全 文 :收稿日期:2010-01-21
作者简介:黄平 ,男(1953-),研究员 ,从事中草药化学及质量标准
化研究。 E-mail:hping1208@yahoo.com.cn
基金项目:桂科攻 0424008-2A
相思子属三种药材中的氨基酸分析比较
黄 平 ,莫建光 2
(1.广西中医药研究院 ,南宁 530022;2.广西分析测试研究中心 ,南宁 530022)
摘要:利用全自动氨基酸分析仪和高效液相色谱仪分析比较相思子属三种药材中氨基酸成分及含量。结果 9个样品都
检测出 17种氨基酸和 2种色氨酸衍生物。结论:不同样品中的氨基酸含量有所差异 , 但其中门冬氨酸 、谷氨酸 、亮氨酸和赖
氨酸的含量相对较高 。
关键词:相思子;广东相思子;毛相思子;氨基酸
中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:1006-8376(2010)02-0035-03
豆科相思子属植物相思子(Abrusprecatorius)、
广东相思子(A.cantoniensis)、毛相思子(A.molis)
主要产于广东 、广西 ,在民间都被用来作为能清热解
毒治疗肝炎的药材[ 1] ,除配方用药外 ,还用于煲汤 、
煮茶等保健食疗 。现代化学研究表明 ,这三种植物
中含生物碱 、黄酮 、三萜和甾醇等化合物 ,每种药材
所含的成分在化学结构上有一定差异 。为进一步探
讨这些药材治疗肝炎作用的物质基础 ,笔者利用氨
基酸分析仪和高效液相色谱仪对 9个样品所含氨基
酸和色氨酸衍生物进行了分析 。
1 材料与方法
1.1 材料采集
所用相思子属的 9个样品分别采购自广西玉
林 、南宁 、钦州及广东珠海市 ,经广西中医药研究院
中药室方鼎研究员鉴定品种分别为相思子 (Abrus
precatorius)除去果荚后的茎叶 、广东相思子 (A.
cantoniensis)和毛相思子(A.molis)除去果荚后的
全草。
1.2 仪器与试剂
L-8800全自动氨基酸分析仪(日本日立公司)
以及 WindowsNT色谱操作系统;1200高效液相色
谱仪包括二极管阵列检测器 、 Chemstation色谱工作
站(美国安捷伦公司);KQ5200超声振荡器 ,江苏省
昆山市超声仪器有限公司产;B2200S超声波清洗
器 ,上海必能信超声有限责任公司。对照品氨基酸
混合标准溶液 ,日本日立公司 。N-甲基色氨酸(相
思子碱 , abrine)对照品 ,美国 SIGMA-ALDRICH公
司。 N-三甲基色氨酸(下箴刺桐碱 ,海帕刺桐碱 ,
hypaphorine)对照品(纯度﹥ 98%,广西中医药研究
院自制 , 经1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HMBC和
MS鉴定结构)。
1.3 氨基酸分析
1.3.1样品制备
将相思子属三种药材分别于 65℃干燥至恒重
后进行常规酸水解处理 。取药材粗粉 0.4g,精密称
定 ,置安瓿瓶中 ,精确加入 6 mol· L-1盐酸溶液 20
mL,抽真空后封口 ,置 110℃烘箱内水解 24 h。取出
冷却 ,打开安瓿瓶 ,滤过 ,精密取滤液 2mL,置 100℃
水浴上蒸干。用 0.02 mol· L-1盐酸溶液定容至 25
mL,过 0.45 μm微孔滤膜 ,取续滤液上机测定 。
1.3.2样品测定
离子交换树脂分析柱(4.6 mm×60 mm, 3μm
),缓冲液流量 0.4 ml·min-1 ,茚三酮流量 0.3ml·
min-1 ,取氨基酸混合标准溶液和样品溶液各 20
μL,分别注入氨基酸分析仪进行测定。
1.4 色氨酸衍生物的测定
1.4.1样品制备
根据文献 [ 2]精密称取对照品 N-甲基色氨酸
和 N-三甲基色氨酸对照品各 5.5 mg,置于 50 mL
量瓶中 ,加流动相溶解 ,定容 ,摇匀 ,制成每 1 mL含
N-甲基色氨酸和 N-三甲基色氨酸各 0.11 mg的
