全 文 ：园 艺 学 报 2005, 32 (5):939 ～ 946
ActaHorticulturaeSinica
收稿日期:2004-12-27;修回日期:2005-06-06
基金项目:北京市自然科学基金项目 (5002010);国家 `863 项目 (2002AA207012)
＊通讯作者 Authorforcorrespondence(E-mail:liuym@mail.caas.net.cn)
芸薹属作物抗芜菁花叶病毒育种研究进展
王 雪 1, 2 刘玉梅 1＊ 李汉霞2 张扬勇1 方智远 1
(1中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 北京 100081;2华中农业大学园艺林学学院 , 武汉 430070)
摘 要:本文从芸薹属作物芜菁花叶病毒的分子特性 、 TuMV株系分化及检测方法 、 芸薹属作物抗
TuMV的遗传和分子标记 、 转基因创造新种质 、 抗源材料的筛选与抗病新品种选育等方面的研究进展进行
了较系统地综述 , 并讨论了存在的问题和前景。
关键词:芸薹属作物;芜菁花叶病毒;抗性;育种
中图分类号:S63 文献标识码:A 文章编号:0513-353X(2005)05-0939-08
AdvanceinResearchonTuMV-resistanceBreedingofBrassicaCrops
WangXue1, 2 , LiuYumei1＊ , LiHanxia2 , ZhangYangyong1 , andFangZhiyuan1
(1InstituteofVegetableandFlowers, ChineseAcademyofAgricultureSciences, Beijing100081, China;2ColegeofHorticulture
andForestry, HuazhongAgriculturalUniversity, Wuhan430070, China)
Abstract:Advanceinthemolecularcharacteristicsandstraindiferentiationofturnipmosaicvirus
(TuMV), theinheritanceandmolecularmarkerofTuMV-resistanceinBrasicacrops, creationofnewgerm-
plasmbytransformation, thescreeningofTuMV-resistanceandthebreedingofnewcultivarswithTuMV-re-
sistancewerereviewedinthispaper.TheproblemstobesolvedandprospectsofTuMV-resistancebreeding
werediscussed.
Keywords:Brassicacrop;Turnipmosaicvirus;Resistance;Breeding
芜菁花叶病毒 (Turnipmosaicvirus, TuMV)属于马铃薯 Y病毒科 (Potyviridae)马铃薯 Y病毒组
(Potyviruse), 几乎遍及世界各地 , 寄主范围广 , 但以芸薹属作物为主 , 可导致作物严重减产 , 甚至
死亡。芸薹属作物主要包括 3个基本种 〔甘蓝 Brassicaoleracea(2n=2x=18, CC)、芸薹 B.campes-
tris(2n=2x=20, AA)、黑芥 B.nigra(2n=2x=16, BB)〕和 3个复合种 〔欧洲油菜 B.napus(2n
