全 文 ：广 西 植物 Gui hai a 11 ( 2) :1 51一1 5 5.M ay 1 09 1
香燕小茎尖培养和快速繁殖 *
姚 军 刘春惠 林 荣
(广西植物研究所 , 桂林 5 4 1 0 0 6 )
摘要 本文报道 14 个香蕉品种或品系进行小茎尖离体培养繁殖无病苗。 小茎尖培养在改良M S
培养基中 , 附加B A 2 . 。一 5 . o m g / l , 试验结果显示 . B A 明显促进芽的形成和增殖 , 随着 B A 浓度
的增高 , 形成的芽苗数也随着增多 . 各品种均能诱导丛生芽 , 但品种间的繁殖率有很大差 异 。 低
浓度的 K t或B A有利于诱导生根。 培养的试管苗经检验为无病苗 .
关键词 香蕉 ; 茎尖培养 ; 无病苗 ; 快速繁殖
香蕉是我国南方的重要果树之一 , 主要分布在广东 、 广西 、 福建 、 云南 、 贵州和台湾等
省区 。 我区栽培面积约16 万亩 , 目前生产上栽培品种产量低 、 品质欠佳 、 病害严重 , 在国内
外市场缺乏竞争能力 。 因此引进 良种 , 逐步更新现有品种 , 对改变我区香蕉生产状况有着重
要意义 。
香蕉用吸芽进行无性繁殖 , 繁殖系数低 , 吸芽还会促进病菌的扩展 , 导致植株严重丧失
生产力 。 用茎尖离体培养繁殖可以克服这些问题 。 国内外利用茎尖培养进行脱毒和繁殖香蕉
无病苗已有不少报道 二’ 一 3 ] 。 为了繁殖 良种无病苗 , 我们从国内外引进在 国际市场畅销 的 优
良品种进行小茎尖离体培养脱毒和快速繁殖无病苗获得成功 。 本文报道 14 个香蕉品种或品系
的小茎尖培养无病苗和植物激素对芽苗增殖和生根的影响 。
材料与方法
试验材料为 1 9 8 7一 1 9 8 8年先后从澳大利亚 、 广东 、 福建及广西农科院引进 香 蕉 ( M 。 : a
s p p
.
) 的 N e w G u i n e a o va e n d i s h , W i l l i a m H y b r i d , N o r 七h Q L D W i l l i a m , S o u t h
J o h n o t o n e W i l l i
a
m
,
N e l S 0 n m o n s m a r i
, 泰 国 9 号 、 菲律宾 1 7号 、 台湾 s 号 、 泰 国 金
蕉 、 美国金蕉 、 红香蕉 、 墨西哥 7 号 、 龙溪 8 号及广东 7 41 等 14 个品种或品系的试 管 苗 。 在
无菌操作下剥除小苗的叶片 , 经表面消毒后再将残留在无菌材料上的外层组织剥除 , 切除茎
尖约 Z m m 进行接种培养 。
基本培养基采用M S和改良M S ( 包含M S无机盐 、 附加 B : , 0 . 5 m g l/ 、 其它维生素略 ) 。
分化培养基附加 6 一节基氨基嗦吟 ( B A ) 2 . 0一 5 . Om g / l 。 生根培养基附加V it o 25 m g 1/ 和
k t o
.
