全 文 ：Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2011 January，Vol．22 No．1
3 讨论
3.1 水分 山柰酚粉末较为疏松，105 ℃下恒重所需
时间较长（8h）；热重分析结果失重率为 5.91 %，且失
重主要发生在 150 ℃之上，推测样品中应含有一分子
结晶水，样品分子式为 C15H10O6·H2O。
3.2 薄层色谱法 本文薄层色谱法属半定量，只能测
定杂质限量，不能准确测定含量。
3.3 山柰酚纯度计算 本文采用 HPLC法测定山柰酚
纯度时，分别用面积归一化和自身稀释对照法进行计
算，计算结果基本一致，分别是 99.05 %和 98.94 %。
面积归一化法是假设各杂质与主成分吸收基本一致，
如果主峰与其他峰的紫外吸收系数差别大，用峰面积
归一化法测定主峰纯度则会影响定量的准确性。本试
验中，采用了二极管阵列检测器全波长（200～400 nm）
扫描分析，查看各杂质吸收光谱，结果显示主要杂质
与主成分吸收光谱接近，适用于面积归一化法测定纯
度。此外，采用自身稀释对照法计算可加以佐证，
故取二者计算结果的平均值作为山柰酚的纯度。
参考文献：
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学报，1998，16（1）：36.
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（编辑：宋威）
HPLC法测定复方盐肤木化痔胶囊中没食子酸的含量
杜 敏，颜仁梁（广东食品药品职业学院，广州 510520）
摘要：目的 建立复方盐肤木化痔胶囊中没食子酸含量的测定方法。方法 采用HPLC法测定没食子酸的含量。
AnglentTC-18柱（4.6 × 250 mm，5 μm），甲醇-0.5 %冰醋酸（5 ∶ 95）为流动相，柱温为室温，流速为1.0 mL·min-1，
检测波长为273 nm。结果 没食子酸浓度在15.09～45.27 μg·mL-1范围内与其峰面积呈良好的线性关系（r=0.999
6，n=7），平均回收率为101.83 %（RSD=1.67 %）。结论 该测定方法精密度高，重现性好，可用于复方盐肤木
化痔胶囊的质量控制。
关键词：复方盐肤木化痔胶囊；没食子酸；HPLC
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：1003-9783（2011） 01-0102-03
Determination of Gallic Acid in Compound Yanfumu Huazhi Capsules by HPLC
DU Min，YAN Renliang（Guangdong Food and Drug Vocational College，Guangzhou 510520，China）
Abstract：Objective To establish a method for the determination of gallic acid in Compound Yanfumu Huazhi
Capsules. Methods HPLC method was carried out on a AnglentTC-18 column（4.6×250mm，5 μm） at room
temperature. Methanol- 0.5 % acetic acid（5 ∶ 95）was used as the mobile phase，the flow rate was 1 mL·min-1 ，
and the detection wavelength was at 273 nm. Results Gallic acid showed a good linear relationship in the range
of 15.09～45.27 μg·mL-1（r=0.999 6，n=7）. The average recovery of gallic acid was 101.83 %（RSD=1.67 %）.
Conclusion The method is sensitive，accurate，and reproducible，and can be used for the quality control of
Compound Yanfumu Huazhi Capsules.
