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Standard operating procedure(SOP)for Artemisia annua

黄花蒿规范化生产标准操作规程(SOP)



全 文 :广 西 植 物 Guihaia 28(3):363— 366 2008年 5月
黄花蒿规范化生产标准操作规程(SOP)
蒋运生,韦记青,梁惠凌,漆小雪,陈宗游,李 锋
( 薯 曩广西植物研究所,广西桂林541006)
摘 要 :以《中药材生产质量管理规范》(GAP)为指导原则,对黄花蒿栽培生产的区划 、生态环境、育苗技术 、
栽培技术、采收加工、档案、质量检测以及包装、储运等一系列过程开展研究。确定各个生产环节的最佳指标
和方法 ,制定了黄花蒿的规范化生产标准操作规程,提高黄花蒿的产量和质量。
关键词:黄花蒿 ;栽培技术 ;规范化生产 ;标准操作规程
中图分类号 :Q949.95 文献标识码:A 文章编号:1000—3142(2008)03—0363—04
Standard ,peratin~procedure(SOP)for Arfi ~ oo o rt temisia a
JIANG Yun-Sheng,WEI Ji—Qing,LIANG Hui—Ling,
QI Xiao-Xue,CHEN Zong-You,LI-Feng
(Guangxi Imtitu~of Botany,Guangxi Zhuang Autonomous Region and the Chinese Academy of Sciences,Guilin 541006,China)
Abstract:The division,ecological environment,seedling technique,cultivated technique,harvest and process,
file,the quantity examination,packing,store and carry the production for Artemisia口 口 were investigated
according tO Good Agricultural Practice of Chinese Crude Drugs(GAP)requirements.The best criteria and
methods for all production links in technology have been settled down.Standard Operating Procedure(S0P)
for A.ay/y/~a have been established in order tO make its high quality and high yield.
Key words:Artemisia口 口;cultivated technique GAP;standard operating procedure
黄花蒿 (Artemisia彻删 )是菊科艾 属一年生
草本植物,为我国传统中药(王三根等,2OO3)。其提
取物青蒿素制成的青蒿素类药是我国科学家自主开
发研制的抗疟特效药(杨水平等,2004)。中药材生
产质量管理规范(GAP)是国家食品药品监督管理
局制定与发布的,从保证中药材质量出发,控制影响
药材质量的各种因子,规范药材各生产环节乃至全
过程 ,以促进中药标准化和现代 化。由于黄花蒿特
殊的药用价值,我们以 “中药材生产质量管理规范”
为指导原则,系统地研究控制黄花蒿产量与质量的
关键因子,结合多年的研究成果,制定黄花蒿规范化
生产标准操作规程(SOP),旨为实现黄花蒿的规范
化栽培,提高黄花蒿药材的质量。
1 主要 内容和适用范围
按我国《中药材生 产质 量管理规范》(GAP)的
综合技术要求,对黄花蒿生产中区划、生态环境、育
苗技术、栽培技术、采收加工、档案、质量检测以及包
装、储运等技术作了研究,制定广西黄花蒿规范化生
产标准操作规程。本规程适用于广西黄花蒿主要生
产 区 。
收稿日期 :2007—07-27 修回日期:2007-12-19
基金项目:国家自然科学基金(30660222);中国科学院农办项目(KSCx2一Yw一 44一O5);广西科技攻关项 目(0663003);广西科学基金(0640138。
0731039)[Supported by the National Natural Science Foundation of China(3066022);The Project of Agricultural Ofice of the Chine$e Academy of Sciences
(KSCX2一Yw—N-44一O5);Key Technologies Research and Development Program of Guang)d(O663。。3);Science Foundation of Gang)d(O64O138,0731039)]
作者简介:蒋运生(1966-),男(瑶族),广西恭城县人,副研究员。主要从事植物引种栽堵研究,E-mail:Jys@gxib.cn。
。通讯作者(Author for c0rresp0ndence)
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364 广 西 植 物 28卷
2 引用标准
(1)GB5084-1992农田灌溉水质量标准。(2)
GB3095—1996大气环境质量标 准。(3)GB15618—
1995土壤环境质量二级标准。(4)WM2—2001药用
植物及制剂进出口绿色行业标准。(5)《中国药典》
2005年版一部。(6)国家药品监督管理局《中药材
生产质 量 管 理 规 范 》(试 行 )(2002年 版 )。(7)
GB9687—88国家食品包装卫生标准。(8)桂农办发
[2004]56号文关于确定广西种植业无公害农产品
认定环境检测免检参数的通知。
3 具体要求
3.1生态环境
黄花蒿在广西各地都有分布。主要分布于平
原、丘陵及低山地带;基岩为砂页岩、砂岩或石灰岩,
土壤为红壤、红黄壤及棕色石灰土。在海拔 300 123.
