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内蒙古赖草属(Leymus Hochst.)植物的分类及同工酶研究



全 文 :蕊娜举 第 4 期 内蔽古师大学报 ( 自然科学汉文版》
( 生物学增 +l ) J u or na l of l one ` M。 。 : ol i a N r o, a l U n i v e ` s i t , ( N a t u ` . 1 5户i e o c e E d i t i o n )
村0 . 4
19 9 3
内蒙古赖草属 ( eL y ,一 : 15 H oc hs t . )植物
的分类及同工酶研究
陈世龙 杨锡麟
(生 物 系 )
摘 要 系统地整理了内蒙古赖草属植物 , 现已知 6 种 , 1 变种 , 其中有中国新纪录 1 种和 1 新变
种 . 并运用同工酶技术证明 6 种植物的各自独立性 .
关 . 词 赖草属 , 分类 , 同工海
, 吧6 . 心牙
1 日幼 巨
赖草属 ( L o y m “ : H o c hs t . ) 全世界约 30 余种 , 主要分布在北半球温寒地带 , 多数种类
产于亚洲中部 、 欧洲和北美 . 我国有 10 种 , 内蒙古有 6种 , 1变种 . 本属植物为内蒙古草原
的主要牧草资源之一 , 其中尤以羊草 ( L o y o su hc i ne 脚 `: ( T r i n . ) T : v e l . )在呼盟和锡盟形成
大面积的草原 , 成为我区重要妙业生产基地 . 所以对赖草属植物进行深入 研 究 , 在 科研 、
生产 、 教学等方面均具重要意义 .
我们在我区各地区大量采集植物标本和整理鉴定后 , 使内蒙古赖草属植物由已记载的 2
种增加到 6 种 , 1变种 . 同时运用同工酶技术证明 6 种植物的独立性 . 文章试图对内蒙古赖
草属植物的分类提供更多资料和证据 .
2 内蒙古赖草属的分类
2
.
1 分种检索表
1
。 颖细锥形 , 或下部稍扩展 , 具 l 脉 , 不具膜质边缘 , 长 6 ~ 12 毫米 , 背部 被 毛 或
否 , 第一外浮长 6 一 10 毫来 , 被长约 1 一 1 . 5毫米的细柔毛 · · · · · · · · · · · · · · · · . · · . . … …
· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … … 1 . 毛穗赖草 L . 夕。 ob a nu : ( lC a su ) iP lg e r
1
. 颖披针形或线状披针形 , 下部多少扩展 , 具 3 ~ 5 脉 , 且常具膜质边缘 .
2
。 颖短于小穗
收稿 日期 . 1 9 9 2一 0 6一 1
3
。 穗轴边缘具纤毛 , 小称轴节间光猾 , 外浮及基盘均光滑无毛 , 小枕常李生
`或上部在每节上单生 · · · · , · · · · … … 2 . 羊草 L . o hi 拙。 51 5 ( T n n . ) T ` 碑
3
. 穗轴被短柔 .毛 , 小穗轴节间贴生微柔毛 , 外存背部被毛 , 基盘具长 1 毫米
的微毛 , 小穗常 2 ~ 3 枚生于每节上 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … …
、 : ` · ” ” ” “ ’ ` ” “ ` ’ . ’ “ “ , ” ” ’ ` ” ’ 3 · 赖草 L . “ ` i“ ” 一 ( G e哟 i 、李一。 T : ve ! .
2 } 绷哮于或长于刁嘟” 、4 . 小穗含 2一 3小花 , 颖基部膜质边缘较宽 , 紧包外俘使之基部不外露· · · · · · · · · · “ ·…… ` · · · · · · · … … 4 . 窄领赖草 L . 洲 gu : ut : ( T r in . ) iP lg e r4 . 小称含 3 一 6 小花 , 颖基部膜质边缘窄 , 不紧包外俘 , 使之基部外露6 . 小穗每节反生 2枚 , 长 10 一 15 毫米 · · · … … “ · ` ” · · · · · · · · · · · · · · · · · · … …· · · · · · … … 6 . 科佩特颖草 L . k o 夕e t d a g 几e n : f: ( R o s h e v . ) T z v e l .5 . 小德每节常 3 枚
6
. 植株高 70 ~ 120 厘米 , 小穗长 15 ~ 19 毫米 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … …
… … 6 a ` 天 山赖草 L . t i a n : c h a n so u : ( D r o b . ) T z ve l . 往 r .
t i a n s e h a n i e u s

