全 文 ：收稿日期:2006-03-07;　修订日期:2006-11-09
作者简介:冯　冲(1976 - ), 女(汉族), 新疆伊犁人 ,硕士学位 ,主要从事
新药研发及质量研究工作.
高效液相法测定慢支紫红丸中岩白菜素的含量
冯　冲 , 黄晓丹 , 秦春梅
(广州王老吉药业股份有限公司 , 广东 广州 　510450)
摘要:目的 建立了慢支紫红丸中岩白菜素的高效液相法 (HPLC)测定方法。方法 使用甲醇溶液加热回流提取岩白菜
素 , 采用 RP18 C18柱为固定相 , 甲醇-水(25∶75)为流动相 ,流速 1 m l /m in,检测波长 275 nm。结果 在 0. 053 5～ 0. 535 μg
范围内 , 岩白菜素与峰面积呈良好的线性关系 , r=0. 999 9,平均加样回收率为 98. 2%, RSD =2. 15%, n =9。结论 该方法
简便 、快速 、灵敏 、专属性好 ,是制剂质量控制的有效方法。
关键词:高效液相法;　慢支紫红丸;　岩白菜素
中图分类号:R284. 2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)02-0375-02
Determ ination of Bergenin inM anzh izihong P ills byHPLC
FENG Chong, HUANG X iao-dan, QIN Chun-M ei
(GuangzhouWang laoji Pharmaceutica lCompany Lim ited , Guangzhou 510405, China)
Abstract:Objective AnH PLC m ethod fo r determ ina tion o f bergen in in M anzhizihong P ills w as estab lished.M ethods Bergen in
w as ex tracted by m e thano l and w arm-up and reflux. An RP C18 co lumn w as used w ith the mobile phase o fm ethano l -w ater(25∶
75), a t the de tec tion wave leng th o f 275 nm and the flow ra te w as 1. 0m l /m in. Resu lts The linea r rangew as 0. 0535 ～ 0. 535 and
the average recove ry wa s 98. 2% (RSD 2. 15%). Conclusion The m e thod is rapid, conven ien.t
Key words:HPLC;　M anzh izihong P ills;　Be rgenin
　　慢支紫红丸由矮地茶 、红背叶根 、猪胆粉 、五指毛桃和山药组
成 , 具有健脾去湿 , 顺气化痰 , 消炎镇咳的功效 , 主要用于咳嗽痰
多 , 气促 ,慢性支气管炎等疾病的治疗 [ 1] 。本文采用 HPLC法对
该药中的岩白菜素进行了含量测定。精密度 、重复性均较好 ,结
果可靠 , 可作为该药质量标准的定量方法 [ 2 , 3] 。
1　仪器和试药
1. 1　仪器 W ate rs600液相色谱仪(W aters公司);Em pow er工作
站;W aters717自动进样器;柱温箱 , DAD2996检测器;Bp211-D型
电子天平(十万分之一 ,德国 Sarto rious公司)。
1. 2　试药 岩白菜素对照品(供含量测定用 , 批号:1532-200202
由中国药品生物制品检定所提供)。慢支紫红丸由广州王老吉
药业股份有限公司生产。甲醇为色谱纯 , 水为高纯水 , 缺矮地茶
阴性制剂自制。
2　方法与结果
2. 1　溶液配制
2. 1. 1　对照品溶液配制 精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒
重的岩白菜素对照品适量 , 用甲醇制成每毫升含有岩白菜素
0. 053 5 m g的对照品溶液。
2. 1. 2　供试品溶液配制 取重量差异下的本品 ,研细 ,取粉末约
0. 25 g,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入甲醇 25m l, 称定重
量 , 加热回流 1 h, 放冷 ,再称定重量 , 用甲醇补足减失的重量 ,摇
匀 , 滤过 ,取续滤液 , 即得。
2. 1. 3　阴性溶液配制 除去矮地茶 , 按照慢支紫红丸生产工艺制
成阴性对照样品 , 按供试品溶液的制备方法制成矮地茶阴性对照
溶液。
2. 2　最大吸收波长的选择 经 DAD紫外光谱扫描 , 在 275 nm处
有紫外最大吸收峰 , 与岩白菜素的紫外最大吸收峰一致 , 选择此
为检测波长。结果见图 1。
2. 3　色谱条件色谱柱 Symm e try shieldTM RP18柱 , 5 μm , 4. 6 mm×250. 0 mm;流动相:甲醇-水(25∶75)为流动相 ,流速为 1. 0 m l /
m in;柱温:30℃;检测波长:275 nm。理论塔板数不低于 1 500。
2. 4　线性关系考察 精密吸取上述对照品溶液 1, 2, 4, 5, 8, 10
μl,注入液相色谱仪中 ,测定峰面积 ,求标准曲线 、回归方程及相
关系数 ,以峰面积 Y对对照品量 X 进行回归分析 , 得回归方程 Y
=8. 86e+005X - 3. 48e+003,相关系数 r=0. 999 9, 表明岩白