5一 i 。 o m g / l 。 白糖 2 0一 3 0 9 / l , 粉状琼脂卜 5 9 / l , p H 为 5 . 5 , 在 1 公 斤 / 厘 米 2 、
, 20 ℃高压蒸汽下灭菌 20 分钟 。 接种后培养于 25 士 2 ℃的培养室 , 每天光照 9 一10 小 时 , 光
照强度约 2 0 0 0勒克斯 。
小茎尖培养 , 每处理接种外植体 20 块 , 定期检查其成活和生长情况 , 培养二个月后统计
成活率和器官分化的情况 。 无病苗的增殖和生根 , 每处理接种外植体 40 块 , 培养一个月后记
录芽苗生长 、 增殖和生根情况 。
签还有王秀琴 , 王润珍 、 张燕玲 、 唐高风等同志参加试验工作 。
1 8 2 广 西 植 物 1 1卷
结果和讨论
一 ’ 香刻、 茎尖培养
1
。 植物激素与器 官形成的关 系 : 培养基中的植物激素状况 , 在诱导植物组织形成器官
起着重要的作用 「弓〕 。 采用改 良M S为基本培养基 , 附加不同浓度的细胞分裂素 B A 的试 验 结
果表明 ( 表 1 ) , B A 明显促进芽的形成 , 随着 B A浓度的增高 , 形成的芽数也随着增多 , 而
无激素的对照组培养的小茎尖只是本身生长形成一个芽苗 。 低浓度的 B A有利于诱导 生 根 。
表 1 植物激素对香蕉小茎尖的器官形成的影响
植 物 激 素 N
o r t h Q l
;
D w il l ia m N
e l s o n m
o n s
m
a r i
形 成 芽 苗
( m g / l )
成
活
率拓 数 量( 个 )
1
.
0 0士0
1
.
4 4士O ,
1
.
3 8士0 .
1
.
5 8土0 .
1
.
7 5士0 .
1
.
7 8士.0
1
.
8 2士0 .
1
.
4 4士0 `
1
.
6 0士0 .
生根
率形
苗
率终 度
成 { 形 成 芽重呈- _卜一蔽二一 , 套不一丁 -不;扩州一共春一
( 个 )
1
.
0 5士 0 .
2
.
3 5士 0 .
2
.
6 5士 0 .
2
.
6 5士 0 .
2
.
8 5士 0 .
2
.
5 5士0 .
( 厘米 )
2
.
5 9士 0 . 7 5
3
. 选9士 0 . 8 0
3
.
2 8士 0 . 6 6
2
,
8 5士0 . 7 0
1
.
5 8 士0 . 通段
3
.
0 2士0 . 5 2
2
.
1 2士0 . 7 1
2
.
3 8士0 . 6 9
2
.
5 9土0 . 5 0
生根
率终度)米厘
高(
n,尸aó日ù勺néùU工匕八U八“ùO八,曰Q山9自19曰n口ùón冲八a潇住ù9曰一ó, .代d0J口
2
.
5 0士0 . 7 6
2
.
6 0士0 . 5 0
2
.
5 0士0 . 5 1
八“八UnùO,o曰óù日功1090210né,d03八“ǎ匕Où吕OnJ曰内了只ó卜J内心人肋一月口n七2 . 2 0士0 .
3
,
5 0士0 .
3
.
0 8士0 .
1
.
8 6士0 .
2
.
1 7士0 .
2
.
5 5士0 .
1
.
96士0 .
2
.
1 9士。 `
2
.
5 0士0 .
nùO山OJ一丫八J叮才,工60叹d甲.丹七斤沙月了, .Rù月勺
nùóU八工bC甘二JnùnUnùnUO口只óJù匕.11.,一改良 M S+ B A O CK
改良 M S+ B A 2 . 0
改良 M S + B A 3 . 0
改良 M S + B A 4 . 0
改良 M S + B A 5 . 0
M S + B A 3
.
0
M S + B A 5
.
0
M S + B A 3
.
0 十 I B A 0 . 1
M S+ B A 5
.
0+ I B A 0
.
1
娜, 10。000、形…|l……!…! J07889;61)。宇毛)7砂f公引刽列沁5[J七少、洲 J:“ 2.`c、卜ō妇进任苗ó。淤峋0rt吻蜘sA咖心卿表 2 香蕉品种的小茎尖培养与器官形成的关系一 {环覆沫…而一 活 } 形 成品 种 名 数 量汁川 个 … , 数 量( 个 ) 32211上.1从七lle,11w`eIJ|!Iellesl`Iljlll.l.les8 01 0 0
9 0
9 0
1 0 0
1 0 0
9 0
8 5
9 0
7 5
1 0 0
9 0
8 0
1 0 0
1
.
9 4士0 . 8 5
1
.
5 5士0 . 6 9
1
.
6 7士0 . 8 4
1
.