植株高 50 ~ 70 厘米 , 小穗长 10 ~ 15 毫米 · · · · · · · · · · · · · · · … … ,’ ……
’ , 声
·一 6 b . 矮天山赖草 L . t`a n : h 。 n i c u ; ( D r o b ) T z v e l . , a r .
h
u fn i l i
s s

L
.
C h e n e t H
.
L
.
Y a n g
.
2

2 各种地扭分布及个别种描述

.1 毛稼翰草
肠 y砌 s 夕a ob o n : : ( C l a u s ) P i lg e r i n E n g l 。 B o t . J a h r b . . 7 4 : 7 . 1 9 4 7 . ,二 E l y曰姗 ’
.夕a ob a ” 瀚 七 C l a u s i n B e i t r . P f l a n z e n 。 R u s s . R e i e h . 8 : 1 7 0 。 1 8 5 1… A n e u r o l e P id i `价
广。 吞。曲 u成 ( C l a u s ) N e丫 s k i i n K o nt . F l . U R S S Z : 7 0 7。 1 9 3 4 .
产于巴盟乌拉特后期境内狼山北麓 . 分布于新疆 、 甘肃 、 青海 ; 蒙古 、 前苏联中亚及西
f白利亚也有分布 。
2
。 . 羊草
L e y m u s c h i .
e ” 5 15 ( T r i n
.
) T z v e l
.
i n P I
.
A s i a e C e n t r

4
:
2 0 5

1 9 6 8… T r`梦i c “ 阴
c
h i ” e ” 5 15 T r i n 。 e x B u n g e , E n u m P I . C h i n a b o r 。 1 46 。 1 8 3 2 … A n e u r o 介P fd f u m
c
h i
n e , 5 15 ( T r i n
.
) K i t a g
.
i n R e p
.
I n s t
.
s e i
.
R e s
. 入I a n e h . 2 : 2 8 1 . 1 9 3 8 .
产全区各地 . 分布于我国东北 、 河北 、 山西 、 新疆 ; 朝鲜 、 蒙古 , 前苏联 (西伯利亚 、
中亚 、 远东 ) 也有分布 .
3
。 赖草
’ 五e 夕m “ : : 。 。 。 z` , 。 : (` e 。 r g i ,) T : , 1. 1。 P I . A s i a e e e n t r . 4 : 2 0 0 . 1 0 6 5 . … 乙 e夕川 。 ;
d a s夕 s t a c h夕 s ( T r i n . ) P i lg e r i n E n g l . B o t . Ja h r b . 7 4 : e . i 9 4 7 … A n召 u r o le P f d i u协
d a : 夕 5 t a e h夕: ( T r i n ) ,万e v s k i i n K o m . F I . U R S S Z : 7 0 6 . 1 0 5 4 .
产全区各地 . 分布于我国东北 、 河北 、 :力西 、 陕西 、 青海 、 甘肃 、 西藏 , 日本 、 朝鲜 、
萦古 、 前苏联也有分布 .
本种在外俘的被毛上表现出一连续变异 , 从外 、孚背部反基部边缘被微毛到外移背部被毛
.
5 2
,
!
且边缘的毛长而密 . 这种变异与生态条件有关 , 生长在缺水 、 千早或沙地上的赖草其外样背
部密被毛 , 而生长在水分条件较好的地域的赖草外浮背部被毛少而稀 .
4
。 窄颖赖草
L e夕nt u s a ” 夕 u ` r u s ( T r i n . ) P i l g e r i n E n lg . B o t . Jh r a b . 7 4 : 6 : 1 9 4 7… E I夕爪 u s
a ” g u s t “ 5 T r i n . i n L e d e b . F l . A l t . i : 1 1 9 . 1 5 2 9 … A ” 口“ r o l e P i d f u m a n夕u s t“ m
( T
r i n
.
) N
e v s k i
.
i n K o m
.
F !
.
U R S S Z
: 7 0 0

