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Antifungal activity against plant pathogens of the extracts from Salsola passerina

珍珠柴粗提物对13种植物病原菌的抑制活性



全 文 :广 西 植 物 Guihaia 29(1):132— 135 2O09年 1月
珍珠柴粗提物对 13种植物病原菌的抑制活性
任 芳,刘 强
(天津师范大学 化学与生命科学学院,天津 3oo387)
摘 要:以生长速率法测定了珍珠柴 7种溶剂粗提物对棉花黄萎病菌 V991、棉花黄萎病菌 V43—1、棉花枯萎
病菌、茄子黄萎病菌 、稻曲病病菌 、苹果黑星病菌、番茄枯萎病菌、番茄叶霉病菌、黄瓜黑星病菌、西瓜炭疽病
菌、芦笋茎枯病菌、扩展青霉和梨黑斑病菌 13种植物病原菌的抑制活性。结果表明,不同溶剂粗提物的抑菌
活性差异很大 ,某些溶剂粗提物对个别病菌表现出较强的抑制作用,如水粗提物对棉花黄萎病菌 V991,石油
醚粗提物对苹果黑星病菌的抑制率分别达 1。O 和91.89 ;有的溶剂粗提物的病菌抑制作用较弱,如二氯甲
烷粗提物对 13种病菌的抑菌率均较低;有些还表现出一定的促进生长作用 ,如甲醇粗提物对梨黑斑病菌表现
为明显的促进生长作用。
关键词:珍珠柴;粗提物 ;植物病原菌;抑菌活性
中图分类号 :Q946 文献标识码:A 文章编号:1OOO一3142(2。O9)O1一O132一O4
Antifllngal actiVity agaiI t plant path0geIls 0f
the extracts fI.0m S Z DZ p JP.Z n
REN Fang,LIU Qiang
(C0f D, 研l s£ )J删 S nce,n 抽N0凇z ,Tia in 3OO387,China)
Abstract:The bi0activitities against 1 3 species of fungi of seven solvent extracts from SnZs0 户口ss m were studied
by growth rate meth0d. The results showed that different extracts had dramaticaI1y different fungistatic effects on the
fungi tested.S。me extracts had strong fungistasis on some species of fungi. rhe inhibiti。n rate 0f the boIling water
e赋racts achieved 1OO on 埘,z ,I胁 g V991.A】l 7 extracts had the efects on 吁觑砌 已口m 协 ,furthe卜
more,the inhibition rate of the petr0leum ether extracts achieved 9l_89 .S0me had a litle fun stasis on some species,
such as dich1or0methane e)(七racts had lower fungistasis against aIl 13 fungi.While some had prom0tioml efect on some
specieS 0f fungi,f0r example,methan0l eXtracts hd an evidently promotional effect 0n A£ r行 口愚 愚 口 gr0 h
Key words:SnZs0Z日 口s5 r 日;extracts;plant path。gens;fungistasis
植物源杀菌剂是指从植物的某些部位提取具有
杀菌、抑菌活性的有效成分,以及分离纯化的单体物
质加工而成的用于防治植物病害的药剂(Swain,
1977)。从植物中寻找杀菌、抑菌活性物质现已成为
当今开发、研制无公害新型杀菌剂 的热点之一。有
关植物源杀菌剂方面的研究报道 目前有很多(范青
生等,l995;冯俊涛等,2O01;王理达等,2OO1;李玉平
等,2O02a,2OO3b)。珍珠柴 (Snz oz口 &s r 72“)属
藜科猪毛菜属,强旱生半灌木(马毓泉等,199O)。根
据多年来在该地区相关研究发现该植物没有病害,
极少有虫害,因此认为该植物可能存在抗生性,但未
见关于该植物化学成分及其生物活性方面的研究报
道。作者的初步研究发现了该植物的粗提物对小菜
蛾有显著的产卵忌避作用(另文发表),本文报道了
珍珠柴7种溶剂粗提物对 13种常见的植物病原真
菌的抑制活性,旨在从该植物中筛选和创制新型杀
收稿日期 :20O7—1O一12 修回日期 :2。O8一O9—25
基金项目:国家自然科学基金(3O570344)[supported by the Nati0naI Naturai ence F0undatiDn 0f chim(30570344)]
作者简介;任芳(1982一),女,内蒙古包头市人,硕士研究生,主要研究方向是保护生物学。
。通讯作者(Auth0r for corresp。ndence,E—mai1:lqqnu@126.com)
1期 任芳等 :珍珠柴粗提物对 13种植物病原菌的抑制活性 133
菌剂奠定基础。
1 材料和方法
1.1材料
将采自内蒙古乌海市的珍珠柴茎、叶荫干,用粉
碎机粉碎,过 4O目筛 ,备用。提取溶剂 :自来水、无
水甲醇 、无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷和石油
醚(有机溶剂均为分析纯,天津化学试剂六厂)。供
试菌种:棉花黄萎病菌 V99l( f “ “ zi口
V991),棉花 黄萎病菌 V43—1( r c 口^Z “g
V43—1),棉花枯萎病菌(F“ “r “ 0z Dr f.sp.
