全 文 ：中南药学 2015 年 6 月 第 13 卷 第 6 期　Central South Pharmacy. June 2015, Vol. 13 No. 6
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（收稿日期：2015-01-03；修回日期：2015-02-20）
基金项目：九芝堂股份有限公司博士后科研资助项目；湖南省中医药管理局项目（编号：201320）。
作者简介：杨先国，男，讲师，博士，主要从事中药质量与资源研究，Tel：（0731）28529074，E-mail：yxg656@163.com
不同品种紫珠属药材中毛蕊花糖苷、木犀草素的
含量比较研究
杨先国 1，谷陟欣 2，颜冬兰 2，于定荣 3（1.湖南中医药高等专科学校，湖南 株洲 412012；2.九芝堂股份有限公司，
长沙 410021；3.中国中医科学院中药研究所，北京 100700）
摘要：目的　测定并比较紫珠属 6种紫珠药材中毛蕊花糖苷和木犀草素含量。方法　采用 Agilent ZORBAX
SB-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）色谱柱，乙腈 -0.5 %冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱，流速为 1.0 mL·min－ 1，
检测波长为 330 nm，柱温 25 ℃。结果　 6种紫珠中，广东紫珠与尖尾枫中毛蕊花糖苷的含量较高，分别达
到 69.83、36.26 mg·g－ 1，而枇杷叶紫珠、裸花紫珠中含量次之，大叶紫珠与杜虹花中的含量最低；木犀草
素的含量以裸花紫珠、大叶紫珠、尖尾枫与广东紫珠中的含量较高，含量范围为 11.10～ 133.95 μg·g－ 1，
而枇杷叶紫珠、杜虹花中的含量则较低。对广东紫珠的采收季节考察表明以 8月中旬二者含量较高。
结论　6种紫珠属药材中的毛蕊花糖苷与木犀草素的含量有明显的差异，在应用中不宜混用，本研究为紫珠
属药材资源的合理利用奠定基础。
关键词：紫珠属；毛蕊花糖苷；木犀草素；高效液相色谱法；质量评价
中图分类号：R917　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2015)06-0641-04
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2015.06.022
Content of verbascoside and luteolin in different varieties
of Callicarpa Linn.
YANG Xian-guo1, GU Zhi-xin2, YAN Dong-lan2, YU Ding-rong3 (1. Hunan Traditional Chinese Medical College,
Zhuzhou Hunan 412012; 2. Jiuzhitang Co., Ltd, Changsha 410021; 3. Institute of Chinese Materia Medica,
China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700)
Abstract: Objective To determine the content of verbascoside and luteolin in Callicarpa Linn. by HPLC. Methods
ZORBAX SB-C18 column (4.6 mm×150 mm, 5 μm) was used with gradient elution with methylcyanides-0.5%
glacial acetic acid. The fl ow rate was 1 mL·min －1. The detection wavelength was 330 nm, and column temperature
was 25℃. Results The contents of verbascoside in the Callicarpa kwangtungensis and Callicarpa longissima
were relatively high, reaching 69.83 mg·g －1 and 36.26 mg·g －1 respectively, followed by Callicarpa kochiana and
Callicarpa nudifl ora, and the lowest in Callicarpa macrophylla and Callicarpa formosana. The content of luteolin in
Callicarpa nudifl ora, Callicarpa macrophylla, Callicarpa longissima and Callicarpa kwangtungensis were relatively
high at 11.10－133.95 μg·g－1，the lowest was Callicarpa kochiana and Callicarpa formosana. The content of active
ingredients of Callicarpa kwangtungensis reached the peak in the middle of August, which was the best harvest
season. Conclusion The content of verbascoside and luteolin in 6 Callicarpa species is signifi cantly different and so
they are not suggested for mixture or substitution of one another in clinical practice. The study lays a foundation for
proper use of Callicarpa Linn. resources.
