全 文 ：收稿日期: 2007 07 16
基金项目: 国家自然科学基金项目 ( 30671429)
作者简介: 卢军 ( 1982 ) ,男 ,四川凉山人 ,硕士研究生 ,从事生物化学与分子生物学研究。
芸薹属自交不亲和功能因子及分子机制研究进展
卢　军 ,　李乐玉 ,　陈晓丹 ,　朱利泉 ,　王小佳
(西南大学农学与生物科技学院 ,　重庆　 400716)
摘要: 芸薹属的自交不亲和性受 S位点基因控制 ,其上的 SRK基因和 SCR /SP11基因是自交不亲和反应中的两
个关键因子 ,另外所发现的其他因子也对自交不亲和发挥了重要作用。 文章介绍了影响自交不亲和的功能因子及
其分子结构特征和功能 ,对自交不亲和反应的分子机制作了进一步阐述 ,同时对这些功能基因在芸薹属植物甘蓝
染色体组上的定位研究作出展望。
关键词: 芸薹属 ;自交不亲和 ;功能因子 ;分子机制
中图分类号: Q949. 748. 3　 文献标识码: A　　　　　文章编号: 1002— 8161( 2007) 06- 0601- 05
Progress on functional factors of self-incompatibility and molecular
mechanism in Brassica
LU Jun, LI Le-yu, CHEN Xiao-dan, ZHU Li-quan, WANG Xiao-jia
(College of Agriculture and Biotechnology , Southwest University , Chongqing 400716, China)
Abstract: The self-incompatibility ( SI) o f Brassica is contr olled by S locus genes, and SRK gene and SCR /
SP11 gene a re tw o key facto rs in SI r ea ction; in addition, o ther functional facto r s also pla y impo rtant r oles in SI.
The a rticle int roduced the charac teristics of molecula r st ructure and function o f S locus genes and functional facto rs
affecting IS, and discussed the molecular mechanism o f SI Reac tion. At th e same time, g ene mapping on genome of
these functional molecules for Brassica oleracea w ere pr ospec ted.
Key words: Brassica; self-incom patibility; functional factor s; mo lecula r mechanism
　　自交不亲和性 ( sel f-incompatibility, SI)是显花
植物进化过程中产生的阻止自体受精、促进远系繁
殖的一种重要机制。自交不亲和现象在显花植物中
非常普遍 ,估计存在于一半以上的显花植物中。根据
花的形态 ,可将 SI分为异型 ( heteromo rphic)和同型
(homomo rphic)两大类 ,前一类中 ,植物间亲和与
否 ,可依据各种基因型植株具有的不同花的形态来
判断 ,比如报春花、荞麦等 ;后一类中 ,花的形态特征
和亲和性无关 ,在被子植物中较为普遍 ,比如甘蓝、
白菜等。另外在同型 SI中 ,根据花粉不亲和表型遗
传控制方式的不同 ,又可分为孢子体型 SI ( spo ro-