以下的石山、土坡、丘陵、平地、路边及房前屋后的红
壤、红黄壤、石灰土等均有分布,且能正常生长发育。
据测定,土层 0~35 cm深 的有机碳 含量 0.288 4
~ 1.785 6 ;有机质 0.255 7 ~3.078 4 oA;全氮
0.106 2 ~O.422 6 ;全磷 0.074 1 ~O.410 5 ;
全钾 0.661 0 ~3.179 9 oA(李锋等,1997)。
选择远离工矿区和公路铁路干线 、避开工业和
城市污染源 的适生地作 为黄花蒿 GAP生产基地 。
其中大气符合大气环境质量标准 (GB3095—1996),
土壤质量基本符合《土壤环境质量标准》(GB15618—
1995)中二级质量标准,灌溉水水质质量符合《农田
灌溉水质标准~(GB5084—92)中的二级质量标准。
3.2品种类型
黄花蒿在本规程中指的是菊科艾属一年生草本
植物 Artemisia鲫 Ⅱ。选用桂 93001号、桂 93004
号和桂 93006号等黄花蒿叶青蒿素含量≥0.8 的
高产优质的黄花蒿良种。
3.3黄花蒿生物学特性及生长 习性
黄花蒿为浅根系植物,主根短,侧根发达,多而
密集。从发芽到侧枝出现前,生长较为缓慢;5月下
旬至 7月下旬为高生长速生期;7月下旬后高增长
量逐渐缓慢;到 9月上旬的花蕾期,高停止生长。基
茎粗生长在生长前期即 5月下旬以前为速生期,该
期 间 茎 粗 增 长 最 快,生 长 量 占 整 个 生 长 量 的
3O.1 ;6月上旬至 7月 下旬 ,主茎 粗生长逐渐 缓
慢;在 8月上旬至 8月中旬,出现第二次增长高峰;8
月中旬后增长量不大,9月上旬停止增长(韦霄等,
1997)。黄花蒿整个生育期 约 24od,开花期为 8月
上旬至 9月下旬 ,1O月上旬果形 成,1O月 中旬种子
成熟,11月份为枯萎期。
黄花蒿整个生长发育期,叶片的 N、P、K、Ca、
Mg营养元素的含量是 N、K>Ca>P、Mg。叶片从
幼苗期到种子成熟期 ,N、K的含量总的变化趋势是
逐渐下降。在幼苗期,叶片的 N、K素营养含量为最
高。黄花蒿根、叶的干物质变化较为平缓,根的干物
质积累量达到最高的时期是 7、8月下旬,叶的干物
质积累量达到最高的时期是 7月下旬。茎的干物质
变化幅度很大,茎的干物质积累量达到最高的时期
是 8月下旬。
栽培黄花蒿的最大净光合速率(P 。 )、光饱和
点(LSP)和表观量子效率(AQY)均较高,分别达
22.38± 0.68/~molm- · ,1 564± 15/~molm- ·S-
和 0.075±0.002/~mol/~mol~;光补偿点 (LCP)较
低,达 18.1O±0.85/~molm{·S- 。黄花蒿的光合
能力强,能够利用很高的光强,且对弱光的适应性也
较强。强的光合能力有利于黄花蒿的生长,在人工
栽培黄花蒿的过程中应选择阳光充足的开阔生境
(王满莲等,2007)。
3.4黄花蒿繁殖操作规程
采用种子繁殖和组织培养两种方式培育。(1)
采种和种子处理 。于 1O月中旬以后采收,晒干或阴
干,除去茎、叶,然后用 1 mm细筛过筛,置于通风干
燥处或低温(3~6℃)贮藏。(2)播种期。黄花蒿从
