全 文 ：北方园艺２０１５（１６）：１１～１７ ·试验研究·
第一作者简介：曲永青（１９８７－），女，硕士研究生，研究方向为果树栽
培生理与分子生物学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｎｏｎｇｘｕｅｙｕａｎ１２３ｋｏ＠１６３．ｃｏｍ．
责任作者：马春晖（１９６６－），男，博士，副教授，研究方向为果树栽培
生理。Ｅ－ｍａｉｌ：ｍａｃｈｕｎｈｕｉ２０００＠１６３．ｃｏｍ．
基金项目：山东省自然科学基金资助项目（Ｙ２００７Ｄ６４）；国家现代
农业（梨）产业技术体系建设专项资助项目（Ｎｙｃｙｔｘ－２９－０６）。
收稿日期：２０１５－０５－１８
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１５１６００３
山西梨属植物资源的ＳＳＲ遗传多样性分析
曲 永 青，王 然，马 春 晖，李 鼎 立，宋 健 坤
（青岛农业大学 园艺学院，山东 青岛２６６１０９）
摘 要：以５０份野生梨属植物资源为试材，应用ＳＳＲ分子标记技术对其进行了遗传多样性
分析，以探索山西省梨属植物资源的遗传多样性。结果表明：筛选的４０对ＳＳＲ引物扩增得到２３６
个等位基因位点，平均每对引物扩增得到５．９０个等位点。不同样品间遗传多样性指数为
０．２７６ ２～０．４３１ ９，检测位点杂合度为０．３３５ ０～０．７７５ ０，多态信息含量变化范围在０．２３６ ８～０．４３１ ２，
表明４个遗传多样性参数均表现出较高的遗传多样性。聚类分析结果显示，５０份样品相似系数的
变化范围在０．４４４ ９～０．９４４ ９，样品在相似系数０．５７处被分为四大类群，类群Ｉ为豆梨类，类群Ｉ、ＩＩ、
ＩＶ为杜梨类；其中，类群Ｉ、ＩＩ集中了大部分白家山和绛县地区的样品，类群ＩＶ的样品全部来自太
谷，表明山西梨属植物资源的聚类结果与样品的地理分布基本吻合；发现大果、绿皮杜梨野生资源。
关键词：梨；野生资源；ＳＳＲ；遗传多样性
中图分类号：Ｓ ６６１．２０３．６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１５）１６－００１１－０７
梨属（Ｐｙｒｕｓ）植物属蔷薇科（Ｒｏｓａｃｅａｅ）苹果亚科
（Ｍａｌｏｉｄｅａｅ），是我国重要的果树之一，长期以来，对我国
农业经济的发展起到了重要的作用。全世界梨属植物
约有６０余种，起源于我国的梨属植物为１４种以上［１］。
目前，对梨的遗传多样性的研究已有不少报道，例
如，李树玲等［２］对大鸭梨与不同倍性梨品种杂交后代的
染色体数目进行了鉴定，发现３０株三倍体，占１．９％；６８
株四倍体，占１７．８％；余者为二倍体。曲柏宏等［３］用
ＰＯＤ同工酶技术研究表明梨属植物有共同的特征酶谱
带，秋子梨（Ｐ．ｕｓｓｕｒｉｅｎｓｉｓ Ｍａｘｉｍ）、砂梨（Ｐ．ｐｙｒｉｆｏｌｉａ
Ｎａｋａｉ）、白梨（Ｐ．ｂｒｅｔｓｃｈｎｅｉｄｅｒｉ Ｒｅｈｄ）、西洋梨（Ｐ．
ｃｏｍｍｕｎｉｓ Ｌ．）４个栽培种间谱带差异较大，种内品种间
谱带差异较小，苹果梨在遗传关系上和白梨系统有很大
的相似性。ＢＡＯ等［４－５］利用ＳＳＲ引物对东亚地区的１００
个梨的遗传多样性和亲缘关系进行了研究；张东［６］采用
ＳＳＲ和ＡＦＬＰ标记对中国红皮砂梨资源的遗传多样性
及亲缘关系进行了研究，分别用６对ＳＳＲ引物对２９个
砂梨品种和６对ＡＦＬＰ引物对３８个砂梨品种进行鉴定。
曹玉芬等［７］利用ＳＳＲ技术对白梨、砂梨、秋子梨、西洋
梨、新疆梨以及种间杂交类型共４１个栽培品种进行了
梨品种鉴别、遗传多样性以及亲缘关系研究。虽然，目
前对梨的遗传多样性的研究不少，但大都集中在对栽培
品种的研究上，对于野生资源的研究相对较少，缺乏对
野生梨属植物资源遗传多样性的了解，因此，很难对野
生梨资源做进一步的开发和利用。野生梨资源具有更
好的抗性特征，可作为栽培品种的优良砧木，具有非常
广阔的应用前景。但是，随着环境的破坏以及商业用地
的大量开发，其数量正在逐年减少，因此，研究其遗传多样
性，为资源的保护和开发利用奠定基础显得尤为重要［８］。
研究遗传多样性的方法随着生物学研究层次的提
高而不断发展。目前已经从传统的形态标记、染色体
标记以及生化标记发展到分子标记。近年来，以ＰＣＲ
（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ）为基础的各种分子标记技
术被广泛使用［９－１１］，随着该技术的日渐成熟，在梨属植物
上运用此技术的研究也越来越多［１２－１５］。在多种分子标
记技术中，ＳＳＲ（Ｓｉｍｐｌｅ Ｓｅａｑｕｅｎｃｅ Ｒｅｐｅａｔ）分子标记具有
多态性好、辨别率高、信息量大、共显性标记、所需ＤＮＡ
量少等优点，因此，已被许多研究学者采用。综上所述，
ＳＳＲ分子标记技术已经成为一种可靠且被广泛使用的
分子标记技术。
通过长期的调查研究发现，山西省气候条件和地貌
特征独特，使其成为梨野生资源的广泛分布区。为了能
更系统的了解山西省局部地区野生梨属植物资源的分
布及遗传特点，该研究利用ＳＳＲ分子标记技术对采自山
西省的５０份梨野生资源的遗传多样性进行了分析，期望
能为我国梨属植物的育种和新砧木开发提供理论指导。
１１
·试验研究· 北方园艺２０１５（１６）：１１～１７
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
２０１３年４—５月对山西省局部地区５个梨野生资源
居群进行了实地考察，并采集刚展开的叶片装入封口带
用硅胶干燥保存带回实验室，液氮处理后－８０℃保存
备用。
表１ 供试样品
Ｔａｂｌｅ １ Ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｓａｍｐｌｅｓ
序号
Ｎｏ．
名称
Ｎａｍｅ
采集地
Ｒｅｇｉｏｎ
经度
Ｌｏｎｇｉｔｕｄｅ（Ｅ）
纬度
Ｌａｔｉｔｕｄｅ（Ｎ）
海拔
Ｅｌｅｖａｔｉｏｎ／ｍ
所属种
