全 文 ：少` “ 西 植 物G ui h ai as( 4 ) :35 9 一 36 2 .9 18 8
一阶导数光谱法测定猫豆中左旋多巴的含量
陈 桂 初
( 广西植物研究所 )
摘要 用一阶导数光谱法测定猫豆中左旋多巴的含量 , 可以排除无关杂质吸收 的 干 扰 ,
去复杂的分离提取步骤 。 试验结果表明 : 相关系数达 。. 9 9 , 平均回收率 10 1 . 5万 , 重现性较好
关键词 左旋多巴 ; 猫豆 ; 一阶导数光谱
猫豆 (M u C u o a 夕r u r ` e n s v a r . u t i l`s ) 是广西各地均 一可栽培 的 豆 类 植物 。 它不仕1 2乞 _ :。之
高 , 易于管理 , 不 占农 田 , 而且蛋白质含量高 , 每 10 0 9 含蛋 白质 27 . 3 9 , 仅次 于 黄 豆 和黑
豆 【` 。 更令人感兴趣的是从猫豆中可以提取经济效益高的药物— 左旋多巴 。左旋多巴 ( L e v o d o p a) 是 一种抗震颤性麻痹症较好 的 药 物 , 已收载于 1 9 7 7版的「r ,国药
典不口1 9 5 4版的 《 国家获本药物 》 ` {, 。 l介11 9 7 2年以来 , }园内先后从常春油麻藤 ( M o e u n a 。 e 。 -
p e r v f r e n s ) 的种子— 黎豆 【“ 〕 、 猫豆 ! “ 、 自 花 油麻藤 ( 汀。 e “ n a b f r d叨 o o d i a o a T u t c h )的种仁 【` j 和老 鼠豆 [ ” ’ 中提取左旋多巴获得成功 。 但是 , 关 一 J立原植物 `!“左旋多巴的含址测定
却报道不多。 文献 I “ ,提出了用 紫外吸收光谱测定黎豆中左旋多巴含量的方法 。 由于植物成分
比较复杂 , 其他成分的存在影响测定结果 。 因此 , 术试验采用一阶导数光谱法 , 既可排陌飞无
关吸收的干扰 , 又省去了冗 长繁琐的分离提取步骤 。 直接用 猫豆提取 液 测 定 左旋多巴的含
量 , 取得了比较满意的结果 。
一 、 仪器 、 试剂和药品
紫外分光光度计 : 岛津 U V 一 2 10 A 型及 D E S 一 2 型导数附件 。
硅胶 G板 : 自制 。
离心沉淀器 : s o 0C型 ; K D C一 i 型 。
左旋多巴 : 经两次重结晶精制 , 无色针状结晶 。 溶点 2 78 ~ 2 82 ℃ , 薄 层 上 只 有一个斑
点 , 红外光谱与中国药典 ( 1 9 7 7年版 ) 上的一致 。
猫豆 : 市售品 ( 已存放两年 ) 。
乙醇 、 盐酸 、 冰醋酸 、 正丁醇均为分析纯试剂 。
二 、 实验方法和结果
1
. 采用一阶导数光谱法的根据 称取猫豆粉 (过 80 目) 约 2 5 o o m g , 放入 5 0 0 1三角瓶中 ,
加 I OOm 1 N / 10 盐酸 。 在沸水浴上加热提取 5 分钟 。 放冷后加入30 0 m l 无水乙醇 , 充分搅抖 ,
使多糖和蛋白质等杂质析出 。 离心沉淀 , 倾出上清液 。 通氮气减压浓缩至 2 . 5 m l 左右 。 在硅胶
G 板土点样 弓风 , 用 正丁醇 : 冰醋酸 : 水 ( 4 : 1 : 3 ) 展开 , 与左旋多巴纯品对照 , 如图 1 。
3 60 )一 酉 植 物 8 卷
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刮下 1 , 视为左旋多 巴纯品 , 刮下 2 , 视为杂质 ; 再刮下适量空
白硅胶 3 , 作为参比 。 以上分别置于三个离 心 管 中 , 各 加 5
m l N l/ O盐酸 , 充分振摇提取 , 离心分离 。 在 紫外分光光 度计
土分别绘制吸收光谱图 2 和一阶导数光谱图 3 。