菜素含量在 0. 053 5 ～ 0. 535μg范围内与峰面积呈良好的线性关
系。结果见图 2。
图 1　岩白菜素紫外光谱图
图 2　岩白菜素标准曲线图
2. 5　方法的专属性考察 在上述的色谱条件下 , 将供试品溶液
(慢支紫红丸)、岩白菜素对照品溶液 、矮地茶阴性对照液 、矮地
茶对照药材溶液 ,注入液相色谱仪中 , 得 H PLC图 , 结果显示阴性
对照无干扰。理论塔板数不低于 1 500。结果见图 3 ～ 5。
2. 6　方法精密度实验 依照 “ 2. 1”项下供试品溶液的制备方法 ,
制备供试品溶液 ,进行以下试验。连续进样 5次 , 每次 10 μl, 测
375
LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2007 VOL. 18 NO. 2 时珍国医国药 2007年第 18卷第 2期
得岩白菜素的含量 , 结果见表 1。
图 3　岩白菜素对照品溶液 HPLC
图 4　供试品 HPLC图
图 5　阴性对照液 HPLC图
表 1　方法精密度实验
样品号 峰面积 RSD(%)
1 180 521
2 178 220
3 179 292 0. 734 5
4 179 101
5 180 339
　 测定数据差异小 ,达到要求 。
2. 7　样品稳定性实验 采用上述供试品溶液 , 于第 0, 2, 4, 7和
10 h各进样 10 μl, 测定含量。结果见表 2。
表 2　方法稳定性实验
样品号 峰面积 RSD(%)
0 180 597
2 181 207
4 181 221 0. 428 9
7 182 001
10 179 925
　 结果显示 ,在 10 h内 , 样品稳定。
2. 8　方法重现性实验 分别取药品粉末 0. 25 g, 依照 “ 2. 1”项
下供试品溶液的制备方法 , 平行操作 6份 , 测定含量。结果见
表 3。
表 3　重现性实验
样品号 岩白菜素含量 C /mg g-1
平均含量
C /m g g-1
RSD
(%)
1 3. 784 0
2 3. 824 1
3 3. 910 4
4 3. 821 0 3. 808 2 0. 686 0
5 3. 720 4
6 3. 789 7
　　结果显示 ,重现性良好。
2. 9　加样回收率实验 取药品粉末 0. 25 g, 精密称定 , 共 9份 , 分
别加岩白菜素对照品(0. 038 0 m g /m l)25 m l, 照供试品溶液的制
备方法制备供试液 ,测定 , 计算回收率。结果见表 4。结果显示 ,
该方法加样回收率在 95% ～ 105%之间 ,符合《中国药典》要求。
表 4　加样回收实验结果
样品
号
供试品
重 m /g
含岩白菜
素 m /mg
对照品加
入量 m /mg
测得量
m /mg
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 0. 249 9 0. 950 5 0. 950 0 1. 870 1 96. 80
2 0. 255 8 0. 972 9 0. 950 0 1. 901 2 97. 72
3 0. 267 3 1. 016 7 0. 950 0 1. 932 1 96. 36
4 0. 256 5 0. 975 6 0. 950 0 1. 911 7 98. 54
5 0. 263 0 1. 000 2 0. 950 0 1. 921 5 96. 98 98. 20 2. 148 6
6 0. 243 3 0. 925 4 0. 950 0 1. 876 2 100. 08
7 0. 246 0 0. 935 6 0. 950 0 1. 840 2 95. 22
7 0. 246 0 0. 935 6 0. 950 0 1. 840 2 95. 22
9 0. 267 4 1. 017 0 0. 950 0 1. 983 7 101. 76
　　n =9
2. 10　成品中含量测定及限量规定 按本品成品的质量标准项下
含量测定方法 ,对 7批样品的含量进行测定。结果见表 5。
表 5　成品中岩白菜素的含量测定结果
批号 含量(%)
041209 3. 810 4
050109 3. 800 3
050301 3. 681 2
050302 3. 920 3
050709 3. 940 7
050921 3. 676 1
050922 3. 920 3
051022 3. 940 7
3　讨论
根据参考文献 , 岩白菜素易溶于甲醇 , 在水或乙醇中微
溶 [ 2] , 故选择甲醇作为本品的溶剂 , 以提取慢支紫红丸中的岩白
菜素。本品是一个复方制剂 ,由矮地茶等 5味中药组成 , 方中主
药矮地茶所含的岩白菜素有镇咳祛痰作用 [ 1] , 与该药的功效一
致 , 通过测定矮地茶中的有效成分岩白菜素含量可对该药进行质
量控制 , 本研究报道中的岩白菜素的含量测定方法简便可行 , 结
果可靠 , 亦可对含岩白菜素的中药材及制剂的岩白菜素含量测定
方法提供参考。
参考文献:
[ 1 ] 　周文枭 ,崔德斌. 高效液相色谱法测定抗痨胶囊中岩白菜素的含
量 [ J] .医药导报 , 2004, 23(10):777.
[ 2 ] 　潘　嬿 ,邓茂芳 ,田永华. HPLC法测定矽肺宁片中岩白菜素的含
量 [ J] .中国药品标准 , 2005, 6(2):22.
[ 3 ] 　李忠琼 ,张雯洁 ,马　昕 , 等.止泻胶囊中岩白菜素的 HPLC测定
[ J] .中国医药工业杂志, 2004, 35(3):170.
376
时珍国医国药 2007年第 18卷第 2期 LISH IZHEN MEDIC INE AND MATERIA M ED ICA RESEARCH 2007VOL. 18 NO. 2