vasinfectun),茄子黄萎病菌 ( r fⅢ “ &
& ),稻曲病病菌( £ zng 0 e nu r ” ),苹果黑星
病菌( “r “ “eq z s),番茄枯萎病菌(F“ “r 一
“ oz 乡0r“ sp.1ycopersici),番茄叶霉病菌(C2n—
dosp0r池m -厂乱£ m),黄瓜 黑 星 病 菌 (C.c“c“mer{一
m),西瓜炭疽病菌(Ccl z f0£r彳c Dr6如“ r ),
芦笋茎枯病菌(P 0^ fJ “ nsp口r“g ),扩展青霉
(PP m ez户删 )和梨黑斑病菌(Az抛r “r “
是“ 口,z“),均由天津植保所提供。
1.2方法
有机溶剂粗提物的提取采用冷浸法,将珍珠柴
茎叶混合粉末分别浸泡在甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙
酯、二氯甲烷和石油醚中 ,各提取液减压抽滤后,用
旋转蒸发仪蒸发溶剂,得到油状物或膏状物。水粗
提物的提取采用水煮法,茎叶混合粉末加水煎煮,过
滤,将滤液继续加热浓缩成膏状 。7种粗提物分别
用各自的提取溶剂配制成浓度为 1OO g/L的药液,
备用。
对病原菌的生物活性测定采用生长速率法 (陈
年春,1991)。分别取 1O0 g/L的各粗提物药液 O.4
mL,加于培养基上,涂布均匀,以加等量的提取溶剂
为对照,静置至药液挥发干后,将供试菌用无菌打孑L
器打制出直径 4 mm的菌饼,移置含药培养基上,每
皿 3个菌饼,置于 27℃温箱中培养,72 h后用十字
交叉法测量菌落直径。根据菌落直径求抑制生长的
百分率,公式如下:
菌落直径(mm)一两次直径平均数一菌饼直径
抑制生长率(%)= 壁 霎
X 1OO
表 1 各种溶剂粗提物对 l3种植物病原茵的抑制生长率 ( )
Table 1 The antifunga1 activity of different kinds of extracts
供试菌种 不同溶剂粗提物抑菌率 (%)
水 甲醇 乙醇 丙酮 乙酸乙酯 二氯甲烷 石油醚
棉花黄萎 V991
棉花黄萎 V43—1
棉花枯萎病菌
茄子黄萎病菌
稻曲病病菌
苹果黑星病菌
番茄枯萎病菌
番茄叶霉病菌
黄瓜黑星病菌
西瓜炭疽病菌
芦笋茎枯病菌
扩展青霉
梨黑斑病菌
注:“一”为对照组菌落直径小于处理组菌落直径,粗提物对病菌表现出促进生长作用。
Note:“一’’means the diameters of the control group were smaIIer than th。se of the treated group,the extract had promotional effect on the fun
gous growth.
