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Main pharmacodynamics study on the different extracts of Ficus microcarpa leaves

小叶榕不同提取物的主要药效学研究



全 文 :广 西 植 物 Guihaia 29(6):871— 874 2009年 11月
小叶榕不同提取物的主要药效学研究
陈 路 ,蓝鸣生 ,王 硕
(广西壮族自治区药用植物园,南宁 530023)
摘 要:为研究小叶榕不同提取部位的镇咳、抗炎作用,采用氨水致咳小鼠动物模型、枸橼酸致咳豚鼠动物模
型来评价小叶榕不同提取部位的镇咳作用;采用二甲苯滴耳廓致肿胀的小鼠动物模型、大鼠棉球肉芽肿动物
模型来评价小叶榕不同提取部位的抗炎作用。结果表明:小叶榕醇沉不溶物能延长小 鼠和豚 鼠的咳嗽潜伏
期 ,但不能减少咳嗽次数 ,小叶榕水提物 、水提醇沉溶解物、大孔吸附树脂吸附洗脱物能延长小鼠和豚 鼠的咳
嗽潜伏期,并能减少咳嗽次数 ,其中水提醇沉溶解物镇咳作用最强 ;小叶榕醇沉不溶物不能减轻二甲苯引起的
小鼠耳廓肿胀的程度 ,能减轻大 鼠棉球 肉芽肿足跖肿胀的程度 ,但效果不明显 ,小叶榕水提物、水提醇沉溶解
物、大孔吸附树脂吸附洗脱物均能明显减轻二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀的程度,并能明显减轻大鼠棉球 肉芽
肿足跖肿胀的程度。这表明国产小叶榕不同提取部位具有明显的镇咳、抗炎作用。
关键词 :小叶榕 ;镇咳;抗炎
中图分类号:R9 文献标识码 :A 文章编号:1000—3142(2009)06—0871-04
Main pharmacod~ study on the diffe mton aynalmcs o O Olltren
extracts of Ficus microcarpa leaves
CHEN Lu,LAN Ming-Sheng ,WANG Shuo
(Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants,Nanning 530023,China)
Abstract:The effects of relieving cough and resisting inflammation of different extracts from Ficus icrocarpa leaves
were studied.The models of cough mouse caused by ammonia water and citric acid were used to evaluate the relieving
cough effect;the models of swelling mouse auricles caused by dropping xylene,and the models of big mouse granulo—
ma caused by cotton bals were used to evaluate the resist inflammation effect.The results were as follows:the F.
microcarpa leaves extracts of water extracting,water extracting-alcohol precipitating dissoluble position,the position
absorbed by macroreticular adsorbent resin and dissolved by solutions could extend cough incubation period of the
mouse and guinea pig,reduce the coughing numbers.The above extracts could obviously lighten the swelling mouse
auricles caused by dropping xylene and the big mouse granuloma caused by cotton bals.So the different extracts
ftom F.microcarpa leaves had obvious effects on relieving cough and resist inflammation.
Key words:Ficus microcarpa leaves;relieving cough;resisting inflammation
. 小 叶榕为桑科榕 属植物 (Ficus microcarpa),
主要用其叶入药。桑科 (Moraceae)榕属 (Ficus)植
物广泛分布于我国秦岭以南各省区,在我国约有
120种(江苏新 医学 院,1988)。小叶榕作 为榕属植
物的一个重要物种 ,主要分布在广西、福建、广东、海
南、台湾和浙江等地,为当地的主要植物品种之一
(江苏新医学院,1988;中华本 草编委会 ,1999)。在
广西,几乎每一县市都有分布 ,但主产地在桂南及桂
西南地 区(中华 人 民共 和 国卫 生部 药政管 理局 ,
1994)。小叶榕叶主要含有黄酮、三萜类等化合物
(叶荣科等,2003),其中的黄酮类化合物具有抗癌、
抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、降血
