全 文 ：第 7卷第 4期 　　　　　　　　　　 　　　上 海 大学 学 报 (自 然 科 学 版 )　　　　 　 　　　　　 Vol. 7, No. 4
2001年 8月　　　　　　　　　 JOU RN AL O F SHANGHAI UNIV ERSITY ( N ATU RAL SCIEN CE)　　　　　　　　　　　 Aug. 2001
文章编号: 1007-2861( 2001) 04-0326-05
棕榈科麒麟血竭与百合科剑叶血竭 HPLC
指纹图谱分析与比较
黄茂华 ,　雍克岚
(上海大学 生命科学学院 ,上海 200436)
摘要: 采用反相高效液相色谱法 ,首次建立了进口棕榈科麒麟血竭和国产百合科剑叶血竭 HPLC指纹图谱 ,运用相
对保留指纹谱的方法 ,对获得的图谱进行数据化处理 ,得出重叠率、 n强峰、特征峰群和特征指纹峰检出率等参数 ,
从中找出不同血竭品种所含化合物之间的相互关系及特征 .结果表明 ,进口血竭与国产血竭的 HPLC指纹图谱差
异明显 ,同一品种不同产地的国产血竭指纹谱极为相似 ,但主成份含量有一定的差别 .
关键词: 血竭 ; HPLC;指纹图谱
中图分类号: O 657. 7; R 92　　文献标识码: A
Comparison Daemonorops Draco Bl. with Dracaena Cochinchinensis
( Lour. ) S. C. Chen by HPLC Fingerprint Analysis
HUANG Mao-hua,　 YONG Ke-lan
( School o f Life Sciences, Shanghai Univ ersity, Shanghai 200436, China)
Abstract: To establish a method fo r cont roling the quality o f drag on s blood by reversed-phase
high perfo rmance liquid chromato graphy ( RP-HPLC) , the relativ e retention time method was ap-
plied to deal w ith HPLC fingerprint da ta, and several pa rameters w ere obtained. These include:
ov erlapping ratio, n major peaks, g roup of cha racteristic peaks and detection ratio of cha racteris-
tic peaks. The results show that the fingerprints of homemade dragon s blo ods f rom dif ferent
sources are very simi la r, but the contents o f major components show di fferences to some ex tent;
the HPLC fingerprint of Daemonorops draco Bl. is distinct to Dracaena Cochinchinensis ( Lour. )
S. C. Chen.
Key words: dragon s blo od; HPLC; fingerprint
　　血竭为传统中药 ,原名麒麟竭 ,始载于《雷公炮
灸论》 ,具有止血、活血、消炎、定痛和生肌的功效 ,为
常用的树脂类中药之一 [1 ] .现代药理研究表明: 血竭
具有改善机体微循环 ,调整机体新陈代谢 ,提高机体
免疫功能等作用 [2 ] .血竭主要来源于两类植物: 棕榈
科黄藤属藤本植物麒麟竭 (Daemonorops draco Bl. )
及同属他种植物果实中溶出或分泌的红色树脂和百
合科植物剑叶龙血树从含脂木质部中提取而得的树
脂 [3 ] .血竭为紧缺药材之一 ,历来依靠进口 ,进口的
血竭为棕榈科麒麟血竭 . 70年代以来 ,我国植物学
收稿日期: 2001-05-16　作者简介:黄茂华 ( 1972～ ) ,女 ,湖南人 ,硕士生 ,主要从事生物活性物质的分离与分析的研究 .
家蔡希陶等人经过广泛的资源调查 ,在云南、广西等
省区陆续找到了一种可供提取血竭的植物—— 百合
科剑叶龙血树 (Dracaena cochinchinensis ( Lour. ) S.
C. Chen)
[4 ]
,其树脂经过多年药效、毒理和临床研
究 ,证明各项指标达到或超过目前进口血竭 [5 ] .作为
一种名贵中药 ,近年来血竭市场上出现了不少伪品 ,
影响了以血竭作为原材料的中成药质量 ,同时也危
害了人体健康 .血竭成份复杂 ,虽然已明确主要为黄
酮类、蒽醌类、皂甙类、甾醇类、萜类等化合物 [ 6] ,但
真正能够反映血竭药材内在质量的评价方法尚无统
一认识 .目前主要使用薄层、灰分、吸光度等多种方
法试图把握其质量 ,但这些方法干扰因素多 ,测定结
果不稳定 .因此 ,为了全面控制血竭的内在质量和确
保血竭临床使用的安全有效 ,有必要对进口棕榈科
植物麒麟血竭和国产百合科植物剑叶血竭 (云南血
竭和广西血竭 )利用高效液相色谱 ( HPLC)指纹图
谱等手段进行研究 ,从而为血竭的鉴定、质量控制提
供科学的依据 .
