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千斤拔属植物提取工艺及药理作用研究进展



全 文 :* 国家科技部第十九次中泰科技合作项目NO:19-508J
△广西中医药大学 (南宁530001)
▲内布拉斯加林肯大学 (美国,林肯68503)
◇西安市儿童医院 (西安710003)
◆通讯作者,柳州医学高等专科学校(柳州54005)
·文献综述·
千斤拔属植物提取工艺及药理作用研究进展*
陈 鹏 翁剑斌△ 殷 虎▲ 沈树虎△ 覃洪含△ 高 琦◇ 林 航 岳桂华△ 审校  秦海洸◆
遵义医药高等专科学校 (遵义563002)
 【中图分类号】 R285 【文献标识码】 A 【文章编号】 1000-7369(2013)02-0247-03
   千斤拔来源于豆科植物蔓性千斤拔 Moghania philip-
pinensis(Merr.et Rolfe)Li.、大 叶 千 斤 拔 M.macrophyla
(Wild.)O.Kuntze或绣毛千斤拔 M.ferruginea(Wal.ex
Benth.)Li.的干燥根。主产于广西和云南。我国产16种以及
1变种。千斤拔属植物在我国一直作为民族药及民间药被广泛
使用,其中有确切药用历史的就有6种。千斤拔性平味甘,具
有补气血,助阳道的作用,临床上主要用于治疗手足痹痛,腰部
风湿作痛,理跌打伤等,《广西中药志》介绍:“舒筋活血,祛风
湿,强筋骨,四肢酸软,跌打扭伤,阳黄疸[1],又治腰肌劳损,腹
胀,食欲不振,月经不调”[2]。饶伟文等[3]进行预试验分析并
采用依据文献的方法进行试管法和TLC预试法推测千斤拔属
植物中含有黄酮、酚类、鞣质、糖类、甾醇、生物碱和氨基酸类试
验均呈阳性反应。且近年研究发现,豆科千斤拔属植物中广泛
存在异黄酮类物质[4]。综合查阅近几年文献,发现关于千斤拔
提取工艺的研究主要有渗漉法、回流法、水蒸气蒸馏法、超声法
及其他提取方法;现代药理学研究表明,千斤拔属植物多具有
抗炎、抗病毒等作用,在医药领域的应用前景非常广阔。笔者
就近年来对该属植物的提取工艺、药理作用及临床应用等方面
研究成果进行综述。
1 千斤拔属植物提取工艺研究
1.1 渗漉法提取工艺研究 海莉等[5]以总生物碱的最大
吸光度值为指标,采用正交实验筛选千斤拔中生物碱提取方法
及工艺参数,表明最佳提取工艺为酸水渗漉提取,最佳提取工
艺参数是硫酸浓度为3%,渗漉时间为12h,流速为1mL·
min-1,能得到较高产率的生物碱类成分,符合工业化生产。
1.2 回流法提取工艺研究 任朝琴等[6]研究千斤拔多糖
的提取最佳工艺条件,其最佳提取工艺为:采用加热回流法,石
油醚(30~60℃)回流3h;滤渣用乙醚回流5h;滤渣用95%乙醇
回流5h,滤渣用18倍量提取3次,2h/次,提取液浓缩至10mL
加入乙醇后使溶液中乙醇的浓度约为90%,静置8h后抽滤,真
空干燥即得千斤拔多糖粗品。任朝琴等[7]采用正交试验筛选
千斤拔总黄酮的提取工艺。以芦丁含量为指标,其最佳工艺为
乙醇回流,最佳工艺参数为回流时间为3h,料液比为1∶14,乙
醇浓度为50%,提取2次。并考察了提取工艺的稳定性。此方
法简单,可行性好,稳定。
1.3 超声法提取工艺研究 李华等[8]通过单因素多水平
及正交试验考察超声-甲醇法提取其总黄酮的试验条件,以染
料木素作为对照品,通过比色法测定总黄酮的含量,高效液相
色谱验证结果,在85%甲醇,料液比1∶40,超声提取20min,提
取1次,采用染料木素为对照品测定总黄酮得率为4.98%。该
方法简单,易操作。邓雪阳等[9]首次运用试验设计优化提取总
酚酸。乙醇浓度,超声时间,超声温度和溶剂溶质液固比用ful
two-level factorial design同时进行优化筛选,乙醇浓度,超声时
间,超声温度用face-centered composite design进行响应面优
化。结果:优化超声提取总酚酸条件为乙醇浓度58.9%,超声
时间38min,超声温度47.2℃。在此条件下,总酚含量为40.