糖、治疗骨质疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗
辐射等作用(华光军等,1999;黄河胜等,2000;曹纬
收稿日期:2009—06—08 修回日期 :2009—10—20
基金项 目:广西科技攻关项目(桂科攻 0630002—1G)[Supported by Key Technologies Research and Development Program of Guang)【i(O63oOO2—1G)]
作者简介:陈路(1979一),男,广西南宁人,药师.从事新药开发、药学和植物化学等研究。
通讯作者(Author for corresp0ndence,E—mail:lanmingsheng@l26.corn)
872 广 西 植 物 29卷
国等 ,2003),两广民间广泛将其用于咳嗽、哮喘、支
气管炎等多种疾病的治疗(陈奇,1993)。在药效学
研究方面,韦锦斌等(2006)对小叶榕水提物和醇提
物止咳平喘作用进行了比较研究 ,其结果表明,水提
物、醇提物均有明显的止 咳、平喘作用,且醇提物的
作用稍强于水提物 。本试验 旨在考察 小叶榕水提
物、水提醇沉溶解物、醇沉不溶物 、大孔吸附树脂吸
附洗脱物的镇咳、抗炎作用 (徐叔云等,1991),并 比
较它们的作用效果 ,为临床用于治疗慢性支气管炎
提供依据 ,考察提取小叶榕最佳方法。
1 实验材料与方法
1.1药物
小叶榕水提物 (由小叶榕加水提取浓缩干燥制
得)、小叶榕水提醇沉溶解物 (小 叶榕水提取,浓缩 ,
加乙醇沉淀后的上清液浓缩干燥制得)、醇沉不溶物
(小叶榕水提取,浓缩 ,加乙醇沉淀后的沉淀物,离心
脱水、干燥制得)、小叶榕大孔树脂吸附洗脱物(小叶
榕水提取,提取液过大孔吸附树脂吸附、乙醇洗脱 ,
洗脱液浓缩干燥制得)各 50 g,由广西壮族自治区药
用植物园制药厂提供。咳必清 ,片 5O mg,丹东制药
厂生产,批号:051008。
1.2试 剂
枸橼酸,中国医药集团上海化学试剂公司生产,
批号 :20030426。浓氨水 ,江苏省常熟华港制药有限
公司生产 ,批号:050717。
1.3动物
豚鼠,体重 200~250 g,雌雄各半,SPF级;昆
明系小鼠,体重 2O~22 g,雌雄各半,SPF级;实验
动物使用许可证号:SYKG桂 2003—0005;实验动物
生产许可证号 :2008—0003,均 由广西医科大学实验
动物中心提供。动物室温度 :25±2℃,相对湿度 :
6O±2%。
1.4统计方法
应用 SPSS 13.0软件进行统计学处理,计量资
料均采用表示 ,两组间比较采用 一检验,多组均数比
较采用方差分析。
表 l 小叶榕不同提取物对氨水致咳小鼠的影响
Table l The effect of different extracts of Ficus microcarpa leaves on ammonia—induced cough in mice
与模 型组 比较 :“⋯ P2 实验方法与结果
2.1小叶榕水提物、水提醇沉溶解 物、醇沉不溶物、
大孔吸附树脂吸附洗脱物的镇咳作用
2.1.1对氨水致咳小鼠的作用 将小鼠随机分 为正
常对照,咳必清(0.05 g/kg),小叶榕水提物(剂量
o.72 g/kg);小叶榕水提 醇沉溶解物组 (剂量 0.72
g/kg);小叶榕醇沉不溶物组(剂量 0.72 g/kg);小
叶榕大孔吸附树脂吸附洗脱物组 (剂量 0.72 g/
kg)。正常对照组给予生理盐水。动物灌胃(i.g.)
给药,各组灌胃容积均为 10 mL/kg,每天给药一次,
连续给药 4 d,给药第 4天上午,每组动物给药 1 h
后,均分别将小 鼠放入 500 mL的玻璃钟罩内,通过
超声雾化器恒速将 25 氨水雾化喷入钟罩内,喷雾
5 S,观察小 鼠自喷雾开始至出现咳嗽的潜伏期及 3
min内的咳嗽次数,以小鼠腹肌收缩或缩胸,同时张
大嘴为咳嗽指标 (表 1)。表 l表明,小叶榕水提物
能明显延长咳嗽潜伏期、减少咳嗽次数,咳嗽次数、
咳嗽潜伏期与正常对 照组 比较均有显著性差异(P
减少咳嗽次数,与正常对照组比较均有显著性差异
(P能明显延长咳嗽潜伏期 、减少咳嗽次数,与正常对照
6期 陈路等:小叶榕不同提取物的主要药效学研究 873
组比较均有显著性差异(P小叶榕水提物同剂量组比较,减少咳嗽次数作用明
显增强(P<0.05或 P<0.01),延长咳嗽潜伏期作
用基本相当;与水提醇沉溶解物同剂量组相比,大孔
吸附树脂吸附洗脱物减少 咳嗽次数 作用基本相同
(P>0.05),延长咳嗽潜伏期作用相当;但三者均较
醇沉不溶物强。醇沉不溶物与对照组比较小鼠咳嗽
次数无显著性差异,但能延长咳嗽潜伏期(P醇沉不溶物的咳嗽抑制率明显小于咳必清,水提物的
咳嗽抑制率与咳必清相当,水提醇沉溶解物、大孔吸
附树脂吸附洗脱物的咳嗽抑制率大于咳必清。
2.1.2对枸橼酸致咳豚鼠的作用 将体重合格的豚
鼠,分别放人连有超声雾化器的 4 L玻璃钟罩内,喷
入 17.5 枸橼酸,喷雾 1 min,记录各动物咳嗽潜伏
期,并观察喷雾后 5 rain内咳嗽次数少于 1O次者不
用,以听到响亮的咳嗽声为判断标准。
将合格豚 鼠随机分为正 常对照,咳必清 (0.05
g/kg),水提物组 (剂 量 0.72 g/kg),小 叶榕水提醇
沉溶解物组(剂量 0.72 g/kg),醇沉不溶物组(剂量
0.72 g/kg),大孔 吸 附 树脂 吸 附洗 脱 物组 (剂量
0.72 g/kg)。正常对照组给予生理盐水。动物 i.g.
