全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 29(6)：885— 888 2009年 11月
不同遮荫处理罗汉果内在品质的变化研究
黄丽娟1一，莫长明l，马小军1，4*，李典鹏0，王海英
(1．中国医学科学院 药用植物研究所 广西分所，南宁 530023；2．广西大学 林学院，南宁 530005；
3． r
中- 毳广西植物研究所，广西桂林54106；4．中国医学科学院药用植物研究所，北京10193)
摘 要 ：以罗汉果‘永青 1号’品种为试验材料 ，在授粉 30 d后 ，设置不遮荫、遮荫 7O 、遮荫 95 三个处理，
探讨遮荫对罗汉果总苷、总糖、维生素c等内在品质的影响。结果表明：在授粉30 d后，对罗汉果进_／仃一定程
度的遮荫处理，显著提高了罗汉果果实重要内含物总苷 、甜苷V、总糖和维生素 c的含量，可有效改善罗汉果
果实的内在品质。遮荫 7O％处理条件下较适宜罗汉果果实内含物的累积。
关键词 ：罗汉果 ；遮荫；品质变化
中图分类号 ：Q946 文献标识码：A 文章编号 ：i000—3142(2009)06—0885—04
Changes 0f the internal quality in fruits 0f Siraitia
grosvem under ‘““rent；hading treatmentsnOrll Oltte sn l~
HUANG Li—Juan 2，MO Chang-Ming ，MA Xiao-Jun ，¨ ，
LI Dian-Peng0．Ⅵ NG Hai-Ying
(1．Guangxi Branch Institute，Institute of Medicinal Plant Development，Chinese Academy of Medical Sciences，Nanning
530023，China；2．College of Forestry Guangxi University，Nanning 530005，China；3．Guangxi Institute of Botany，
Guangxi Zhuang Autonomous Region and the Chinese Academy of Sciences，Guilin 541006，China；4．Institute
of Medicinal Plant Development，Chinese Academy of Medical Sciences，Beijing 100193，China)
Abstract：On the thirtieth day after polination，‘Yongqingl’was treated by three ways of natural lighting，70
shading and 95 shading to study shading effects on internal quality in fruits of Siraitia grosvenorii．The results
were as follows：some shading treatments on S．grosvenorii significantly increased contents of total mogroside，mogro—
side V，total sugar，vitamin C of fruits and effectively improved fruit internal quality of S．grosvenori．The condition
of 7O shading treatment was beneficial tO inclusion accumulation．
Key words：Siraitia grosvenorii；shading treatment；quality change
罗汉果具很强的地域性 ，自然分布主要在广西
桂北凉爽 、湿润的山区，成为广西著名道地药材 。罗