6 7士0 . 59
2
.
5 0士0 . 6 9
1
.
4 0士0 . 6 0
2
.
2 2士0 . 4 3
1
.
5。士0 . 8 7
1
.
2 8士0 . 5 7
1
.
3 3士0 . 6 2
1
.
7 6土0 . 8 3
1
.
5 6士0 . 7 0
1
.
3 8士0 . 7 2
1
.
2 5士0 . 吐4
162087185206…11.1护ej.!1.1!lies2020N e w G u i n e a e a v e n d i s hW i l l运m H y b r i dN o r t h Q L D w i l l ia m
5 0 u t h J
o h n e t o n e w i l l i a m
N e l s o n m o n s m a r i
泰国 9 号
菲律宾 17 号
福建龙溪 8 号
台湾 8 号
广东7 4 1
泰国金蕉
美国金蕉
红 香 蕉
墨西哥 7 号
2期 姚 军等 :香蕉小茎尖培养和快速繁殖 13 8
从表中看出 , 不同的基本培养基及 附加 I B A 对器官的形成均无明显的作用 。
2
. 品种与器官形成的关 系: 我们用 N e w G u i n e a o a v e n d i s h , W i l l i a m H y b r td ,
N o
r t h Q L D W i l l i
a 功 , S o u 七h J o h n c切 n e W i l l i a m , N e l s o n m o n “ m a r i , 泰国 9 号 、
菲律宾 17 号 、 福建龙溪 8 号 、 台湾 8 号 、 广东7 4 1 、 泰国金蕉 、 美国金蕉 、 红香蕉和墨 西 哥
7 号等1 4个品种的小茎尖在相 同的培养基中进行培养 , 各个品种均能培养成活和生长芽苗 ,
但形成的芽苗数有一定的差异 , 苗的高度也有差异 ( 表 2 ) 。 如 N e lso n m o n s m a r i品种 ,
每个茎尖平均形成 2 . 50 个芽 , 苗高 2 . 20 c m ; 而菲律宾17 号只形成 1 . 2 个芽 , 苗 高 1 . 17 “ m ,
这是由于培养材料的种性不同所致 。 在各 个 品 种 中 , 只 有 N e w G iu n ae C ae e n d i叭 和
N 。 ls o n m o n s m a r i 品种在分化培养基中产生个别的带根苗 。
香蕉小茎尖培养约一周后 , 外植体开始膨大 , 生长点露白 ; 培养二周 , 叶原基伸长并开
始形成叶片 , 培养约一个月 , 小茎尖形成芽 , 在培养过程中 , 小茎尖形成的芽生长缓慢 , 个
别的芽开始逐渐形成丛生芽 , 芽数 2 一 。 个。 培养 2 个月后转到新鲜培养基 , 芽 苗 生 长 迅
速 , 并形成较多的丛生芽 。
二 、 试管苗的检验
香蕉小茎尖形成芽苗后 , 选取具有代表性的芽苗培养成完整植株 , 于 1 9 8 7年 1 0月和 1 9 8 8
年 4 月两次送试管苗共 5 个品种或品系到北京农牧渔业部植物检疫实验所病毒室进行了 4 次
接种鉴别害主检测 , 未发现花叶心腐病 。 另于 1 9 8 9年 7 月将其它 9 个品种的试管苗送广州华
南农业大学植保系病毒室进行生物测定和血清测定 , 未发现花叶心腐病 , 这说明香燕通过小
茎尖培养可 以获得无病苗 。 其它研究结果也证实了这一点 几” “ 。
三 、 无病苗的增殖和诱异生根
1
。 植物激素甘芽苗增技的效应 :
继代培养促进芽苗增殖 。 采用 M S
或改 良 M S 作基本培养基 , 附加不
同浓度的细胞分裂素 B A Z . O一 5 . 0
m g / 1的试验结果表明 ( 表 3 ) , 在
不加任何细胞分裂素的对照培养基
中 , 培养的香蕉芽仅增殖 1 一 2 个
芽苗 , 加入细胞分裂素后 , 增殖的
芽苗数增多 。 B A 明显促进芽苗的
增殖 , 随着 B A 浓度的增高 , 增殖
的芽苗数也随着增多 。 因此在香蕉
茎尖培养中 B A 是必需的 , 但植物
激素浓度过高在无性繁殖中是不利
的 仁` 〕 。 为了培养壮苗 , 要采 用 适
当的 B A 浓度 , 经试验比较 , 我们
我们将经检验的无病的香蕉丛生芽苗分割成单芽进行
表 3 激素对香蕉芽苗增殖的效应
` * 。 卜 , { 芽 苗 增 殖激 素 浓 度 } 刁 用 乍 ~
(毫克 / 升 ) 形 }数量 / 块 (个 ) 高 度(厘米 )
M S
M S+ B A 2
.