1 9 3 4
.
产巴盟乌拉特中旗境内巴音哈太苏木等地。 在我国分布于新疆 、 甘肃 、 陕西等省 。 前苏
联中亚细亚 、 西伯利亚及欧洲也有分布 .
5
。 科佩特赖草 (中国新纪录 )
L
e 夕m u s k o P o t d a g h e n s i s ( R o s h o v . ) T z v e l . B o t . M a 仁. ( L o n i p g a r d ) 2 0 : 4 2 9 ,
1 9 6 0… E l夕m o s k o P e t d a 夕h e n s ` 5 R o s h e v . F l . H 。 T u r k m . i : 2 1 1 , 1 9 3 2 , R o s h e v .
T r

B o t
.
I
n s t
.
U R S S
, i , 2
: 10 0
, 1 9 5 6二 卜界” e o r 。介乡f心 。 m k o p。 t d a g h。 n s i s ( R o s h e v . )
N
e v s
k i

i n K o m

F I
.
U R S S Z : 7 0 3
,
1 9 3 4
-
一 多年生 , 具下伸根茎 . 秆单生 , 稀丛生 . 基部残留纤维状叶鞘 , 直立 , 高 51 ~ 75 厘米 ,
具 2 ~ 3 节 . 花序下粗糙 . 穗状花序直立 、 纤细 , 灰绿色或浅褐色 , 长 7 . 5~ 12 . 日厘米 , 宽
。 . 。一。 . 7厘米 , 穗轴粗糙或密众柔笔厂袂上具睫毛 , 基部节间长 1 . 。一 1 . 2厘米 , 上部仅。 . 3
~ 。 . 4厘米 , 小穗 2 枚生于 l 节 , 长 1 . 0~ 1 . 5厘米 , 含 4 一 5 小花 , 小稼轴节间长 2 毫 米 ,
密被短柔毛 , 颖线状披针形 , 等长于小穗 , 两颖迈相等 , 先端狭窄如芒 , 具膜质边缘 , 背部
和边缘粗糙 , 外俘披针形 , 先端延仲成小尖头 , 5 脉 , 背部粗糙或被笔 , 长 0 . 8~ 1 . 2厘米 ,
内移与外释等长 , 背上具纤毛 . 花 、 果期 6 ~ 8 月 .
产巴盟硷口县哈腾套海苏木 . 生于盐渍化草地上 . 前苏联中亚有分布 . 模式标本采自前
苏联中亚巴尔喀什 .
6
。 天 山赖草
L e夕m u s t `a n s c h a 拄 i c u s ( D r o b . ) T z v e l . N o t . I n s t . B o t 、 K o m . A e a d 。 S e i . U R S S
2 0 : 4 6 9
.
1 9 6 0… E I夕拼 u s r f a n s c h a ” r f e u s D r o b . i n F e d d e , R e p e r t . N o v . S p . 2 1 : 4 5 ,
1 9 2 5… A ” 叼 u r o l君夕i d f “ 阴 r i a 作 s e h a n i e u s ( D r o b . ) N e v s k i i n K o m . F I : U R S S Z : 7 0 3 ,
1 9 3 4

a6
. 夭 山赖草 (原变种 ) `
v a r 。 t玄a n s c h a n玄e “ s
产巴盟瞪口县哈腾套海苏木 . 新疆也有分布 . 也分布于前苏联 中亚地区 .
6 b
. 矮天 山赖草
v a r 。 h u m i l i s S
.
L

C h
e n e t H
.
L
.
Y a n g
, v a r 。 尽o v .
A t y p o e u lm i 5 0~ 7o e m a l t i ; S p i e a b r o v i s e t t e n u i s
,
8~ i s
e m l o n g i , 0
.
5~ 0
.
7
e m a t i s ; S P i e u l i s 1 0~ 1 5m m l
o n g i s d i f f e r t
.
N e i M o n g g o l
:
x i l i n G o l M e n : ( x i U j i m
a q i n Q i
, 耳b a g a Q i ) , C h i F e n g
( K e s h i k e t e n Q i ) , B a y a n N o l M e n g ( D e n k o u 工 i” ) , A l a s h a n M e n g ( A l a s h a n z u o
Q i
,
H
o l a n s h
a n ) g V l l l
,
5
.
L
.
C h e n 2 7 7 ( T y p
u s i n H e r b
.
D e p a r t
.
B i o l
.
M o n g o l i a i n t e r i o T e a e h
.
U n i v
. e o n s e r v a t o r )
.
本变种与原变种主要区别在于: 植株矮小为5 07 ~ 0厘米 ;穗状花序短而细 , 长 8 ~ 15 厘
米 , 宽。 。 5~ 0 . 7厘米 , 小穗长为 10 一 15 毫米 。 .
分布广泛 , 分布于锡盟 (西乌珠穆沁旗、 阿巴嘎旗 ) , 赤峰 (克什克腾旗 ) 、 巴盟 (瞪口
县 ) 、 阿盟 (阿拉善左旗 、 贺兰山 ) .
3 内蒙古赖草属 6 个种的同工酶研究
3