=4x=38 , AACC)、埃塞俄比亚芥 B.carinata(2n=4x=34, BBCC)、 芥菜 B.juncea(2x=4x=36,
AABB)〕。
TuMV主要是靠蚜虫以非持久性的方式传播 , 据报道目前至少有 89种蚜虫可传播 〔1〕 , 而采用杀
虫剂不可能很快杀死全部的蚜虫以阻止病毒的传播 , 仅靠杀虫剂杀蚜防治病毒病的效果不明显 。利用
植物的天然抗性可有效地控制病毒病的发生 , 而且对生态环境没有破坏。为了解芸薹属作物对 TuMV
抗性机理并在生产中更好地加以利用 , 国内外学者围绕芸薹属作物抗 TuMV方面开展了大量的研究工
作 , 取得了可喜进展 。
1 TuMV的分子特性
Nicolas等 〔2〕采用反转录得到了第 1个 TuMV的外壳蛋白 (coatprotein, CP)RNA全长序列 (Gen-
Bank:D10927), 全长 9 830个核苷酸 , 内含 1个由 9 486个碱基组成的开放读码框架 (openreading
frame, ORF), 该 ORF编码的多聚蛋白由 3 863个氨基酸组成。而在 ORF上游的 129个核苷酸为富含
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AU区域 (A:腺嘌呤;U:尿嘧啶), AU含量达 70%, 其二级结构为发夹结构。随后 , 4个全长序
列也相继发表 (GenBank:D83184〔3〕 , AF169561〔4〕 , AF394601, AF394602)。 1996年 Ohshima等 〔3〕对
TuMV的日本株系进行了测序 , 表明它是由 9 833个核苷酸组成 (不包括 ployA尾巴)。 Xu等〔5〕对
TuMV的 CP基因进行了测序 , 表明 CP基因由 867个核苷酸编码的 288个氨基酸组成。 Jenner等 〔4〕指
出 TuMV显性抗性基因 TURB-01的抗性是由 TuMV病毒的 CI(cylindricalinclusion)基因决定的。
Kundu等〔6〕进一步研究表明抗源决定簇位于 CI蛋白 N-端第 103 ～ 119和第 224 ～ 237的氨基酸残基
上 。这些结果将为深入研究分析 TuMV提供良好的信息资源。
2 芸薹属作物 TuMV株系分化及其检测方法
国内外在其株系分化方面进行了大量的研究 , 最初仅是根据寄主受害症状 〔7〕或寄主范围 〔8〕进行
的粗略划分 。 1975年 McDonald等 〔8〕根据寄主范围把 TuMV划分为两个株系:Ⅰ型可以侵染全部的芸
薹属作物 , 而Ⅱ型只能侵染其中的一部分 。以后逐渐采用寄主鉴定谱进行 TuMV株系的划分。 1980
年 Provvidenti〔9〕筛选出 9个大白菜品种组成一套株系鉴定谱 , 将纽约州的 TuMV划分为 C1、 C2 、 C3、
C4株系 , 1985年 Green等〔10〕从上述鉴定谱中筛选出 4个大白菜品种作为新的鉴定谱 , 把当地 TuMV
划分为 C1 、 C2 、 C3 、 C4 、 C5株系。 1990年 , 冯兰香等〔11〕采用 Green的方法对北京地区大白菜上的
31个 TuMV分离物进行了株系分化研究 , 表明 C1 ～ C5株系都存在 , 而且 C4为主要株系 , 占分离物
的 45.2%, C5致病力最强 。国家 “六五 ～八五 ” 蔬菜抗病育种攻关课题十字花科蔬菜抗 TuMV病害
研究协作组 , 鉴于 Green鉴定寄主谱不能区分来自我国 6个大区 10个省市的 TuMV分离物的株系分
化 , 选定 6个十字花科蔬菜品种组成一套株系鉴定谱 , 将我国 TuMV归纳为 7个株系 , 即 Tu1 ～
Tu7〔12〕。为进一步提高识别株系水平 , 制备单克隆抗体对 7个株系的抗原决定簇进行了测定 , 从而将