Key words: Callicarpa Linn.; verbascoside; luteolin; HPLC; quality evaluation
Central South Pharmacy. June 2015, Vol. 13 No. 6　中南药学 2015 年 6 月 第 13 卷 第 6 期
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　　紫珠来源于马鞭草科紫珠属（Callicarpa Linn.）中药，
我国有紫珠属植物 46种，主要分布在长江以南的广大地
区，其中约有 30多种紫珠药材可以作为药用，入药部位
为茎叶，具有活血、止血、清热、解毒等功效，主要用
于治疗吐血、咳血、便血、崩漏以及创伤出血等 [1-2]。
　　紫珠作为一种重要的中药资源，在我国分布广泛。
目前，中药制药与临床使用过程中，较常用的紫珠主要
有广东紫珠、裸花紫珠、大叶紫珠、枇杷叶紫珠等，由
于紫珠属植物叶及枝均具有止血、解毒等功效，且原植
物的药材性状极其相似，在市场流通及临床应用过程中
常常混用，给紫珠药材的用药安全与合理利用产生影响。
紫珠中的化学成分较复杂，文献研究表明，黄酮类成分
为主要抗炎、止血活性成分 [3-5]，紫珠的质量控制主要检
测黄酮类成分如毛蕊花糖苷与木犀草素 [6-8]等。因此，为
了更好地利用紫珠药材资源，本试验采用高效液相色谱
法，对市场流通中较常见的 6种紫珠药材进行含量测定，
以期为紫珠药材的安全、合理利用提供依据。
1　材料
1.1　仪器
　　Agilent1260型高效液相色谱仪（美国 Agilent公司，
配备四元低压混合泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵
列检测器），电子分析天平（德国赛多利斯），Milli-Q
超纯水机（美国Milli-pore公司）。
1.2　试药
　　毛蕊花糖苷、木犀草素对照品（四川维克奇生物科
技公司，纯度＞ 98%），乙腈为色谱级，其他试剂均为
分析纯，水为去离子纯化水，所有供试品进样前均用 0.45
μm微孔滤膜过滤。紫珠药材样品均自采集，经湖南中医
药大学刘塔斯教授鉴定，样品来源见表 2。
2　方法与结果
2.1　对照品溶液的制备
　　分别取毛蕊花糖苷、木犀草素对照品适量，分别加
75%乙醇溶解，配制成含毛蕊花糖苷、木犀草素含量分
别为 0.124、4.7 μg·mL－ 1的混合对照品溶液。
2.2　供试品溶液的制备 [9]
　　精密称取紫珠粉末 0.6 g，置 100 mL圆底烧瓶中，
用 40 mL 75%乙醇回流提取 1 h，过滤，滤液加 75%乙
醇定容至 50 mL，摇匀，进样分析前用 0.45 μm微孔滤膜
过滤，取续滤液即得供试品试液。
2.3　色谱条件
　　色谱柱为 ZORBAX SB- C18柱（4.6 mm×150 mm，
5 μm）；流动相 A为乙腈 B为 0.5%冰醋酸水溶液，梯
度 洗 脱，0 ～ 20 min，13% ～ 17%A；20 ～ 35 min，
17%～ 22%A；35～ 50 min，22%～ 35%A；流速：1.0
mL·min－ 1；检测波长：330 nm；注温为 25 ℃；进样量：
10 μL。对照品及样品色谱图见图 1。
2.4　标准曲线的制备
　　精密量取 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL的混合对照品储
备液，加 75%乙醇至 10 mL量瓶中，摇匀后定容。分别
取上述溶液 10 μL进样测定，以峰面积（y）为纵坐标，以
样品的量（x）为横坐标，绘制标准曲线，分别得回归方
程：y＝ 85.19x＋ 4.096，r＝ 0.9990；y＝ 18.53x－ 2.594，
r＝ 0.9989。结果表明，毛蕊花糖苷、木犀草素分别在
图 1 对照品及紫珠样品的 HPLC图谱
Fig 1 HPLC chromatogram of control and sample
A.对照品（control）；B.样品（sample）；1.毛蕊花糖苷（verbascoside）；
2.木犀草素（luteolin）
0.124～ 0.62、4.7～ 23.5 ng内与峰面积线性关系良好。
2.5　精密度试验
　　精密量取混合对照品溶液，在“2.3”项色谱条件
下，连续进样 5次，测定毛蕊花糖苷与木犀草素峰面积。
结果毛蕊花糖苷峰面积 RSD为 0.85%，木犀草素峰面积
RSD为 1.1%，表明仪器精密度良好。
2.6　稳定性试验
　　取同一紫珠药材供试品溶液在在“2.3”项色谱条件下，
于 0、2、4、6、8、12 h进样测定，按“2.3”项下色谱条
件测定，考察其稳定性。毛蕊花糖苷峰面积 RSD为 1.5%、
木犀草素峰面积 RSD为 1.4%，表明供试品溶液在 12 h内
稳定。
2.7　重复性试验
　　取 2号紫珠样品，按“2.2”项下方法制备 6份供
试品溶液，按“2.3”项下色谱条件进行测定，计算毛