对照品混合溶液。将相思子属三种药材分别于 65℃
干燥至恒重后取药材粉末 1.0 g,精密称定 ,置锥形
瓶中 ,加流动相 50mL,称定重量。浸泡过夜 。超声
处理(80 w, 50kHz)30 min,放冷 ,再称定重量 ,用流
动相补足减失的重量 ,摇匀 ,用注射器取上清液 ,经
0.45 μm微孔滤膜过滤 ,取续滤液上机测定。
1.4.2样品测定
氨基酸和生物资源 2010, 32(2):35~ 37
AminoAcids&BioticResources
DOI :10.14188/j .ajsh.2010.02.016
色谱柱为 LichrospherC18(250mm×4.6mm, 5
μm),流动相为水 -甲醇 -乙腈 -冰醋酸 -三乙胺
(82:13:5:0.2:0.3),临用前经过滤 、超声脱气处
理;流速为:1.0 ml· min-1 , 紫外检测波长为 220
nm;柱温为室温;取对照品混合溶液和样品溶液各
10 μL,分别注入液相色谱仪进行测定。
2 结果与分析
相思子属三种药材中的 17种氨基酸及 2种色
氨酸衍生物的质量分数测定结果见表 1。
三种药材中所含氨基酸成分的种类相同 ,但质
量分数有差异 。同种药材因产地不同 ,每种氨基酸
质量分数也不相同。常见 17种氨基酸中质量分数
相对较高的有门冬氨酸 、谷氨酸 、亮氨酸和赖氨酸 ,
质量分数最低的是胱氨酸。
表 1 相思子属三种药材中的氨基酸分析结果 /%
样品名称 相思子(玉林)
相思子
(南宁)
相思子
(钦州)
广东相思子
(珠海)
广东相思子
(钦州)
广东相思子
(南宁)
毛相思子
(珠海)
毛相思子
(玉林)
毛相思子
(南宁)
门冬氨酸 0.92 0.78 0.46 0.46 0.91 0.64 0.80 0.47 0.72
苏氨酸 0.33 0.34 0.22 0.32 0.44 0.32 0.39 0.23 0.33
丝氨酸 0.34 0.35 0.31 0.36 0.48 0.37 0.42 0.28 0.38
谷氨酸 0.82 0.88 0.55 0.61 0.76 0.66 0.90 0.51 0.76
脯氨酸 0.39 0.42 0.32 0.40 0.41 0.50 0.49 0.32 0.51
甘氨酸 0.38 0.40 0.21 0.28 0.32 0.29 0.44 0.24 0.33
丙氨酸 0.38 0.39 0.22 0.30 0.37 0.32 0.44 0.25 0.34
胱氨酸 0.02 0.02 0.01 0.02 0.01 0.01 0.02 0.01 0.02
缬氨酸 0.40 0.42 0.25 0.35 0.41 0.36 0.49 0.28 0.40
蛋氨酸 0.03 0.04 0.02 0.04 0.03 0.07 0.05 0.02 0.04
异亮氨酸 0.33 0.35 0.19 0.27 0.32 0.28 0.39 0.21 0.30
亮氨酸 0.55 0.57 0.31 0.47 0.56 0.47 0.66 0.36 0.50
酪氨酸 0.16 0.16 0.14 0.18 0.18 0.17 0.27 0.14 0.19
苯丙氨酸 0.34 0.35 0.19 0.29 0.33 0.29 0.40 0.22 0.32
赖氨酸 0.50 0.49 0.35 0.40 0.42 0.35 0.55 0.34 0.44
组氨酸 0.19 0.16 0.18 0.19 0.20 0.18 0.21 0.16 0.20
精氨酸 0.30 0.30 0.16 0.21 0.37 0.26 0.34 0.19 0.26
N-甲基
色氨酸 0.53×10 -3 0.20×10-3 1.55×10-3 0.29×10-3 0.40×10-3 0.20×10 -3 0.16×10-3 0.13×10-3 0.16×10-3
N-三甲基