给药,各组灌胃容积均为 l0 mL/kg,连续给药 4 d,
每组动物给药 1 h后,均分别将豚 鼠放人 4 L的玻
璃钟罩内,通过超声雾化器恒速将 17.5 枸橼酸雾
化喷入钟罩 内,喷雾 1 min,观察豚 鼠自喷雾开始至
出现咳嗽的潜伏期及 5 min内的咳嗽次数,以听到
表 2 小叶榕不同提取物对枸橼酸致咳豚鼠的影响
Table 2 The effect of dif{erent extracts of Ficus microcarpa leaves on cough guinea pigs induced by citric acid
响亮的咳嗽声咳嗽指标 (表 2)。
表 2结果表明,水提物能明显延长咳嗽潜伏期 、
减少咳嗽次数,咳嗽潜伏期 、咳嗽次数与正常对照组
比较均有显著性差异(P<0.01)。水提醇沉溶解物
能明显延长咳嗽潜伏期、减少咳嗽次数,与正常对照
组比较均有显著性差异(P孔吸附树脂吸附洗脱物能明显延长咳嗽潜伏期、减
少咳嗽次数 ,与正常对照组比较均有显著性差异(P
<0.05或 P<0.01)。与水提物同剂量组比较 ,减
少咳嗽次数作用明显增强(P<0.05或 P<0.01),
延长咳嗽潜伏期作用基本相当;与水提醇沉溶解物
同剂量组相比,大孔吸附树脂吸附洗脱物减少咳嗽
次数作用基本相同(P>0.05或),延长咳嗽潜伏期
作用相当;但三者均较醇不溶物强。醇沉不溶物与
对照组比较小鼠咳嗽次数无显著性差异,但能延长
咳嗽潜伏期(P<0.05)。醇沉不溶物的咳嗽抑制率
明显小于咳必清 ,水提物的咳嗽抑制率与咳必清相
当,水提醇沉溶解物、大孑L吸附树脂吸附洗脱物的咳
嗽抑制率大于咳必清。
2.2小叶榕水提物、水提醇沉溶解物、醇沉不溶物、
大孔吸附树脂吸附洗脱物的抗炎作用
2.2.1对二 甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 取合格
小鼠 5O只,随机分为正常对照、阿司匹林组(5O
mg/kg)、水提物 、水 提醇沉溶解物、醇沉不溶物、大
孔吸附树脂吸附洗脱物组 。正常对照组给予生理盐
水。动物灌胃(i.g.)给药 ,每天给药一次,灌 胃容积
为 10 mL/kg,连续给药 7 d,末次给药后 0.5 h,于每
只小 鼠右耳两面涂二甲苯 0.1 mL。左耳不涂作为
自身对照 ,l h后将小鼠颈椎脱 臼处死,用 9 IBm打
孔器打下两耳同一部位的耳片,于天平上称重。右
耳重量减去左耳重量为肿胀度(表 3)。
肿胀抑制率一[(正常组耳廓肿胀度一给药组耳
廓肿胀度)/正常组耳廓肿胀度]×i00 。
表 3结果表明,小 叶榕水提物、水提醇沉溶解
物、大孔吸附树脂吸附洗脱物等组别的肿胀度与正
常对照组比较均有显著性差异 ,这三种小叶榕提取
874 广 西 植 物 29卷
物均能明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀。
2.2.2对大鼠棉球 肉芽肿的影响 取合格大 鼠 50
只,雌雄各半,腹腔注射乌拉坦麻醉后,无菌条件下
做 l cm腹部切口,将 30 mg经高压灭菌的棉球植入
~ 侧腹股沟皮下 ,术后将大鼠随机分为正常对照、阿
司匹林组(50 mg/kg)、小 叶榕水 提物 、水提醇沉溶
解物、醇沉不溶物、大孑L吸附树脂吸附洗脱物组。正
常对照组给予生理盐水。动物灌胃(i.g.)给药,每
天给药一次 ,灌 胃容积为 10 mL/kg,连续给药 7 d,
第 8天处死大鼠,剥离出棉球 肉芽组织 ,6O℃烘箱
内干燥 12 h,用分析天平准确称重,减去原棉球重
量即肉芽肿净重(表 4)。
肉芽肿抑制率一[(对照组肉芽肿净重一给药组
肉芽肿净重)/对照组肉芽肿净重]×i00 。
表 4结果表明小叶榕水提物、水提醇沉溶解物、
醇沉不溶物、大孑L吸附树脂吸附洗脱物等组别的肉