蕊花糖苷与木犀草素的含量，供试品中毛蕊花糖苷含量
为 11.98 mg·g－ 1，RSD为 1.1%；木犀草素的含量为
26.57 μg·g－ 1，RSD为 0.70%。结果表明上述方法重复
性良好。
2.8　加样回收试验
　　取 6份已知含量的同一批次广东紫珠（序号 2）药材
样品 0.3 g，分别加入毛蕊花糖苷对照品 3.6 mg、木犀草
素对照品 8.4 μg溶液，照“2.2”项下方法制备供试品溶液，
测定，计算回收率，结果见表 1。
2.9　样品测定
　　将不同批号的紫珠样品，按“2.2”项下方法制备成
供试品溶液，照“2.3”项下色谱条件测定，每份样品测
定 3次，计算平均值，测定结果见表 2。
3　讨论
3.1　提取方式的选择
　　考察了加热回流法、超声提取法 2种方法，结果表明，
以加热回流提取法效果较好，可能由于大叶紫珠、裸花
紫珠等药材中有大量的茸毛，影响提取过程。本试验中，
参考相关文献中采用的提取溶剂 [10-11]，考察了 30%甲醇、
50%甲醇、70%甲醇、甲醇等溶剂，结果，以 70%甲醇
回流提取效率较高，故采用 70%甲醇回流提取。
3.2　含量测定结果
　　6种紫珠药材中，大叶紫珠与杜虹花中毛蕊花糖苷的
含量极低，尖尾枫、广东紫珠、裸花紫珠、枇杷叶紫珠
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表 1 加样回收试验结果 (n＝ 6)
Tab 1 Recovery (n＝ 6)
成分
（composition）
取样量（sample
weight）/g
样品中含量（sample
content）/μg
加入量（added
amount）/μg
测得量（detected
amount）/μg
回收率
（recovery）/%
平均回收率
（average recovery）/%
RSD
/%
毛蕊花糖苷 0.3012 3600 3600 7320 100.3 99.7 2.5
0.3125 3740 3600 7250 97.5
0.3056 3650 3600 7310 101.7
0.3047 3640 3600 7160 97.8
0.3061 3660 3600 7280 100.6
0.3031 3630 3600 7140 97.5
木犀草素 0.3012 7.95 8.4 16.42 100.8 100.3 1.8
0.3125 8.25 8.4 16.47 97.9
0.3056 8.07 8.4 16.55 101.0
0.3047 8.04 8.4 16.53 101.1
0.3061 8.08 8.4 16.35 98.5
0.3031 8.00 8.4 16.62 102.6
表 2 紫珠样品毛蕊花糖苷、木犀草素含量测定结果 (n＝ 3)
Tab 2 Determination of verbascoside and luteolin in Callicarpa samples (n＝ 3)
序号
（No.）
样品
（sample）
药材来源
（source）
采样时间
（sampling time）
毛蕊花糖苷
（verbascoside）/mg·g－ 1
木犀草素
（luteolin）/μg·g－ 1
1 广东紫珠 湖南株洲 2014.04.15 9.73 20.12
2 广东紫珠 湖南株洲 2014.04.25 11.96 26.40
3 广东紫珠 湖南株洲 2014.05.05 15.94 67.38
4 广东紫珠 湖南株洲 2014.05.25 9.83 56.85
5 广东紫珠 湖南株洲 2014.06.10 9.05 14.77
6 广东紫珠 湖南株洲 2014.06.25 6.99 11.10
7 广东紫珠 湖南株洲 2014.08.15 69.83 40.76
8 广东紫珠 湖南株洲 2014.09.01 19.71 65.78
9 广东紫珠 湖南株洲 2013.11.20 18.08 63.68
10 广东紫珠 江西芦溪 2012.10 3.57 17.97
11 广东紫珠 贵州台江 2012.01 1.02 66.18
12 广东紫珠 湖南会同 2012.11 1.85 27.24
13 广东紫珠 江西宜春 2012.09 0.03 2.24
14 枇杷叶紫珠 广东广州 2013.07 2.08 0.00
15 尖尾枫 广东广州 2013.05 36.26 60.81
16 大叶紫珠 广东广州 2013.07 0.43 133.95
17 大叶紫珠 广东广州 2013.10 0.04 12.93
18 杜虹花 广东广州 2013.10 0.08 12.72
19 杜虹花 广东广州 2013.10 0.18 29.13
20 裸花紫珠 海南五指山 2013.11 2.02 128.32
21 裸花紫珠 海南五指山 2013.11 4.00 102.11
22 裸花紫珠 广西 2012.06 1.70 137.36