寄主鉴定谱与分子生物学鉴别方法结合起来 〔12〕。
Jenner等 〔13〕根据 TuMV侵染一系列甘蓝型油菜表现出的症状 , 将 124个 TuMV分离物划分成不同
的株系 , 欧洲以 1、 3、 4株系为主 , 这种划分在欧洲被普遍接受。 Jenner等 〔14〕采用单克隆抗体从血
清学上把 41个 TuMV分离物划分成 3个株系群。 Ohshima等 〔15〕将世界各地搜集的 76个分离物划分为
两个致病型:芸薹属 (B)及芸薹和萝卜属 (BR)类型 。 B致病型分离物仅侵染参试的芸薹属大白
菜 、油菜和白菜品种 , 而 BR致病型分离物能够侵染参试的芸薹属 3个作物品种以及萝卜属的萝卜品
种 。 2003年 Sanchez〔16〕通过已有的 TuMVCP基因序列分析和限制性内切酶多态性分析 , 将 60个不同
分离物进行聚类 , 分成 2个主要类群 〔MB(大多数是芸薹属分离物)和 MR(大多数是萝卜属分离
物)〕以及 2个次要类群 〔 (在芸薹属和萝卜属之间的类群 (IBR)和以外的类群 (OBR)〕。
芜菁花叶病毒的最大特点之一就是侵染寄主范围广泛 , 不同的株系可以侵染不同的寄主 , 而其株
系的分化来源于其自身的变异 。这种变异很可能是由于点突变和重组造成的 〔13, 16, 17〕。其 RNA聚合酶
缺乏 3※ 5校正的功能 , 而且 TuMV为单链 RNA, 不可能进行错配修复 。因此 , 在复制过程中大约
每 10kb有 0.1 ～ 10个碱基的突变 〔18〕。此外 , Hancock等〔19〕发现在 TuMV基因组 5端区域存在复制
子滑动现象 。TuMV的高频率突变正是其寄主广泛的主要原因 , 因而给 TuMV的防治带来更大困难 。
目前对芸薹属作物中 TuMV的常规检测多采用 ELISA技术 , 既可以定性分析〔20, 21〕 , 又可以定量
分析。施曼玲等 〔22〕建立了三抗体夹心 ELISA检测 TuMV方法 , 检测病叶的灵敏度为 1∶5 120倍 , 检测
提纯 TuMV病毒绝对量为 219ng。由于 ELISA比生物测定及常规血清学方法灵敏 、 简便 , 因此其应用
越来越多〔23 ～ 26〕。 ELISA检测方法也有不足之处 , 其灵敏度有待提高 , 而且存在非特异性反应〔27〕。
近年来国内外在 TuMV检测方法方面也取得了一些新进展。 Suh等 〔28〕以获得的单克隆抗体 , 利用
免疫电镜技术 (immunosorbentelectronmicroscopy, ISEM)进行 TuMV检测。邓晓东等〔29〕以克隆的
TuMV外壳蛋白基因的重组质粒 PGT3为模板 , 用 PCR的方法合成了长度为 0.87 kb的地高辛标记的
双链 DNA探针 , 并用其进行了白菜 、 芥菜等蔬菜病毒的检测研究。庄木等 〔30〕利用 RT-PCR技术 , 建
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5期 王 雪等:芸薹属作物抗芜菁花叶病毒育种研究进展
立了一种简便 、 快速 、准确地检测十字花科蔬菜芜菁花叶病毒的方法 , 可直接对田间病样简单处理后
进行检测。
3 芸薹属作物 TuMV抗性遗传规律
1984年钮心恪 〔31〕选用不同大白菜抗性材料对 F1 、 F2、 BC1群体进行抗性分析 , 表明大白菜对病
毒病的抗性受 2对相互独立的显性基因控制 , 植株只要具有其中 1对基因就表现抗性 。 1983年 Leung
等 〔32〕报道大白菜对 TuMV-C1的抗性遗传受显性基因控制 。 1993年 Yoon等 〔33〕选用对 TuMVC1 ～ C5株