0
M S+ B A 3
.
0
M S+ B A 4
.
0
M S+ B A S
.
0
改良M S
改良M S+ B A 2 . 0
改良M S+ B A 3 . 0
改良M S+ B A 4 . O
改良M S+ B A S . 0
改良M S+ B A Z , o + I B A o . 1
改良M S + B A s . 0 + I B A o . 1
改良M S + B A 4 . 0 + I B A O . 1
改良M S + B A S . 0+ I B A o . 1
9 7
。
5
9 7
。
5
1 0 0
.
0
认为 B A 浓度在3 . 。一 4 . o m g / 1时效
果较好 。 在 B A 浓度相 同 , 基本培
养基不同下 , 芽苗的增殖率有一定
1 0 0
.
0
10 0
.
0
1 0 0
.
0
9 5
。
0
9 5
。
0
1
.
4 5士0 . 7 6
3
.
3 0士1 . 1 3
2
.
9 0士0 . 7 9
3
.
35士0 . 7 5
吐. 1 5士1 . 1 4
1
.
4 0士0 . 2 1
4
.
2 5土0 . 9 1
4
.
30士1 . 0 8
4
.
4 0士0 . 8 2
4
.
9 5士0 . 6 4
3
.
3 0士0 . 9 2
魂 . 2 0士0 . 6 2
4
.
3 5土0 . 9 9
5
.
3 0士0 . 7 3
4
.
2 1
2
。
8 4
2
。
8 4
2
.
3 9
2
。
4 9
4
。
7 0
2
。
9 9
2
.
8 7
2
.
4 9
2
.
6 0
2
,
9 9
2
.
7 0
2
。
4 4
2
.
6 1
nùēU八“éónùnǐ日Uù1一1上
18 4 广 西 植 物 1 1卷
的差异 , 改良 M S 培养基比 M S 培养基增殖的芽苗数多 , 这说 明改良 M S 培养基更适合香蕉
生长 。 B A 和 I B A 配合使用对芽苗的增殖无明显作用 ,因此促进芽苗增殖 , I B A 不是必需的 。
2
. 品种与芽苗增技的关 系: 我们用W i l l i a m H y b r i d , S o u t h J o h n o t o n e W i l l i a m ,
N el so n m o n S m ar i
, 泰国 9 号 、 菲律宾 17 号 、 龙溪 8 号 、 台湾 8 号 、 广东 7 4 1 、 泰国金蕉 ,
美国金蕉 、 红香蕉和墨西哥 7 号共12 个品种的芽在同一分化培养基中培养 , 各品种增殖的芽
苗数有明显的差异 ( 表 4 ) , 如美国金蕉平均产生 1 . 3 0个芽 , 而 S o u七h J o h n o七o n e W i l l i a m
和墨西哥 7 号平均产生 4 . 35 个芽苗 。 这是由于培养材料的不同种性所致 。 芽苗增殖率在不同
品种中有差异 , 这与W O n g , W . C . 的研究结果相似 〔“ 〕 。
3
。 激素衬诱导生根的影响 :
香蕉生根较容易 , 在分化培养基和
不加任何激素的培养基中均能形成
带根苗 。 但为了培养壮苗 , 需将芽
苗转到生根培养基中诱导生根 , 一
般转管 10 天后开始生根 , 获得完整
植株 。 试验结果表明 , 以改良 M S
