全 文 ：新班中医药 2 0 7年 第 2 5卷 第 4期 (总第 10期 )
鬓 新疆紫草对小鼠免疫功能的影响景玉仗 , 单丽娟 , 连 军 , 周爱萍 , 朱虎虎
(新班医科大学中医学院 ,新皿 乌鲁木齐 83 X() 54
摘 要 目的: 探讨新扭紫草对小鼠免疫功能的影响。 方法 : 观察新扭紫草对环磷疏胺所致免疫抑制小鼠脾的
t t
、 脾脏琳巴细胞增殖 、 腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。 结果 : 新班紫草高、 中、 低剂 t 治疗组均可明显提商小鼠
免疚器官脾的 t t ,新班紫草高 、 低剂 t 治疗组可提高小鼠腹腔 巨噬细胞的吞噬功能 ;新扭紫草低剂 t 组 可促进脾
脏琳巴细施的增殖 。 结论 : 新扭萦草对环磷曦胺所致免疫抑制模型小鼠的非特异性免疫(巨噬细胞吞噬功能)和特异
性细胞免痰(脾胜琳巴细胞的增殖)等功能都有上调作用 ,说明新扭紫草水提取物对免痰功能有显著的调节作用 ,能
够增强机体的抵抗力。
关扭词 新扭紫草 ;环磷晚胺 ; 脾琳巴细胞 ; 巨噬细胞 ;免疫功能
新班紫草为多年生草本植物 , 其来源主要是新
获紫草的干燥根 1闷 ,在我国有悠久的药用历史 ,其
味甘 、咸 ,性寒 ,归心包络 、 肝经 ,有凉血 、 活血 、 清
热 、解毒透疹等功效 , 是中医临床常用的清热解毒 、
凉血止血药物 。 新班是我国新班紫草的主要产地 ,
其有效化学成份主要分为两大类 :一类是水溶性成
分 , 主要是多糖 ,含量在 2 %左右 ;二类是脂溶性很
强的蔡酿类色素 ,主要包括紫草素及其衍生物 。 紫
草素及其衍生物含量新姐紫草平均为 3 . 1% , 紫草
为 1 . 05 % , 新疆紫草约为硬紫草的 3 倍阅。 目前对
情志关系密切 ,情志变化引起大脑皮层功能改变所
致 。 19 34 年美国学者提出“ 心身疾病 ” ,在对心身疾
病的论述中认为 ,心理社会因家是引起躯体疾病的
重要原因。 因而 ,心理治疗一直以来是一种重要的
治疗方法 。 在心身疾病的发展中 ,虽未直接指出情
志致病 ,但是其实质是相同的。 所以 ,对于失眠这种
特殊性疾病 ,根据病因 ,运用 “心理 ” 治疗 , 了解其心
意 、稳定其精神 、 畅悦其情怀 , 等于祛除了病因 , 其
病必愈 。
3 例证
例 1 , 吴某 ,女 , 19 岁 。 因面临高考学习压力大
逐渐失眠 1年 , 高考失意加重 1周就诊 。 失眠 ,人眠
间断或整夜不眠 , 伴月经量少 ,精力不能集中 ,舌红
脉细 。 诊断 :失眠 ,证属肾虚 ,心肾不交 。 方用天王补
心丹加减 。 治疗 l 周 ,失眠好转 ,然再服药失眠时好
时差 。 后探其家人言语 , 因平日学习很好 , 此次结果
心里委屈 ,难以释怀 ,虽在诊病之时 ,与其畅谈青年
人的各种追求和理想 ,并以书信和礼物间候 , 称赞
其优点 ,连续服药 1月后 ,仍有间或失眠 , 即停药 ,
以莲子粥调养 ,两月后心情畅 ,睡眠正常 。
例2 ,张某 ,女 , 46 岁 。 因婚姻不睦失眠 5 年 ,加
重 1月 ,由内科转人 。 失眠 ,彻夜不眠 ,精神紧张 ,思
虑繁多 ,所诉全身皆不适 ,抓氮平 25 mg 才能使其睡
眠 2一 3小时 , 5 年中经过各种治疗 (中医药治疗 、 西
医 、针灸等 ) 。 鉴于此 ,先请其家人 ,直言病情及治疗