36mg·g-1。朱琳等[10]研究超声波辅助提取千斤拔多糖工艺,
通过单因素和正交试验对其进行优化,结果表明在最佳工艺为
提取温度70℃,超声时间30min,料液比1∶40,提取时间2h
时,多糖提取率为0.372%。陈帅[11]等采用采用单因素和正交
试验辅助超声波法提取千斤拔总黄酮工艺条件,在最佳条件为
乙醇浓度80%,提取工艺为25min,料液比为1∶20,提取次数
为2次时,总黄酮得率为3.00%。
1.4 水蒸气蒸馏法提取工艺研究 王小庆等[12]利用水
蒸气蒸馏法提取蔓性千斤拔挥发油,流出液用乙醚萃取3次,
合并及低温除尽乙醚,无水硫酸钠干燥,得淡黄色油状物0.
5mL,收率为0.5%,并用GC-MS进行成分分析测定,结合计算
机检索技术鉴定出38个化学成分。刘建华等[13]采用水蒸气
蒸馏法,从蔓性千斤拔的根茎中提取挥发油,得油状物0.5mL,
收率为0.02%,并采用气相色谱-质谱-计算机联用系统对挥发
油的化学组成进行了定性、定量研究,从提取出的60个成分中
分析、鉴定出39个成分。周菊峰等[14]用水蒸气蒸馏法得到的
蔓性千斤拔挥发油采用子窗口因子分析法(SFA)分辨重叠色
谱峰,依靠每一组分纯质谱在 NIST质谱库进行相似性检索而
定性分析,总体积积分法进行定量分析,共分辨出76个色谱
峰,鉴定出59个化学成分。
1.5 其他提取工艺方法研究 范贤等[15]分别采用水蒸
气蒸馏(SD)法、超声萃取水蒸气蒸馏(UESD)法、超临流体萃
取(SFE-CO2)法提取千斤拔的挥发油。实验结果表明:SD法、
UESD法和CO2-SEF法提取的挥发油的收率分别为0.03%,
0.08%和0.5%,SD法和UESD法提取的主要化学成分为萜烯
类的物质,而CO2-SEF法提取的主要化学成分是醇和酸类物
质。年晓莉等[16]利用正交实验对蔓性千斤拔总黄酮进行水提
取工艺优选,以浸膏得率和总黄酮含量为评价指标。结果显示
最佳水提工艺为以1∶30倍水量,于75℃条件下水提3h,共提
取3次,该工艺简便,收率高,并且指出水提时间对蔓性千斤拔
总黄酮的提取有较大影响。
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2 药理作用及临床应用研究
2.1 药理作用 目前,从文献已知千斤拔主要药理作用
有抑菌、镇痛和抗炎、抗雌激素活性、保护神经和保护血脑屏障
等作用。其被广泛应用于妇科、风湿痹痛等类型的中成药生
产,如妇科千金片、千斤拔饮、金鸡胶囊(冲剂)、补血调经片和
壮腰健肾丸等中成药。跌打损伤、乳房疾病、牙痛、妇科病、慢
性肾炎、病后气虚、食欲不振,均收到了良好的效果[17]。我国
民间和临床采用千斤拔治疗疾病的有效单验方,用于风湿骨
疼、毒蛇咬伤、急性咽喉炎、各种肿毒、妇女白带过多、产后关节
疼痛等症的治疗[18]。再有,病后及老年人下肢软弱无力、白细
胞减少症、急性乳腺炎、软组织损伤及感染,千斤拔治疗效果
佳[19]。
2.1.1 镇痛、抗炎作用 陈一等[20]采用蔓性千斤拔乙醇
提取物对小鼠进行抗扭体反应和热板试验,研究表明千斤拔乙
醇提取物显著抑制小鼠醋酸性“扭体”反应;在热板法中显著提
高小鼠痛阈,提示具有一定的镇痛作用。试验又采用蔓性千斤