,从图 2 可看出 , 由于杂质的存在 , 如果直接用吸收值对左
旋多巴定量 , 会引起一定的误差 。 但 由于杂质的吸收光谱近似
于一次曲线 , 其导数基本上为常数 。 根据吸收的加和性 , 用一
阶导数光谱的振幅对左旋 多巴定量 , 可以消除这种杂质吸收的
干扰 , 减少误差 [ 。 3 。
2
. 测定条件的选择 通 过 试验 , 波长 差 ( △几 ) 选 用 名
n m 比较合适 , 一阶导数光谱特征 比较明显 , 振幅 D 较 大 , 适
用于定量分析 。
3
, 标准 曲钱的绘制 精密称取左旋多巴纯品 5 0 1 n g , 置乃-
1 0 m l量瓶中 , 加 N / 10 盐酸至刻度 , 摇匀 , 称为标准溶液 。 精
密量取标准溶液 2 m l 、 4 m l 、 6 m l 、 s m l 、 z o m l 分 别 置刁-
5 个 s o m l量瓶中 , 各加 N / 10 盐酸至刻度 。 配成每笔升含左旋
多巴 2 0拼g 、 4 0拼g 、 6 0拼g 、 5 0“ g 、 2 0 0 “ g的系 列 工 作 溶 液 。 以
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2 4 0 3 2 0 4 0 0
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4 0 0
图 2 吸收光谱
i
。 左旋 多巴纯品 , 2 。 杂质 ,
3
. 左旋 多巴十杂质
图 3 . 一阶导数光谱
1 。 左旋多巴纯品 ; 2 。 杂质 ;
3
。 左旋多巴十杂质
N 八。盐酸为参比 , 按选定 的 条 件测绘
一阶导数光谱 。 以浓度 C 为 横 座 标 ,
振幅 D为纵座标作标准曲线 ( 表 1 和图
4 )
o
4
. 回收率试 验 从 1 项 所 得 的
表 1 标准曲线测试结果
浓度 ( 卜 g / m l )
m m )
方 程
2 0
3 5
。幅归振回
相关 系 数 ( r )
4 0 6 0 8 0 1 0 0
6 7
.
5 1 0 4
.
0 1 3 7
.
5 1 7 0
.
D二 2 . 2 0 0 + 1 . 6 8 5C
0
.
9 9 9 9
:
.
5 m l猫豆 提取 液中 , 分若于次点样 于硅胶 G 制备薄层 _ } 共点样 1 0 0川 , 用 一前面所述的展升
4期 陈桂初 : 一阶导数光谱法测定猫豆中左旋多巴的含量
1574015钧
会弓àa乡
剂展开 。 刮下杂质部分 , 用 10 o m 1 N八 。 盐 酸 洗
脱 。 然后离心分离 , 制成杂质溶液备用 。
精密量取标准溶液 10 m l , 置 于一个 50 m l 量
瓶中 , 加杂质溶液至刻度 ; 分别精密量取该溶浪
4
、
4
.
5
、
5
、
5
.
5
、
6 m l
, 置 于 5 个 l o m l 量瓶
中 , 依次加入杂 质 溶 液 2 . 7 、 3 . 0 、 3 . 3 、 3 . 6 、
3
.
9 m l
, 然后分别加 N八 。盐酸至刻度 。 按前述测
定条件测绘一阶导数光谱 , 度量振幅 D , 用回归
方程计算测得浓 度 , 然后计算回收 率 如 表 2 。
5
. 样 品浦定 精密称取猫 豆 粉 ( 过 80 目 )
约1 0 o m g , 共称 5 个样品 , 分 别 置于 5 个 5 0m l
三角瓶中 , 各加 s m 1 N 八。盐 酸 , 同时在沸水浴
上加热搅拌提取 5 分钟 。 放冷后 各 加 15 m l 无水
一一 2饭es三 在0 6 0 分0 1 0 0
c 触盯幼 l )
图 4 左旋多巴的标准曲线
表 2 左旋多巴回收试验结果
编 号 实
际浓度
( 卜 g / m l )
测得浓度
( ,
: g /m l )
回 : }交率
( 拓 )
1 0 2
.
