全 文 ：　　第 21卷第 2 期　　　　　　　　　毕节师范高等专科学校学报
JOURNAL OF TEACHERS COLLEGE
　　　　　　　　　　　　　　2003年 6 月　　
作者简介:向红:女 , 1967年 4月生 ,贵州纳雍县人,六盘水师专生物系讲师 ,从事细胞生物学研究。
王绪英:女 , 1971年 1月生 ,山东泰安市人 ,六盘水师专生物系讲师 ,从事应用生物化学研究。
孙爱群:女 , 1961年 8月生 ,湖南冷水江市人 ,六盘水师专生物系副教授 ,从事遗传学研究。
蓼属植物赤胫散醇提物水溶液的抑菌作用
◆　向　红　王绪英　孙爱群
(六盘水师专生物系 ,贵州　水城　553004)
摘　要:用琼脂平板扩散法 ,从定量的角度检测了赤胫散醇提物水溶液对G-大肠杆菌 、志贺氏痢疾
杆菌 、G+金黄色葡萄球菌的抑菌作用 。结果表明 ,赤胫散的醇提物水溶液对G-志贺氏痢疾杆菌有明显
的抑菌作用 ,且抑菌作用强度与药液浓度成正相关;对G-大肠杆菌 、G+金黄色葡萄球菌无抑菌作用。
关键词:赤胫散;醇提物;水溶液;抑菌作用
中图分类号:Q946·887　　文章标识码:A　　文章编号:1672-0296(2003)-02-0065-04
Studies on Antibacterial Action of Watery Solution of P.runcinatum Buch.-Ham.ex D.Don.Var
Xing Hong　Wang Xu-Ying　Sun Ai-Qun
(Liupanshui Teachers College ,GuiZhou ShuiCheng 553004)
Abstract:Antibacterial experiments through agar diffusion test were done to observe bacteria comprising
Staphylococcus aureus Escherchia coli 、Shigella dgsenteric in response to watery solution of p.runcinatum Buch.-
Ham.ex D.Don.Var.Stumulation from qualitative analysis angle.The authers found that antibacterial action of
Shigella dgsenteric was more effective and with the watery solution of P.runcinatum Buch.-Ham.ex D.Don.Var.
concentration increasing , the diameter of antibacterial circle increased.It was no use of antibacterial action of
shigella dgsenteric.
Key words:P.runcinatum Buch.-Ham.ex D.Don.Var.;Watery Solution;Antibacterial Action
蓼属(Polygonum)约有植物 230种 ,广布于全世界。我国有 115种 26变种 ,南北各省(区)均有 ,多数
种类可入药[ 1]贵州省六盘水市水城县蓼属植物经初步鉴定有 15 种 1变种[ 2] 。蓼属植物药理学活性多
样 ,是世界各国重要的传统药物资源 。近年来的研究发现 ,蓼属植物具有抗菌 、抗氧化 、抗肿瘤 、杀虫等
多种生物活性 ,已经显示出巨大的研究和开发潜力[ 3] 。赤胫散(Polygonum runcinatum Buch.Ham.ex D.
Don.Var.sinense Hemsl.)为蓼属植物一变种 ,据文献记载 ,赤胫散主要用于治疗吐血 、溃疡病 、扭伤[ 4] 、痢
疾 、白带 、血热头痛 、崩漏 、经闭 、乳痈疮疖 、跌打损伤[ 5 , 6] ,具清热解毒 ,活血消肿作用[ 7] 。迄今为止 ,尚
无关于赤胫散抗微生物活性的报道 。本文对赤胫散醇提物水溶液的抗菌作用进行了定量检测 ,旨在为
丰富蓼属植物药理作用的研究提供参考数据 ,为充分开发利用水城境内的蓼属药用植物资源做一点研
究工作。
1 材料与方法
1.1实验材料:
赤胫散于 2002年 10月采自贵州省六盘水市水城县玉舍森林公园场部工区(海拔 1900 ～ 2300m;
N26°36′E104°46′)阔叶林下。选取叶多 、开花 、带绿色的地上部分洗净晾干 ,干燥备用。
1.2实验器材:
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28型微量标准口有机组合仪 、DZKW -D单列四孔恒温水浴锅 、HH.B11.360恒温培养箱 、Kodak
DC210A数码相机。
1.3 提取物的制备:
称取赤胫散干燥 、粉碎的地上部分 10g ,用 95%乙醇(每次 150毫升)浸泡 1.5h提取 1h ,共三次 ,得
乙醇提取液。用常压蒸馏法蒸馏至提取液为 25ml时 ,于 60℃的恒温水浴中继续蒸馏 ,得褐色膏状物 1.