Keywords: Compound Yanfumu Huazhi Capsules； Gallic acid； HPLC
收稿日期：2010-10-15
作者简介：杜敏，女，副教授，研究方向：主要从事药学相关课程的理论及实践教学工作。Email：dum@gdyzy.edu.cn。
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中药新药与临床药理 2011年 1月第 22卷第 1期
复方盐肤木化痔胶囊由盐肤木、三七、千里光等
六味药材制成，具有清热解毒，止血止痛，收涩止血
功效，主要用于大肠湿热所致的内痔、外痔、内外混
合痔等。本方重用盐肤木为君药，其有效成分没食子
酸具有较强的生物活性，文献中多用没食子酸作为药
材或制剂的检测指标[1-3]。为了利于市场推广、应用，本
研究旨在建立复方盐肤木化痔胶囊科学、可行的质控
标准。因此，本研究参考相关文献，采用 HPLC法测
定复方盐肤木化痔胶囊中没食子酸的含量，经方法
学验证，该方法分析快速、准确、灵敏度高、重现
性好，可用于复方盐肤木化痔胶囊中没食子酸的含
量测定，在保证检验精度的基础上大大缩短了检验
周期。
1 仪器与试药
1.1 仪器 Anglent1100高效液相色谱仪（DAD检测
器），AnglentTC-18柱（4.6 × 250 mm，5 μm），德国
BP211D Sartorius电子天平（十万分之一）。超声波清
洗器。
1.2 试药 没食子酸对照品，购自中国药品生物制
品检定所，批号：110813-200302。复方盐肤木化痔
胶囊（自制，批号：090128、090613、091126）。甲醇
（色谱纯，SIGMA公司）。水为重蒸水，其他实验所
用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件和系统 适 用 性 试 验 色 谱 柱 ：
AnglentTC-18柱（4.6 × 250 mm，5 μm），柱温为室温；
流动相：甲醇-0.5 %冰醋酸（5 ∶ 95）；流速：1. 0mL·
min-1；检测波长为 273 nm。取供试品溶液 10 μL注
入液相色谱仪测试，没食子酸的保留时间约为 11.8
min，供试品溶液中没食子酸可与其他物质基线分离，
且阴性对照供试液无干扰，见图 1，理论塔板数以没
食子酸计不低于 2 000。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液 精密称取没食子酸对照品适量，
置量瓶中，用甲醇溶解，稀释制成每 1 mL含 25 μg
的溶液，摇匀，0.2 μm微孔滤膜滤过，即得（对照品
储备液浓度为 251.5 μg·mL-1，精密吸取对照品储备液
1.0 mL，置 10 mL量瓶，甲醇稀释至刻度，即得浓度
为 25.15 μg·mL-1工作对照品溶液）。
2.2.2 供试品溶液 取平均装量项下的本品细粉约
500 mg，精密称定，置具塞三角瓶中，精密移入 25 mL
甲醇，精密称重，超声 30 min，取出，放冷至室温，
以甲醇补足重量，摇匀，0.2 μm微孔滤膜滤过，即
得。
2.2.3 阴性对照液 取除盐肤木以外的其余药味，按
工艺制成缺味样品，取缺盐肤木阴性对照样品适量，
同供试品溶液制备方法制备阴性对照液。
2.3 线性关系考察 分别精密吸取没食子酸对照品储
备液（浓度为 251.5 μg·mL-1）0.3，0.4，0.5，0.6， 0.7，
0.8，0.9 mL，置 5 mL量瓶，加甲醇稀释至刻度，制
成没食子酸系列对照溶液，分别吸取上述对照品溶液
10 μL 注入液相色谱仪，测定，以没食子酸峰面积
（A）为纵坐标，没食子酸对照品系列溶液的浓度
（μg·mL-1）为横坐标，绘制标准曲线。实验数据经线
性回归得回归方程为：Y=25.965X－55.15，r=0.9996
（n=7），没食子酸进样浓度在 15.09 ～ 45.27 μg·mL-1
范围内与其峰面积呈良好的线性关系。
2.4 专属性试验 取对照品溶液、供试品溶液
（090128）、阴性对照溶液分别进样 10 μL，记录色谱
图，见图 1，结果阴性样品对测定无干扰。
2.5 精密度试验 精密吸取 2.2 项下供试品溶液
（090128）10 μL，在上述色谱条件下，重复进样 6
次，以峰面积 A计算 RSD=0.54 %，表明本实验精密
度良好。
2.6 稳定性试验 精密吸取 2.2 项下供试品溶液