拔乙醇提取物对小鼠足肿胀的影响和小鼠巴豆油耳部水肿的
影响来证明其抗炎作用。王俊芳等[21]探讨千斤拔抗炎的可能
机制,同时探讨千斤拔、芬必得与时间之间是否具有交互效应。
结果显示千斤拔具有修复损伤神经的作用,可能是通过抗炎作
用实现的,同时降低P物质含量可能是其抗炎的机制之一。且
两者具有正交互作用(联合作用)。
2.1.2 对周围神经损伤的保护作用 袁建新等[22]以
Wistar大鼠坐骨神经挤压为动物模型,用千斤拔给 Wistar大
鼠灌胃,于周围神经损伤后的不同时期检测感觉神经传导速度
(SCV)、运动神经远段端潜伏期(ML)、坐骨神经功能指数
(SFI)。结果千斤拔能促进 Wistar大鼠坐骨神经损伤后有髓神
经再生,能促进感觉、运动纤维的恢复。
2.1.3 对脑组织及血脑屏障的保护作用 赵节绪等[23]
在家兔口服千斤拔浸出液后,采用视神经孔注入无肝素化自身
动脉血的方法建立急性蛛网膜下腔出血(SAH)模型,造成家兔
血脑屏障损害,结果表明千斤拔对实验组家兔脑波频率和振幅
的恢复有明显的促进作用,显微镜下可见脑组织也有极少量荧
光现象。
2.1.4 抑菌作用 王明煜[24]用蔓性千斤拔提取物对大
肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及白色念珠菌等四
种临床常见致病菌的抑制作用,阳性对照药物妇炎康颗粒。结
果表明,与阳性对照比较,蔓性千斤拔两种提取物对上述四种
致病菌均有较好的抑制作用。
2.1.5 抗血栓作用 张明秋等[25]研究探索了千斤拔黄
酮抑制血栓形成及机制,结果表明千斤拔黄酮高剂量组血小板
聚集率明显降低。说明千斤拔黄酮具有抑制血栓形成作用,其
机制为主要抑制血小板活化和促进纤溶作用。
2.1.6 类雌激素和抗雌激素活性作用 韦丽君等[26]研
究壮药千斤拔饮对去卵巢大鼠免疫内分泌的影响。观察各组
大鼠血清E2、FSH、LH及IL-2的变化、子宫重量及子宫组织
学改变。壮药千斤拔饮高剂量组能够明显增加去势大鼠的子
宫重量指数,但子宫内膜并无明显增厚;明显升高去势大鼠血
清E2、IL-2水平,降低去势大鼠血清FSH、LH的水平。日本
学者[27]曾对千斤拔的提取物进行雌激素活性指导分离,从中
分离得到几个活性类黄酮化合物,其中8-(1,1二甲烯丙基)-染
料木黄酮活性最强,连续给药14d对卵巢切除大鼠的子宫亦具
有明显的增重作用。抗雌激素活性试验显示,5,7,3’,4’-四羟
基-6,8-异戊二烯基异黄酮活性最强。
2.1.7 其他作用 曾春兰等[28]观察大叶千斤拔的抗炎
镇痛、抗肝损伤、抗凝血、抗疲劳作用及毒性情况,结果说明大
叶千斤拔能减轻小鼠耳廓肿胀,减少小鼠扭体次数;降低肝损
伤小鼠转氨酶活性,延长凝血时间和小鼠游泳时间。急性毒性
试验表明,大叶千斤拔的小鼠最大给药量为160.1g生药/kg,
药物毒性很小。祁晓晨等[29]观察大叶千斤拔水煮液对纳洛酮
引起的吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断性收缩作用及它对乙酰胆
碱引起的正常离体豚鼠回肠平滑肌收缩的影响。结果显示,大
叶千斤拔对以上两种情况均有抑制作用。饶伟文等[3]利用昆
明小白鼠,对蔓性千斤拔、大叶千斤拔、宽叶千斤拔的水煎液做