表 3 小叶榕不同提取物对苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 ( ±S,n—lO)
Table 3 The effect of different extracts of Ficus microcarpa leaves on the mouse ear sweling induced by xylene
与正常对照组比较 :“*”P<0.05,“**”P<0.01。与表 4同 。
表 4 小叶榕不同提取物对大鼠棉球肉芽肿的影响 (爻±s,n一10)
Table 4 The effect of different extrats of Ficus microcarpa leaves on granuloma in rats
芽肿净重与正常对照组 比较均有显著性差异 ,均可
抑制大鼠肉芽肿;小叶榕水提物、水提醇沉溶解物、
大孔吸附树脂吸附洗脱物等组别肉芽肿抑制率大于
l0 ,表明这三种小叶榕提取物的抑制效果明显。
3 讨论
咳嗽是人体的一种保护性呼吸反射动作。咳嗽
的产生 ,是 由于当异物、刺激性气体、呼吸道 内分泌
物等刺激呼吸道粘膜里的感受器时,冲动通过传入
神经纤维传到延髓咳嗽中枢 ,引起咳嗽;炎症是致炎
因子对机体的损害作用所诱发的以防御为主的局部
组织反应。主要表现为组织的变质、渗出和组织细
胞增生。炎症面部常表现为红、肿 、热、痛及功能障
碍,同时伴有全身性表现如发热、血白细胞增多或减
少,全身单核吞噬细胞系统增生、局部淋巴结肿大和
脾肿大等症状。
本研究结果显示,小叶榕醇沉不溶物能延长小
鼠和豚鼠的咳嗽潜伏期 ,但不能减少咳嗽次数 ,小叶
榕水提物、水提醇沉溶解物 、大孔吸附树脂吸附洗脱
物能延长小鼠和豚 鼠的咳嗽潜伏期 ,并能减少咳嗽
次数,其中水提醇沉溶解物镇咳作用最强;小叶榕醇
沉不溶物不能减轻二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀的程
度,能减轻大鼠棉球肉芽肿足跖肿胀的程度 ,但效果
不明显,小叶榕水提物、水提醇沉溶解物、大孔吸附
树脂吸附洗脱物均能明显减轻二甲苯引起的小鼠耳
廓肿胀的程度,并能明显减轻大鼠棉球肉芽肿足跖
肿胀的程度;表明国产小叶榕不同提取部位具有明
显的镇咳、抗炎作用,其作用机理有待进一步研究。
(下转第 841页 Continue on page 841)
6期 谢月英等 :假酸浆种子发芽特性研究 84l
表 3 不同贮藏温度和时间对假酸浆种子萌发的影响
Table 3 Effects of different storage time and methods
on seed germination of Nicandra physaloides
3 小结
(1)不同发芽温度会影响假酸浆种子的发芽率,
以l5/25℃变温条件下的种子发芽率最高。假酸浆
种子不耐高温 ,当温度达 3O℃以上时不利于种子萌
发,因此生产上宜采用春播或秋播 ,不宜进行夏播 。
(2)假酸浆种子采收后立即播种发芽率非常低,甚至
不发芽,说明种子有休眠现象,引起其休眠的原因有
待进一步研究。生产上不宜采用随采随播的方式。
(3)假酸浆种子在室温条件下贮藏 9个月后能获得
较高的发芽率,但室温贮藏 l5个月后,种子发芽率
明显下降,说明种子活力基 本丧失 。因此假酸浆种
子在室温下贮藏时间不宜超过一年。另外 ,1O℃低
温贮藏虽然可以在一定程度上延长假酸浆的寿命,
但发芽率非常低,因此,室温贮藏比低温贮藏更适合
假酸浆种子作短期保存。(4)假酸浆种子在一般低
温条件下贮藏 9个月时仍不能发芽,在贮藏 l5个月
后虽然能发芽但发芽率较低 。因此低温贮藏是否适
合假酸浆种子的长期贮藏 ,需要在不 同的低温条件
下和延长低温贮藏时间作进一步的试验研究,以观
察低温贮藏后种子的活力和萌发能力。
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