系均产生抗性的大白菜自交系 O-2为抗病材料 , 研究发现 TuMV的抗性遗传受 2个隐性基因控制。
Suh等〔34〕用两个 TuMV抗性材料 BP058和 O-2与两个感病材料 sd31和 B18来研究不同株系间的相互
作用 , 指出单株系的抗性受 1个或 2个显性基因控制 , 当用混合株系接种时 , 其抗性受 2个以上主效
基因和几个微效基因控制。 1995年曹光亮等 〔35〕采用双列杂交设计结合配合力分析 , 发现白菜对
TuMV抗性为不完全显性 。Il-YongKim〔36〕采用 TuMV的 K1、 K2株系对大白菜抗病亲本 (O-2)、 感病
亲本 (SE、 SS)及其 F1、 F2 、 BC群体进行抗病性鉴定 , 结果在组合 SS×O-2中 , 抗性由 2个显性基
因控制;在组合 SE×O-2中 , 抗性由显性单基因控制 , 这表明同一抗病材料在不同的遗传背景下对
相同 TuMV株系的抗性受感病亲本的控制 。
国内外开展甘蓝 TuMV抗性遗传研究不少 , 但是得出的结论也不一致 。 Pound等和 Walkey最早
报道甘蓝对 TuMV的抗性遗传是不完全显性 , 推断可能是多基因控制的遗传 〔12〕。 1968年 Wiliams也
曾经报道甘蓝对 TuMV和 CaMV的抗性为显性遗传 〔12〕。 1986年 Pink等〔37〕报道抱子甘蓝对 TuMV的抗
性至少受 4个基因控制。 1995年方智远等〔12〕指出甘蓝对 TuMV的抗性表现为显性遗传。王超等 〔12〕采
用 F2以及回交世代群体进行抗病鉴定 , 表明甘蓝对 TuMV的抗性为显性 , 细胞质效应不明显 , 推测
甘蓝对 TuMV的抗性是受两对独立分配的显性基因 R1和 R2控制 。
Hughes等 〔25〕鉴定了甘蓝型油菜和白菜型油菜的 42个材料对代表欧洲 3种主要株系的 TuMV分离
物的抗性 , 其抗性遗传表现也不一致 , JongBai2号对株系 1的抗性为单基因显性 , PI418957C以及
JinG55对株系 4的抗性为单基因隐性;PI418957C对株系 3的抗性为隐性 , 推测有 2个独立位点中
的 1个控制 , 2个位点间不连锁 JongBai1号对株系 3的抗性也为隐性 , 受 3个位点上的等位基因控
制 , 3个中的任何 2个具有上位性而且为抗性所必需。由此可以看出 , 对 TuMV的不同分离物 , 在芸
薹属不同作物中呈现出多种抗 TuMV遗传规律 。
4 芸薹属作物抗 TuMV基因及其分子标记
迄今发表的芸薹属抗 TuMV基因主要集中在 A基因组 , 少部分在 C基因组 (表 1), 而且位于 C
基因组的 TuRB02基因也呈现出数量性状位点抗性 。 TuRB01是在油菜品种 `Westar 中发现的 , 为
显性基因 , 抗所有生理小种 1的分离物 , 抗病性几乎达到免疫级别 , ELISA检测没有发现病毒 , 位于
A基因组 N6染色体上 。TuRB01b与 TuRB01一样 , 位于 Brasicanapus的 A基因组 R6染色体上 , 但
由于接种生理小种不一致 , 所以命名为 TuRB01b。
TuRB02为数量性状位点 , 控制着感病的程度。
TuRB03为单显性基因 , 对分离物 CDN1的抗性为
高抗。 Retr01 (隐性基因)与 ConTR01 (显性基
因)协同控制着作物对 TuMV的抗性 , 主要是控
制病斑的扩散。曹必好等 〔41〕以甘蓝抗 TuMV自交
不亲和系 84075和感 TuMV自交不亲和系 9797及
其杂交的 F2代分离群体为材料 , 鉴定其抗病性表
明 , 甘蓝抗 TuMV性状符合孟德尔遗传规律 , 抗
表 1 芸薹属作物抗芜菁花叶病毒病基因
