全 文 ： ·738· Chin J Mod Appl Pharm, 2016 June, Vol.33 No.6 中国现代应用药学 2016 年 6 月第 33 卷第 6 期
茵柏益肝汤不同配伍对岩白菜素煎出率的影响

田静，李兆翌，蒋小琴，纪倩，金巧菲*(杭州市西溪医院，杭州 310023)

摘要：目的 建立测定茵柏益肝汤中有效成分岩白菜素的 HPLC，考察药材不同配伍对岩白菜素煎出率的影响。方法 采
用 RP-HPLC 测定茵柏益肝汤不同配伍水煎液浸膏粉中岩白菜素的含量，Agilent Zorbax Extend-C18 柱(4.6 mm×250 mm，
5 µm)；流动相为甲醇-水(20∶80，用磷酸调节 pH 至 2.50)；流速为 1.0 mL·min1；检测波长为 275 nm；柱温为 30 ℃。
结果 茵陈可降低茵柏益肝汤中岩白菜素的煎出率；金钱草、凤尾草+岩柏草+六月雪可提高茵柏益肝汤中岩白菜素煎出
率，且二者具有协同作用。结论 建立的茵柏益肝汤中岩白菜素测定方法快速、准确、重现性好；不同配伍对茵柏益肝
汤中岩白菜素含量影响显著。
关键词：茵柏益肝汤；配伍；岩白菜素；煎出率
中图分类号：R917.101 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2016)06-0738-03
DOI: 10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2016.06.014

Research on Dissolution Rates of Bergenin in Different Combinations of Yinbaiyigan Decoction

TIAN Jing, LI Zhaoyi, JIANG Xiaoqin, JI Qian, JIN Qiaofei*(Xixi Hospital of Hangzhou, Hangzhou 310023, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To establish an HPLC method of determining simultaneously bergenin in different combinations
of Yinbaiyigan decoction to investigate its dissolution rates. METHODS The contents of bergenin was determined by
RP-HPLC with Zorbax Extend-C18 column, mobile phase of methnol-water(20∶80), flow rate of 1.0 mL·min1, detection
wavelength of 275 nm, column temperature of 30 ℃. RESULTS Herba artemisiae scopariae can reduce the dissolution rate of
bergenin in Yinbaiyigan decoction. Herba Lysimachiae, Herba Pteridis Multifidae and plus Selaginella moellendorffii Hieron plus
Serissa serissoide can improve the solubilization of bergenin in yinbaiyigan decoction, and both had synergy. CONCLUSION
The RP-HPLC method is fast, accurate and its reproducibility is good. Different compatibilities have impact on the content of
bergenin in Yinbaiyigan decoction significantly.
KEY WORDS: Yinbaiyigan decoction; compatibility; bergenin; dissolution rate