phy tic SI, SSI)和配子体型 SI ( gametophytic SI,
GSI)两类 ,前一种自交不亲和遗传型比后一种更为复
杂 ,其受精的结果多是由亲本的基因型决定的。
芸薹属植物属于典型的孢子体自交不亲和 ,这
种自交不亲和受一个带有复等位基因的多态性 S基
因座 ( S-lo cus)所控制 ,在一个 S基因座上 ,可含有多
个 S等位基因 (亦称 S单元型 ) ,目前芸薹属已鉴定
出100多个 S等位基因 ,在甘蓝中发现 50多个 S等位
基因 ,在芜菁中发现 30多个 S等位基因。在这个 S多
基因家族中 ,包含 3类基因: SRK( S-locus recepto r
kinase, S位点受体激酶 )、 SLG( S-locus g lyco-pro-
tein, S位点糖蛋白 )及 SCR( S-locus cystein-rich
protein, S位点富集半胱氨酸蛋白 ) /SP11( S-locus
protein11, S位点蛋白 11)。这种自交不亲和性除了
受 S位点基因的控制外 ,还受 MLPK、 ARC1、 SLR、
T HL1 /THL2、水孔蛋白等因子的调控 ,这些因子的
编码基因虽然不与 S位点连锁 ,但对植物的自交不
亲和性有着非常重要的作用。目前 ,芸薹属自交不亲
和的分子机制还远未弄清楚 ,因此深入研究影响自
交不亲和反应的功能因子 ,理清整个 SSI途径中各
个功能因子的相互作用机理 ,对促进生殖细胞之间
的化学调控、芸薹属作物遗传育种均具有重要的理
论和现实意义。
·601·广西农业科学　 2007年第 38卷第 6期
1　 S位点上的 3个连锁基因
1. 1　 SLG
SLG基因编码一种分子量为 55～ 65kD的可溶
性分泌型糖蛋白 ,基因型不同时 , SLG分子量有所
差异 ,在氨基酸序列上体现出 2%～ 40%的成对 [1 ]。
SLG的氨基酸序列分析表明:其序列总长 436个氨
基酸 ,羧基端 ( 269～ 436氨基酸 )包括 12个完全保守
的半胱氨酸残基和 12个 N-连接的糖基化位点 ,此区
段保守性约为 78% ,中间区域 ( 182～ 268氨基酸 )变
异幅度较大 ,氨基端 ( 1～ 181氨基酸 )为疏水区 ,保
守性达到 80% ,其中含有 31个氨基酸 ,因为成熟的
蛋白质中没有这段疏水区 ,故推测该 31个氨基酸为
信号肽 ,负责引导 SLG进入细胞分泌系统。同时 ,不
同 S基因编码的 SLG的 N-糖化位点确切位置不一
样 ,由此表明 SLG具有分子多样性。目前 ,在芸薹属
植物中已获得了 30多个 SLG的克隆。 SLG基因的
表达不是诱导性的 ,而是受到严格的发育阶段性控
制 ,因此临开花前才在雌花中大量表达 ,在一些基因
型植物开花前 1～ 2d的柱头中 , SLG的含量可达其
全部可溶性蛋白的 5% 。最初 ,人们普遍认为柱头识
别花粉是靠 SLG,但通过 SLG与 SRK转基因实验表
明 SRK在 SI中起首要作用 ,而 SLG在 SI中只起辅
助作用 ,在花粉拒绝反应中并非是必要的 ,某些植物
中甚至没有 SLG出现而同样发生 SI反应 [2 ] ,它可能
是通过与 SCR以及其他花粉胞被蛋白的相互作用 ,
穿过柱头细胞壁 ,与锚定在细胞膜上的 SRK结合 ,
从而促进花粉与柱头的粘合 [3 ] ,因此 SLG在 SI反应
中起增强 SRK活性的作用 ,但这种增强作用的机理
还不清楚 ,需通过进一步研究来阐明。
1. 2　 SRK
SRK基因包括 7个外显子和 6个内含子 ,内含
子大小从 76～ 896bp不等 ,它编码一个含有 857个
氨基酸的跨膜蛋白质激酶 , SRK属于植物受体蛋白
激酶 ( PLKs)家族 ,主要由 N端胞外区域 ( S域 )、跨
膜区域以及 C端胞外 Ser / Thr激酶区域构成。外显
子 1编码 S域 ,由 438个氨基酸组成 ,其中有一段 32