1 材料和方法
3

1
.
1 材料及来源见表 1
表 1 启种植物同工酶分析的材料及来派
-一一一 . . . . . . . . . . . . . . . .种 名 来 源 及 产 地一 -一一一奋-一 -一一一一 叫一 -一一一一羊 草毛 稼 赖 草窄 预 赖 草天 山 软 草科佩特较草赖 草 内获古畜科院草原所 , 产地 : 呼盟内菠古畜科院草原所 , 产地 : 巴盟乌拉特后旗’ 内获古畜科院草原所 , 产地 : 巴盟乌拉特后旗采 自巴盟破口县哈腾套海苏木 , 采集号 91 一 。。 1 7采自巴盟橙口 县哈腾套海苏木 , 采集号弧一 。0 11采自巴盟破口 县哈腾套海苏木 , 采集号 91 一 0。。 63 。 1。 2 样品制备 : 将种子播种于花盆中 , 待苗长至 5 ~ 6 厘米时 , 将整株幼苗取出 (包括根
部分 ) , 冲洗干净 , 以 1 : 3比例加蒸馏水在冰浴中研磨 , 然后在冷冻离心机中以 10 0 o or p m
的转速离心 10 m i n , 提取上清液 ,滴加甘油置于冰箱中保存待用 .
3
.
1
.
3 电泳夕法 [ ` l : 采用不连续聚丙烯醚胺凝胶系统垂直板型电泳 . 本文分析了过氧化 物 酶
和细胞色素氧化酶伺工酶 , 所采用的分离胶浓度和浓缩胺浓度均 相 同 , 分 别 为 7 . 5% 和
3
,
2 %
。 每个样品槽加样40 拼L , 恒压 20 。~ 220 V , 电泳时间5 ~ 6 h .
3
.
1
.
4 染色方法 [ . ] : 过氧化物同工酶采用醋酸联苯胺法 . 细胞色素氧化酶同工酶为二 甲基
对苯二胺 、 a 一蔡酚和磷酸缓冲掖配制而成的染色液 .
3

1
.
5 分析方法 : 本文采用极点排序法更清楚地说明 6 种植物的关系 .
1
3

2 结果分析
从电泳 5 ~ 10 次的重复结果看 , 酶带极为稳定 , 具体结如下 :
3

2
.
1 过氧化物酶同工酶
赖草属 6 种植物之间的过氧化物酶同工酶酶谱差异很大 , 虽科佩特赖草和赖草有相同的
酶带数且 R f值也相同 , 但带的颇色有深浅之分 , 即酶的反应活性不同 . 这 6 个种有一条共有
酶带 , ` 即 R f值为 0 . 1 27 . 从整体看 , 肴狡f值不同的酶带 8 条 (见图 1 和表 2 ) .
万4
表 2
酶带序号
6种植物过级化物酶同工酶Rf 值
I
` ’
nI w
L
. e五i o n n :i , 0 . 12 7 0。 1 36 ;
L

P ab
o a n u , 0

0 82 心 . 1 0
L
. a n g u , t u , 0
.
1 2争: o . z s e
L

t王a n , e 五a n i e u , o 。 1 2 7 0。 1 3 6
L

K o p e t d a g h e n , 10 0
.
1 2 7 0
.
1 3 6
L

S e e a l i n u o o

1 2 7 0
.
25 6
〕 。 15 5
0

1 2 7
0

1 9 1
0

2 4 5
0

2 4 5
0

3 1 8
0

2 4 5
0

2 4 5
0

2 4 5
0

3 1 8
农 3 相似系数 、 不相似值总和 (习 )与 iX , iE , iY (单位% )
- - - - - - - - - - , - -中一 -
L 2 L 2 L 3 L一 L s L 6 . 刃 X i E i Y i一 - ~ - - - - - - - - - - , 产一- 一一一 ,一一一一尸一一一 - - 一- 一一~一叫一一~ 一一 一L : 6 0 ` 3 ` 5 5 2亏 2 5 i a 6 ` 5 3 6 05 52 8
3 3
2 3
2 3
231.5
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0
0
1 4