汉果含有多种罗汉果苷 。各种罗汉果苷含有一个相
同的葫芦烷型四环三萜(罗汉果醇)骨架，骨架连接
的糖均为葡萄糖，差异仅在于随着果实生长发育，在
C3和 C24上连接的葡萄糖数 目不同，进而从低糖苷
到高糖苷逐步形成不同的罗汉果苷。其中罗汉果甜
苷 V是罗汉果苷 中最重要的甜味成分 (Makapugay
等 ，l985)，为世界上最强 的天然甜味物质之一。由
于市场对罗汉果需求的增长和退耕还林保护生态的
要求，罗汉果栽培从山林扩展到了平地，生境的光照
和温度条件发生较大变化。光照和温度变化可能影
响光合和代谢相关酶的活性，进而对果实中糖的运
输、代谢与积累起调节作用，如交让木遮荫后净光合
收稿日期：2009—07—29 修回Et期 ：2009—10-20
基金项 目：国家自然科学基金(30860379)；广西科技成果转化项目(桂科转0896002—8)[Supported bytheNational Natural Science Foundation of China
(30860379)；Science and Technology Achievement Transformation Program of Guang)d(O8960。2—8)]
作者简介：黄丽娟(1 983一)，广西桂林人，硕士研究生，主要从事罗汉果品质调控研究。
通讯作者(Author for corresp0ndencc，E—mail：xjma@public．bta．net．cn)
886 广 西 植 物 29卷
速率升高(李晓征等，2006)；柑橘在果实发育过程中
遮荫，蔗糖含量显著增加，果实品质改善(陈俊伟等，
2001)；高山红景天遮荫后 红景天苷有所增加 (阎秀
峰等，2004)；猕猴桃适度遮荫，可溶性 固型物、总糖
含量增加 ，显著提高果实品质 ，过度遮荫则可溶性固
型物、总糖含量逐渐减少 ，果实 内在品质降低 (何科
佳等，2007)。但光照和温度对罗汉果果实糖 、甜苷
等内在品质的影响规律尚未见有相关文献报道 。本
研究通过遮荫调节光照和温度 ，探讨其对罗汉果 内
在品质的影响，旨在为生产实践中利用光照、温度来
改善果实品质和改进平地栽培技术提供理论依据。
1 材料和方法
1．1材料种植及处理
以‘永 青 1号 ’品 种 为 试 验 材 料，按 杭 玲 等
(2003)的方法进行栽培管理 。在盛花期，选取 9株
生长一致的植株进行授粉 ，每株授粉 1O个，并挂牌
标记时间。于授粉后 30 d，随机抽取授粉植株 ，设置
3个处理 ，每处理重复 3次 ，每个重复 l株。不搭盖
遮荫网作为对照(CK)；在果棚上 20 cm处搭盖遮荫
密度为 70％的遮荫网作 为遮荫 70 处理(SH 。)；在
果棚上 20 cm 处搭盖遮荫密度为 95 的遮荫网作
为遮荫 95 处理(SH。 )。每处理 3株。
1．2采样及测试方法
1．2．1采样方法 搭盖遮荫网当天，于选定将分别
用于进行 CK、SH 。、SH。处理 的每个重复植株上，
分别随机采集罗汉果 5个 ，作为遮荫前样本；搭盖遮
荫网后 ，等到 CK、SH 。、SH。 三个处理果实成熟(果
柄发黄)时，各处理的每个重复植株上再分别随机采
集罗汉果 5个 ，作为遮荫后样本 ，进行 罗汉果 ⅡE、
Ⅲ、Ⅳ、V和总苷、总糖 、维生素 C含量测定。
1．2．2苷 ⅡE、Ⅲ、Ⅳ、V测定 方法 标准品溶液制
备：精密称取罗汉果苷标准品加 甲醇配成浓度 0．70
mg／mL的储备液。供试样品溶液的制备：分别取遮
荫前、后不同处理罗汉果各 5个 ，破碎，置于圆底烧
瓶中，按固液比 1：10加入蒸馏水 ，加热至沸，回流
提取每次 1 h，共 3次。水提液过滤后 ，经大孑L吸附
树脂 吸附，然后用 蒸馏 水 冲洗 至流 出液无色 。以
80 乙醇液洗脱，收集洗脱液，旋转蒸发，得到罗汉
果总苷提取物。精密称取罗汉果提取物加入 l0 mL
容量瓶中，加甲醇超声溶解 10 min，冷却至室温，甲
醇定容至刻度，摇匀 、离心，备用。色谱条件 ：色谱条
件为色谱柱 ：Luna 5uC18(250 mm×4．6O mm)；流