个氨基酸组成的信号肽 ,剩下的 S域 ( 1～ 406位氨
基酸 )包含完全保守的 12个半胱氨酸残基和 3个可
变区。保守的半胱氨酸残基在 SRK的 S区域和 SLG
的结构中起主要作用 ,决定 SI中的识别反应 ,这种 S
域是花粉配体的结合位点 ,与同座 SLG蛋白有 90%
的同源性。外显子 2编码跨膜域 ,包含 20个疏水氨基
( 415～ 434位氨基酸 ) ;外显子 3～ 7编码蛋白激酶域
( 489～ 781位氨基酸 ) ,定位于胞质内 ,它通过丝氨
酸 /苏氨酸残基的磷酸化 /脱磷酸化而起传递信号的
作用。 2000年 , Takasaki等 [ 2]通过构建载体 pSL JS-
RK28将Ⅰ 类 S单倍型 SRK28基因导入Ⅱ类 S单倍
型 S60的 Brassica rapa中 ,在获得的 17个转基因植
株中 ,全部为 SI,其中有 3株拒绝 S28和 S60花粉 ,其
他的 14株只拒绝 S60花粉 ,表明前 3株的柱头 SI表
型已经改变。为了检测新的 SI表型是否由 SRK28引
起 ,他们采用 S24、 S43、 S45、 S52和 S29、 S44花粉对
其授粉 ,结果花粉管全部穿过柱头 ,表明植株获得了
对 SRK28特异性的 SI表型。在随后的 Northern杂
交分析中发现了在柱头有 SRK28转录本的存在 ,而
在花药中不存在。这些证据均表明 SRK是自交不亲
和性的雌性专一性决定因子。
1. 3　 SCR/SP11
SCR /SP11基因为单拷贝序列 ,编码一个开放
阅读框 ( ORF) , RN A杂交分析表明它在花药中特
异表达 ,蛋白质产物含 74～ 77个氨基酸。 它是一种
高度多态性的、富含半胱氨酸的小分子巯基蛋白 ,成
熟的 SCR /SP11蛋白是一个分子量为 8. 4～ 8. 6kD
的碱性 ( pH为 8. 1～ 8. 4)蛋白 ,具有亲水性 ,包含 8
个保守的半胱氨酸残基 ,相互形成 3～ 4个二硫键。
SCR /SP11信号肽中 C1-C2之间的 Gly残基和 C3-C4
之间的芳香族残基都具有高度保守性 , Shiba[4 ]推测
这可能与其特异结合有关。这些年来对 SCR / SP11
的研究获得了很大进展 ,那么如何确定 SI的信号分
子是由花粉产生的 SCR配体呢? 主要有以下几个方
面的证据:①在甘蓝 ( Brassica oleracea)的花粉自交
亲和突变体上没有检测到 SCR基因的表达 ,导致了
SI的丧失 [5 ];② SCR6转基因植株的花粉获得了 S6
花粉表型 [6 ] ;③ S6、 S8和 S13单元型中的 SCR表现出高
水平的序列多态性 ,它们之间相似性只有 30% ～
42% ,这种高度的变异与自交不亲和反应中担当特
异性配体的作用是一致的 ;④ SP11转基因植物的花
粉只有授粉到不同单元型柱头上时才能结实 ,而与
相同单元型柱头结合则发生不亲和 [7 ]。所有这些足
以表明 SCR是自交不亲和性的雄性专一性决定因
子。
2　其他与 SI相关的非 S位点因子
2. 1　 M LPK( M locus pro tein kinase, M位点蛋白
激酶 )
　　 MLPK是 Murase等 [ 8]在 2004年从芸薹属自交
不亲和途径中发现的一种新的激酶 ,他们同时发现
自交不亲和信号传导途径除了受 S-locus基因控制
外 ,还受 M-locus基因的调控 , M位点与 S位点彼此
之间是独立的 ,并且 M位点对于 S位点是上位性的。
MLPK的编码基因含有 8个外显子、 7个内含子 ,一
·602· 广西农业科学　 2007年第 38卷第 6期
共编码 404个氨基酸。它具有 1个典型的植物 N端 -
十四 [烷 ]酰化 (豆蔻酰化 )的花边序列: Met-Gly-
XXX-Ser /Thr( Arg ) (X代表任何一个氨基酸 ) ,有 1