药材中的毛蕊花糖苷的含量较高。通对广东紫珠不同采
收期药材中毛蕊花糖苷的含量分析表明，不同采收季节
广东紫珠叶的含量差异较大，其中以 8月中旬达到高峰
期 [12-13]，该季节应为湖南地区广东紫珠药材的最佳采收
期。木犀草素的含量测定结果表明，枇杷叶紫珠与杜虹
花中的含量较低，而大叶紫珠、裸花紫珠、尖尾枫与广
东紫珠中的含量较高，且广东紫珠中木犀草素的含量受
季节的影响变化较大 [14]。通过对湖南、江西、贵州 3地
不同地区广东紫珠药材含量分析表明，不同产地药材中
的含量变化较大。
3.3　结果
　　紫珠属的不同紫珠药材中活性成分的含量差异较大，
因此，在临床应用过程中不应混用。同时，为了安全、充分、
合理地利用紫珠属药材资源，需要对不同来源的紫珠药
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材的内在质量进行综合评价，并对不同产区、不同采收
季节开展系统研究，特别是不同产地的中药材，其有效
成分的含量差异较大。本研究为紫珠属药材资源的合理
应用提供一定依据。
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（收稿日期：2015-01-04；修回日期：2015-02-10）
高效液相色谱法检测盐酸厄洛替尼片中有关物质
李昌亮 1，2，狄斌 2*，马晓宁 1，戴波 3（1. 湖南省食品药品检验研究院，长沙 410001；2. 中国药科大学，南京
210009；3. 湖南省食品药品职业学院，长沙 410208）
摘要：目的　建立检测盐酸厄洛替尼片中有关物质的高效液相色谱法。方法　采用资生堂MG C 18色谱柱（250
mm×4.6 mm，5 μm）；流动相 A为 0.05 mol·L－ 1磷酸二氢钾溶液（用磷酸调 pH至 3.0）-甲醇 -乙腈（56 ：
22 ：22），流动相 B为甲醇 -乙腈 -水（45 ：45 ：10），梯度洗脱，流速 1.0 mL·min－ 1；检测波长为
247 nm。结果　在调整后的流动体系下，厄洛替尼峰与相邻杂质峰达到有效分离；样品溶液室温放置 12 h，
峰面积无明显变化，溶液稳定性较好；各杂质的回收率在 99.4%～ 102.4%。结论　该方法准确、可靠，重
现性好，可用于该药品的质量控制。
关键词 :盐酸厄洛替尼片；有关物质；高效液相色谱法
中图分类号：R917　　　　文献标识码：A　　　　文章编号：1672-2981(2015)06-0644-04
doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2015.06.023
HPLC determination of related substances in Erlotinib
hydrochloride tablets
LI Chang-liang1, 2, DI Bin2*, MA Xiao-ning1, DAI Bo3 (1. Hunan Institute for Food and Drug Control, Changsha
410001; 2. China Pharmaceutical University, Nanjing 210009; 3. Hunan Food and Drug Vocational College,
Changsha 410208)
Abstract: Objective To develop an HPLC method to determine the relevant substances in Erlotinib hydrochloride
tablets. Methods The separation was performed on CAPCELL PAK MG C 18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm); 0.05
mol·L － 1 potassium dihydrogen phosphate (adjusting the pH to 3.0 with phosphoric acid)-methanol-acetonitrile
(56 ：22 ：22) as the mobile phase A and methanol-acetonitrile-water (45 ：45 ：10) was used as mobile phase
B, gradient elution, The fl ow-rate was 1 mL·min － 1. The detection wavelength was 247 nm. Results Erlotinib
作者简介：李昌亮，男，副主任药师，主要从事药品检验工作，Tel：15973162183，E-mail：21405563@qq.com *通讯作者：狄斌，男，
教授，主要从事新药研究与开发工作，Tel：（025）83301606， E-mail：dibin@cpu.edu.cn