2 结果与分析
2.1对菌丝生长的抑制作用
珍珠柴7种溶剂粗提物在 l0O g/L的浓度下对
13种植物病原菌的抑制活性表现出极大的差别,结
果如表 l。各种溶剂粗提物的抑菌作用不具有广谱
性,例如,水粗提物对棉花黄萎 V991病菌的抑菌率
高达 1OO%,对其余的 12种菌均无明显的抑制作
用;石油醚粗提物对苹果黑星病菌的抑制率达
91.89 ,而对其他 12种菌也无明显的抑制作用。
同一溶剂粗提物对不同菌种的作用有明显的差别,
∞ 的娼 弛 吕{卯如 良 驺孙 ∞
Ⅺ∞ ∞脚蛆朋 船∞∞ 乱弧 苷享她
瑚 ∞瑚 m埘 弘 u 啪
134 广 西 植 物 29卷
例如,甲醇粗提物对供试的l3种植物病原真菌中的
仅有 5种表现抑制活性,并且除对棉花黄萎 V43—1
病菌的抑菌率达 6o.32 ,抑菌作用较好外,对其他
几种菌的抑菌作用并不显著。不同溶剂粗提物对同
~ 菌种的作用也有很大差别,例如,对于棉花黄萎
V43—1病菌,甲醇粗提物的抑制活性较好,抑菌率可
达 6O.32 ,乙酸乙酯粗提物则有一定的促进生长
作用,而其余五种溶剂粗提物的抑菌活性均较差;对
于棉花枯萎病菌,乙醇粗提物的抑菌率为 52.73 ,
其余几种溶剂粗提物的抑菌率均低于 3O ,抑菌作
用都不明显 。
2.2.6种溶剂粗提物对 4种菌的抑菌效果比较 如
果以 1O0g/L粗提物抑菌率在 5O 以上的为有效,
只有 6种溶剂 (除二氯甲烷外)粗提物对 4个菌种
(棉花黄萎 V991、棉花黄萎 V43—1、棉花枯萎和苹果
黑星病菌)有效,对同一菌种,不同溶剂粗提物的抑
制作用表现出很大差异(图 1),如,对于棉花黄萎
V991病菌,水粗提物的抑菌率为 10O ,而其他几
种溶剂粗提物的抑菌率最高则为 26.46 ,其中甲
醇粗提物和乙醇粗提物的作用为 O,可见水粗提物
中含有对棉花黄萎 V99l病菌高活性的抑制物;对
棉花黄萎 V43—1病菌,甲醇粗提物的抑制活性较
好,抑菌率为60.32 ,乙酸乙酯粗提物没有抑菌活
性,其余四种粗提物的抑菌活性较差,抑菌率最高为
38.93 ;对于棉花枯萎病菌,仅乙醇粗提物的抑菌
活性较好,抑菌率为52.73 ,其余几种粗提物的抑
菌率最高 25.8O ,最低仅 4.54 ;六种粗提物都
对苹果黑星病菌有一定的抑制活性,其中,石油醚、
乙酸乙酯、乙醇和丙酮粗提物的抑菌效果较好,抑菌
率分别达到 91.89 ,78.39 ,65.48 和53.32 ,
水、甲醇粗提物的抑菌效果较差,抑菌率分别为
5.62 ,32.95 ,因此,对于苹果黑星病菌而言,珍
珠柴的各种溶剂粗提物普遍有一定的抑制活性。
3 结论与讨论
过 1O g/L、2O g/L、5()g/L、75 g/L和 lO0 g/L
等几个浓度梯度的初步生测,100 g/L为珍珠柴对
这7种菌的最低有效浓度,低于此浓度 7种不同溶
剂粗提物对 4种真菌(棉花黄萎 V43—1、棉花黄萎病
菌V991、棉花枯萎病菌、西瓜炭疽病菌)表现促进生
长作用,当浓度达到 lOO g/I 时,总体抑菌效果较
好,并首次出现 1OO 抑菌率(水粗提物对棉花黄萎
病菌 V991的抑制率),其原因可能是粗提物在低浓
度时促进生长的因子起主要作用,具有抑菌活性的
物质的作用由于含量过低而没有明显的作用。当粗
提物浓度达到 1O0 g/L时,抑菌活性物质达到了有
效浓度 ,因而才表现出明显的活性,而促进作用被抑
制。因此 ,本研究 的各项抑菌试验均选取 1O0 g/L
的浓度。在此浓度下,珍珠柴粗提物的抑菌活性总
体来看表现的并不很强 ,这可能是样 品中抑菌活性
物质的含量甚微所致。