个具有 30个氨基酸且富集丝氨酸 ( 33% )的结构域
以及 11个蛋白激酶的亚结构域。通过 Northern杂交
实验表明 , M LPK主要在柱头中表达 ,早期阶段表
达量较低 ,但在开花前 3d左右 (花蕾达到 6～ 8mm
长 )其表达量迅速增加并在开花当天达最大。由于 N
端 -十四 [烷 ]酰化 (豆蔻酰化 )的花边序列编码蛋白
通常被转移到硝酸纤维素滤膜上 ,所以通过 West-
ern杂交实验显示 MLPK是一种膜锚定蛋白。
Murase等 [8 ]通过序列分析 ,发现 MLPK与 SRK一
样存在 Ser /Th r蛋白激酶活性位点、蛋白激酶磷酸
化位点、 cAMP磷酸化位点 ,且N端结构域都表现为
序列多态性 ,于是引出一个假设即 MLPK类似于
SRK在自交不亲和信号传导中发挥接收并传递胞
外信号的作用 ,但赵永斌等 [9 ]在甘蓝中成功克隆出
MLPK基因后 ,通过序列比较分析发现 MLPK不大
可能与 SRK一样具有接收并传递胞外信号的功能 ,
因此推测 MLPK是芸薹属自交不亲和信号传导途
径中 SRK下游的一个极重要的因子。
2. 2　 SRK底物蛋白 ARC1、 THL1和 T HL2
ARC1( Arm repeat-containing )编码基因只含
有一个外显子 ,没有发现内含子 ,其 C端含有 5个重
复臂 ,是与 SRK相互作用的部位 ,用蛋白磷酸化处
理或使用激酶失活突变的方法来减弱或消除 ARC1
结合 SRK激酶域的能力 ,结果发现这种相互作用是
依赖于磷酸化作用的 , N端可能是与其他蛋白质结
合的部位 ,含有一个广泛存在于泛素连接酶中的 U-
box结构域。 ARC1主要在柱头中表达 ,一般存在于
细胞核和细胞质中。 ARC1实质是连接酶 E3,调控
蛋白质之间的相互作用 ,它可以通过其 N端亮氨酸
拉链或卷曲螺旋结构域与来自核和胞质中的未知底
物结合 ,随后 ARC1复合体通过 U-box结构与具有
泛肽功能的 E2酶作用 ,使底物泛肽化形成一复合物
(其反应过程如下: Ub-E1+ E2→ Ub-E2+ E1 ;
Ub-E2 + ARC1-P + 底 物 → E2-ARC1-P-底
物 [10 ] ) ,该复合物可能导致某种能促进自交亲和的
蛋白质降解。
T HL1( Thio redoxin-h-like-1)和 T HL2( Thio re-
doxin-h- like-2)属于硫氧还蛋白 h家族 ,都由 3个外
显子和 2个内含子组成 ,含有一个编码 117个氨基酸
开放阅读框。目前已将 THL1( THL2)结合 SRK的部
位定位在第 2个外显子中活性位点 CPPC上 ,而
SRK的结合位点为 Cys465,二者的结合作用是不依
赖于磷酸化作用的。 Cabrillac[11 ]认为 , SRK分子在
活体细胞中的自体磷酸化需要 PCP,而在非活体细
胞中无需配体就可以发生磷酸化作用 ,推测在自交
不亲和反应中 SRK分子受某一因子调控而处于“非
活性”状态。在加入 T HLl基因后 , SRK3的自体磷酸
化受到了抑制 ,而加入配体 PCP后这种抑制得到了
有效缓解 ,这表明 T HL1和 THL2能有效控制 SRK
的自体磷酸化作用 ,使其受到“冻结” ,因此 T HL1和
T HL2是 SRK的负调控因子。这种负调控作用减弱
了 SRK的活性 ,被认为是通过自体磷酸化或者二聚
化实现的。
2. 3　 SLR
SLR基因是一条连续的外显子编码与 SLG相
似的分泌型糖蛋白 ,其氨基末端有一段疏水的信号
肽 ,氨基酸序列中也含有多个潜在的糖基化位点 ,定
位于乳突细胞壁上时 ,两者均被糖基化为糖蛋白 ,蛋
白质产物在柱头乳突细胞壁中大量存在 ,尤其在花
期含量一直很高。 Luu等 [12 ]利用 SLR1进行 Brassica
napus转基因实验表明 , SLR1在花粉与柱头的粘和