Ｓｐｅｃｉｅ
１ ＴＧ－１ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２５′１５．４″ １１２°３３′０４．３１″ ７９４ 杜梨
２ ＴＧ－２ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２６′１３．３２″ １１２°３３′０６．４５″ ７９３ 杜梨
３ ＴＧ－３ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２５′３５．２３″ １１２°３２′０５．３２″ ７９７ 杜梨
４ ＴＧ－４ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°３５′２２．４４″ １１２°３３′０５．４７″ ７９５ 杜梨
５ ＴＧ－５ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２５′１８．０７″ １１２°３３′０６．３８″ ７９２ 杜梨
６ ＴＧ－６ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２７′３８．０６″ １１２°３５′０４．３１″ ７９５ 杜梨
７ ＴＧ－７ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２５′４７．４８″ １１２°２９′０７．５３″ ７９４ 杜梨
８ ＴＧ－８ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２５′１７．４５″ １１２°３５′０４．５８″ ７９０ 杜梨
９ ＴＧ－９ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２９′１８．３６″ １１２°３３′３６．２１″ ７８３ 杜梨
１０ ＴＧ－１０ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°３７′１７．４３″ １１２°３２′４５．１７″ ７９４ 杜梨
１１ ＴＧ－１１ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２５′２８．４６″ １１２°３７′３６．２６″ ７７５ 杜梨
１２ ＴＧ－１２ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２５′３３．２７″ １１２°３５′１６．４３″ ７９３ 杜梨
１３ ＴＧ－１３ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２５′３２．５″ １１２°３６′３２．５３″ ７９５ 杜梨
１４ ＴＧ－１４ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２８′２２．４７″ １１２°３３′５５．３４″ ７８４ 杜梨
１５ ＴＧ－１５ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２６′３１．５４″ １１２°３２′４８．４２″ ７９３ 杜梨
１６ ＴＧ－１６ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°３１′１７．４８″ １１２°３３′３２．１８″ ７７５ 杜梨
１７ ＴＧ－１７ 山西·太谷县Ｔａｉｇｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２５′２２．５″ １１２°２８′２５．３８″ ７９６ 杜梨
１８ ＳＺＧ－１ 山西·交口县Ｊｉａｏｋｏｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３６°５８′５６．４７″ １１１°１０′５３．６１″ １ ３３９ 杜梨
１９ ＳＺＧ－２ 山西·交口县Ｊｉａｏｋｏｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３６°４７′２８．３９″ １１１°１８′５３．２７″ １ ３３８ 杜梨
２０ ＳＺＧ－３ 山西·交口县Ｊｉａｏｋｏｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３６°５９′７９．１９″ １１１°１４′４９．３８″ １ ３３９ 杜梨
２１ ＺＴＳ－１ 山西·中条山Ｚｈｏｎｇｔｉａｏ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３４°４５′５６．９９″ １１０°４７′５７．８３″ １ ０２１ 杜梨
２２ ＺＴＳ－２ 山西·中条山Ｚｈｏｎｇｔｉａｏ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°１６′２４．３５″ １１１°３０′３７．８５″ １ １８６ 杜梨
２３ ＢＪＳ－１ 山西·白家山Ｂａｉｊｉａ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２８′５４．０６″ １１１°２５′４２．１８″ １ ６３２ 杜梨
２４ ＢＪＳ－２ 山西·白家山Ｂａｉｊｉａ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２８′５４．０６″ １１１°２５′３３．５８″ １ ５３７ 杜梨
２５ ＢＪＳ－３ 山西·白家山Ｂａｉｊｉａ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２８′５４．０６″ １１１°２７′４２．２３″ １ ６３５ 杜梨
２６ ＢＪＳ－４ 山西·白家山Ｂａｉｊｉａ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°２８′５４．０６″ １１１°２５′３８．１１″ １ ７０７ 杜梨