1　实验部分
1. 1　实验试剂、样品
甲醇 ( HPLC专用 ) ;乙腈 ( HPLC专用 ) ;磷酸二
氢钾 (分析纯 ) ;磷酸 (分析纯 ) ;进口血竭 (购自上海
华宇药业有限公司 ) ;云南血竭、广西血竭 (均由上海
中华制药厂提供 ) ;血竭素高氯酸盐对照品 (中国药
品生物制品检定所生产 ) .
1. 2　实验仪器
Shimadzu Lc-6A高压液相色谱仪 (日本岛津 ) ;
Shimadzu UV-260紫外分光光度计 (日本岛津 ) ;
TDL-4型低速离心机、超声波清洗器 (上海 ) .
1. 3　方法
1. 3. 1　供试溶液的制备
对照品溶液的制备:精密称取血竭素高氯酸盐
对照品 4 mg,以 3%磷酸甲醇溶液溶解 ,定容至 25
m l棕色容量瓶中 ,作为对照品溶液 .
样品溶液的制备: 精密称取进口血竭、广西血
竭、云南血竭药材细粉 (过 100目筛 )各 40 mg ,分别
置于 10 m l离心管中 ,准确加入 3%磷酸甲醇溶液
10 ml ,密塞后 ,振摇 5 min,使血竭充分溶解 ,然后放
入转速为 2000 r /min离心机中离心 ,吸取上清液 ,
并用 0. 45μm微孔滤膜过滤 ,澄清滤液作为样品溶
液 1、 2、 3.
1. 3. 2　紫外 -可见 ( UV -V IS)吸收光谱的测定
图 1　血竭素高氯酸盐的紫外 -可见光谱图
Fig . 1　 UV-V IS spectra o f Dracohodin Perochrorate
图 2　进口血竭的紫外-可见光谱图
Fig. 2　 UV-VIS spec tra o f Daemonorops draco Bl
图 3　广西血竭的紫外-可见光谱图
Fig. 3　 UV-VIS spectr a of Guangxi dragon s blood
图 4　云南血竭的紫外-可见光谱图
Fig. 4　 UV-V IS spectr a of Yunnan dragon s blo od
·327·第 4期　　　　　　　黄茂华 ,等:棕榈科麒麟血竭与百合科剑叶血竭 HPLC指纹图谱分析与比较
取对照品溶液及样品溶液 1、 2、 3,用 UV-260
紫外分光光度计在 190～ 700 nm之间进行紫外扫
描 ,扫描结果见图 1～ 4.
1. 3. 3　高效液相色谱 ( HPLC)指纹图谱的测定
高效液相色谱条件:
色谱柱: ZORABAX ODS-C18 (内径: 4. 6 mm ,
柱长: 25 cm ) ;流动相:乙腈 -0. 05 mol /l磷酸二氢钠
水溶液 ( 1∶ 1 ) ; 检测波长: 270 nm; 流速: 1. 2
m l /min;进样量: 10μl;柱温: 40℃ ;纸速: 5 cm /
min.对照品溶液与样品溶液 1、 2、 3的高效液相色
谱图见图 5～ 8.
图 5　血竭素高氯酸盐 HPLC图谱
Fig. 5　 HPLC Fingerprint of Dracohod in Perochrorate
图 6　进口血竭 HPLC图谱
Fig. 6　 HPLC Finge rprint o f Daemonorops draco Bl
2　实验结果与讨论
2. 1　紫外-可见 ( UV-V IS)吸收光谱分析
从紫外 -可见吸收光谱图看 ,血竭素 (图 1)在
图 7　广西血竭 HPLC图谱
Fig. 7　 HPLC Finge rprint o f Guangx i Dragon s Blo od
图 8　云南血竭 HPLC图谱
Fig. 8　 HPLC Fingerprint o f Yunnan Dragon s Blo od
439. 8、 269. 0 nm处有两个明显的吸收峰 ,在 301. 2
nm处有一个较小吸收峰 ,进口血竭 (图 2)在 422. 0、
274. 8 nm处有两个明显的较宽的吸收峰 ,蕴含了
269 nm处的峰 ,可以初步判断进口血竭中含有血竭
素 ;云南血竭和广西血竭 (图 3、 4)两者的光谱图很
相似 ,两者在 479. 8± 1 nm和 284± 2 nm处有两个
明显的吸收峰 ,在 270 nm附近没有出现血竭素的
特征吸收峰 ,初步确定国产血竭中不含血竭素 ,与进
口血竭的光谱图有明显的差别 .