中起作用 ,导入反义 SLG的转基因植株中 ,花粉与
柱头的粘和强度减弱 ,表明 SLG可能通过与花粉胞
被蛋白的相互作用 ,促进花粉和柱头的粘和 ,说明包
括 SLR1和 SLG的几种因子可能共同参与了此过
程。 Takayama等 [ 13]经进一步研究 ,又分离纯化了两
种花粉中的 SLR结合蛋白 SLR1-BP1和 SLR1-
BP2,并发现该蛋白与 SLR有很高的亲合力。 表明
SLR与花粉和柱头粘着有关 ,它可能参与了 SI反
应 ,但其具体的功能尚不清楚 ,目前只能肯定 SLR
不具有参与决定自交不亲和反应的特异性。
2. 4　水孔蛋白
水孔蛋白 ( MOD)有 6个α螺旋二级结构 ,并且
都呈右手螺旋。一个α螺旋实质就是一次跨膜结构 ,
共有 6次跨膜。此外 , MO D还有两个天冬酰胺-脯氨
酸 -丙氨酸 ( Asn-Pro-Ala, N PA) 的串联重复序列 ,
而 N PA是 M IP( majorint rinsic pro tein)家族的特征
序列 ,这些特点都说明 MOD蛋白和其他水孔蛋白
一样 ,具有高度保守的结构特征。 Ikeda等 [ 14]认为水
通道在自交不亲和中起着非常重要的作用 ,在 SI反
应初期 ,发生自体磷酸化的 SRK分子激活 MOD蛋
白 ,从而使水分子进入柱头而远离花粉 ,导致自交不
亲和的发生。由于 MOD蛋白的序列与 M IP膜蛋白
十分相似 ,而后者不仅可透过水分子 ,还可透过一些
小分子 ,因此推测 MOD蛋白可能通过调节花粉与
柱头之间水分或某些小分子的运输来调控 SI反应。
2. 5　第二信使及 BPC1
花粉的萌发和花粉管的伸长对于 Ca2+ 十分敏
感 ,自花授粉后 ,刚刚萌发的花粉管与柱头的乳突细
·603·卢军等: 芸薹属自交不亲和功能因子及分子机制研究进展
胞接触数分钟后 ,花粉管呈螺旋状 ,不能侵入乳突细
胞 ,生长即受到抑制。与此同时 , Ca2+ 浓度上升了
65% ,花粉和乳突细胞内开始积累由 β-1, 3-葡聚糖
构成的胼胝质 ( callo se)。 Rozw adow ski等 [ 15]认为 ,
Ca
2+浓度受 BPC1( the Brassica napus pollen calci-
um binding pro tein 1)调节。 BPC1位于成熟花粉粒
的胞质中 ,也在伸长的花粉管表面积累 ,它含有两个
EF-hand结构域 ,该结构域可能与钙的结合有关。在
位点 10和 21处的 Asp和 Glu残基和 15位的 Gly残
基是高度保守的 ,这些保守性表明 BPC1可能在花
粉与柱头相互识别中起作用。但由于钙离子的信号
传导途径目前还不清楚 ,也可能信号分子触发 Ca2+
浓度的增加 , Ca2+ 作为植物细胞的第二信使对花粉
及花粉管的生长进行调节。
3　 SI反应分子机制
SRK在 SI反应的信号传递过程中起核心作用。
自交不亲和反应发生在柱头乳突细胞内 ,当自体不
亲和花粉粒未落到柱头上时 ,乳突细胞中的 SRK与
T HL1 /T HL2粘附在一起 ,导致 SRK的活性受到抑
制 ,而下游调控因子 ARC1能特异地作用于与 SRK
的胞内激酶功能区。 当自体不亲和花粉落到柱头上
时 ,含有 PCPs和花粉 S配基 -SCR /SP11的花粉外
被在花粉和柱头之间形成接触层 , SCR /SP11蛋白
从花粉被中分泌出来 ,相同单倍型的 SCR /SP11与
SRK特异性识别 ,位于细胞壁与细胞膜之间的 SLG
和 SRK相互作用 ,导致 SRK构象发生改变 , SRK的
活性受到激活 , T HL1 /T HL2游离下来 , SRK之间
发生转磷酸化作用形成寡聚体 ,伴随着 M LPK加入
到已经激活的复合物中。激活后的 SRK与胞质内的
ARCl结合 ,导致 ARC1磷酸化 , ARC1可以通过其
N端亮氨酸拉链或卷曲螺旋结构域与来自核和胞质