采收后 12月至次年 4月底都可播种。但 1月中旬
至 2月中旬是播种的最佳 时期 。(3)直播。一般采
用条播,条距 20~40 cm,沟深约 1~2 cm。播种量
为 40~80 g/亩。种子 与细沙混 匀后 ,均匀撤在沟
内,然后盖上一层薄土,盖土以不见种子为度。种子
撤播后,要及时淋水,并注意淋水,保持湿润。(4)育
苗。苗床宜选在地势较高、有水源、灌排方便、背风
向阳的地方。播种基质可选用砂壤土或草皮灰,施
足农家肥。将选好的地深翻打碎后起畦,畦高 2O~
25 cm,宽 1.2 ITI,长 因地而宜,畦间隔 50 cm。每 1
ITI 施经腐熟的有机肥 2 kg和过磷酸钙 0.2 kg作
基肥。将种子与草木灰或河砂混和,一般种沙比例
为1:750,拌匀,用水撒湿畦面,然后将种灰或种沙
匀撤畦面,再薄盖 1层草木灰、细砂或细土,以遮住
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3期 蒋运生等:黄花蒿规范化生产标准操作规程(SOP) 365
种子为宜。用竹子做成拱棚,盖上塑料薄膜,四周用
土压实即可。(5)组织培养苗培育。黄花蒿幼叶、茎
段、花序等不同外植体均能诱导形成愈伤组织,其中
叶比茎 、花序更为容易 ,培养 5~10 d后 ,开始长出
愈伤组织,而茎和花序分别需要 2周、4周才开始形
成愈 伤 组 织 。培 养 基 MS+ 6-BAI.0 mg/L+
IBAO.1 mg/L、MS+6一BA0.5 mg/L+IBA0.1 rag/
L和 MS+NAA0.1 mg/L+IBA 0.5 mg/L可分别
用于黄花蒿组培快繁的芽诱导、增殖和生根培养,增
殖倍数为 5.5倍/20 d,生根率 98.3 。培养基 MS
+CCC1.0 mg/L、MS+CCC2.0 mg/L、MS+PP
4.0 mg/L可用作离体保存。(6)苗地管理。淋水:
保持土壤湿润,播种后一般是一个星期淋水 2~3
次。除草:坚持除早、除了,减少杂草争夺水分和养
分。施肥:在苗生长期间可适当施用复合肥、充分腐
熟的粪水或麸水。间苗和除草:25 d左右太密的要
间苗、除草。在苗过密处,疏除小苗、弱苗,保留长势
良好的壮苗。一般留苗数量以 400~500株/m。为
宜。炼苗:待株高 5~10 cm时应开始炼苗。天气睛
朗时白天打开膜让其适应外界环境,炼苗后一个星
期便可移栽 。
3.5黄花蒿苗移栽定植操作规程
3.5.1选地整地 选择阳光充足、土壤较深厚、质地
疏松 ,保水保肥性强的沙壤或粘壤 土种植 。将 土壤
深翻20~30 cm,翻后打碎土块,除去石块、树枝、杂
草。开沟起畦 ,畦宽 1OO~120 cm,畦高 20 cm,畦长
2 OOO~3 000 cm,畦沟宽 20 cm。畦东西向、种植南
北向为最佳。
3.5.2基肥施用 使用腐熟农家肥、草皮灰、垃圾肥
等 ,每亩 2 000~3 500 kg,再加 25~35 kg钙镁磷肥。
3.5.3定植 当苗床的苗出现 4处片真叶(苗高约
15~25 cm)以上时即可以进行移栽。在广西定植时
间在 3月进行 为好。种 植 密 度一 般株 距 2O~ 5O
cm,行距 20~50 cm。移栽时培土以刚覆盖根颈部
