全 文 ：和青菜 ,但取食野茼蒿的 2 龄幼虫全部死亡无法发
育到 3龄 ,取食菜苔和青菜的安婀珍蝶幼虫生长发
育受到限制 ,表现在大龄幼虫体长 、体重和头壳宽
各项指标明显偏低 , 最终都不能正常完成生活世
代 ,所以野茼蒿 、菜苔和青菜不是安婀珍蝶寄主
植物 。
参考文献
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收稿日期: 2007-04-10基金项目: 国家自科学基金(30471230);国家科技支撑项目(2006BAD16 B04-1)＊通讯作者 E-mail:yuanqinghua@hotmail.com
苜蓿假盘菌对一些豆科牧草寄主
侵染能力的初步研究
马鸿文1 , 2 , 袁庆华1＊ , 徐秉良2
(1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 , 北京 100094;2.甘肃农业大学草业学院 , 兰州 730070)
摘要 对豆科牧草的 5 个属 14个种在实验室条件下进行苜蓿假盘菌接种 , 并观察苜蓿假盘菌的寄主范围 ,试验结
果表明:苜蓿假盘菌可以危害苜蓿属的紫花苜蓿 、杂花苜蓿 、镰荚苜蓿 ,草木樨属的白花草木樨 、黄花草木樨 , 三叶草
属的库拉三叶草。说明苜蓿假盘菌具有寄主专化性。经室内鉴定 ,苜蓿假盘菌可以在苜蓿属和黄花草木樨上产生
成熟的子实体及子囊孢子 , 而在白花草木樨和库拉三叶草上不能形成子实体。
关键词 苜蓿假盘菌; 侵染能力; 专化性
中图分类号 S 435.79
A preliminary study on the virulence and infectivity of Pseudopeziza
medicaginis to some lequminosae
Ma Hongw en1 ,2 , Yuan Qinghua1 , Xu Bing liang2
(1.I nstituteo f Beij ng Animal Science , CAAS , Bei jing 100094 , China;
2.College of Grassland , Gansu Agricultural Univ ersity , Lanz hou 730070 , China)
Abstract The virulence and infectivity o f Pseudopez iza medicag inis to some lequminosae w as observ ed by artificial-
ly inoculating the pathogens to 14 species of 5 catego ries.The results showed tha t the ho sts of P.medicaginis w ere
Medicago sati va , M.varia , M.f alcate , Meli lotus medic , M.o f f icinalis and Tri folium ambig uum.P.medi-
caginis could spo rula te on Medicago L.and Melilotus of f icinalis.I t wa s show n that P.medicag inis w as phy sio-
log ically specialized and spent its sexua l stage on Medicago L.and Melilotus Mill..
Key words Pseudopez iza medicaginis; virulence and infectivity; phy siolo gic specializa tion
由苜蓿假盘菌(Pseudopez iza medicaginis)引
起的苜蓿褐斑病是苜蓿最常见和破坏性最大的病害
之一 ,几乎遍布世界所有苜蓿种植区。在我国华北 、
西北 、东北等地均有发生[ 1] 。它虽不至使植株死亡 ,
但对其生活力有很大影响 ,发病严重时 ,落叶率达
50%以上 ,产量减少 15%～ 40%,种子减产 25%～
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第 33 卷第 6 期(2007)
PLAN T PROTECTION Vol.33 No.6 (2007)
研 究 报 告
57%,粗蛋白质含量下降 16%,可消化率下降约