２７ ＢＪＳ－５ 山西·白家山Ｂａｉｊｉａ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°３７′３４．２７″ １１１°５４′３６．４３″ １ ３６３ 杜梨
２８ ＢＪＳ－６ 山西·白家山Ｂａｉｊｉａ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°４５′６５．３２″ １１１°２６′３２．６５″ １ ３４５ 杜梨
２９ ＢＪＳ－７ 山西·白家山Ｂａｉｊｉａ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°１７′４６．５６″ １１１°３０′５２．６７″ １ ３６６ 杜梨
３０ ＢＪＳ－８ 山西·白家山Ｂａｉｊｉａ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°３６′３８．０９″ １１１°４４′２５．６９″ １ ３５６ 杜梨
３１ ＢＪＳ－９ 山西·白家山Ｂａｉｊｉａ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°３０′２６．１０″ １１１°３１′３１．２４″ １ ４５３ 杜梨
３２ ＢＪＳ－１０ 山西·白家山Ｂａｉｊｉａ Ｍｏｕｎｔａｉｎ，Ｓｈａｎｘｉ ３７°４５′５２．２１″ １１１°２５′３４．２２″ １ ４８９ 杜梨
３３ ＪＸ－１ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°２９′２２．１２″ １１１°３４′００．０５″ ７３３ 杜梨
３４ ＪＸ－２ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°４３′２８．５７″ １１１°４５′０７．７５″ ６９８ 杜梨
３５ ＪＸ－３ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°３３′４５．２２″ １１１°４５′１５．８０″ ７４５ 豆梨
３６ ＪＸ－４ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°４０′２５．４７″ １１１°３５′１２．４３″ ７０７ 杜梨
３７ ＪＸ－５ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°４７′４７．３８″ １１１°５６′２７．６６″ ７３２ 杜梨
３８ ＪＸ－６ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°２２′３５．７８″ １１１°５７′０８．２２″ ６７８ 杜梨
３９ ＪＸ－７ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°５７′５６．２７″ １１１°５６′１７．３５″ ６９５ 杜梨
４０ ＪＸ－８ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°３７′３３．５２″ １１１°３０′０７．６６″ ７３１ 杜梨
４１ ＪＸ－９ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°２９′２８．４２″ １１１°２９′１８．３７″ ７３２ 杜梨
４２ ＪＸ－１０ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°２５′４７．２８″ １１１°５７′３７．６８″ ６８９ 豆梨
４３ ＪＸ－１１ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°４５′６７．５７″ １１１°２６′２２．３１″ ７０６ 杜梨
４４ ＪＸ－１２ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°４２′６７．８８″ １１１°１９′００．１０″ ７４９ 杜梨
４５ ＪＸ－１３ 山西·绛县Ｊｉａｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ３５°４９′５２．７２″ １１１°２０′３２．７５″ ７３４ 豆梨
４６ ＪＫＸ－１ 山西·交口县Ｊｉａｏｋｏｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３６°５２′３１．４２″ １１１°４８′５３．２１″ １ ７８２ 杜梨
４７ ＪＫＸ－２ 山西·交口县Ｊｉａｏｋｏｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３６°４８′３２．９２″ １１１°３２′５０．３１″ １ ７７２ 杜梨
４８ ＪＫＸ－３ 山西·交口县Ｊｉａｏｋｏｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３６°３５′４７．５５″ １１１°１７′４７．３８″ １ ７７５ 杜梨
４９ ＪＫＸ－４ 山西·交口县Ｊｉａｏｋｏｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３６°５０′３３．８３″ １１１°１５′２１．６４″ １ ７６９ 杜梨
５０ ＪＫＸ－５ 山西·交口县Ｊｉａｏｋｏｕ，Ｓｈａｎｘｉ ３６°４８′５２．５１″ １１１°２６′３８．４２″ １ ７４５ 杜梨
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北方园艺２０１５（１６）：１１～１７ ·试验研究·
１．２ 试验方法
１．２．１ ＤＮＡ的提取 ＤＮＡ采用ＴＩＡＮＧＥＮ生化科技
有限公司的ＴＰ－３０５型离心柱式植物ＤＮＡ提取试剂盒
提取。获得的ＤＮＡ模板调节质量浓度至２０ｎｇ／μＬ