1 20
1 00
8O
褂 60
{圃
量 40
20
O
一水粗提物 晒甲醇粗提物 曰乙醇粗提物
I丙酮租提物 口乙酸乙酯粗提物 囝石油醚粗提物
棉花黄萎v9 花黄蒌v4
3
枯萎病
果黑星病菌
菌种名
图 1 珍珠柴 6种溶剂粗提物对 4种菌的抑菌效果比较
Fig.1 The antifungal activity 0f six extracts on four fungi
甲醇和乙醇粗提物对棉花黄萎 V991,乙酸乙酯
粗提物对棉花黄萎 V43—1没有抑菌作用
IⅥethan0l extracts and ethanol extracts had no antifungaI efect
on Vertic|l1iun1 dahliae Kleb.V991,while ethyl acetate
extracts had n0 fungistasis on Vertic|llium dahliae V43—1
植物体内的次生代谢物质对病原真菌的作用有
抑制生长、杀死或促进生长(冯俊涛等,2OO1;曹克强
等,2Oo1)。本实验中珍珠柴的 7种溶剂粗提物对棉
花黄萎 V991、棉花黄萎 V43—1、棉花枯萎、茄子黄萎
和苹果黑星等 5种病菌均有抑制生长作用;对梨黑
斑病、芦笋茎枯、西瓜炭疽、扩张青霉等 4种病菌主
要表现为促进生长的作用;对测试的 13种植物病原
菌均没有杀死作用。
不同溶剂粗提物的抑菌活性差异很大,某些溶
剂粗提物对个别病菌表现出较强的抑制作用,如水
粗提物对棉花黄萎病菌V991的抑制率达 1O0 ;石
油醚粗提物对苹果黑星病菌的抑制率达 91.89 。
因此认为,水粗提物中含有对棉花黄萎病菌 V991
有很高抑制活性的物质,可以在直接利用或者活性
物质分离、纯化和结构鉴定方面开展进一步的工作。
对于苹果黑星病菌,7种有机溶剂中有 6种表现出
不同程度的抑菌性,说明珍珠柴中含有多种抑制该
病菌的活性成分,作为该病菌植物源杀菌剂的可能
性会更大。
l期 任芳等 :珍珠柴粗提物对 l3种植物病原菌的抑制活性 135
珍珠柴粗提物对棉花黄萎 V99l,石油醚粗提物
对苹果黑星病菌最低抑菌浓度(MIC)和抑制 中浓度
(EC5O值)的测定还需进一步的试验。对于杀菌剂
而言,有的在离体条件下没有活性,但在活体植物上
则表现出极强的抑菌活性(林孑L勋,1995),本试验仅
初步进行了离体试验,活体盆栽试验、有效抑菌成分
的分离纯化及抑菌、促菌活性物质 比例变化不同对
病原菌的作用机制也有待于进一步的研究。
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The current situation and exploitation and ut订azation of antisep一
(上接第31页 Continue from page 31)
它们之间容易杂交,杂种种子发育良好,不需通过幼胚
拯救技术可以获得生长旺盛的杂种 F1植株。在 尺.
“r鲫 妇×尼 f 抛r 中,杂交结实率为 22%,杂种花
粉育性为 74.O8 ,自然结实率为 24.67 ;在 _R. 。一
声o s妇×R.。,删r 中,杂交结实率为2O ,杂种花粉
育性为81.34 ,自然结实率为 31.1l 。结果表明R
“ “ ,zs 与尺. z r 、R. ⅡpD 存在一定的生殖
障碍。因此,建议将毛叶鹅观草作为纤毛鹅观草的亚
种;而竖立鹅观草作为其变种处理比较合适。
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