7544g ,得率为 17.544%。
1.4 参试菌株:
选择引起皮肤化脓的G+金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),两个标准菌株 91118 、91053和引起
肠道疾病的 G-大肠杆菌(Escherchia coli ,)、志贺氏痢疾杆菌(Shigella dgsenteric)进行检测 ,前二者来自
武汉大学菌种保藏中心 ,大肠杆菌为贵州师范大学生物系保藏菌种 ,志贺氏痢疾杆菌由六盘水市人民医
院提供。
1.5 培养基的配方 、制备:
牛肉膏蛋白胨琼脂培养基配方:牛肉膏 5g ,蛋白胨 5g ,Nacl12.5g ,葡萄糖 0.5g ,琼脂 18g ,水 1000ml ,
pH7.2 ～ 7.4 ,于 121.5℃灭菌 20min。将灭菌 、熔化后的培养基倒入已灭菌的培养皿中 ,制成平板 ,待冷
却凝固后作无菌检查 ,备用。
1.6 提取物水溶液的制备:
称取醇提物用无菌水配成 100mg/ml的原液 ,于 60℃恒温水浴加热 10min ,有少量不溶物为深褐色
沉淀并凝集成粘稠的块状 。取上清液作为原液 ,按徐淑云等的二倍稀释法[ 8]用无菌水配成1∶2 、1∶4 、1∶8
各浓度备用。
1.7 细菌悬液的制备:
菌种经3次活化后 ,用无菌生理盐水按范秀容等的十倍稀释法[ 9]配成菌悬液 。
各参试菌分别配成 10-6菌悬液 ,备用 。
金黄色葡萄球菌 91053 、志贺氏痢疾杆菌分别配成 10-3菌悬液 ,备用 。
1.8 实验方法:
取50ul已制备好的菌悬液用玻璃涂布器均匀涂布于固体培养基上。采用平板打洞法 。样品加药
量均为50ul。待药液充分吸收后 ,倒置于 37℃培养 16 ～ 18h或一周后 ,观察有无抑菌圈的产生 ,并用直
尺测量抑菌圈大小(mm),记录结果 ,求其平均值 。用无菌水作对照 。实验共设七个实验组 ,每三个平板
为一组 ,每组重复三次。
2 结果及讨论
2.1赤胫散醇提物水溶液对志贺氏痢疾杆菌的抑菌作用
2.1.1将 10-6的志贺氏痢疾杆菌菌液 50ul涂布于已制备好的平板上 ,打孔 ,采用药液浓度分别为原
液 、1∶2 ,每孔加药量均为 50ul ,培养时间为 18h时 ,实验结果如图 1。提取液对志贺氏痢疾杆菌有很强的
抑菌作用 ,已经无法正确测量抑菌圈大小。
2.2.2将 10-6的志贺氏痢疾杆菌菌液 50ul涂布于平板上 ,药液浓度分别为原液 、1∶2 、1∶4 ,每孔加药
量为 50ul ,培养时间为 1周时 ,实验结果如图 2。原液抑菌圈直径为 27mm , 1∶2 药液的抑菌圈直径为
20mm。1∶4药液的抑菌圈直径为 20mm 。
图 1 　两种浓度的药液对志贺氏痢疾杆菌的抑菌作用　　图 2 　三种浓度的药液对志贺氏痢疾杆菌的抑菌作用
　　　　　(左面 、上面为原液 ,右面 、下面为 1∶2 药液)　　　(上面 、左面均为原液 ,右面为 1∶2药液 ,下面为 1∶4 药液)
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2.2.3将 10-3的志贺氏痢疾杆菌菌液 50ul涂布于已制备好的平板上 ,打孔 ,每孔加药量均为 50ul
时 ,以无菌水作空白对照 ,培养时间为 16h时 ,实验结果如图 3。
图 3　不同浓度的提取物对志贺氏痢疾杆菌的抑菌作用
(上面为对照 ,左面为原液 ,下面为 1∶2 ,右下为 1∶4 ,右上为 1∶8)
原液的抑菌圈直径为 28mm;1∶2药液的抑菌圈直径为18mm;1∶4药液的抑菌圈直径为15mm;1∶8药
液的抑菌圈直径为 12mm 。不同浓度的提取液对志贺氏痢疾杆菌均有抑菌作用 ,且抑菌作用的强弱与药
液浓度成正相关 。
2.2 赤胫散醇提物水溶液对各参试菌的抑菌作用