Table1 Resistancegenetoturnipmosaicvirus(TuMV)inBrassica
基因名称
Name
所在基因组
Locatedgenome
分离物
Isolates
参考文献
Reference
TuRB01 A 1 38
TuRB01b A 1 39
TuRB02 C CHN1, JPN1 38
TuRB03 A CDN1 40
Retr01 A 1, 3, 4, 7, 8, 9, 12 39
ConTR01 A 1, 3, 4, 7, 8, 9, 12 39
TuR2 C 未知 Unknown 41
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性基因为单显性基因 , 并且克隆了抗 TuMV相关基因 (TuR2), 但未对其功能作进一步分析。
在芸薹属作物中 , 油菜上的相关分子标记研究较深入 , 芸薹属其它作物上也有一些报道 , 而关于
芸薹属作物抗 TuMV的分子标记研究则很少。 Hughes等 〔40〕采用 CDN1株系接种油菜 (Brasicanapus)
后 , 用分离群体分组分析法 (BSA)选择回交后代中的抗 、感单株建池 , 寻找 AFLP或 SSR标记 , 最
终找到了 1个与抗 TuMV基因连锁的 AFLP标记和 6个 SSR标记 。闫瑾琦 〔42〕找到 2个与大白菜抗
TuMV基因紧密连锁的 RAPD标记 (OPV181400和 OPV18820), 其遗传距离分别为 9.5 cM和 15.36
cM。韩和平〔43〕以大白菜抗病自交系 Brp0058和感病自交系 Brp0181杂交后代的 F2分离群体为试材 ,
采用 BSA法筛选到 2个与 TuMV感病基因紧密连锁的 AFLP分子标记 , 利用 Mapmaker作图软件统计
分析 , 其遗传距离分别为 7.5和 8.4cM。
作者以甘蓝感病自交系 01-16-5-7和抗病自交系 20-2-5杂交后代的 F2分离群体为试材 , 用侵染我
国甘蓝的 TuMV主导致病株系———TuMV-C4对亲本和 F2群体的各个单株进行室内人工接种 , 利用酶联
免疫吸附测定法对各单株 TuMV的抗性进行鉴定 。根据鉴定结果采用 BSA法选取不同 F2单株构建两
对抗感池 , 用 AFLP不同引物组合筛选抗 、感池以及对 F2群体检测 , 获得了与甘蓝抗 TuMV基因连锁
的 AFLP分子标记 。
5 转基因创造新的抗 TuMV种质资源
卢爱兰等〔44〕将 TuMV-CP基因以整合方式导入甘蓝型油菜 , 经分子检测和攻毒试验表明 , 再生植
株基因组 DNA中整合了 TuMV-CP基因 , 且得到了表达 。张海燕等〔45〕采用农杆菌介导法与激光微束
穿刺法将损伤诱导型启动子控制之下的商陆抗病毒蛋白 (PAP)cDNA导入甘蓝型油菜 “双低 ” 品种
H165, 获得抗性再生植株 , 经 PCR扩增检测及 Southern杂交分析表明 , PAPcDNA连同损伤诱导型
启动子已稳定整合至油菜基因组。攻毒试验表明 , PAP的表达受损伤诱导型启动子控制 , 转基因油菜
植株对供试病毒 TuMV具有不同程度的抗性。朱常香等 〔46〕将 TuMV-CP基因导入大白菜中 , 获得转化
植株。经分子检测证明 TuMV-CP基因已整合到大白菜的基因组中 , 并在转录和翻译水平上进行了有
效表达 。转基因植株 T1代的遗传分析表明 , 外源基因在转基因植株后代中遵循 3∶1的孟德尔分离规
律 。抗病性测定结果表明转基因植株具有明显的抗病毒侵染能力 。曹鸣庆等〔47〕克隆了 TuMV的核内
蛋白酶基因 NIa, 通过真空渗透法转化白菜 , 获得了抗 TuMV转基因白菜种质材料。 Lam等 〔48〕将重组