动相 ：乙腈(B)：0．1 9／5磷酸水(A)一17：83(v／V)；
流速 ：o．8 mL／min；检测波长 ：203 nm；柱温 ：25℃；
进样量 ：5 L。标准品溶液、供试样品溶液的测定 ：
将标准 品溶液、供试 样 品溶液 各 5 txL分别注入
HPLC仪，按照上述的色谱条件进行含量测定。测
定罗汉果苷 ⅡE、Ⅲ、Ⅳ、V的色谱峰面积分值 ，计算
不同处理罗汉果鲜果苷 ⅡE、Ⅲ、Ⅳ、V的含量。
1．2．3总苷含量测定方法 罗汉果总苷含量测定方
法由桂林莱茵生物科技股份有限公司提供，测定方
法：(1)精密称取对照品 30～40 mg置于 1O mL容
量瓶中，加 甲醇，超声溶解 15 min，冷却到室温，定
容至刻度，摇匀离心 10 min(10 000 r／rain)。上清
液为对照品溶液 。(2)精密称取样 品 3O～40 mg左
右置于 10 mL容量瓶中，加甲醇，超声溶解 15 min，
冷却到室温，定容至刻度，摇匀离心 10 min(10 000
r／min)。上清液为样品溶液。(3)用微量取样器精
密吸取 0．1 mL样 品溶液 ，置磨 口具塞试管中，8O℃
挥干溶剂后 ，冷却 到室温。加新配制的 5 香草醛
一 冰醋酸 0．2 mL，高氯酸 0．8 mL，摇匀 ，于 6O℃水
浴加热 15 min后 ，取 出，冰水冷却 5 min，加冰醋酸
5 mL，摇匀 。溶液为蓝紫色，静置 5 min后测定，对
照品同法操作。以 0．1 mL甲醇同法操作，作为空
白。上述溶液在 590 nm处测定吸光度。
^ ＼／ ^／r
罗汉果总苷含量(％)一 ×100
n 2 ^ 』VI1
式中A ：样品吸光度值；M1：样品取样量(mg)；
A。：对照品吸光度值；M2：对照品取样量(mg)。
1．2．4总糖含量测定方法 总糖含量的测定采用袁
晓华等(1983)的 3，5-二硝基水杨酸比色法。
1．2．5维生素 C含量测定方法 (1)称取罗汉果样
品 5 g，放在研钵 中加入 2 草酸溶液，通过漏斗将
研碎的样品倒人一只 100 mL的容量瓶 中，研钵及
杵用 2 草酸溶液冲洗，并将洗液一并倒入该容量
瓶中，最后用 2 9／6草酸定溶至刻度，过滤，滤液备用。
(2)取标准抗坏血酸溶液至三角瓶中，以 2，6一二氯
酚靛酚溶液滴定呈红色 ，并在 15 S内不褪 色为终
点。计算染料相当于抗坏血酸的质量(mg)(重复 3
次，取平均值)。取滤液 1O mL于三角瓶中，用已标
定的2，6一二氯酚靛酚溶液滴定至粉红色并且在 15 S
内不褪色为终点，记下染料的用量(重复 3次，取平
均值)。滴定过程不超过 2rain，快速滴定可避免或
减少一些非维生素 C的物质的还原作用。(3)空白
6期 黄丽娟等：不同遮荫处理罗汉果 内在品质的变化研究 887
滴定 ：用以消除提取液中其他具有还原力的物质 ，如
谷胱甘肽。吸取 l0 mL提取液滴加 3～4滴的硫酸铜
溶液，再加水，在 100℃下加热 10 m_in，冷却后用染料
滴定重复 3次，由于铜离子的存在抗坏血酸被破坏，
使提取液中其他具有还原力的物质与染料反应。
维生素 C含量 (rag／lO0g)==
(Vl—V2)× l×V3、， ，、
— — 一 ^ 川
式中， 。为滴定样品所用染料 的体积 ，mL；V
为滴定空 白所用染料的体积 ，mL； 为 1 mL染料
溶液相当的抗坏血酸 的质量 ，mg／mL；V。为样品溶
液定容后的总体积，mL； 为样品的质量，g；V 为
滴定时吸取样品溶液的体积，mL。
1．3统计方法
为避免各试验处理植株间初始差异影响，以遮
荫前样本的罗汉果苷V、总苷、总糖 、维生素 C含量
分别作为空白值，以遮荫后样本的罗汉果苷V、总
苷、总糖 、维生素 C含量分别作为测定值 ，计算从搭
盖遮荫网至果实成熟期间各处理 的每个重复的罗汉
果苷 V、总苷 、总糖 、维生素 C含量 的净累积量，并
进行差异显著性分 析，探讨遮 荫对罗汉果苷 V、总
苷、总糖 、维生素 C内在 品质 的影响，计算公式 如
下：净累积量(％)=：遮荫后样本含量( )一遮荫前
样本含量( )。