即可,每穴栽 1株苗,灌足定根水。
3.5.4田间管理 (1)灌溉与排水:幼苗期(6片真
叶前)的水分管理尤其重要,土壤干旱或水分过多都
影响正常生长,土壤过干,影响黄花蒿的生长,植株
生长量小,应及时灌溉。如遇长期干旱,可结合追肥
进行浇水。黄花蒿耐涝能力较弱,田间积水容易引
起烂根,特别连绵雨季地要注意及时排水。(2)查苗
补苗:移栽后的前两个星期,应定期检查移栽苗的成
活情况,出现缺苗断垄的情况,及时进行补苗。(3)
松土、除草:在没有封行前要注意中耕除草,一般在
追肥前进行。(4)打顶:当苗高长到 40 cm左右时,
进行打顶摘心 ,一般摘去顶尖 3~4 cm。(5)追肥 :
在苗期和生长盛期各追肥 1次,以施水肥为主,即 4
月上旬施一次尿素加过磷酸钙;5月下旬追施一次
复合肥。尿素浓度为 0.4 ,过磷酸钙为 1 ,复合
肥为0.4 ~0.5 。(6)病虫害防治:黄花蒿主要
的病虫害有茎腐病、猝倒病、桃蚜、小地老虎、菊瘿蚊
等(梁惠凌等,2007)。猝倒病:幼苗出土后遭受病菌
侵染,茎基部发生水渍状暗斑,继续绕茎扩展,逐渐
缢缩呈细线状,致使幼苗地上部因失去支撑力而倒
伏地面。3月初开始发病。防治方法:避免苗床土
壤过湿,苗床内保证较充足的光照以及 良好的通风
条件。58 甲霜灵锰锌 400倍对苗期猝倒病有很强
的抑制作用。茎腐病:初期部分枝叶出现萎蔫,后期
整株萎蔫,叶子保持绿色,不落叶,拔起整株可见根
皮变黑,易脱落。剪开茎部,木质部变黑,严重的韧
皮部也变黑。防治方法:①用 5O 代森锰锌可湿性
粉剂撤施,耙人定植土中,进行土壤灭菌消毒 ②每
15 d喷药 1次,连喷 2~3次。可采用 95 精制恶
霉灵可湿性粉剂+7O 代森锰锌可湿性粉剂 1:1
复配 1 000倍液,95 9/6精制恶霉灵可湿性粉剂+
5O 多菌灵可湿性粉剂 1:1复配 i000倍液进行药
剂防治。小地老虎 :发生高峰期在 3月中旬左右,地
老虎取食青蒿幼苗时首先咬断幼苗茎基部,但不拖
人穴中,垅面可见残缺不全的幼苗。小地老虎只取
食幼嫩小苗。防治方法①农业防治:冬季注意清园,
春季起垄时撤石灰粉。②化学防治:用 4O 辛硫磷
乳油 1 000倍液、48 乐斯本乳 1 500倍液 、21 增
效氰 ·马乳油 2 000倍液喷雾处理。菊瘿蚊(Diar-
thronomyia chrysa nthemi Ahlberg):虫瘿初见在 4
月,5~8月都可见白色蛹壳脱在虫瘿口。幼虫在组
织内取食,并刺激组织膨大呈虫瘿。在广西 6月是
菊瘿蚊发生发展高峰期。防治方法:黄花蒿生长季
节时勤观察,发现虫瘿及时摘除,集中销毁。成虫期
喷洒 4O 氧化乐果 l 000倍稀释液。
3.6采收与加工
黄花蒿以初蕾期采收最为适宜,此时其产量和
青蒿素产量均较高。在广西于 8月上旬~9月上旬
采收。采收时应选 在大 晴天 ,中午开始 收割最好 。
将主杆砍倒 ,倒竖在原地晒半天 ,然后再移至晒场晒
干。第二天打落其叶子花蕾,去除茎干,将叶子花蕾
包装好,放于通风阴凉处保存。
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366 广 西 植 物 28卷