天花粉蛋白 (Trichosanthin, TCS)外源施用在菜薹上 , 延迟了 TuMV的发生 , 为抗 TuMV育种提供了
一条新途径 。此外 , 还有很多通过转 TuMV相关基因来研究转基因沉默和基因互作方面的报道 , 如
CP基因 〔49 ～ 51〕 、 VPg基因〔52〕等 。
6 抗 TuMV材料的筛选和新品种选育
上世纪 80年代以前 , 白菜 、甘蓝等作物的抗病性鉴定主要采用田间自然发病的方法。 1983年 ,
蔬菜抗病育种列入国家重点科技攻关计划 , 开始系统地开展了人工苗期接种抗病鉴定 。 “六五 ” 期间
的育种目标为单一抗性 , 如白菜 、甘蓝抗 TuMV。 “七五 ” 期间则要求抗 TuMV和抗黑腐病 。 “八五”
期间要求抗 TuMV、 抗黑腐病或霜霉病 、 兼抗 CMV或根肿病等 3种病害;抗病育种攻关协作组对
“六五 ～八五” 期间 3个五年计划开展的抗病性鉴定技术进行了全面总结 , 系统地提出了大白菜 、 结球
甘蓝 、白菜等对上述病害单抗和多抗性鉴定方法与标准 , 包括接种病原 、接种方法 、调查和分级等。
徐玲等 〔53〕对 28份较重要的中国大白菜品种及亲本材料进行了苗期抗性鉴定 , 分别筛选出 13、 9、
5份高抗相应株系 C1 、 C4 、 C5的材料。鹿英杰等〔54〕采用60 Coγ射线处理 , 单株选择得到优良自交系
后培育出大白菜新品种———龙辐二牛心 , 经人工接种 TuMV鉴定表明为抗病品种 。刘克钧等 〔55〕选取
84份经 TuMV、霜霉病菌 (Peronosporaparasitica)、黑斑病菌 (Alternariaoleracea)单抗鉴定后筛选出
的大白菜高代自交系抗源材料 , 于 1992 ～ 1993年对其进行上述 3种病害苗期人工诱发接种多抗性联
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5期 王 雪等:芸薹属作物抗芜菁花叶病毒育种研究进展
合鉴定 , 获得 21份三抗材料。李经略等 〔56〕对同一甘蓝植株用复合接种平行鉴定的方法 , 从 249份材
料中筛选出对 TuMV和黑腐病兼抗的材料 30份 , 筛选率为 12.05%, 表明目前用于育种的甘蓝材料中
不乏兼抗种质存在。在 “六五 ～九五 ” 期间 , 甘蓝抗源材料的筛选和创新一直被列为国家重点科技
攻关研究内容 , 由中国农科院蔬菜花卉研究所主持 , 经与其它 5个合作单位 (西南农业大学 、 原陕
西农科院蔬菜所 、东北农业大学 、 江苏农科院蔬菜所 、 上海农科院园艺所)联合攻关 , 共筛选出抗
TuMV、抗黑腐病兼抗 CMV或根肿病的抗源 21个 , 为多抗性育种提供了新抗源。刘玉梅等 〔57〕研究了
青花菜抗源材料的筛选和利用 , 对 80余份青花菜资源采用苗期多抗性人工接种和田间鉴定相结合的
方法进行鉴定 , 筛选出 1份抗 TuMV兼抗黑腐病的抗源材料 , 1份抗 TuMV耐黑腐病的抗源材料 , 并
用该两个抗源材料与其它自交系杂交 , 选出两个优良的杂交组合 , 田间表现抗病毒病兼抗黑腐病 , 且
具有优良的经济性状 。王述彬等 〔58〕对我国 982份白菜种质资源材料进行苗期的 TuMV抗病性鉴定 ,
结果表明 , 表现高抗的材料有 9份 , 占鉴定总数的 0.92%;抗病材料 49份 , 占鉴定总数的 4.99%。
亚洲蔬菜研究发展中心 (AVRDC)选育出抗 TuMV大白菜材料 Wonye20020-Wonye20027和 Wonye
20028-Wonye20032〔59〕。AVRDC采用人工机械接种在温室和露地对 8份埃塞俄比亚芥菜 (Brassica
