全 文 ：色赤杨根瘤内生菌 Fr a n k i a s p . A t `的
分离和侵染能力的鉴定 (简报 )
李忠伟 黄牙详丽 丁 鉴
( 中国科学院林业土壤研究所 , 沈阳 )
放线菌与非豆科木本植物的共生体系
具有强大的固氮能力 , 可将大气中氮素转
变成化合态 , 以满足植物需要 , 并培肥土
壤 , 在绿化造林中起着重要 作 用 。 近 年
来 , 国内外均在积极开展这方面的工作 ,
使其成为固氮研究 中最活跃的领域之一 。
最近 , 我们 已从色赤杨根瘤 中分离到了几
株 F ar n k ia 放线菌 , 并进行了形态学和宿
主植物回接结瘤等方面的鉴定工作 。 已证
实A t 4 是一株能使色 赤 杨 结 瘤 固 氮 的
F
r a 称k i a 菌株 。
我们所用的色赤杨根瘤及种子采自辽
宁省森林经营研究所 (草河 口 )实验苗圃 。
内生菌分离采用切片法 。 根瘤洗净后进行
表面 灭 菌 ( 95 % 乙 醇 处 理 30 秒 , 升 汞
( 0
.
1% H g C I :
·
0
.
5 % H C I ) 灭 菌 6 分
钟〕 , 再用无菌水冲洗 , 用无 菌 操 作 在
P B S + P V P 缓冲液中将瘤切成片状 , 然后
转到 M 6 B + P V P培养液 中培养 。
采用这种方 法 , 我 们 获 得 了 一 株
尸ar ”肛 a 菌株 , 标号 A t 4 。 它在培养基 中
约 4 0天长出 , 在液体培养基 中菌丝体呈 白
色 , 生长极慢 , 在光学显微镜下可 见 A 4t
具有 F ar 砧 ia 的典型特征 。 A t 4 菌丝长而
有分枝 ,直径 。 . 9~ 1 . 5卜有清晰的竹节状分
隔 。 可看到着生于菌丝顶端的抱子囊 , 抱
子囊外面有囊套 , 内含许多方形的抱子石
从不同发育阶段的抱子囊形态可以看出 ,
其形成过程是菌丝顶端膨大 , 然后横向分
隔 , 再纵向分隔 , 逐渐将其中原生质分隔
为抱子 。 成熟的抱子囊有球形 、 梨形 、 菠
萝形 、 哑铃形等多种形状 , 最大的 长径可
达 60 协。 经过无氮 B a P培养基 诱 导 , A t 4 能
产生许多顶囊 。 在光学显微镜下顶囊呈球
状 , 直径 2 . 2~ 2 . 6协 , 以囊柄与菌丝相连 。
回接试验证明 , A t 4 能诱发色赤杨小
苗产生根瘤 。 育苗方法是将经过表面消毒
的色赤杨种子发芽后 , 播到灭过菌的珍珠
岩上 , 待幼苗长至 4 ~ 5 片真叶 , 移栽到
有氮的十浓度 H ao g al n d 溶液中 , 改用水
培 。 接种 时 , 把菌丝研碎制成悬液 , 将幼
苗据部浸泡 30 分钟 , 接种后 把苗换入无氮
的十浓度 H o a g la n d溶液中培养 。 接 种 后
7 天 , 在接种时的根毛区长出很小的红色
侵染斑 , 以后逐渐变大 , 同时斑点基部根
组织逐渐膨大 , 接后 3 周发展为突出的幼
瘤 。 将这种瘤的切片在光学显 微镜 下 观
察 , 可见到寄主植物细胞中的内生菌菌丝
体和大量顶囊 。 不接种的对照株没有形成
根瘤 。
上述证据表明 , A t 4 是一株能使色赤
扬结瘤的 F ar n k i a菌株 。 有 关该菌株的 微
生物生理 、 生化特性 , 我们将做进一步研
究 。
(承辽宁省森林经 营研 究所澎责清 、
孙世栋 同志指 导采集色赤杨根瘤及息赠 色
赤杨种子 , 工作中承李维光同志提供试脸
用幼 苗 , 均一并致谢 )