或女改 良 M S 培养基 附 加 k七1 . 0
m g/ 1 诱导生根效果较好 , 不仅生
根率高 , 且根 系生长良好 , 苗较健
壮 。
香蕉的芽在适宜培养基中培养
一周后 , 芽开始伸长 , 培养 2 一 3
周 , 芽周围开始形成丛生小芽 , 培
养一个月后 , 丛生小芽逐渐长大并
有少数芽发育成苗 , 此时将丛生芽
分割进行继代培养 , 无根苗转生根
培养基 , 约 1 0天开始形成根 , 获得
完整植株 。
试管苗移栽成活与否 , 是组织
培养成败的关键 。 我们进行了不同
时期 , 不同基土等移栽试验结果表
明 ( 表 5 ) , 移栽时期对试管苗移
栽成活率有明显的影响 。 香蕉试管
苗在 4 一10 月移栽 , 成活率较高 ,
达 8 0一 95 % , 而 1 1一 3 月移栽 , 成
活率较低 , 只有 3 2 . 5一 0 % 。 这是
因为桂林的冬季气温较低 , 香蕉是
热带植物 , 植株在低温 下 易 受 冻
害 , 因此低温期移栽试管苗 , 必须
表 4 香蕉品种与芽苗增殖的关系
多 苗 增 殖
香 蕉 品 种 万 {数量 / 块 (个 ) 高 度(厘米 )
W i l l运m H y b r i d
S o u t h l o h n e t o n e w i l l i a m
N e los n m o n s m a r i
泰国 9 号
菲律宾 17 号
福建龙溪 8 号
台湾 8号
广东7 4 1
泰国金蕉
美国金蕉
红 香 蕉
墨西哥 7 号
1 0 0
。
0
9 7
。
5
1 0 0
。
0
3 6
.
5士0 . 6 7
魂 . 3 5士0 . 7 5
2
.
1 5士0 . 9 3
4
.
0 5士1 . 2 3
3
.
7 5士0 . 9 7
1
.
9 5士0 . 7 6
2
.
7 0士1 . 1 7
1
.
9 0士0 . 6 4
1
.
6 0士0 . 8 2
1
.
3 0士0 . 77
2
.
2 0士0 . 7 5
4
.
3 5士0 . 8 8
3
.
2 0
3
.
03
5
.
1 9
2
.
6 3
3
.
3 5
3
。
5 0
3
。
2 2
2
.
8 3
3
.
3 8
3
.
8 0
1
。
5 7
2
.
3 6
八”nù亡J目勺.0八IJùno
.…Où八Uti了bl匕n.ónùóUQUO口尸勺0八URùjll孟J I
表 S 不同时期移栽对香蕉试管苗成活的影响
一率活男成活数株成栽量移数对温月绝低对温绝月高均温月平气期时栽移
005
n甘尸a八U叮`甘口On一tI甘OnóU勺`八己nol9冉目h汽Xù碑任nJ,O1QJ曰no叮dCOCno1
40叨拍切9 . 5 2
9
。
1 8
1 3
.
7 0
1 9
。
4 0
2 5
,
8 0
1 9
。
4 0
1 3
。
4 0
1 0
.
8 0
1 9
。
0
2 0
。
2
2 5
。
8
3 0
.
0
3 3
。
0
33
。
0
3 5
。
0
3 5
。
0
3 5
。
8
1 9
。
4
13
。
4
1 0
.
8
0
0
。
9
1
.
0
1 2
。
4
1 3
。
6
2 2
.
0
2 1
。
0
1 8
.
0
1 6
。
5
6
。
0
3
.
0
3
。
0
9 0
.
0 0
9 5
.
0 0
8 5
。
0 0
3 2
.