14%[ 2] ,严重制约了苜蓿生产的发展 。
苜蓿假盘菌属于子囊菌亚门(Ascomyco tina)假
盘菌属(Pseudopez iza)。国外有关苜蓿假盘菌寄主
范围的研究早有文献报道 ,苜蓿假盘菌可以侵染苜
蓿属 、草木樨属 、三叶草属 、驴食豆属和野豌豆属中
的某些牧草种类[ 3-4] 。另外还有研究者认为苜蓿假
盘菌具有不同的专化型[ 5] 。我国研究者在紫花苜
蓿 、小苜蓿和南苜蓿上发现此病原菌[ 6] ,而在其他寄
主上的寄生情况还未见报道。
为了深入了解苜蓿假盘菌的寄主范围和危害程
度 ,为苜蓿褐斑病的防治和抗病育种提供科学依据。
本研究以 5个属14种植物为供试寄主 ,对苜蓿假盘菌
寄主范围进行了初步确定 ,并对其专化性进行了研究。
1 材料和方法
1.1 供试材料
供试植物菌种为苜蓿假盘菌。采自中国农业科
学院北京畜牧兽医研究所牧草试验田 ,当年发病较
严重的保定苜蓿叶片 。
供试植物材料共 5个属 ,即苜蓿属 、草木樨属 、
驴食豆属 、野豌豆属和三叶草属 , 14个种 ,材料种类
及来源见表 1。
表 1 供试植物及来源
供试植物 产地 采种日期
保定苜蓿(Med ica go sa tiva
cv.Baoding)
河北保定 2005
杂交苜蓿(M.var ia) 北京畜牧研究所1) 2005
天蓝苜蓿(M.lu pu lina) 甘肃兰州 2003
野苜蓿(M.f alcata) 内蒙古呼伦贝尔 2004
白花草木樨(Mel i lotus a lbu s) 阿根廷 2003
黄花草木樨(M.o f f icinali s) 北京畜牧研究所1) 2005
库拉三叶草(Tr i f olium ambig uum) 北京畜牧研究所1) 2005
红三叶(T.p retense) 北京畜牧研究所1) 2004
埃及三叶(T.a lexandrium) 埃及 2000
白三叶(T.repen s) 北京畜牧研究所1) 2001
毛荚野豌豆(V icia an gust i f olia) 加拿大 2000
山野豌豆(V.amoena) 美国 2001
长柔毛野豌豆(V .vi llosa) 北京畜牧研究所1) 2002
红豆草(Onobrychis viciaef olia) 北京畜牧研究所1) 2001
1)为中国农业科学院北京畜牧兽医研究所。
1.2 试验方法
1.2.1 苜蓿幼苗的培养
将种子用 0.1%升汞消毒 3 min ,用灭菌水冲洗
4次 ,放在消毒培养皿内的滤纸上 ,加适量的灭菌
水 ,种子吸水膨胀后放入 20 ℃的生长箱内 ,发芽
2 d ,待幼根长到 1 cm 长时 ,移至直径 10 cm 装有消
毒土壤的塑料锥形花盆中 ,每盆 10株 , 5个重复 ,并
接种根瘤菌 ,温度为 10 ～ 30 ℃,待幼苗生长 35 d后
进行病菌接种。
1.2.2 活体菌株覆盖接种法
参照袁庆华的方法[ 6] ,并做适当改动。将当年从
田间采集的具成熟子囊盘的苜蓿褐斑病叶片在无菌
水中清洗 2次 ,病叶按一定的间隔平铺在白瓷盘内的
消毒双层滤纸上 , 叶面朝上 ,白瓷盘大小 30 cm ×
40 cm 。在病叶上滴加灭菌水后用干净的塑料薄膜将
平盘密封 ,放入 5 ℃的冰箱内保湿 24 h ,使叶片充分
吸水子囊盘膨胀 。把培育好的盆栽苗放入 40 cm×
50 cm瓷盘内 ,盘上放高 60 cm 的梯形架。把装有接
种源的盘子倒扣在梯形架上 ,用保鲜膜将整个梯形架
密封起来 ,防止子囊孢子扩散 , 并保持湿度。放入温
室内 ,接种温度为 20 ～ 30 ℃,相对湿度 98%～ 100%,
接种48 h ,接种期间每隔 5 ～ 8 h移动 1次接种苗 ,以
使接种均匀一致。14 d后观察病情。
1.2.3 病情测定及鉴定
对发病叶片进行室内分离培养 ,按魏景超的方
法进行病原菌鉴定[ 7] 。病情分级按袁庆华的分级标
准[ 8] ,根据每个苜蓿单株上所有叶片上总病斑数目
划分级别 ,共分为 5级 。分级标准为 0级:无病斑;l
级:病斑数 10个以下;2级:病斑数 11 ～ 30个;3级:
病斑数 31 ～ 50个;4级:病斑数 50个以上。病情指
数的计算公式如下:
Di =∑
4
i=0
(n i ×S i)
4 ×N
式中:D i :病情指数;ni :i 级病株数;S i :发病级
别 , i级代表值(0 ～ 4);i :病情分级的各个级别;N:
调查总株数 。
2 结果与分析
不同植物材料的发病程度和发病症状见表 2 ,
从表 2中显然可以看出 ,接种的 14份材料中只有 6