备用。
１．２．２ ＳＳＲ引物序列的获得及筛选 ＳＳＲ引物参考
ＹＡＭＡＭＯＴＯ等［１６］、ＨＡＮ等［１７］、许靖诗等［１８］报道的序
列，由上海英潍捷基生物技术有限公司合成。该试验从
７８对引物中筛选了４０对电泳谱带清晰、多态性好的引
物对试验材料进行扩增（表２）。
表２ 引物序列
Ｔａｂｌｅ ２ Ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ
引物名称
Ｎａｍｅ ｏｆ ｐｒｉｍｅｒｓ
正向引物
Ｆｏｒｗａｒｄ ｐｒｉｍｅｒ
反向引物
Ｒｅｖｅｒｓｅ ｐｒｉｍｅｒ
退火温度
Ａｎｎｅａｌｉｎｇ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ／℃
ＴｓｕＥＮＨ１５５ ＣＧＡＣＴＣＴＣＣＣＴＣＡＣＴＴＴＴＧＣ ＧＴＴＴＣＴＴＧＧＡＧＡＡＡＴＧＧＡＴＣＴＣＡＡＧＣＧ ４８
ＮＨ０２９ａ ＧＡＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＡＧＣＡＧＧＧＣＡ ＣＣＴＣＣＣＧＴＣＴＣＣＣＡＣＣＡＴＡＴＴＡＧ ５０
ＢＧＡ３５ ＡＧＡＧＧＧＡＧＡＡＡＧＧＣＧＡＴＴ ＧＴＴＴＣＴＴＧＣＴＴＣＡＴＣＡＣＣＧＴＣＴＧＣＴ ５３
Ｎｂ１０４ａ ＴＣＧＧＡＧＡＧＧＡＡＧＡＧＴＴＧＧＡＧＧＡ ＡＧＧＴＣＣＧＴＧＣＣＣＡＧＴＴＴＣＴＴＴＣ ５５
ＣＨ０２ｅ０２ ＣＴＣＡＴＣＡＧＴＣＴＣＡＣＴＧＡＣＴＧＴＧＴＧ ＧＴＴＴＣＴＴＡＧＧＧＴＣＡＧＧＧＴＣＡＧＴＣＡＧＧ ５５
ＣＨ０２ｂ１０ ＣＡＡＧＧＡＡＡＴＣＡＴＣＡＡＡＧＡＴＴＣＡＡＧ ＣＡＡＧＴＧＧＣＴＴＣＧＧＡＴＡＧＴＴＧ ５０
ＮＢ１０５ａ ＡＡＡＣＡＡＣＣＧＡＣＴＧＡＧＣＡＡＣＡＴＣ ＡＡＡＡＴＣＴＴＡＧＣＣＣＡＡＡＡＴＣＴＣＣ ５０
ＮＨ００９ｂ ＣＣＧＡＧＣＡＣＴＡＣＣＡＴＴＧＡ ＧＴＴＴＣＴＴＣＧＴＣＴＧＴＴＴＡＣＣＧＣＴＴＣＴ ５０
ＮＢ１４１ｂ ＧＴＴＴＣＴＴＣＡＧＡＧＡＡＡＧＡＣＡＧＡＧＧＴＡＧＡＧＡＧＡＡ ＧＧＡＴＴＧＡＴＣＧＣＣＴＴＡＴＧＧＴＴＧＴ ５３
ＣＨ０２ｄ１０ｂ ＧＴＡＡＣＣＴＴＴＧＴＴＧＣＧＣＧＴＧ ＧＴＴＴＣＴＴＧＣＣＴＴＧＡＧＴＴＴＣＴＣＡＧＣＡＴＴＧ ５３
ＣＨ０３ｇ０６ ＡＴＣＣＣＡＣＡＧＣＴＴＣＴＧＴＴＴＴＴＧ ＴＣＡＣＡＧＡＧＡＡＴＣＡＣＡＡＧＧＴＧＧＡ ５０
ＮＨ０３９ａ ＴＧＧＴＴＧＣＣＧＡＧＡＡＡＧＴＧＴＡＧ ＣＡＡＧＣＡＡＧＴＡＣＡＡＣＡＴＧＡＧＴＧＧ ５３
ＣＨ０２Ｄ１１ ＡＧＣＧＴＣＣＡＧＡＧＣＡＡＣＡＧＣ ＡＡＣＡＡＡＡＧＣＡＧＡＴＣＣＧＴＴＧＣ ５２
ＮＨ００４ａ ＡＧＧＡＴＧＧＧＡＣＧＡＧＴＴＴＡＧＡＧ ＣＣＡＣＡＴＣＴＣＴＣＡＡＣＣＴＡＣＣＡ ５３
ＮＨ０１１ｂ ＴＧＧＴＴＣＡＣＡＴＡＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡ ＴＴＴＧＣＣＧＴＴＧＧＡＣＣＧＡＧＣ ５４
ＮＨＯ１３ａ ＧＧＴＴＴＧＡＡＧＡＧＧＡＡＴＧＡＧＧＡＧ ＣＡＴＴＧＡＣＴＴＴＡＧＧＧＣＡＣＡＴＴＴＣ ５０
ＮＨ０１５ａ ＴＴＧＴＧＣＣＣＴＴＴＴＴＣＣＴＡＣＣ ＣＴＴＴＧＡＴＧＴＴＡＣＣＣＣＴＴＧＣＴＧ ５０
ＫＡ４ｂ ＡＡＡＧＧＴＣＴＣＴＣＴＣＡＣＴＧＴＣＴ ＣＣＴＣＡＧＣＣＣＡＡＣＴＣＡＡＡＧＣＣ ５１
ＣＨ０２ｃ０２ａ ＣＴＴＣＡＡＧＴＴＣＡＧＣＡＴＣＡＡＧＡＣＡＡ ＴＡＧＧＧＣＡＣＡＣＴＴＧＣＴＧＧＴＣ ５２
ＣＨ０２ｈ１１ａ ＣＧＴＧＧＣＡＴＧＣＣＴＡＴＣＡＴＴＴＧ ＣＴＧＴＴＴＧＡＡＣＣＧＣＴＴＣＣＴＴＣ ５２
ＣＨ０３ｃ０２ ＴＣＡＣＴＡＴＴＴＡＣＧＧＧＡＴＣＡＡＧＣＡ ＧＴＧＣＡＧＡＧＴＣＴＴＴＧＡＣＡＡＧＧＣ ５１
ＣＨ０３ｄ１２ ＧＣＣＣＡＧＡＡＧＣＡＡＴＡＡＧＴＡＡＡＣＣ ＡＴＴＧＣＴＣＣＡＴＧＣＡＴＡＡＡＧＧＧ ５０
ＣＨ０４ｈ０２ ＧＧＡＡＧＣＴＧＣＡＴＧＡＴＧＡＧＡＣＣ ＣＴＣＡＡＧＧＡＴＴＴＣＡＴＧＣＣＣＡＣ ５２
ＣＨ０５ｄ０３ ＴＡＣＣＴＧＡＡＡＧＡＧＧＡＡＧＣＣＣＴ ＴＣＡＴＴＣＣＴＴＣＴＣＡＣＡＴＣＣＡＣＴ ５１
ＣＨ０１ｈ０１ ＧＡＡＡＧＡＣＴＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＧＣ ＧＧＡＧＴＧＧＧＴＴＴＧＡＧＡＡＧＧＴＴ ５３
ＣＨ０２ｄ０８ ＧＣＡＧＡＣＡＣＴＣＡＣＴＣＡＣＴＡＴＣＴＣＴＣ ＴＣＣＡＡＡＡＴＧＧＣＧＴＡＣＣＴＣＴＣ ５３
ＣＨ０３ｄ０２ ＡＡＡＣＴＴＴＣＡＣＴＴＴＣＡＣＣＣＡＣＧ ＡＣＴＡＣＡＴＴＴＴＴＡＧＡＴＴＴＧＴＧＣＧＴＣ ５０
ＣＨ０４ｅ０５ ＡＧＧＣＴＡＡＣＡＧＡＡＡＴＧＴＧＧＴＴＴＧ ＡＴＧＧＣＴＣＣＴＡＴＴＧＣＣＡＴＣＡＴ ５０
ＣＨ０５ｅ０６ ＡＣＡＣＧＣＡＣＡＧＡＧＡＣＡＧＡＧＡＣＡＴ ＧＴＴＧＡＡＴＡＧＣＡＴＣＣＣＡＡＡＴＧＧＴ ５１
ＮＢ１１３ａ ＡＴＧＡＡＡＴＡＴＧＴＣＧＴＧＴＴＧＣＣＣＴＴＡＧ ＣＣＣＴＴＣＣＴＣＡＧＣＡＴＧＴＴＴＣＣＴＡＧＡＣ ５２
ＢＧＴ２３ｂ ＣＡＣＡＴＴＣＡＡＡＧＡＴＴＡＡＧＡＴ ＡＣＴＣＡＧＣＣＴＴＴＴＴＴＴＣＣＣＡＣ ５２
ＫＡ１６ ＧＣＣＡＧＣＧＡＡＣＴＣＡＡＡＴＣＴ ＡＡＣＧＡＧＡＡＣＧＡＣＧＡＧＣＧ ５１
ＫＵ１０ ＡＧＴＡＴＧＴＧＡＣＣＡＣＣＣＣＧＡＴＧＴＴ ＡＧＡＧＴＣＧＧＴＴＧＧＧＡＡＡＴＧＡＴＴＧ ５４
ＫＡ１４ ＴＣＡＴＴＧＴＡＧＣＡＴＴＴＴＴＡＴＴＴＴＴ ＡＴＧＧＣＡＡＧＧＧＡＧＡＴＴＡＴＴＡＧ ５３
ＣＨ０１ｆ０２ ＡＣＣＡＣＡＴＴＡＧＡＧＣＡＧＴＴＧＡＧＧ ＣＴＧＧＴＴＴＧＴＴＴＴＣＣＴＣＣＡＧＣ ４８
ＣＨ０１ｆ０７ａ ＣＣＣＴＡＣＡＣＡＧＴＴＴＣＴＣＡＡＣＣＣ ＣＧＴＴＴＴＴＧＧＡＧＣＧＴＡＧＧＡＡＣ ４８
ＣＨ０１ｇ０５ ＣＡＴＣＡＧＴＣＴＣＴＴＧＣＡＣＴＧＧＡＡＡ ＧＡＣＡＧＡＧＴＡＡＧＣＴＡＧＧＧＣＴＡＧＧＧ ５０