由于紫外 -可见吸收光谱图上出现的特征吸收
峰不多 ( 2～ 3个 ) ,提供信息较少 ,血竭中各种同类
化合物其取代基的变化 ,难以在光谱中体现出来 ,所
·328·　　　　　　　　　　　　　　　　 　 上 海 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 )　　　　　　　　　　　　 　　第 7卷
以采用紫外 -可见吸收光谱方法制定指纹图谱 ,其专
一性不强 ,不能达到全面评价血竭质量的目的 .
2. 2　高效液相色谱 (HPLC)指纹图谱分析
2. 2. 1相对指纹图谱的建立
( 1)相对保留值T的计算
从上述实验条件下得到的 3个样品的 HPLC
图谱中 ,选择一个保留时间较居中且在各样品中均
存在的组分的色谱峰作为参照峰 ,指定它的 α值为
1,然后分别求出各样品中各组分的相对保留时间T
(T= tRi /tRT,其中 tRi为各组分的出峰时间 , tRT为
参照峰的出峰时间 ) .
( 2)T值窗口的设定
因保留时间受各种实验因素的影响 ,每一次实
验的数据不可能完全一致 ,故对每个峰位的 T值根
据统计学的处理设定窗口≤ 5% ,即通过实验数据算
出每个峰位的 T值可信度限制在± 5%的范围内 .
( 3)相对保留值指纹谱的建立
取广西血竭的色谱峰总面积为分母 ,各样品每
个色谱峰面积为分子 ,求得该色谱峰的相对面积值
( RA) ,将它标在其 T值项下 ,最后将各样品的T值
按小到大的次序排列成行 ,得到 3种血竭样品的相
对保留值指纹谱 ,如表 1所示 ,其中血竭素高氯酸盐
的T值为 2. 22.
2. 2. 2　指纹谱中色谱峰的重叠率
重叠率的计算是以广西血竭的指纹谱为基准 ,
将它的出峰数目和欲对比样品的出峰数之和为分
母 ,两者具有相同T值的峰数之和为分子 ,以此分别
求出 3种样品的重叠率 ,如表 2所示 .
重叠率从质的角度表明了进口血竭、云南血竭
与广西血竭的相似性 .从表 2可以看出 ,进口血竭与
国产血竭 HPLC色谱峰重叠率仅为 22. 7% ,说明两
者在化合物组成方面有着明显的差异 ,同一品种不
同产地的国产血竭之间 HPLC色谱峰重叠率为
75% ,表明国产血竭之间在化合物组成方面有着明
显的相似性 .
表 1　不同血竭样品的相对保留值指纹谱
Tab. 1　 Relative retent ion f ingerprint of three samples
T值 进口血竭
RA
广西血竭
RA
云南血竭
RA
共有峰
0. 54 1. 6 23. 5 23. 3 3
0. 66 0. 398 5. 0 5. 2 3
0. 70 - 16. 1 17. 9 2
0. 79 0. 018 - - 1
0. 83 - 6. 1 - 1
0. 86 0. 41 6. 3 14. 3 3
0. 94 0. 62 6. 2 7. 3 3
1. 00 0. 45 4. 8 14. 0 3
1. 07 - 6. 3 - 1
1. 12 5. 6 - - 1
1. 23 - 2. 4 4. 2 2
1. 35 - - 3. 2 1
1. 40 - 5. 5 4. 1 2
1. 45 0. 45 - - 1
1. 51 - 4. 8 13. 5 2
1. 67 - 1. 2 3. 6 2
1. 83 - - 1. 3 1
1. 92 - 0. 23 1. 6 2
2. 06 - 5. 5 7. 2 2
2. 22 0. 48 - - 1
2. 43 11. 3 - - 1
2. 97 2. 9 - - 1
3. 70 1. 9 - - 1
4. 47 8. 0 - - 1
总峰数 13 14 14
表 2　不同血竭样品 HPLC色谱峰重叠率
Tab. 2　Chromatographic peaks overlapping rat io
of three samples
样品 进口血竭 广西血竭 云南血竭
重叠率 /% 22. 7 100 75
2. 2. 3　指纹谱中六强色谱峰
六强峰是根据色谱图中每个峰的相对面积 ,选
出含量较高的六个峰 ,得 3种血竭样品的六强峰表 ,
如表 3所示 .
