全 文 ：第 32 卷第 2 期
2013 年 4 月
中 国 野 生 植 物 资 源
Chinese Wild Plant Resources
Vol． 32 No． 2
Apr． 2013
收稿日期:2012 － 06 － 20
作者简介:刘红燕(1980 －) ，女(汉族) ，山东肥城市人，讲师，在读博士研究生。研究方向:中药质量控制与资源研究。
doi:10． 3969 / j． issn． 1006 － 9690． 2013． 02． 008
鬼针草属六种植物的同工酶电泳实验研究
刘红燕
(山东中医药大学，山东 济南 250355)
摘 要 目的:建立鬼针草 6 个品种过氧化物酶同工酶( POD) 电泳指纹图谱，探讨鬼针草种内变异规律。方法:聚
丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果:鬼针草 6 个品种过氧化物酶同工酶 PAGE指纹图谱差异显著。结论:聚丙烯酰胺凝
胶同工酶电泳图谱可用于鉴别鬼针草 6 个种质。
关键词 鬼针草;聚丙烯酰胺凝胶过氧化物酶同工酶电泳;指纹图谱
中图分类号:S567 文献标识码:A 文章编号:1006 － 9690(2013)02 － 0026 － 02
Studies of Fingerprint on Bidens by Polyacryamide Gel Electrophoresis
Liu Hongyan
(Shandong University of TCM，Jinan 250355，China)
Abstract Objective:To probe the genotypic difference of six species of Bidens distributed in Shandong
province，electrophoresis fingerprints were established． Methods:Using the PAGE of POD methods to
forge PAGE fingerprint． Results:There was significant difference in POD － PAGE fingerprints of Bidens
varities． Conclusions:POD － PAGE fingerprints can be used as a tool to identify the six species of Bidens
plants．
Key words Bidens;POD － PAGE;fingerprint
鬼针草为我国民间常用中草药，来源于菊科
(Compaositae)鬼针草属(Bidens Linn．)多种植物，具
有清热解毒、活血、散淤、消肿之功效，用于治疗痢
疾、腹泻、感冒、炎症等［1］。全球约有 230 种，我国有
9 个种、2 个变种，其中山东省内有 6 个品种。为进
一步探讨鬼针草种内变异的关系，揭示其变异规律，
本研究采用过氧化物酶同工酶电泳生化标记方法对
来源于山东省内 6 个品种鬼针草进行了分析研究，
以期为种质资源的收集和药效成分研究提供参考。
1 仪器与材料
1． 1 仪器
DYY －24A型恒流电泳仪、DYY － IH 型垂直电
泳槽、凹槽玻璃板一套(均为北京市六一仪器厂)、
LGR16 － W 型冷冻离心机(北京医用离心机厂)、
PHS － SD 型数显酸度计(上海电子光学技术研究
所)、FA1104 型电子天平(上海天平仪器厂)微量进
样器、研钵、离心试管。
1． 2 试剂
三羟甲基氨基甲烷、丙烯酰胺、过硫酸铵、N，N
－亚甲基双丙烯酰胺、甘氨酸、40%蔗糖溶液、考马
斯亮蓝 R250、醋酸联苯胺、四甲基乙二胺、溴酚蓝
等，所用试剂均为分析纯。
1． 3 实验材料
鬼针草属大狼杷草(Bidens frondosa L．)、金盏
银盘(Bidens biternata Merr． et Scherff)、小花鬼针草
(Bidens parviflora Willd．)、婆婆针(Bidens bipinnata
L．)、狼杷草(Bidens tripartita L．)、矮狼杷草［Bidens
tripartita L． var． repens(D． Don．)Sherff］的成熟新
鲜叶片。
2 实验方法与结果
2． 1 电泳实验
样品制备、凝胶制备、电泳操作、染色与保存参
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第 2 期 刘红燕:鬼针草属六种植物的同工酶电泳实验研究
照文献［2］进行。
2． 2 PAGE图谱处理
胶板用 EDAS － 290 凝胶成像紫外分析仪成像
(图 1)。根据各样品谱带形态及出现的先后顺序，
绘制电泳图谱(图 2)。根据谱带泳动率 Rf值(泳道
中各谱带与溴酚蓝前沿的位置比值)计算鬼针草谱
带泳动率(表 1)。
表 1 鬼针草过氧化同工酶电泳谱带 Rf值
样品名称
Rf
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
大狼把草 0． 16 0． 24 0． 3 0． 4 0． 46 0． 6 0． 6 0． 73 0． 77 0． 81
金簪银盘 0． 73 0． 77 0． 81
小花鬼针草 0． 2 0． 3 0． 73 0． 77
婆婆针 0． 2 0． 24 0． 77
狼把草 0． 2 0． 24 0． 73 0． 77 0． 81
矮狼把草 0． 73 0． 77
图 1 鬼针草属药材植株 POD图谱
图 2 鬼针草属药材植株 POD图谱示意图
六个样品电泳谱带存在显著差异，其中共有谱
带 11 可作为特征鉴别谱带;谱带 4，5，6，7，8 是大狼
把草所特有，可作为鉴别谱带;矮狼把草只有 2 条谱
带，可区别于其它品种;金盏银盘、小花鬼针草、婆婆
针均有 3 条谱带，但谱带 Rf的显著差异可用于 3 种
植物的鉴别。谱带强度的显著差异，可能与样品有
效成分含量不同有关。总之，鬼针草 POD 图谱谱带
模式(数目、位置)能够把 6 种植物区分开来。
3 讨 论
本实验所用样品于同一时间采集。预试验发现
成熟叶片酶谱较为清晰，所以采样部位为鬼针草植
株茎的成熟叶。
鬼针草药材形态学特征显示 6 个种质在叶形、
果实形状与芒刺数目上有显著差异。大狼把草、金
盏银盘、小花鬼针草、婆婆针、狼把草、矮狼把草的叶
形分别为羽状、羽状、条状披针形、三角状或菱状披
针形、矩圆状披针形、披针形;果实分别为扁平、条状
略扁具 4 棱、条形具 4 棱、条形具 3 ～ 4 棱、扁，楔形，
或倒卵状楔、楔状条形;果实顶端芒刺分别为 2 枚、3
～ 4 枚、2 枚、3 ～ 4 枚、2 枚、2 ～ 3 枚。6 个品种的形
态学差异显著，与过氧化物酶同工酶谱差异显著结
果相吻合。外在形态学特征结合内在酶谱特征可作
为鬼针草种质划分的一种手段。
聚丙烯酰胺凝胶过氧化物酶同工酶电泳技术根
据同工酶的结构差异能够稳定地遗传给后代的规
律，可以鉴别诸多遗传变异，如生物的类别、品种的
地理分析、演化关系等［4］。此方法操作简单、快速
准确，直观性强，且成本低，可用于鬼针草品种之间
的鉴别。
参考文献:
［1］ 江苏新医学院． 中药大词典:上册［M］． 上海:上海人民出版
社，1997:1354．
［2］ 徐凌川，卢燕，辛学梅，等．白首乌蛋白质及同工酶电泳实验研
究［J］．时珍国医国药，2003，14(12) :3 － 4．
［3］ 石俊英．中药电泳鉴别法及其在药用植物、动物中的应用研究
［J］．山东中医学院学报，1995，19(2) :74 － 75．
［4］ 李明，田永云，耿杰． 山东玫瑰花的过氧化物酶同工酶分析
［J］．时珍国医国药，2009，20(7) :1624 － 1625．
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