2 结果与分析
2．1遮荫对苷 ⅡE、Ⅲ、Ⅳ、V累积的影响
表 1显示，遮荫前 ，果实中罗汉果苷主要为苷 Ⅱ
E、Ⅲ，苷Ⅳ、V的含量较少或没有 ，CK、SH 。、SH。
三个 处理 的苷 ⅡE含量 分别 为 0．15 、0．18 、
0．15 ，苷 Ⅲ含量分别为 0．08 V0、0．02 、0．06 ，
苷 ⅡE的含 量分 别 比苷 Ⅲ的含 量 高 出 87．5O 、
157．14 、150．00 。遮荫后 ，果实中罗汉果苷则仅
有苷V，苷 ⅡE、Ⅲ、Ⅳ的含量均为 0。遮荫后与遮荫
前相比，CK、SH 。、SH。三个处理苷 V平均含量均
提高。遮荫处理 SH 。、SH。苷V平均净累积量比不
遮荫处理 CK分别高 出 15．63 、9．38 。其 中，遮
荫处理 SH 。苷 V平 均净 累积量 与不遮 荫处理 CK
差异达到显著水平。但遮荫处理 SH。 苷 V平均净
累积量低于遮荫处理 SH 且与不遮荫处理 CK差
异不显著。
表 1 不同处理罗汉果苷 ⅡE、Ⅲ、Ⅳ、V含量比较
Table 1 Comparison of mogroside I E，II，lV，V contents under different treatments
注：表中数值为各处理三次重复的平均值，以下同。
Note；The values are the average of three replications in all treatments，the same below
2．2遮荫对罗汉果的总苷、总糖、维生素 C的含量影响
遮荫后与遮荫前 相 比，CK、SH 。、SH。三个 处
理总苷平均含量均提高。遮荫处理 SH 。、SH 苷
平均净累积量比不遮荫处理 CK分别高 3．17、5．75
倍 ，差异均达到了极显著水平 。且遮荫处理 SH 总
苷平均净 累积量 高于遮荫处理 SH 。，差异极显著
(表 2)。
从表 2看出，遮荫后与遮荫前相 比，CK、SH 。两
个处理总糖平均含量均提高，SH 总糖平均含量则
降低。遮荫处理 SH 。总糖平均净累积量 比不遮荫
处理 CK高 2．23倍，二者差异达到极显著水平。与
不遮荫处理 CK 和遮荫处 理 SH 。相 比，遮 荫处 理
SH 糖平均净积累量则降低，达到极显著水平。
表 2还显示 ，遮荫后 与遮荫前相 比，CK、SH 。、
SH。s三个处理维生素 C平均含量均提高。遮荫处
理 SH 。、SH。 维生素 C平均净积累量比不遮荫处理
CK有不同程度提高，分别提高了5．40 、30．20 ，
且随着遮荫程度的增加 ，维生素 C平均净积累增加
的幅度增大。其中，遮荫处理 SH。与不遮荫处理
CK、遮荫处理 SH 。的维生素 C平均净累积量差异
均达到极显著水平，维生素 C含量提高非常明显。
但遮荫处理 SH 。与不遮荫处理 CK 的维生素 C平
均净累积量差异未达到显著水平，维生素 C含量提
高不明显。
888 广 西 植 物 29卷
表 2 不同处理罗汉果的总苷、总糖、维生素 C的含量比较
Table 2 Comparison of total mogroside，total sugar，vitamin C contents under different treatments
3 讨论与结论
(1)罗汉果授粉 30 d时，果实内含有 的低糖苷
较多，高糖苷较少甚至没有；而在果实成熟后，果实
内只有高糖苷 ，即罗汉果 苷 V，低糖苷 的含量均为
0。这种现象提示 ，罗汉果苷V(甜苷)可能以幼果中
的苷 ⅡE作为前体 ，经历一个 以葡萄糖残基逐步转
移的复杂生源途径 ，依次形成呈强甜味的苷Ⅳ、苷V
的过程，与刘金磊等(2007)的报道一致。遮荫调节
光照和温度未破坏罗汉果低糖苷随着果实发育 ，逐
步转化成高糖苷的生源途径。
(2)遮荫处理的苷 V平均净累积量均 比不遮荫
处理对照的高，遮荫 7O 处理的苷V平均净累积量
比不遮荫处理对照高出 15．63 ，差异达显著水平，
表明适当进行遮荫处理能有效地提高罗汉果苷V的
含量 ，遮荫 7O 处理可能是罗汉果较理想的生长和
苷V累积生境条件。遮荫 95 9／6处理的苷V平均净