表 3　不同血竭样品的六强峰
Tab. 3　 Six major peaks of three samples
T值 /
相对面积
六　　　强　　　峰
1 2 3 4 5 6
相对总面积
进口血竭 2. 43 /11. 3 4. 47 /8. 0 1. 12 /5. 6 2. 97 /2. 9 3. 7 /1. 9 0. 54 /1. 6 31. 3
广西血竭 0. 54 /23. 5 0. 70 /16. 1 0. 86 /6. 3 1. 07 /6. 3 0. 94 /6. 2 0. 83 /6. 1 64. 5
云南血竭 0. 54 /23. 3 0. 70 /17. 9 0. 86 /14. 3 1 /14. 0 1. 67 /13. 5 0. 94 /7. 3 90. 3
·329·第 4期　　　　　　　黄茂华 ,等:棕榈科麒麟血竭与百合科剑叶血竭 HPLC指纹图谱分析与比较
　　n强峰从量的角度比较 3种血竭的组分差异
性 ,尽管云南血竭和广西血竭指纹谱极为相似 ,但主
成份的含量除T= 0. 54, 0. 70, 0. 94时相近外 ,其余
都有差别 .
2. 2. 4　特征指纹峰
以上述 3个样品的六强峰为主体 ,并结合它们
在样品中出现的频率 ,选出 T值为 0. 54、 0. 66、
0. 70、 0. 86、 0. 94、 1、 1. 40、 1. 51、 2. 06、 2. 43、 2. 97、
4. 47共 12个色谱峰为研究血竭的特征指纹峰群 . 3
种血竭样品的特征指纹峰检出情况如表 4所示 .
表 4　不同血竭样品的特征指纹峰检出率
Tab. 4　 Detection ratio of characterist ic peaks of three samples
α 0. 54 0. 66 0. 70 0. 86 0. 94 1 1. 40 1. 51 2. 06 2. 43 2. 97 4. 47 检出特征峰数
检出率
%
进口血竭 √ √ √ √ √ √ √ √ 8 66. 7
广西血竭 √ √ √ √ √ √ √ √ √ 9 75
云南血竭 √ √ √ √ √ √ √ √ √ 9 75
　　特征峰群和特征指纹峰的检出率充分反映了血
竭的内在特性 ,可作为其指纹特征用来区分血竭样
品及全面地评价血竭药材质量 .从表 4可以看出 ,进
口血竭特征指纹峰检出率为 66. 7% ,广西血竭和云
南血竭的特征指纹峰检出率为 75% ,超过进口血
竭 ;同时国产血竭中没有检出血竭素 ,与前面所述紫
外 -可见光谱分析相一致 .据文献指出 ,国产血竭在
改善血液流变性、抑制血小板聚集和实验性血栓形
成等方面具有明显的作用 [ 7] ,对二甲苯和烫伤所致
炎症 ,及抗真菌活性的研究表明 ,国产血竭的疗效接
近有些指标甚至超过进口血竭 [8 ] ,这进一步说明棕
榈科血竭的血竭素系该品种血竭的特征成份而非医
药特效性成份 ,中药血竭的医疗效果是许多成份药
效宏观汇合的结果 .
3　结　　论
( 1)血竭是我国名贵而常用的中药 ,长期以来
一直依赖进口 ,因此对于国产血竭的化学成份研究
工作起步较晚 .本研究首次建立了国产血竭和进口
血竭 HPLC指纹图谱 ,采用的色谱条件为:色谱柱:
ZORABAX ODS-C18 (内径: 4. 6 mm ,柱长: 25 cm ) ;
流动相: 乙腈 -0. 05 mo l /l磷酸二氢钠水溶液 ( 1∶
1) ;检测波长: 270 nm;流速: 1. 2 ml /min;柱温: 40
℃ .由于进口血竭与国产血竭的原植物棕榈科藤竭
和百合科木血竭分属两种不同植物 ,其中所含的化
学成份、有效成份也不尽相同 ,而导致两种不同科属
的血竭在指纹图谱上有较大的差异 .
( 2) 本文运用相对保留指纹谱的方法 ,将
HPLC指纹图谱数据化 ,得出血竭 3%磷酸甲醇提
取液的 HPLC色谱峰重叠率、 n强峰、特征峰群和特
征指纹峰检出率等参数 ,并将这些参数用于进口血
竭与国产血竭质量评价中 ,为鉴定和区分血竭的品
质提供了科学的、客观的、公正的依据 .
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