了急性毒性与药效学比较,结果表明,3种千斤拔均属无毒类;
与蒸馏水对照组相比,除镇痛、抗炎作用外,免疫增强作用、抗
疲劳、抗缺氧等指标均有增强趋向。付鑫等[30]建立高脂血症
大鼠模型,用千斤拔总黄酮连续灌胃4周,测定血清中 TC、
TG、HDL2c、LDL2c、NO含量及NOS活性,结果表明TC、TG、
LDL2c含量降低,NO含量增加,NOS活性升高,即能调节高脂
血症大鼠血脂代谢,纠正NO代谢紊乱。
2.2 临床应用 在傣医中应用具有调理土塔,消食化积,
收敛止泻的作用。大叶千斤拔根20g煎服,主要用于治疗急慢
性腹泻、腹痛、不思饮食、消化不良;25g煎服治疗产后体弱多病
和月经不调等[31]。韦丽君等[32]探讨壮药千斤拔饮治疗90例
更年期综合征观察疗效。治疗组60例服千斤拔饮,治疗3个
月,愈显率为81.66%,有效率为100%。结论是千斤拔饮能有
效降低血中卵泡雌激素(FSH)浓度,提高雌二醇(E2)水平,改
善更年期症状。向自军[33]用妇科千金片(金樱根、千金拔、穿
心莲、当归、鸡血藤、党参等)治疗慢性盆腔炎102例,千斤拔清
热凉血、解毒除湿、通络,并设对照组观察,治疗组显效50例,
有效25例,总有效率73.5%。赵连皓等[34]用妇科千金片治疗
慢性前列腺炎50例,结果总有效率95%。提示妇科用药治疗
男性病,可开辟新思路。陆璇霖[35]运用千斤拔、黄芪、桂枝等
组成的芪桂千斤拔汤内服外用治疗痹症80例,取得满意效果,
14例(17.5%)治愈,关节疼痛消失,58例(70.25%)显效,关节
疼痛减轻,复发时间较原来延长;8例(10%)无效,服药2个疗
程症状改善不明显。总有效率为90%。姜颖等[36]运用金鸡胶
囊治疗盆腔炎80例,治愈率100%,治疗简便,疗程短,疗效可
靠。梁晶[37]采用金鸡冲剂配合外用康妇消炎栓法治疗慢性盆
腔炎73例,取得了满意的效果,总有效率达97.3%。
3 结语与展望
近年来,研究者们在其化学成分的提取分离等方面获得了
肯定的成果,综合文献大都表明了其主要有效成分是黄酮类和
多糖,在药效学方面证明千斤拔具有镇痛、抗炎、抑菌及神经功
能恢复等作用,并提示具有免疫作用。在以后工作中应该进一
步应用现代化手段深入神经功能恢复和免疫调节方面研究,将
不同的工艺设计及提取方法有机结合起来,确定最佳提取工艺
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条件,并联合色谱技术建立药材主要成分的 HPLC、HPLC-MS
及GC-MS指纹图谱,考察活性部位指纹图谱的特征峰与药效
的关系,用“量化的化学特征数据”建立“谱-效”关系,从药效角
度控制追踪千斤拔化学成分的药物活性,以便使该属植物得到
更好的开发与利用,这些都有待今后更进一步的深入研究。相
信随着研究的不断深入,进行全成分的高效分析、检测,提高其
提取效率,推进中药千斤拔研究现代化进程。
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(收稿2012-09-20;修回2012-11-10)
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