1
1 0 0
.
6
1 0 1
.
8
1 0 1
.
2
1 0 1
.
7
1 0 1
。
5
0
_
5 8
乙醉 , 使蛋白质 、 多糖等杂质 充 分 析 出 。 离
心分离 。 残渣再用同样方法提取 一 次 。 分别合
并上清液 , 并置于 5 个 1 0 m l量瓶中 ,加纯 水至
l4J 度 。 j安 上述条件测绘各样 绍; 的一阶 导 数光
i沁。 川下面的公式计算含量 。 结果如表 3 。
含量 ( % ) c
。
1 0 0
a 。 1 0 0 0
平均值
变异系数 ( 拓 )
C— 用 回归方程算 出 的 浓 度 , 单位 :召g / m l 。
Q曰一了11tl,1Rg侧OeUn八U
.…八USLO11月性J改一óJS八0八讨O目Un Co六八曰目n甘. .…八Ulanésn甘刀伟J跳巴J一协nb几嘴,ú弓口J性ù勺
a— 所测样品的重量 , 单位 : m g 。
表 3 猫豆中左旋多巴的含量
小 结
1
。 实验结果表明 , 采用一阶 导 数光谱法
测定猫豆中左旋多巴的含量 , 可 以不经分离而
消除其它成分的干扰 。 此法简单易行 , 重现性
较好 。
2
. 从测定结果来看 , 所用猫豆虽 巳 存放
两年 , 但所含左旋多巴还高达 5 . 4~ 6 . 0% 。 而
生产上一般收率为 1 %左右 , 可见左旋多巴的
提取工艺还有改进的潜力 。
样品重量
( m g )
1 1 8
.
6
9 3
`
4
测得浓度
( 林g / m l )
含 塌
(书 )
1 0 7
.
7
9 4
。
7
9 0
_
4
5
.
5
5
.
8
6
.
0
6
.
0
5
.
4
内匕O公丹bLQ甘月了n八尸a冉城ùO乃
..…一óJ八通比hn八匕一ó户n尸al匀nJJ任只」
平均 f改
标准差
5
.
7 4
0
。
2 7 9
本 文承蒙成桂仁研 完 员和 吴树荣副教授审阅 , 吴祖祥和方 宏同志协 助 测 紫 外 , 特此致
谢 。
3 62 广 西 植 物 8二卷
参 考 文 献
〔 1 ) 中国医学科学院卫生研究所 , 1 98 1 : 《 食物成分表 》 第三版 。
〔 2 〕 北京医学院药学系 , 1 9 7 4 : 中草药通讯 , ( 4 ) 2 0。
( 3 〕 广西东南制药厂 , 1 9 6 6 : 中草药通讯 , ( 5 ) 10 八
〔 4 ) 中国人民解放军一九九医院 , 1 979 , 中草药通讯 . ( 8 ) , 了。
〔 5 〕 崔兴义 , 1 9 5 2 : 中草药 , ( 1 1 ) 4 。
〔 6 〕徐嘉凉等 . 1 9 8 4 : 药物分析杂志 , 4 ( 2 ) 。
T H石:于码O N T E N T O F L E V O D O P A IN M U C U N A
P R U R I E N S
M E A N S O F
V A R
。
U T IL I S W A S
F IR S T D E R IV A T IV E
D E T E R M IN E D B Y
S P E C T R O M E T R Y
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, r i d o f t h e e o m P l i e a t e d p r o e o d u r e o f s e P 找 r -
a t i o n a n d e x t r a e i o n
.
T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t t h e r e l a t e d e o e f f i e i e n t a t t a i n e d t o
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.
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