将10-6的金黄色葡萄球菌(91118)菌液 、大肠杆菌菌液 50ul分别涂布于已制备好的平板上;将 10-3
的志贺氏痢疾杆菌菌液 、金黄色葡萄球菌(91053)菌液 50ul分别涂布于已制备好的平板上;打孔 ,每孔加
药量均为 50ul时 ,赤胫散醇提物水溶液对 4种细菌的抑菌作用 ,结果见表 1 ,提取物对金黄色葡萄球菌
没有抑菌作用 ,对大肠杆菌没有抑菌作用 ,对志贺氏痢疾杆菌有抑菌作用 ,且抑菌作用的强弱与药液浓
度成正相关。
表 1　　不同浓度赤胫散醇提物水溶液的抑菌效果
抑　菌　圈　直　径　(平均值 mm)
细菌名称 对照 原液(100mg/ml) 1∶2(50mg/ml) 1∶4(25mg/ml) 1∶8(12.5mg/ml)
金黄色葡萄球菌(91118)(菌液浓度 10-6) - - - - -
金黄色葡萄球菌(91053)(菌液浓度 10-3) - - - - -
志贺氏痢疾杆菌(菌液浓度 10-3) - 27 20.33 15.67 13.33
大 肠 杆 菌(菌液浓度 10-6) - - - - -
注:“ -”表示无抑菌圈出现 ,视为无抑菌作用 。
2.3　从上述实验结果看出 ,各对照实验均为“ -” ,表明实验已经排除了植物提取液外的其他因素
对参试细菌的影响 ,实验结果有效 。
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2.4　对参试的四种细菌 ,赤胫散醇提物水溶液仅对 G-志贺氏痢疾杆菌有抑菌作用 ,对 G-大肠杆
菌无抑菌作用 ,对G+金黄色葡萄球菌无抑菌作用。根据资料显示 ,赤胫散可用于治疗痢疾 ,本实验的
研究结果表明:赤胫散对引起肠道疾病的大肠杆菌却无抑制作用 ,而仅对志贺氏痢疾杆菌有较强的抑菌
作用。是由于两种细菌本身的细胞壁结构差异导致药液的穿透性有了不同 ,还是由于某些活性成分在
提取过程中有所丧失 ,而导致对大肠杆菌 、志贺氏痢疾杆菌的抑菌作用有了差异 ?这将有待于进一步的
研究 。
2.5　赤胫散醇提物各浓度水溶液对志贺氏痢疾杆菌菌均有抑菌作用 。赤胫散醇提物的实际浓度
分别为:原液为 100mg/ml 、1∶2为 50mg/ml 、1∶4为 25mg/ml 、1∶8为 12.5mg/ml。参照北京药品检验所提
供的常规抗生素药敏抑菌圈标准 ,抑菌圈在 15mm 以上为抑菌能力强 ,在 10-15mm 为抑菌能力较强 ,
10mm以下为抑菌能力弱 。赤胫散醇提物各浓度水溶液对志贺氏痢疾杆菌均有较强的抑菌作用。
2.6　蓼属植物主要含挥发油 、黄酮与黄酮苷 、萜类 、蒽醌 、甾类及苷类等多种化学成分[ 3] 。赤胫散
醇提物的水溶液中主要是亲水性物质 ,醇提物中有部分不溶于水的物质 ,经对醇提物中不溶于水的部分
做进一步的检测发现:对参试的四种细菌均无抑菌作用 。在上述物质中 ,是什么化学成分对志贺氏痢疾
杆菌有较强的抑菌作用? 赤胫散所含活性成份的研究正在进行中。
绿色无公害是未来医药的主调 ,蓼属植物具有抗微生物 、杀虫 、抗氧化 、抗肿瘤等多种生物活性[ 3] ,
探索蓼属植物的药理作用 ,对于研究与开发抗肿瘤 、抗衰老 、抗疲劳的新型植物源天然保健品 ,具有深远
的意义。
参考文献:
1 、傅立国等 ,中国高等植物(第四卷)[M] .青岛:青岛出版社 ,2000:498
2 、孙爱群 ,向红 ,左经会等 ,水城产蓼属植物分类及药用价值初步研究[ J] .六盘水师范高等专科学
校学报 ,2002 ,14(4):47-51
3 、巩忠福 ,杨国林 ,严作廷等 ,蓼属植物的化学成分与药理学活性研究进展[ J] .中草药 ,2002 , 33
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(责任编辑　胥献宇)
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