基金项目：杭州市科技发展计划项目(20080333Q11)
作者简介：田静，女，主任药师 Tel: (0571)86481702 E-mail: tjhz2002@aliyun.com *通信作者：金巧菲，女，副主任医师 Tel:
(0571)86481530 E-mail: jinqiaofei007@163.com
中药的配伍会影响复方制剂在煎煮制备过程
中有效成分煎出率的变化，研究方剂配伍前后有
效成分含量的变化，有助于优化制剂质量标准的
指标体系、规范其制剂工艺，可以帮助阐明复方
中药的药理，反映复方配伍协同增效的优势。
茵柏益肝汤(Yinbaiyigan Decoction，YBD)是
杭州市西溪医院临床沿用 30 余年的医院制剂，由
茵陈、岩柏草、矮地茶、金钱草、凤尾草和六月
雪 6 味中药组成，具有清热解毒、利湿退黄作用，
临床用于急性黄疸型肝炎、乙型肝炎，疗效确切。
该方中矮地茶含有岩白菜素作为该方的有效作用
成分之一[1]，具有抗炎、护肝等作用[2]，本研究利
用 RP-HPLC 测定 YBD 各拆方组中岩白菜素的含
量，研究 YBD 不同配伍对岩白菜素煎出的影响，
拟从体外化学角度阐明 YBD 的配伍规律。
1 仪器与试剂
Agilent 1100 高效液相色谱仪(美国 Agilent)及
其工作站，包括 DAD 检测器、柱温箱、1200 型自
动进样器；Sartorius BS224 型电子天平(北京赛多
利斯仪器有限公司)；KQ-1000DE 型超声清洗机(昆
山市超声仪器有限公司)；U-2910 紫外分光光度计
(日本日立公司)；XLJ-ⅡB 高速离心机(上海安亭
科学仪器厂)。
岩白菜素对照品[西安小草植物科技有限责任
公司，纯度：98%(HPLC)]；甲醇(美国 Merck 公司，
色谱纯)；复方茵柏益肝方各拆方组浸膏粉自制。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色 谱 柱 为 Agilent Zorbax Extend-C18 柱
(4.6 mm×250 mm，5 µm)；流动相为甲醇-水(20∶
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80，用磷酸调节 pH 至 2.50)；流速为 1.0 mL·min1；
检测波长为 275 nm；柱温为 30 ℃；进样量为 5 µL。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取岩白菜素对照品适量，置于 25 mL
量瓶中，用甲醇溶解，定容，摇匀，配制成岩白
菜素对照品溶液(116 μg·mL1)。
2.3 样品制备方法
YBD 不同配伍组药材按组方比例投料总量均
为 960 g，药材浸泡 30 min，分别加 6 倍量的水煎
2 次，第 1 次 40 min，第 2 次 30 min；合并水煎液，
浓缩，60 ℃真空干燥得干膏，研成细粉，称重(W)，
计算出膏率(出膏率=W/960×100%)，结果见表 1。
根据各拆方的出膏率计算取样量，分别取相
当于等量矮地茶生药量的干膏粉末(表 1)，各 3 份，
精密称定，加水适量，涡旋 3 min，溶解后超声
60 min，定容至 10 mL。摇匀，精密量取 2 mL，
加入乙酸乙酯 4 mL，涡旋混匀 3 min，超声萃取
5 min，5 000 r·min1 离心 5 min，取上清液，下层
溶液加乙酸乙酯重复提取 3 次，合并上清液，减
压蒸干后，加入流动相 1 000 μL，涡旋溶解 2 min，
10 000 r·min1 离心 15 min，精密量取上清液
0.4 mL，用流动相定容至 25 mL，摇匀即得。
表 1 茵柏益肝汤各拆方组
Tab. 1 The separated complex prescriptions of YBD
组 别 编 号
出膏率/
%
相当于 0.1 g
A 取样量/g
矮地茶 A 20.151 0 0.10
矮地茶+茵陈 B 24.852 1 0.30
矮地茶+凤尾草+岩柏草+六月雪 C 12.282 3 0.50
矮地茶+金钱草 D 21.018 7 0.20
矮地茶+茵陈+凤尾草+岩柏草+六月雪 E 13.521 9 0.70
矮地茶+茵陈+金钱草 F 13.352 1 0.40
矮地茶+凤尾草+岩柏草+六月雪+金钱草 G 8.553 1 0.60
全方组 H 18.853 1 0.80
2.4 方法学考察
2.4.1 标准曲线的绘制 分别精密吸取“2.2”项
下对照品溶液 0.08，0.2，0.4，0.8，2.0，4.0 mL
置 25 mL 量瓶中，用甲醇定容，按“2.1”项下色
谱条件测定。以峰面积为纵坐标，样品浓度
(μg·mL1)为横坐标，绘制标准曲线，得到岩白菜
素标准曲线方程为 Y=1.600 5X+0.160 5(r=0.999 8)，
在 0.371 2~18.560 0 μg·mL1 内线性关系良好。
2.4.2 精密度试验 取“2.2”项下对照品溶液，
制成岩白菜素溶液浓度为 3.712 μg·mL，按“2.1”
项下色谱条件连续进样 5 次，以及连续 5 d 分别进
样 1 次，测定岩白菜素峰面积，考察日内精密度
和日间精密度。结果显示，日内和日间精密度分
别为 0.53%，1.11%(n=5)，表明该方法精密度良好。
2.4.3 稳定性试验 取同一份供试品溶液，在室
温下放置 0，8，12，16，20，24 h 分别测定，记
录峰面积。结果显示，峰面积的 RSD 为 1.15%，
可见供试品溶液在 24 h 内稳定性良好。
2.4.4 重复性试验 称取同一批样品约 0.4 g，共
6 份，精密称定，照“2.3”项下方法制备供试品
溶液，在“2.1”项色谱条件下进行测定，并计算
含量。结果显示，峰面积 RSD 为 0.86%，表明该
含量测定方法具有良好的重复性。
2.4.5 加样回收率试验 取已知岩白菜素成分含
量的浸膏粉 0.1 g，共 6 份，精密称定，分别加入
对照品溶液 1 000 μL，即岩白菜素 0.116 0 mg，按
“2.3”项下方法操作。按“2.1”项下色谱条件测
定，根据测定结果计算加样回收率，结果显示，
岩白菜素的平均回收率为 99.12%，RSD 为 0.40%，
结果见表 2。
表 2 加样回收率试验结果(n=6)
Tab. 2 The results of average recovery(n=6)
样品中含
量/mg
对照品加
入量/mg
测得量/
mg
回收率/
%
平均回收率/
%
RSD/
%
0.185 7 0.116 0 0.298 3 98.87
99.12 0.40
0.185 7 0.116 0 0.300 1 99.50
0.185 7 0.116 0 0.297 4 98.57
0.190 6 0.116 0 0.303 4 98.96
0.190 6 0.116 0 0.304 2 99.22
0.190 6 0.116 0 0.305 4 99.61
2.5 样品测定
精密吸取供试品溶液 5 µL，按“2.1”项下色
谱条件进样，依法测定各配伍组中岩白菜素的峰
面积，根据峰面积计算样品中岩白菜素的含量。
结果见表 3，在表 3 中，相对煎出量以各拆方组中
与 A 等量矮地茶生药的岩白菜素含量，煎出率是
以 A 组药材岩白菜素的煎出率为 100%，其他各拆
方组相对于 A 组的煎出量。岩白菜素的保留时间
约 9.6 min。供试液主峰保留时间与岩白菜素对照
品溶液一致，结果见图 1。
煎出率=含相同量矮地茶生药的拆方浸膏中岩
白菜素含量/含相同量矮地茶生药的 A 浸膏中岩白菜
素含量×100%
·740· Chin J Mod Appl Pharm, 2016 June, Vol.33 No.6 中国现代应用药学 2016 年 6 月第 33 卷第 6 期
表 3 茵柏益肝汤各拆方组中岩白菜素含量
Tab. 3 Contents of apigenin of separated complex
prescriptions of YBD
拆方组 含量/% A 药材占比 相对煎出量/% 煎出率/%
A 1.857 1.000 1.857 100.00
B 0.558 0.333 1.676 90.25
C 0.546 0.200 2.730 147.01
D 1.042 0.500 2.084 112.22
E 0.293 0.143 2.049 110.34
F 0.414 0.250 1.656 89.18
G 0.642 0.167 3.844 207.00
H 0.278 0.125 2.224 119.76