份材料感病 ,即:保定苜蓿 、杂交苜蓿 、野苜蓿 、白花
草木樨 、黄花草木樨和库拉三叶草。其中感病最严
重的是紫花苜蓿 ,严重度达 4级 ,病情指数为0.635 ,
其次是杂花苜蓿和黄花草木樨 ,严重度为 2级 ,病情
指数分别为 0.163和 0.086 ,发病较轻的是野苜蓿 ,
病情指数为 1.7 ,以上 4个材料病斑上均能产生子
实体;发病最轻的是白花草木樨和库拉三叶草 ,严重
·55·研 究 报 告
第 33 卷第 6 期(2007)
PLANT PRO TECT ION Vo l.33 No.6(2007)
度为 1级 ,病情指数分别为 0.007 6和 0.003 4 ,病
斑上不能产生子实体 。接种的其他 8份材料没有感
病 ,即:天蓝苜蓿 、红三叶 、埃及三叶 、白三叶 、毛荚野
豌豆 、山野豌豆 、红豆草和长柔毛野豌豆 。
表 2 参试各寄主的发病程度和发病症状
寄主 病级 病情指数 发病症状
保定苜蓿 4 0.635 0 叶表面形成大量黑色病
斑 , 病斑大小不均 , 中央
有乳白色的子实体
杂交苜蓿 2 0.163 0 叶表面形成大量黑色病
斑 ,病斑较小中央有乳白
色的子实体
野苜蓿 1 0.001 7 叶表面形成少量黑色病
斑 ,病斑较大中央有乳白
色的子实体
黄花草木樨 2 0.086 0 叶表面形成大量黑褐色
病斑 ,病斑较大中央有乳
白色的子实体
白花草木樨 1 0.007 6 叶表面形成少量黄色病
斑 ,病斑较大中央没有乳
白色的子实体
库拉三叶草 1 0.003 4 叶表面形成少量深褐色
病斑 ,病斑较小中央没有
乳白色的子实体
天蓝苜蓿 0 0 —
红三叶 0 0 —
埃及三叶 0 0 —
白三叶 0 0 —
毛荚野豌豆 0 0 —
山野豌豆 0 0 —
红豆草 0 0 —
长柔毛野豌豆 0 0 —
同时对接种后感病的寄主植物进行了实验室镜
检和病原菌的分离培养 ,并通过 Koch s Rule 验证 ,
确认是苜蓿假盘菌。这说明苜蓿假盘菌除了可以侵
染苜蓿属的紫花苜蓿 、杂交苜蓿和野苜蓿外 ,还可以
侵染草木樨属的白花草木樨和黄花草木樨 ,三叶草
属的库拉三叶草。而对驴食豆属 、野豌豆属和三叶
草属的其他种不能侵染。
保定苜蓿叶表面形成大量黑色病斑 ,病斑大小
不均 ,中央有乳白色的子实体是典型的褐斑病症状。
杂交苜蓿 、野苜蓿 、黄花草木樨 、白花草木樨和库拉
三叶草的病斑颜色从黑色到褐色 ,病斑大小不均 ,且
只有杂交苜蓿 、野苜蓿和黄花草木樨病斑中央有乳
白色的子实体 。镜检也表明只有保定苜蓿 、杂交苜
蓿 、野苜蓿和黄花草木樨产生子实体及子囊孢子。
白花草木樨和库拉三叶草只能感染苜蓿假盘菌 ,却
不能形成子实体产生有性阶段 。
3 结论与讨论
试验结果表明苜蓿假盘菌寄主范围较广 ,不仅
可以在苜蓿属的紫花苜蓿 、杂交苜蓿和野苜蓿上寄
生 ,还可以寄生在草木樨属的白花草木樨和黄花草
木樨 ,及三叶草属的库拉三叶草上。在苜蓿属上的
寄生范围与 Semeniuk 的报道有差异[ 3] , Semeniuk
认为苜蓿假盘菌除寄生在紫花苜蓿和野苜蓿外 ,还
可以侵染天蓝苜蓿和细齿苜蓿 ,不能侵染杂交苜蓿 ,
这可能是因为苜蓿假盘菌具有不同的专化型 ,
Schm iedekneck认为此菌有 2 个专型 ,即天蓝苜蓿
假盘菌(P .medicaginis lupul inae)和紫花苜蓿假
盘菌(P.med icaginis sativae)[ 5] 。
苜蓿假盘菌对草木樨属 、驴食豆属 、野豌豆属和
三叶草属的侵染性与 Glaese r的报道的结果[ 4] 不一
致 ,Glaeser认为苜蓿假盘菌除了可以侵染白花草木
樨外 , 还可以侵染红豆草 、香胡卢巴(Trigonel la
f oenumgraecum)、蓝花胡卢巴(T .coerulea)和长柔
毛野豌豆 ,而本试验结果得知此菌不仅可以侵染白
花草木樨 ,还可以侵染黄花草木樨和库拉三叶草 ,但
不能侵染红豆草 、香胡卢巴 、蓝花胡卢巴和冬箭舌豌
豆 。这可能与供试菌株有关 ,也可能与接种的环境
条件有关 ,还有待于做深入的研究。
另外 ,苜蓿假盘菌接种在不同的寄主植物上引
起的病斑大小 、病斑颜色 、是否产生子实体也不一
样 。在苜蓿属和黄花草木樨上可以产生子实体及子
囊孢子 ,在其他寄主上不能形成子实体。这可能是
因为苜蓿假盘菌具有专化性 ,只能在苜蓿属和黄花
草木樨属上寄生 ,产生有性阶段 。
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