累积量低于遮荫 70 处理 的，与不遮荫处理对照苷
V平均净累积量差异也不显著，说明过度遮荫不利
于罗汉果苷V累积。可能是过度遮荫影响罗汉果生
长和光合作用 ，导致糖含量降低，阻碍罗汉果苷合成
所致。葡萄糖既是光合作用的直接产物，也是罗汉
果苷合成的底 物。本研究 中遮荫 95 处理的植株
出现较明显的落叶、落果和总糖含量极显著降低现
象就是 良好的印证 。这也预示着罗汉果光合作用对
罗汉果苷V的合成与积累具有重要影响。
(3)遮荫 70 和 95 9／6处理总苷平均净累积量比
不遮荫处理对照均明显提高，且 随着遮荫程度的增
加，提高的幅度显著增加。遮荫70 和 95 处理总
苷平均净累积量分别高于不遮荫处理对照 3．17、5．75
倍 ，与不遮荫处理对照均差异达到极显著水平，且遮
荫 7O 和 95 两个处理间差异也达极显著水平。这
些表明遮荫能有效提高罗汉果总苷的含量。
(4)遮荫 70 处理的总糖平均净累积量高于不
遮荫处理对照 2．23倍 ，二者差异达极显著水平，表
明适当进行遮荫处理能有效地提高罗汉果总糖的含
量，遮荫 70 9／6处理可能也是罗汉果总糖累积的较理
想生境条件。而遮荫 95 处理随着果实发育总糖
平均含量则明显降低，总糖平均净累积量与不遮荫
处理对照和遮荫 7O 处理差异达极显著水平，说明
过度遮荫也不利于罗汉果总糖累积。果实中的总糖
含量包含了葡萄糖 。导致这一现象的原因可能有两
个：一是过度遮荫阻碍了光合作用的进行 ，光合作用
产生的葡萄糖量减少，进而导致总糖含量降低；二是
遮荫处理的罗汉果苷含量较高 ，合成消耗的葡萄糖
也较多，所以也会导致总糖含量的降低。
(5)遮荫 7O 和 95 处理维生素 C平均净累积
量 比不遮荫处理对 照有不同程度提高 ，且随着遮荫
程度的增加 ，维生素 C平均净累积量增加的幅度增
大。其中，遮荫 95 处理与不遮荫处理对照和遮荫
7O％处理相 比，相互间维生素 C平均净累积量差异
均达到极显著水平 ，维生素 C含量明显提高。这表
明进行一定程度的遮荫处理 ，可有效提高罗汉果维
生素 C含量。
综上所述 ，在授粉 3O d后 ，简单地对罗汉果进
行一定程度的遮荫处理 ，即可提高罗汉果重要 内含
物总苷 、甜苷 V、总糖和维生素 C的含量 ，有效改善
罗汉果果实的内在品质 。这可能是因为遮荫调节了
罗汉果生境的光照和温度 ，影响糖和苷等代谢相关
酶的活性，进而对相应品质指标的合成、运输和累积
起调节作用所致。这些可为在生产上采用遮荫方法
来提高罗汉果苷等的含量和光合筛选培育高甜苷含
量品种提供理论基础。
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(下转第 826页 Continue on page 826)
826 广 西 植 物 29卷
GI为 93．7 9／6，已大于 8O 。此时 ，从 温度 、发芽指
数和 C／N比三个指标均可认为堆肥已达到腐熟 。
从 以上结果看 出，应用不 同的指标进行八角提
油下脚料与甘蔗滤泥、桐麸联合堆肥腐熟度评价时，
得到不同的评价结果，这可能是因为堆肥的腐熟度
受很多因素的综合影响 ，单个化学指标 的评价只能
片面地反映某个阻碍因素的作用 ，从 而难以准确评
价有机固体废弃物堆肥的腐熟度。考虑到堆肥产品
最终将用作有机肥进行作物的生产，如果堆肥含有
植物毒性物质，将对植物的生长产生抑制作用，也就
无法作为肥料应用 ，而种子发芽指数 GI综合反映
了堆肥产品的植物毒性 ，被认为是最敏感 、最可靠的
堆肥腐熟度评价指标(杨国义等，2003)。
八角提油下脚料与甘蔗滤泥、桐麸联合堆肥可
以种子发芽指数 GI为堆肥腐熟度主要评价指标，
C／N 比指标和温度等指标 可作为辅助评价指标 ；在
八角提油下脚料与甘蔗滤泥、桐麸在干重 比为 4：8
：3，肥堆起始 C／N 比为 31．45的条件下进行高温
好氧堆肥 ，当堆制 31d时，堆肥达到腐熟。
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