3.7质量标准及监测
根据《中华人民共和国药药典》、企业标准和购
销合同等有关标准,按每批件数的 1 随机抽检样
品。来源于黄花蒿的叶。
3.7.1显微鉴别 叶片表面观表皮细胞形状不规
则,垂周壁波状弯曲,长 18~41~80 m;脉脊上的
表皮细胞为窄长方形,气孔不定式。密布丁字毛,中
脉尤多,具多细胞柄部及两端不对称的单细胞臂部;
柄细胞短小,3~10个,多为 4~5个,基部细胞常膨
大,顶端细胞萎缩,其细胞壁薄并皱缩;壁细胞长
240~480~816 m,在中脉附近其臂部常脱落,只
留下多细胞柄部。腺毛密布,为多细胞无柄腺毛,腺
头呈椭圆形,充满淡黄色挥发油,两个半圆形分泌细
胞的排列方向一般与中脉平行(郑虎占等,1997)。
3.7.2药材质量标准 水分:按 G135009.3-85中第一
法测定,未超过 1O ;总灰分:按 GB5OO9.4-85规定测
定,未超过7 9/6;酸不溶性灰分:按 GB8308-87规定测
定,未超过 0.9 ;青蒿素含量测定:采用柱前衍生一
RP-HPLC法测定青蒿素的含量(刘金磊等,2007)。
3.7.3重金属限量指标 铅(Pb)按 GB/T 5009.12-
1996规定测 定;铅 (Pb)≤ 2.49 mg/kg。镉 (Cd)按
GB/T 5009.15-1996规定测定;镉(Cd)≤O.2 mg/kg。
砷(As)按 GB/T 5009.11-1996规定测定 ;砷 (As)≤
0.6 mg/kg。汞(Hg)按 GB/T 5009.17—1996规定测
定;汞(Hg)≤O.2 mg/kg。铜 (Cu)按 GB/T 5009.17—
1996规定测定 ;铜(Cu)≤18.2 mg/kg。
3.7.4农 药残 留限量 指标 有机氯 农药残 留量按
GB/T 5009.19-1996规 定 测定 ;六 六 六 (BHC)≤
0.1 mg/kg。滴滴涕(DDT)≤0.1 mg/kg。五氯硝
基苯(PCNB)≤0.1 mg/kg。艾 氏剂≤0.02 mg/kg。
3.8文件和档案记录
对基地的大气、水源、土壤分析资料、种子来源、
栽培管理、农药和化肥施用量、质检报告等均应有详
细记录。
3.9包装 、储藏及运输
包装:包装材料多用聚乙烯、麻袋、编织袋、塑料
尼龙等,但以编织袋包装为好。按 5O kg为一包装
单位;产品标志使用 GAP绿色标志,注明“GAP产
品”。每件包装上应标明:品名、规格、等级、净重、毛
重、批号、生产单位、执行标准、采收时间和包装 日
期、质量检验合格证等。储藏:黄花蒿干叶应存放于
专用的仓库中。仓库必须保持阴凉、干燥、通风、避
光、防虫。仓库内空气湿度为 5O ~6O 最佳。库
房应有专人管理,并进行定期检查。运输:运输中要
注意运输车辆应有防雨、防潮、防污染的条件,运输
工具必须清洁。在运输 时采用单项装运,不得与化
肥、农药等其他有毒有害物质混装。运输时保持干
燥,并设有防雨、防晒和防潮措施。商品运到交货地
点后,应立即卸车交货,并完善货物交接手续。
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