4
0
O
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.
J一
八U八UJ任两亡J21.二
户尸
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52,

3 3
3 3
8 6
8 6 1 0 0
刀6780
O甘7八.nù2口01勺.
40576邢2电曰弓叹6L
图 1 过氧化物碗同工酶酶谱
为了更清楚地说明 6种植物之间的关系 , 本文进行极
点排序 . 结果表明 , 科佩特赖章和赖草相似性高为同一点 。 毛穗赖草与其余 5 种排序距离远 , 同时 , 羊草与其
它 4 种植物排序距离也较远 , 说明它们乏间差异较大 ,
这与经典分类是一致的 ( 见图 2 ) 。
3
.
2

2 细胞色素氧化酶同工酶 :
, · 图声, 6 种植仰过氧化物酶同再酶相似程度二维排序 _ 、 图 3 细胞色素军终酶同工酶醉谱
6种植物的细胞色素氧化酶同工酶酶谱差异也很大 . 没有两个种的酶谱是相同的 , 即使酶
带数相同 , : 它们的通移率也不同 , . 6 种同样有一条共有酶带 , 即 fR 值为。 . 1 0 9 . 从整体看共
, 唇5
有值不同的酶带 1 8条 (见图 3和表 4)
表 6 4种植物细饱色紊级化酶同工的 R f位
醉带序号 I皿 I I V· VI V` 粗 粗
~ 一一 一一 - - - -一一~ 月一 ~ ~ ~ - - - -一一 ~ ~ ~ - - -一 -一~ 一~ ~ Lx L· chi e n: ni :0 .1 0 0 9 .1 0 2 7 .0 5 5 2 .22 7 .o . Za Z0 .0 5,
L z L
.
P ab
o a n u , 0
.
0 7 5 0

0 9 2 0
.
20 , 0
.
05 , o

5 6 4
L 3 L
. a n g u : t住: 0 . 2 0 , o一 2 7 0 . 1 5 5 0 . 邱 7 0 . “ 2
L 一 L . t i a n ` e h a o i e u , 0 . 2 0 9 0
.
12 7 0

15 5 O
.
2 2 7 Q

2吕2
L S L
.
k o p e t d a g 五e n , i , 0 . 1 0 0 0 . 2 2 7 0 . 1 5 5 0 . 2 2 7 0一“ 7 0一` Za
L 6 L
一: e c a l i n u o 0
.
1 0 0 0
.
1 2 7 0
.
52 7 0
.
5 32
一一一一一 一一~一一 一 ~ ~ ~ ~向~ . 州~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ 一~ 一~~ ~ 户~ , , 护叫, . ~ , 一表 5 相似系嫩 , 不相似谭总和 (刃 )身xI ;日 , 丫i (单位% )
0
。多0 9 0。 5夕1
同样也进行了极点排序 (见图 4 ) ,
结果表明 , 毛穗赖草与其余 5 种植物排序
距离远 , 其中羊草也与其它 4 种植物排序
距离攀远 , 这与过氧化物酶结果相同 . 但
在反映 L 。 , L ` ,工。 , L 。 之间的关系时 , 两
种酶是有差异的 。
相倪燕莽 r柳 夕`
L 6
.
, 之
:
一 ` 5 ,
3

