbetweenplantletsgerminatedfromD．bulbiferamicrotuberswithandwithoutlow
temperatureconservations　Theleftistheplantletsgerminatedmicrotubersconservedatlowtemperature;therightistheplantletsgerminated
microtuberswithoutlowtemperatureconservation．
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０４７ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３５卷