中的未知底物结合 ,随后 ARC1复合体通过 U-box
结构与具有泛肽功能的 E2酶作用 ,使底物泛肽化而
形成一复合物 ,该复合物可能导致某种能促进自交
亲和的蛋白质降解 ,也可能将信号传导到乳突细胞
的一种水孔蛋白中 ,通过调节水孔蛋白的活性 ,阻止
自交不亲和花粉的水合作用 ,或调节乳突细胞的细
胞壁 ,阻止花粉管的生长 ,导致自交不亲和反应的发
生。 这种分子机制模式见图 1。
·604· 广西农业科学　 2007年第 38卷第 6期
4　芸薹属 SI功能基因定位展望
目前 ,在一些芸薹属物种中 ,已经基本清楚 S位
点上3个连锁基因之间的连锁关系 ,但是非 S位点功
能基因之间的连锁关系以及它们与 S位点的连锁关
系还不明确。
近年来发展起来的荧光原位杂交 ( f luo rescence
in si tu hybridization, FISH)技术 ,其原理是将 DNA
探针用生物素和毛地黄毒苷等荧光染料标记 ,然后
将标记的探针直接原位杂交到染色体或 DNA纤维
切片上 ,再用与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探
针分子特异结合 ,通过荧光杂交信号来检测 DNA序
列在染色体或 DNA纤维上的定位 ,这种技术对于高
度收缩的中期染色体的分辨率是 1Mb,对于间期细
胞核的分辨率可达 100kb。在甘蓝的复合种油菜中 ,
Snow don等 [16 ]已经将 5S和 25S的 rDN A看家基因
家族 FISH到其染色体组上 ,并区分开了其 19对染
色体中的 10对 ;最近 Rober t等 [ 17]又将这两种看家
基因家族定位到了多种芸薹属植物的染色体上 ,显
示出比传统显带技术高得多的染色体分辨能力。在
此基础上发展起来的染色体 DNA伸长纤维荧光原
位杂交 ( Ex tended DN Afibers-FISH, EDFs-FISH)
技术的分辨率更高 ,现在的操作技术可使染色体的
伸长程度达到粗线期的数百倍。 所有这些均为将与
SI相关功能基因定位在芸薹属甘蓝染色体和 EDFs
上提供了可行的方法 [18 ]。
参考文献:
[ 1]　 Nishio T , Kusaba M. Sequence div e rsity o f SLG and
SRK in Brassica o ler acea [ J]. Ann Bo t, 2000, 85: 141-
146.
[ 2]　 Takasaki T, Hatakeyama K, Suzuki G, Wa tanabe M ,
Isogai A, Hina ta K. Th e S recepto r kinase determines
self-incompatibility in Bra ssica stigma [ J]. Na ture,
2000, 403: 913-916.
[ 3 ]　 Benjamin P K, James D. Just how complex is th e
Brassica S-recepto r complex [ J ]. Experimental
Botany , 2003, 54: 157-168.
[ 4]　 Shiba H, Iwano M , Entani T, Ishimo to. K , Shimosato
H, Ch e F, Sa tta Y , Ito A, Takada Y, Watanabe M ,
Isogai A, Takayama S. The dominance o f alleles con-
tro lling self-incompa tibility in Bra ssica po llen is regu-
lated at the RNA level [ J]. Plant Cell, 2002, 14: 491.