ＣＨ０３ｇ１２ ＣＡＡＧＧＡＴＧＣＧＣＡＴＧＴＡＴＴＴＧ ＧＣＧＣＴＧＡＡＡＡＡＧＧＴＣＡＧＴＴＴ ５０
ＣＨ０４ｄ０２ ＣＧＴＡＣＧＣＴＧＣＴＴＣＴＴＴＴＧＣＴ ＣＴＡＴＣＣＡＣＣＡＣＣＣＧＴＣＡＡＣＴ ４９
１．２．３ ＰＣＲ扩增 ＰＣＲ反应体系：采用２０μＬ ＰＣＲ反
应体系，其中１０μＬ ＤｒｅａｍＴａｑ Ｇｒｅｅｎ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ
（２×），２μＬ ＤＮＡ模板（２０ｎｇ／μＬ），正反向引物各１μＬ，
６μＬ ｄｄＨ２Ｏ。ＰＣＲ扩增程序：９４℃预变性５ｍｉｎ，９４℃变
性４５ｓ，４８～５５℃退火４５ｓ，７２℃延伸１ｍｉｎ，３５个循环，
７２℃延伸１０ｍｉｎ。ＰＣＲ扩增结束后加入５μＬ溴酚蓝指
示剂９５℃变性５ｍｉｎ。
１．２．４ 聚丙烯酰胺凝胶电泳 ＰＣＲ产物采用６％的聚
丙烯酰胺凝胶，电泳条件为：恒电压１８０Ｖ，电流１００ｍＡ，
预电泳３０ｍｉｎ，加入４μＬ ＰＣＲ产物，电泳１．５ｈ，１×ＴＢＥ
作为电极缓冲液。
１．２．５ 凝胶银染显色 固定银染：电泳结束后将凝胶放
入染色液（１０％乙醇，１％乙酸，０．２％ＡｇＮＯ３）中轻摇
１０ｍｉｎ；显色：将银染后凝胶用双蒸水快速冲洗２遍后，
放入显色液（１．５％ＮａＯＨ，０．５％甲醛）轻摇至条带显色
后，用双蒸水漂洗，置于背景灯上拍照记录。
１．３ 数据分析
记录每个ＳＳＲ位点上清晰且重复性好的条带，以１
和０分别代表等位基因的有无，采用Ｐｏｗｅｒ Ｍａｒｋｅｒ
Ｖ３．２５ＯＰＧＥＮＥ软件［１９－２０］对扩增条带信息进行分析，得
出主要等位基因频率、基因遗传多样性、期望杂合度和
多态信息含量等参数的数值；利用ＮＴＳＹＳ－ｐｃ ２．１０ｅ［２１］
３１
·试验研究· 北方园艺２０１５（１６）：１１～１７
软件计算ＳＭ相似系数，并采用ＵＰＧＭＡ法对遗传距离
进行聚类分析，得出聚类图谱。
２ 结果与分析
２．１ 野生梨资源的ＳＳＲ扩增结果
筛选的４０对ＳＳＲ引物均能扩增出清晰可辨的条带
（图１）。４０对引物共检测出２３６个等位基因位点，平均
每对引物５．９０个等位位点，其中多态性条带２２０个，多
态比率９３．２２％（表３）。结果表明，ＳＳＲ分子标记能够揭
示野生梨资源较高的多态性，并能较好的反映野生梨资
源间的遗传多样性关系。
注：Ｍ，Ｍａｒｋｅｒ；１～２８，样本序号。
Ｎｏｔｅ：Ｍ，Ｍａｒｋｅｒ；１－２８，ｓａｍｐｌｅ ｃｏｄｅ ｎｕｍｂｅｒ．
图１ 引物ＮＨ００４ａ的ＳＳＲ扩增结果
Ｆｉｇ．１ Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｉｍｅｒ ｐａｉｒ ＮＨ００４ａ
表３ ４０对引物对５０份野生梨资源的扩增信息
Ｔａｂｌｅ ３ Ｔｈｅ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ４０ＳＳＲ ｐｒｉｍｅｓ ｉｎ ５０ｗｉｌｄ ｐｅａｒ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ
引物
Ｍａｒｋｅｒ
扩增带数
Ｎｏ．ｏｆ ｂａｎｄｓ
多态性条带数
Ｎｏ．ｏｆ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｂａｎｄｓ
多态率
Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ｂａｎｄｓ／％
基因遗传多样性
Ｇｅｎｅ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
期望杂合度
Ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ
多态信息含量
ＰＩＣ
ＴｓｕＥＮＨ１５５ ６ ６ １００．００ ０．３１４ ５ ０．４３３ ３ ０．２６１ １
ＮＨ０２９ａ １０ ７ ７０．００ ０．４１７ ４ ０．６２６ ０ ０．３３８ ７
ＢＧＡ３５ １０ １０ １００．００ ０．４０５ ８ ０．６１２ ０ ０．３３０ ６
Ｎｂ１０４ａ ６ ６ １００．００ ０．３９９ ０ ０．６３３ ３ ０．３０９ ８
ＣＨ０２ｅ０２ ６ ６ １００．００ ０．４１３ ２ ０．６０３ ３ ０．３３６ ８
ＣＨ０２ｂ１０ ８ ８ １００．００ ０．３５８ ５ ０．５２７ ５ ０．２９７ ３
ＮＢ１０５ａ ８ ６ ８０．００ ０．３９９ ３ ０．６１７ ５ ０．３１４ １
ＮＨ００９ｂ ８ ８ １００．００ ０．２９００ ０．４３２ ５ ０．４３１ ２
ＮＢ１４１ｂ ６ ６ １００．００ ０．３００ ３ ０．４１０ ０ ０．２４３ ８
ＣＨ０２ｄ１０ｂ ６ ６ １００．００ ０．３８１ ３ ０．６１３ ３ ０．３０９ ６
ＣＨ０３ｇ０６ ８ ７ ８７．５０ ０．４３１ ９ ０．７７５ ０ ０．３４２ ０
ＮＨ０３９ａ ６ ５ ８３．３３ ０．３７０ ０ ０．５５６ ７ ０．２９４ ２
ＣＨ０２Ｄ１１ ４ ４ １００．００ ０．３６３ ９ ０．５３５ ０ ０．２９９ ９
ＮＨ００４ａ ５ ５ １００．００ ０．３７３ ０ ０．５４４ ０ ０．３０８ １
ＮＨ０１１ｂ ６ ６ １００．００ ０．３６１ ９ ０．４９３ ３ ０．３０４ １
ＮＨＯ１３ａ ４ ４ １００．００ ０．２７６ ２ ０．３３５ ０ ０．２３６ ８
ＮＨ０１５ａ ６ ６ １００．００ ０．３５３ ７ ０．５５４ ４ ０．２９１ １
ＫＡ４ｂ ５ ４ ８０．００ ０．３９０ ７ ０．５７２ ０ ０．３１１ ０
ＣＨ０２ｃ０２ａ ６ ４ ６６．６７ ０．４０２ ４ ０．６０３ ３ ０．３１８ ６
ＣＨ０２ｈ１１ａ ５ ５ １００．００ ０．３９０ ７ ０．５４０ ０ ０．３１３ ６
ＣＨ０３ｃ０２ ７ ７ １００．００ ０．３６２ ６ ０．４９７ １ ０．２９４ ７