5 0
3 0
。
0 0
U`八U六UóJ任只UO口内O
.…八j工a丹Db,白弓自勺乙,目
大犬天月厂关元45236a70102
2 期 姚 军等 : 香蕉小茎尖培养和快速繁殖
有加温保温设备 , 才能保证移栽成活率 , 此外在高温期移栽 , 也必需要保证水分供应才能保
证成活率 , 同时培养壮苗亦能提高移栽成活率 。 至于试管苗的移栽基土 、 炼苗与否 , 以及移
栽后覆盖与否 , 对移栽成活率均无明显影响 。 由此可见 , 培养壮苗是移栽成活的基础 , 移栽
时期是移栽成活的关键 。 目前我们已培养香蕉苗约万株 , 蕉苗生长情况 良好 。 我们提供了部
分香蕉试管苗给农户种植 , 现已有一些植株开始开花挂果 。
参 考 文 献
〔 1 〕 G u p t a , P . P . , 1 9 5 6 : E r a d i e a t i o n o f m o s a i e d i s e a s e a n d r a p i d e l o n a l m u l t i P l i e a t -
i o n o f b a n a n a s a n d P la n t a i n s t h r o u g h m a r i s t e m t i p e u l t u r e
.
P l a n t C e l l
,
T i s s u e
0 啥 a n C u l t u r e 6 ( 1 ) : 33一3 9 .
〔 2 〕 W o n g , W . C . , 1 9 5 6 : I n v i t r o P r o P a g a t io n o f b a n a n a s (M u s a s p p . ) : I n i t ia t i o n ,
p r o l i f e r a t io n a n d d e v e lo p m e n t o f s h o o t t i p e u l t u r e o n d e f i n e d m
e d i a
.
P l a n t
C e l l
,
T i s s u e o r g a n C u l t u r e 6 ( 2 )
: 1 5 9一 1 6 6 .
( 3 〕杨乃博 , 1 9 8 4 : 香蕉的茎尖培养 . 植物生理学通讯 ( 3 ) , 43
〔 4 〕 S k o o g , F . a n d M i l l a r , C . 0 . , 1 9 5 7 : C h e m i e a l r e g u l a t i o n o f g r o w t h a n d o r g a n
f o r m a t io n i n p l a n t t i s s u e e u l t u r e i n v i t r o
.
S y m p
.
S o e E x p B i o l 2 1
: 1 2 5一 1 3 0 .
R A P ! D P R OP AG A T !O N AN D SH OO T T ! P
C UL T U R E O F BA NANAS I N V IT R O
Y
a o J u n
,
L i u C h u n hn i
a n d L i n R o n g
( G u a n g x i I n s t i t u t e o f B o t a n y
,
G u i l i n 5 4 10 06 )
A bs t r a e t T h i s P a P e r
一
r e P o r t s t h e hs
o o t t iP e u l t u r e a n d r a p id P r o P a g a t i o n o f m o s a i e
五i s e a 。 e 一 f r e e p za n t s i n , i t r o o f f o u r t e e n v a r i e t i e s 。 f b a n a n a . T h e c u l t u r e o f t h e i r
s h o o t t i p s o n m
o d i f i e d M S m
e d i u m
e o n t a i n i n g 2
.
0一 5 . 0 m g / 1 B A . T h e r e s u l t s s h o -
w e d t h a t B A m a r k e d l y s t im u l a t e d t h e b u d f o r m a t io n a n d p r o l i f e r a t ot n
,
t h e h i g h e r
e o n e e n t r a t i o n i n e r e a s e d t h e m o r e n u m b e r o f b u d f o r m a t i o n
.
A l l f o u r t e e n v a r i e t i e s
o f b a n a n a i n d u e e d m a n y b u d s f o r m a t i o n
,
b u t t h e r e 15 g r e a t d i f f e r e n e e i n t h e i r
P o r P a g a t io n e o e f f i e i e n t
.
L o w e o n c e n t r a t i o n K T o r B A w a s b e n e f i e i a l t o r o o t f o r m a
-
t i o n
.
T h e t e s t
一 t u b e P la n t l e t s d e r i v e d f r o m s h o o t t i p e u l t u r e w e r e d i s e a s e 一 f r e e b y
v i s u a l i n s P e e t i o n
.
K e y w o r d s b a n a n a ; s h o o t t iP e u l t u r e ; m o s a i c d i s e a s e 一 f r e e ; r a p i d p r o p a g a t i o n