图 1 茵柏益肝汤各拆方组岩白菜素成分色谱图
A~H各拆方组溶液；I岩白菜素对照品溶液。
Fig. 1 Chromatogram spetras of bergenin in separated
complex priscriptions of YBD
AH the separated complex prescriptions of YBD; I the control of
Bergenin.
3 讨论
3.1 拆方方法选择
该方药材岩柏草、凤尾草、六月雪中均含有
以芹菜素为苷元的苷类化合物[3-5]。这类化合物进
入体内，在酶的作用下可分解产生芹菜素。现代
药理学研究显示，芹菜素具有抗炎、抗氧化作用[6]。
从研究该方所含有效成分出发，为精简实验，本
研究将此 3 种药材作为一组药材进行拆方研究。
3.2 配伍对复方益肝汤中岩白菜素煎出率的影响
研究结果显示，2 组配伍，即矮地茶分别配伍
茵陈、岩柏草+凤尾草+六月雪、金钱草时能使岩
白菜素煎出量分别增加9.75%，47.01%，12.22%，
表明茵陈能够降低岩白菜素的煎出量，岩柏草+凤
尾草+六月雪、金钱草能增加岩白菜素的溶出量；
3 组配伍结果显示，即矮地茶分别配伍茵陈+岩柏
草+凤尾草+六月雪、茵陈+金钱草、岩柏草+凤尾
草+六月雪+金钱草能分别使岩白菜素煎出量增加
10.34%，10.82%，107.00%，表明配伍茵陈+岩柏
草+凤尾草+六月雪可提高矮地茶中岩白菜素的煎
出量，而配伍茵陈+金钱草后能降低对岩白菜素的
煎出量；配伍岩柏草+凤尾草+六月雪+金钱草后，
能显著提高岩白菜素的煎出率。以上结果提示，
茵陈能够显著降低矮地茶中岩白菜素的煎出率，
岩柏草+凤尾草+六月雪、金钱草均可明显提高岩
白菜素的煎出率，且二者对岩白菜素的增溶作用
具有协同作用。全方中岩白菜素的煎出率增加了
19.26%，即验证了以上的推论。
中药方剂有效成分的溶出在不同的配伍情况
下受多方面因素的影响，值得深入探讨。岩白菜
素属于异香豆素类化合物，在水中溶解度极低，
为极弱酸，在中性和碱性环境中大部分呈离子状
态，在酸性环境中大部分以分子状态存在[7]。由于
矮地茶经配伍后各组药材煎出成分不同，可能造
成水煎液酸碱环境不同，使得岩白菜素的煎出量
不同。全方组岩白菜素的煎出率低于 C、G 组，可
能是茵陈中含有的香豆素类、香豆酸、有机酸类
等酸性成分抑制了岩白菜素的溶出。
复方中药有效成分含量的变化，直接影响药
物作用的强弱。YBD 方中还含有多种已知的具有
肝脏保护作用的有效成分，如 6,7-二甲氧基香豆
素、芹菜素等，本研究只是从体外化学角度分析
岩白菜素煎出率，仍需要进一步探讨 YBD 配伍与
其他有效成分含量变化的规律，结合有效成分的
吸收、药效产生、作用机理等从整体动物、组织
器官、分子水平等方面进行研究，揭示 YBD 方的
配伍规律。
REFERENCES
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收稿日期：2015-09-04