ＣＨ０３ｄ１２ ７ ５ ７１．４３ ０．３４６ ０ ０．４６５ ０ ０．２９３ ５
ＣＨ０４ｈ０２ ５ ５ １００．００ ０．３２２ ８ ０．４５６ ０ ０．２６３ １
ＣＨ０５ｄ０３ ５ ５ １００．００ ０．３２３ １ ０．４４４ ０ ０．２６４ ３
ＣＨ０１ｈ０１ ５ ５ １００．００ ０．３３２ １ ０．４４０ ０ ０．２７３ ９
ＣＨ０２ｄ０８ ６ ５ ８３．３３ ０．３３４ ６ ０．４４３ ３ ０．２７５ ９
ＣＨ０３ｄ０２ ６ ６ １００．００ ０．３２８ ７ ０．４４０ ０ ０．２７０ １
ＣＨ０４ｅ０５ ６ ６ １００．００ ０．３３８ ７ ０．４５３ ３ ０．２７８ ３
ＣＨ０５ｅ０６ ６ ６ １００．００ ０．３８３ ２ ０．５３４ ７ ０．３０７ ６
ＢＧＴ２３ｂ ４ ３ ７５．００ ０．３７６ ３ ０．５２０ ０ ０．３０３ ５
ＢＧＴ２３ｂ ５ ５ １００．００ ０．３６５ ０ ０．５０４ ０ ０．３０５ ２
ＫＡ１６ ５ ５ １００．００ ０．３６１ ５ ０．４７６ ０ ０．２９５ ８
ＫＵ１０ ６ ６ １００．００ ０．３５０ ６ ０．４７５ ７ ０．２８６ ２
ＫＡ１４ ５ ４ ８０．００ ０．３６３ ２ ０．４８８ ０ ０．２９５ ７
ＣＨ０１ｆ０２ ６ ５ ８３．３３ ０．３９８ ３ ０．５５３ ３ ０．３１８ ５
ＣＨ０１ｆ０７ａ ５ ５ １００．００ ０．３６８ ４ ０．５０４ ０ ０．２９８ １
ＣＨ０１ｇ０５ ５ ５ １００．００ ０．３８８ ６ ０．５３６ ０ ０．３１２ ２
ＣＨ０３ｇ１２ ４ ４ １００．００ ０．３２９ ３ ０．４２０ ０ ０．２７４ ３
ＣＨ０４ｄ０２ ５ ５ １００．００ ０．３６１ ３ ０．４７５ ０ ０．３０５ ７
ＣＨ０５ｃ０７ ４ ４ １００．００ ０．３４２ ３ ０．４４０ ０ ０．２９３ ４
Ａｖｅｒａｇｅ ５．９０ ５．５０ ９３．２２ ０．３６１ ８ ０．５１４ ６ ０．３００ １
４１
北方园艺２０１５（１６）：１１～１７ ·试验研究·
不同样品间遗传多样性指数在０．２７６ ２～０．４３１ ９，
平均值为０．３６１ ８，揭示了一个较高的遗传多样性水平；
检测位点杂合度最高值为０．７７５ ０，最低值为０．３３５ ０，平
均杂合度为０．５１４ ６；多态信息含量变化范围在０．２３６ ８～
０．４３１ ２，平均值为０．３００ １。
不同地区之间的梨野生资源的遗传多样性差异明
显，其中基因遗传多样性参数（Ｇｅｎｅ Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ）从大到小
排序为白家山＞交口县＞绛县＞中条山＞太谷县，表现
出了相对较高的遗传多样性；多态信息含量（ＰＩＣ）基本
分布在０．３００ ０左右，遗传多态性适中。期望杂合度均
超过０．５００ ０，说明５个地区的样品的群体多样性均具有
统计学意义。
表４ 不同地区野生梨
资源遗传多样性参数
Ｔａｂｌｅ ４ Ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｏｆ
ｔｈｅ ｗｉｌｄ ｐｅａｒ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｉｎ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ａｒｅａｓ
采集地
Ｒｅｇｉｏｎ
样品数量
Ｓａｍｐｌｅｓ
基因遗传多样性
Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
期望杂合度
Ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ
多态信息含量
ＰＩＣ
太谷县 １７ ０．３７９ ９ ０．５１０ ２ ０．３０７ ７
中条山 ２ ０．３８２ ５ ０．５８９ ３ ０．３０５ ２
白家山 １０ ０．３９１ ８ ０．５３５ ３ ０．３１５ ０
绛县 １３ ０．３８８ ９ ０．５２９ ５ ０．３１３ ２
交口县 ８ ０．３９１ ７ ０．５３４ ６ ０．３１５ １
２．２ 聚类分析
聚类图谱显示，５０份材料均能被分开，相似系数在
０．４４４ ９～０．９４４ ９，说明在分子水平上各个样品之间的遗
传多样性比较丰富。其中ＴＧ－６与ＴＧ－１５相似系数最大
为０．９４４ ９，说明２个样品之间亲缘关系最近；而ＪＸ－１０
与ＪＸ－１１之间的相似系数最小为０．４４４ ９，说明二者的亲
缘关系较远。５０份供试材料在相似系数为０．５７左右被
分为四大类群。
其中，类群Ⅰ属于豆梨，类群Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ属于杜梨。ＪＸ－３、
ＪＸ－１０、ＪＸ－１３三个供试样品同属于类群Ⅰ，显示了较近的
亲缘关系。类群Ⅱ包含１８份供试样品，可分为２个亚群，
其中４份白家山、１份中条山和１份绛县的样品同属于
第１个亚群，另外６份绛县、５份交口县的样品同属于第
二亚群；类群Ⅲ包含１２份供试样品，其中３份舍子沟样
品关系密切，其它样品的谱系关系较为复杂，但大部分
来自白家山和绛县地区。类群Ⅳ的谱系关系较单一，样
品全部来自太谷县，其中ＴＧ－６与ＴＧ－１５的关系最为密
切，相似系数达到了０．９４４ ９。
整个聚类图中，类群Ⅳ中各个样品间的相似系数变
化范围在０．６２７ １～０．９４４ ９，比其它类群样品间的相似
系数大，说明太谷县样品间的亲缘关系比较近。类群Ⅱ
和类群Ⅲ集中了大部分白家山和绛县地区的样品，彼此
间的亲缘关系较为密切。综上所述，聚类类群分布与样
品来源地基本吻合。
图２ 基于ＳＳＲ数据绘制的梨野生资源的聚类图
Ｆｉｇ．２ Ｄｅｎｄｒｏｇｒａｍ ｏｆ ｗｉｌｄ ｐｅａｒ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ
ｂａｓｅｄ ｏｎ ＳＳＲ ｍａｒｋｅｒｓ
３ 讨论
山西省属于我国北方地区，是梨属植物资源较为丰