3 给论
` 赖草属植物在两种酶上均具不同的酶
带 , 这从分子水平、 代谢调控及基因表达
上反映了 6 种植物之间的差 异 , 证明 6 种
植物之间的各自独立性 。 但这 6种植物间
的同工酶也存在共同的酶带 , 表明 6 种植
物具共同的属性 , 存在一定的亲缘关系 .
有差异 。
L刁.
1
60邪.本,的幻
工.
朴`翻,口`.几U
-,曲O
卜内叨
”匕` 一0 10 生. 公0 40
图 4 6 种植物细脚色素氧化酶同工酶柑似程
度二维排序
同时发现这两种酶在反映 6 种植物间的亲缘关系上
参 考 文 狱_
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C g ]
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聂紊舞减玻她脉时秦胶浓麟口交族度的正确选择`生场化学与生物物理进展 , ; 。。 7 , : :
50~ 5 3
B 。 : k , 。 r比 ; 、 M`琢去 :价 , i示畜R` J ;飞块 l nt 。 。 H。呱。 . ( e f。。 ; 。 。。 , : T : * t i 。 e 。 e ) ; 。
N o r t h A m e r i e a
: t a x o n o m y a n d d i s t r i b u t i o n
.
A m e r
.
J B o t
.
19 8 4
,
7 1: 6 09 ~ 6 25
B o u l t e r
,
D
.
& T u r n e r
,
B
.
L
.
T五e u s e o f d i s e e l e e t r o p五o r e s i s o f p l a n t p r o t e i n i n
s y s t e m a t i c s

T a 女七n , 场七6 , 1厅. 13 5~ 14 2
〔 11〕 B r o 下n , A . H 。 D .
u r a l P o P u l a t i o n
, N e v o , E
. , Z o h a r y , J
. ,
& D a g a n
, O
。 ,
G e n e r i e v a r i a t i o n i n n a t
-
o f 下 i l d b a r l e y . G e n 仑 t i e a .
〔 12〕 C h e r y , J . P . , C o m p a r a t i v e s t u d i e s o f s e e d
19 7 8
, 4 9 : 8 7一 10 8
p r o t e i n a n d e n z y m e o f s P e e i e s a n d
奋 e o l l e c t i o n o f A r a e 五15 b y g e l e l e e t r o P五o r e s i s
.
P e a n u t
.
S e i
.
1 9 75 , 2
: 5 7~ 6 5
[ 13〕 D e下 e y , D 。 R 。 , N e 下 n o m e双 e l e t u r a l e o爪 b i n a t i o n i n t h e N o r t h A m e r i e a n P e r e n n i a l
T r i t i e e a e ( G r a nt i n e a e )

B r i t t o n i a

19 8 3
,
35 : 3 0~ 3 3
[ 14〕 .I e d i z i n s k i , G . , S e e d P r o t e 王n e l e e t r o P五o r e s i s i n t a x o n o m i e a n d e 丫 o l u t i o n a r y
s t u d i e s
.
T h e o r

A P p l了 . G e n e t . 19 7 9 , 5 4 : 1 4 5~ 1 5 1
[ 15 〕 L o 甲 e , A 。 , C o n s P e e t u s o f t h e T r i t i c e a e . F e d d e s R e P e r t o r i u m ` 19 84 , 95 : 4 7 7一 48 3
[ 16〕 N e v s k i , S . A 一 T r i b X I V . H o r d e a e B e o t五. In F l o r a o f t il e U 。 S 。 S 。 R . K o . a r o v ,
V

L
. e d , I s r a l P r o g r a m f o r S e i
.
T r a n s a l
.
1 9 3 4
,
1
:
5 5 3~ 55 6
[ 1 7〕 T 名v e l e , N 。 N . , G r a s s e s o f t h e 5 0 丫 i e t U n i o n ( T r a n s l a t e d f o r m R u s s i a n ) 。 W a s五i -
n g t o n D C
:
A m r i n d P u b l
.
C o m 19 7 6
T a x o n o m y
,
a n d I s o z y m e S t u d y o n L e y m u s i n
I o n e r M
o n g o l i a (G r a m i n e a e )
C h
e n S h i l
o n g Y a n g X i l i
n
(刀官 p “ , 矛嘛 . t o 才. B i o l o g夕 )
A b s t r a e t T il i
s p a p e r S y s t e m a t i e a l ly c o l l e e t s s p e e i e s o f L e y m u s i n I n n e r
M o n ` o l i a ` T h e r e a r e · 6 s p e e i e s a n d : 1 v a r i e t jr , I n e l u d i n g 1 n e w r e e o r d o f C h i n a
` n d 1 n e w v a r i e t y , I s o z y m e p r o v i d e s , n v id e n c e s f o r i n d e p e n d e n c e o f 6 s p兮e i e s -
Ke y w o r d s L
e y 成 u s , C l a s s i f i e a t i o n , I s o z y m e .

.
5 7