色氨酸 0.25×10 -3 0.10×10-3 0.15×10-3 0.09×10-3 0.42×10-3 0.17×10 -3 0.17×10-3 0.07×10-3 0.34×10-3
氨基酸总量 6.38 6.42 4.09 5.33 6.52 6.38 7.26 4.23 6.04
3 讨论
据文献报道 ,氨基酸可影响机体的免疫功能 ,还
能对肝脏疾病起一些治疗或辅助性治疗作用。如氨
是有毒物质 ,当人体肝功能异常时 ,鸟氨酸循环不能
正常进行 ,解氨毒作用便受到干扰 ,从而引起血氨升
高 ,甚至导致肝昏迷。门冬氨酸和精氨酸参与了鸟
氨酸循环 ,促进了氨和二氧化碳的代谢 ,从而降低血
中氨和二氧化碳的含量;谷氨酸能与氨结合成低毒
的谷氨酰胺 ,解除代谢过程中氨的毒害作用;胱氨酸
可促进细胞的氧化还原 ,改善肝功能;蛋氨酸可促进
肝内脂肪代谢 ,具有保肝作用 [ 3, 4] 。N-甲基色氨酸
(abrine)和 N-三甲基色氨酸(hypaphorine)近年也
发现具有一定的抗炎 、免疫增强和抗肝损伤作
用 [ 5, 6] 。因此 ,两广民间用相思子 、广东相思子和毛
相思子三种药材治疗急慢性肝炎 ,或用于煲汤 、煮凉
茶等保健食疗是有一定的物质基础的。但从分析结
果可以看出 ,因产地 、生长环境和方式及采收期的不
同 ,药材所含氨基酸的量有一定的差异 ,这势必会影
响它们的临床疗效 。所以 ,应选用来自 GAP种植基
地的药材 ,以保证药材的品质 。
参考文献
[ 1] 国家中医药管理局 《中华本草》编委会.中华本草
[ M] .上海:上海科学技术出版社 , 1999, 4:303 ~
306.
[ 2] 黄平 , 莫虎 , 马雯芳 , 等.RP-HPLC法同时测定鸡骨
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志 , 2009, 29(10):1702 ~ 1704.
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[ 5] 钟正贤 , 李燕婧 , 陈学芬 , 等.相思子碱的药理作用研
究 [ J] .中医药导报 , 2009, 15(1)8 ~ 10.
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研究 [ J] .中国中医药科技 , 2009, 16(5):372 ~ 373.
AnalysisofAminoAcidsinThreeMedicinalHerbsofAbrus
HUANGPing1 , MOJian-guang2
(1.GuangxiInstituteofTraditionalMedicalandPharmaceuticalSciences, Nanning530022,
2.GuangxiAnalyticalandTestingResearchCenter, Nanning530022, China)
Abstract:ObjectiveTocomparethecompositionandcontentofaminoacidsinthreemedicinalherbsofAbrus,
automaticaminoacidanalyzerandhighperformanceliquidchromatographywereused.17kindsofaminoacidsand
2 kindsoftryptophanderivativesweredetectedin9 samples.Thecontentsoftheaminoacidswerevaryindiferent
samples.Thecontentsofasparticacid, glutamicacid, leucineandlysinewererelativelyhigh.
Keywords:Abrusprecatorius;A.cantoniensis;A.molis;aminoacids
·37·氨基酸和生物资源