富的地区之一，长期以来受到研究者的关注，但是由于
受地理条件的限制，以及人为砍伐的影响，资源的分布
范围和数量在急剧的减少，因此，及时地开展山西梨属
植物资源的调查和研究是一项十分重要的工作。为了
解山西梨属植物的分布，对山西梨属植物资源进行了实
地考察，并采集接穗进行了资源保存，采集叶片，资源分
布主要集中在吕梁山脉、中条山脉以及晋中等地区，其
中以吕梁山资源最为丰富。主要分布在海拔６００ｍ以
上的山区，植被为落叶灌木林地，一般分布在半山腰及
河谷边沿地带零散分布。类型主要有杜梨、豆梨等类
型，其中以杜梨分布最广。山西梨属植物资源遗传多样
性丰富，利用ＳＳＲ分子标记技术对山西梨属植物进行了
比较分析，从结果来看，４０对ＳＳＲ引物的扩增结果中各
５１
·试验研究· 北方园艺２０１５（１６）：１１～１７
个参数均具有统计学意义，能够很好地对不同的种类进
行区分。这与前人对其它地区梨属植物的分析结果基
本相一致［２２］。５０份资源的聚类分析指出，基本可以将
供试样品按照地理来源加以区分，可以反映物种间亲缘
关系和地域遗传差异，对研究植物起源和分布具有一定
的意义。但也有少数的样品与实际不相符合，如绛县地
区的梨属植物被分到不同的类群，以上说明绛县地区的
梨野生资源亲缘关系较为复杂，具体原因有待进一步的
研究。
在资源调查中发现大果、绿皮类型资源，果实比普
通杜梨大２～４倍，果皮为绿色，但新梢枝条的绒毛及叶
片形状与杜梨相似，其编号为‘ＴＧ－６’和‘ＴＧ－１５’。该类
型在其他省份较为少见，属稀有资源。利用ＳＳＲ引物可
以将该类型与其它梨属植物资源区分开，从聚类图谱上
显示，ＴＧ－６和ＴＧ－１５聚为一类。以上说明，该大果类型
与普通杜梨存在差异，可能属于杜梨的变异类型，有待
进一步确认。另外，在对山西梨资源调查中发现，杜梨
资源在果实大小、果皮色泽、萼片的宿存、叶片大小、花
瓣颜色等方面变异类型多样，但在该分类中难以区分，
这些给今后在资源分类研究提出了新的问题，需要针对
植物的某一性状选择特殊引物来进行检测分析，这样有
利于深入了解不同梨属植物资源的遗传特性，使分子标
记技术能够准确、全面的反映出植物的遗传特性。
野生植物的遗传多样性不仅是现代农业可持续发
展的物质基础，也是维护生态安全的重要屏障。因此，
保护野生植物资源遗传多样性对人类生存和发展具有
重要意义［２３］。梨属植物在长期的自然演化过程中形成
了对不同环境条件的适应，具有良好的抗御不良环境的
能力，是未来植物抗性育种的优良基因库，特别对梨树
砧木抗性育种具有重要的开发利用价值。该次山西梨
属植物实地调查和遗传多样性分析，基本摸清了山西局
部地区梨属植物资源类型，同时发现了一些可能的新的
变异类型，为今后的遗传资源的保护和开发利用提供了
参考依据。
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ＱＵ Ｙｏｎｇｑｉｎｇ，ＷＡＮＧ Ｒａｎ，ＭＡ Ｃｈｕｎｈｕｉ，ＬＩ Ｄｉｎｇｌｉ，ＳＯＮＧ Ｊｉａｎｋｕｎ
（Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｑｉｎｇｄａｏ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ ２６６１０９）
６１
北方园艺２０１５（１６）：１７～２１ ·试验研究·
第一作者简介：张丹（１９８９－），女，河北衡水人，硕士研究生，研究方
向为果树栽培生理与生态。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｄａｎ９８８４＠ｙｅａｈ．ｎｅｔ．
责任作者：孙建设（１９５７－），男，河北保定人，博士，教授，研究方向
为果树栽培生理及种质创新。Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｉａｎｓｈｅａｐｐｌｅ＠１６３．ｃｏｍ．
基金项目：国家苹果产业技术体系资助项目（ＣＡＲＳ－２８）。
收稿日期：２０１５－０５－２５
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１５１６００４
ＳＨ４０中间砧苹果苗木休眠期假植
失水原因分析及防护措施
张 丹，张 鹤，邵 建 柱，孙 建 设
（河北农业大学 园艺学院，河北 保定０７１０００）
摘 要：ＳＨ４０是目前我国华北地区主要应用的苹果矮化砧木。生产中冬季假植的ＳＨ４０中
间砧苹果苗木春季土壤解冻后往往出现中间砧段率先失水褶皱、随后整株失水现象，对生产极为
不利。该研究以一年生冬季休眠期红富士／ＳＨ４０／八棱海棠为试材，探究ＳＨ４０中间砧苹果苗木
休眠期假植中间砧段率先失水原因。结果表明：ＳＨ４０中间砧苗木休眠期假植中间砧段率先失水
与中间砧自身的品种特性关系不大；根系蒸腾是导致中间砧段率先失水褶皱的主要原因，当根系
缺水，蒸腾量较大时，导管内部形成水势差，迫使中间砧水分逆向运移至根部。根系越庞大，中间
砧段失水速率越快，失水褶皱情况越严重。失水率达２０％是中间砧及接穗能够复水成活的阈值，
超出阈值苗木即不能成活。
关键词：ＳＨ４０中间砧；苹果苗木；休眠假植；失水
中图分类号：Ｓ ６６１．１０５＋．９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１５）１６－００１７－０５
矮化密植栽培是当今世界果树栽培发展趋势［１］，而
矮化砧木的利用仍是目前实现矮化密植栽培的重要手
段［２］。ＳＨ系苹果矮化砧木因其易成花，早果，果实品质
优良，抗寒，抗干旱，抗抽条及适应范围广等优势在山
西、河北、甘肃、陕西地区广泛使用［３－６］。其中，ＳＨ４０是
目前我国华北地区主要应用的苹果矮化砧木［７］。
研究表明ＳＨ系中间砧抗寒性及抗旱性优于 Ｍ７、
Ｍ９［８］、Ｍ２６、ＧＧ８０、ＪＭ７［９］中间砧，越冬能力强。但生产
中发现冬季休眠期假植的ＳＨ４０中间砧苹果苗木春季土