（090128）10 μL，分别在 0，1，2，3，4，5，6，12
h进样，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积 A计
算 RSD=1.71 %，说明样品溶液中的没食子酸在 12 h
内稳定，可满足测定的需要。
2.7 重复性试验 取本品同一批号样品（090128）6份，
按供试品溶液的制备方法和色谱条件进行测定，外标
法计算，没食子酸平均含量为 0.130315 %，RSD＝
0.38 %，结果表明本方法具有较好的重现性。
2.8 加样回收率试验 取已知含量的复方盐肤木化痔
胶囊（090128，没食子酸平均含量为 0.130315 %）250
mg，精密称定，共计 6份，分别精密加入没食子酸
对照品储备液（每 1 mL中含没食子酸 251.5 μg）1.0
mL，低温蒸干，精密移入甲醇 25 mL，按正文含量
测定项下方法测定，结果见表 1，没食子酸平均加样
回收率为 101.83 %，RSD=1.67 %，表明本法具有较
好的加样回收率。
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Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2011 January，Vol．22 No．1
t /min
t /min
t /min
表1 没食子酸加样回收率试验结果（n=6）
250.5
258.1
246.1
259.4
253.1
230.7
326.46
336.32
320.77
338.10
329.87
300.70
251.5
251.5
251.5
251.5
251.5
251.5
583.74
589.58
578.80
600.92
584.64
551.19
257.28
253.26
258.03
262.82
254.77
250.49
102.3
100.7
102.6
104.5
101.3
99.6
称样量/mg 已知量/μg 加入量/μg 测得量/μg 回收量/μg 回收率/%
2.9 样品含量测定 取复方盐肤木化痔胶囊（090128、
090613、091126），按 2.2.1项下对照品溶液制备方法
制备对照品溶液，按 2.2.2项下供试品溶液制备方法
制备供试品溶液，分别进样 10 μL，记录峰面积，外
标法计算没食子酸的含量，结果见表 2。
3 讨论
3.1 三七具有散瘀止血，消肿定痛等功效，为处方中
常用的名贵中药，含有人参皂苷 Rb1、Rg1、Rg2及
黄酮苷等成分。含三七的复方制剂中常以人参皂苷
Rb1、Rg1[4-6]的含量为指标。本制剂曾研究了 HPLC
法测定制剂中的人参皂苷 Rb1、Rg1，但由于本方中
三七入药量很低，被测成分很难有富集，因此不适合
作为质控指标。盐肤木是本方君药，为漆树科植物盐
肤木的根及叶，具有清热解毒，散瘀止血的功效，其
主要成分为没食子酸（五倍子酸），因此，本研究选择
没食子酸为质控指标。
3.2 由上述表2结果可知，三批次复方盐肤木化痔胶
囊中没食子酸含量略有差异，根据同时检测的盐肤木
药材中没食子酸含量，表明复方盐肤木化痔胶囊中没
食子酸含量的变化与药材有相关性。实验中曾观察到
柱温的变化会影响不同图谱中同一色谱峰的保留时
间，为获得重现性较好的色谱图及相应的峰面积，应
保持柱温恒定。HPLC法测定复方盐肤木化痔胶囊中
没食子酸的含量，可以排除干扰，得到较好分离效
果，直接采用色谱峰面积定量，结果准确，且方法简
单，重现性较好，便于推广。
参考文献：
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苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1含量[J].中成药，2009，31（2）：237-240 .
（编辑：宋威）
图1 HPLC色谱图
1. 没食子酸；A.对照品；B.复方盐肤木化痔胶囊；C.空白样品
表2 样品含量测定结果
090128
090613
091126
0.1321
0.2093
0.1648
0.1304
0.2137
0.1663
0.1284
0.2197
0.1562
0.1303
0.2142
0.1624
1.40
2.43
3.34
批 号 没食子酸含量/% 平均含量/% RSD/%
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