carinata)材料进行 TuMV抗性鉴定 , 结果 NIRS-Ⅱ、 RRS-Ⅴ和 MbeyaGreen抗病性好〔60〕。 Hughes
等 〔25〕对甘蓝型油菜和白菜型油菜的 42个系进行 TuMV的抗性筛选 , 分别获得了对不同 TuMV株系的
抗病材料 (JongBai1、 2号 , PI418957C和 JinG55)。以上鉴定方法对于抗病育种具有指导作用 , 这
些抗源在后来的抗 TuMV育种中已得到很好地利用。
经过 TuMV抗病鉴定获得的抗源材料已广泛地应用于优良杂交组合的配制中 , 育成一大批优良杂
交新品种 , 并在生产中得到大面积的推广应用 。如:福油 4号 、湘油 10号 、 中油 821等油菜品种;
北京新三号 、秦白 3号 、 豫新 1号 〔61〕 、 天正秋白一号 〔62〕 、 矮抗 6号 〔63〕 、 暑绿 〔64〕、 中白 66、 中白
78、中白 80〔65〕、东农 903等大白菜品种;中甘 8号 、 中甘 9号 、 中甘 18号 、 中甘 19号 、 中甘 20
号 、西园 4号 、 秦甘 12号 、 东农 608、黑丰 〔66〕、 中甘 22〔67〕等甘蓝品种;中青 2号〔68〕、 上海 1号等
青花菜品种;云山 1号 、丰花 60、 津雪 88〔69〕等花椰菜新品种。
7 问题与展望
TuMV的不同分离物在芸薹属不同作物中呈现出多种抗 TuMV遗传规律 , 推测原因一方面是由于
不同作物抗 TuMV的方式不一致 , 导致其抗 TuMV遗传规律的不同 , 另一方面由于 TuMV株系的分化
而导致其致病机理发生了变化 , 因而作物相应表现出不同的抗病机制 , 这在一定程度上使抗 TuMV育
种具有更大的难度。这就要求深入开展 TuMV的病理学研究 , 包括病原菌的生理生化反应 、 寄主范
围 、症状反应 、 人工接种鉴定方法以及寄主与病原物相互关系的研究 。
选用抗病品种是具有广阔前景的病害防治方式 。尽管国内有关芸薹属作物抗 TuMV育种研究早在
“六五” 期间就已经开始 , 并选育出不少抗性材料和抗性强的品种在生产中推广应用 , 但从当前生产
和市场需求看 , 我国的抗病育种工作与发达国家还存在一定的差距 。我国开展抗 TuMV研究时间尚
短 , 可应用的抗源有限 , 特别是一些病害如根肿病 、 霜霉病 、 黑斑病 、软腐病 、 CMV等在原来不是
重要病害的地区有上升趋势 , 因此需要培育抗多种病害 、包括 TuMV在内的优良品种 。
今后一方面要继续开展种质资源的搜集 、 鉴定和优异抗源材料的创新 , 另一方面要开展育种新技
术和新方法的研究。在今后的抗病育种中 , 常规育种仍占有重要地位 , 但为了提高育种水平 , 常规育
种应与生物技术相结合。现有抗性基因的精确定位还不够 , 随着分子生物学的快速发展 , 分子标记定
位和转基因技术将在抗 TuMV育种中发挥越来越大的作用 , 而且分子标记的使用将使抗性基因的早期
选择和多抗性基因的累加成为可能。转基因技术可以创造新的抗病虫害材料 , 而且在棉花 、大豆 、 油
菜等作物上已经取得了成功。在芸薹属蔬菜上 , 由于目前其抗病性还不够理想 , 而且生物安全性问题
也受到了一定的限制 , 因而为该项技术的应用带来了一些难题。随着高效表达载体的构建和转基因技
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术的发展 , 通过标记基因的去除以及可靠的安全性评价等措施 , 将更大地丰富有限的抗性种质资源 ,
为抗病育种发挥更大的作用。
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