壤解冻后往往出现中间砧段率先开始失水褶皱，随后整
株失水现象，轻则树势减弱，重则树体死亡，这给生产带
来极为不利的影响。然而，与之相关的研究却鲜见报
道，导致生产中缺乏理论指导，防护措施显得极为盲目。
因此，该研究以冬季休眠期ＳＨ４０中间砧苹果苗木
为试验材料，探究ＳＨ４０中间砧苗木休眠期假植失水原
因，旨在为生产中有效的防护措施提供参考依据
。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｗｉｌｄ ｐｅａｒ ｇｅｎｕｓ ｉｎ Ｓｈａｎｘｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ５０ｗｉｌｄ ｓｉｍｐｌｅｓ ｏｆ
Ｐｙｒｕｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｕｓｉｎｇ ＳＳＲ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍａｒｋｅｒ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ，ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ５０ｗｉｌｄ ｐｅａｒ ｇｅｎｕｓ ｗｅｒｅ
ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ＳＳＲ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍａｒｋｅｒ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ，２３６ａｌｅｌｅｓ ｗｅｒｅ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｂｙ ４０ｐａｉｒｓ ｏｆ ＳＳＲ
ｐｒｉｍｅｒｓ ａｎｄ ５．９０ａｌｅｌｅｓ ｗｅｒｅ ａｍｐｌｉｆｉｅｄ ｂｙ ｐｅｒ ｐｒｉｍｅｒｓ．Ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｉｎｄｅｘｅｓ ｖａｒｉｅｄ ｆｒｏｍ ０．２７６ ２ｔｏ ０．４３１ ９，ｔｈｅ ｅｘｐｅｃｔｅｄ ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ ｗｅｒｅ ０．３３５ ０ｔｏ ０．７７５ ０，ａｎｄ ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ
ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ０．２３６ ８ｔｏ ０．４３１ ２．Ｔｈｅ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ５０ｗｉｌｄ ｐｅａｒ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｗｅｒｅ ｓｈｏｗｅｄ ｈｉｇｈ ｂｙ ｔｈｅ
ｆｏｕｒ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ．Ｔｈｅ ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ５０ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ
０．４４４ ９ｔｏ ０．８３９ ０，ａｌ ｔｈｅ ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｆｏｕｒ ｇｒｏｕｐｓ ａｔ ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ０．５７，ｔｈｅ ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｏｆ
ｇｒｏｕｐ Ｉ ｂｅｌｏｎｇｅｄ ｔｏ Ｐｙｒｕｓ ｃａｌｅｒｙａｎａ，ｔｈｅ ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｏｆ ｇｒｏｕｐ ＩＩ，ＩＩＩ ａｎｄ ＩＶ ｂｅｌｏｎｇｅｄ ｔｏ Ｐｙｒｕｓ ｂｅｔｕｌａｅｆｏｌｉａ．Ｔｈｅ ｍｏｓｔ
ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｏｆ Ｂａｉｊｉａ ｍｏｕｎｔａｉｎ ａｎｄ Ｊｉａｎｇ ｃｏｕｎｔｙ ｂｅｌｏｎｇｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｇｒｏｕｐ ＩＩ ａｎｄ ｇｒｏｕｐ ＩＩＩ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ａｌ ｔｈｅ ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｏｆ Ｔａｉｇｕ
ｃｏｕｎｔｙ ｂｅｌｏｎｇｅｄ ｔｏ ｇｒｏｕｐ ＩＶ，ｗｈｉｃｈ ａｃｃｏｒｄｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ；ｗｅ ａｌｓｏ ｆｏｕｎｄ ｎｅｗ Ｐｙｒｕｓ ｂｅｔｕｌａｅｆｏｌｉａ
ｗｉｔｈ ｂｉｇ ｆｒｕｉｔ ａｎｄ ｇｒｅｅｎ ｓｋｉｎ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｅａｒ；ｗｉｌｄ ｒｅｓｏｕｒｃｅ；ＳＳＲ；ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
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