[ 5 ]　 FLanklin-Tong V E, FLanklin F C. The elusiv e
po11en S gene is identified [ J]. Plant Cell, 2000, 12
( 3): 305-308.
[ 6 ]　 Schopfer C R, Nasrallah M E, Nasra llah J B. The
male determinant o f self-incompatibility in Brassica
[ J]. Science, 1999, 286: 1697-1700.
[7 ]　 Shiba H, Takayama S, Iw ano M . A Po llen coat pro-
tein, SP11 / SCR, dete rmines the pollen S-specificity in
the self-incompatibility of Brassicaspecies [ J ]. Plant
Physio lo gy , 2001, 125: 2095.
[8 ]　 Murase K, Shiba H , Iw ano M , Che Fang-Sik, Watan-
abe M , Isogai A, Takayama S. Mem brane-ancho r ed
pro tein kinase involv ed in Brassica self-incom patibili-
ty signaling [ J]. Science, 2004, 303( 5663): l5l6-15l9.
[9 ]　赵永斌 ,朱利泉 ,王小佳 . 甘蓝 MLPK基因的克隆与序
列分析 [ J].作物学报 , 2006, 32( 1): 46-50.
[ 10 ]　 New bigin E, Vier sta R D. Sex and self-denia l [ J].
Na ture, 2003, 15 : 229-232.
[11 ]　 Cabrillac D, Cock J M , Dumas C, Goude T. The S-
lo cus r ecepto r kinase is inhibited by thio redox ins and
activa ted by po llen coat pro teins [ J ]. Natur e, 2001,
410: 220 -223.
[12]　 Luu D T, Mar ty M D, T rick M , Dumas C, Heizmann
P. Po llen-stigma adh esion in Bra sscia involv es SLG
and SLR1 glycopro teins [ J]. The Plant Cell, 1999,
11: 251-262.
[ 13 ]　 Takayama S, Shiba H, Iwano M , Asano K, Ha ra
M , Che F S, Watanabe M , Hinata K , Isog ai A.
Iso la tion and cha racterization o f po llen coat pr oteins
o f Brassica campestris tha t inter act with S locus-re-
lated g ly copro tein 1 invo lv ed in po llen-stigma adhe-
sion [ J]. Plant Biolog y, 2000, 97: 3765-3770.
[14]　 Ikeda S, Nasra llah J B, Dixit R, et a l. An aquapo rin-
like gene in the Brassica self-incom patibility r esponse
[ J]. Science , 1997, 276 : 1641 -1646.
[ 15 ]　 Rozw adow ski K, Zhao R D, Jackman L. Char acteri-
za tion and immunolocalization o f a cy toso lic calcium-
binding pro tein from Brassica napus and Arabidopsis
pollen [ J]. Plant Ph ysio log y , 1999, 120: 787-791.
[ 16 ]　 Snowdon R J, Friedt W , Koh ler A, Kohler W.
Molecular cyto genetic localiza tion and cha racteriza-
tion of 5S and 25S rDNAloci fo r chr omosome identi-
fica tion in oilseed rape ( Brassica napus L. ) [ J].
Annals o f Bo tany, 2000, 86: 201-204.
[17]　 Rober t H, Elzbieta W , Mar ta H. Compara tiv e ana ly-
sis of rDNA distribution in chr omosomes o f v arious
species o f Bra ssicaceae [ J]. Annals o f Bo tany , 2006,
97( 2): 205-216.
[ 18 ]　 Valarik M , Bar tos J, Kovarova P, Kobalakova M ,
de Jong J H, Do lezel J. High-reso lution F ISH on su-
per-stre tched flow -so rted plant chromosomes [ J ].
Th e Plant Journal, 2004, 37: 940-950.
(责任编辑　林　涛 )
·605·卢军等: 芸薹属自交不亲和功能因子及分子机制研究进展