的难度和预后 , 了解家人的真实意图 ,经与家人沟
通 , 以心理治疗为主 ,药物治疗为辅 , 方用丹桅逍遥
散加减 。 经 3 月治疗 ,失眠日渐好转 。 在年龄阶段的
基础上 ,采用心理治疗 , 必须把握治疗层次 、 时机和
技巧 ,切忌强行改造 。
4 结 语
失眠是一种特殊性疾病 , 也是一种常见疾病 。
中医药治疗失眠优于西医治疗的单一性 。 对于失眠
的治疗 , 临床报道很多 ,有辨证分型论治方法 、选方
论治方法 、辨时论治方法等 ,各种方法都有临床基
础和明显疗效 。 然而 ,对于处于社会转型 、 自然环境
和社会环境发生了根本变化时期的中年人和处于
医学进步后寿命延长 、又患有各种慢性疾病的老年
人来说 , 往往是各种证型夹杂 ,一方一法很难凑效 ,
况且 , 失眠具有恶性循环性 , 失眠后烦躁 、 焦虑不
安 ,烦躁 、焦虑不安进一步加重失眠 。 再者情绪的稳
定不是自己所能控制得了的 , 因此 ,药物治疗加心
理治疗是最好的选择 。 通过对临床 1肠例不同类型
的失眠治疗分析 , 笔者认为在现今形势下 ,从年龄
阶段论治 ,加上心理治疗是临床的首选 。
(收稿 日期 二2以X卜 12一 1 9 ;修回 日期 : 2仪y7刁 2~ 25 )
新疆中医药 20 7年 第 25 卷 第 4期 (总第 n o期 )
新疆紫草的研究较为广泛闷 ,但在新疆紫草对机体免
疫功能影响的相关研究方面仍显薄弱 。 鉴此 ,本实验
研究从非特异性免疫 (巨噬细胞吞噬功能 )及特异性
细胞免疫脾淋巴细胞的增殖 )两个方面进行研究 。
1 实验材料
L l 实验动物
IC R小 鼠 50 只 ,雌雄各半 ( 20 土 2 ) g , 由新疆医
科大学动物实验中心提供 。
12 实验药品
新疆紫草 : 购 自新疆参茸中药饮片有限公司 ,
经鉴定为新疆紫草的干燥根 。 用传统方法煎煮浓缩
成 10 % ( 19 / m )L 的水煎液 , 用生理盐水稀释配制
成新疆紫草溶液低剂量组 ( 4 % ) , 新疆紫草溶液中
剂量组 ( 8% ) ,新疆紫草溶液高剂量组 ( 16 % )。
13 主要试剂
环磷酞胺 ( c y ) : Z o m g / 支 ,上海华联制药有限
公司 。 刀豆蛋白 ( C o n A ) 、 四甲基偶氮哇盐 (M rT )均为
is gm
。 公 司 产 品 。 吉姆萨染 液 , Han k er , 。 液 ,
RP M I
一 164 0 培养液 : GI B CO 公司 ,小牛血清 : 由教学
科研服务中心购置 ,淀粉肉汤 ,鸡红细胞 (CBR C ) 1%
混悬液自制 : 取鸡血用生理盐水经 1 50 转 / 分 ,离
心 5分钟 , 洗涤 3次 ,配制成 l%鸡红细胞混悬液 。
L 4 主要实验器材
电热恒温培养箱 、 C仇培养箱 、全自动酶标仪 、洗
板机 、电子分析天平 ,高速离心机 ,旋转蒸发仪等。
2 实验方法与结果
.2 1 实脸分组及给药
按完全随机化设计方案 , 将 50 只六周龄雌雄
各半 cI R 小鼠分成 5 组进行实验 : 正常对照组 、模
型组 (环磷酞胺 ) 、 新疆紫草溶液高剂量组 ( 16 % 浓
度的新疆紫草溶液加环磷酞胺 ) 、 新疆紫草溶液中
剂量组 ( 8%浓度的新疆紫草溶液加环磷酞胺 ) 、新
疆紫草溶液低剂量组 ( 4%浓度的新疆紫革溶液加
环磷酞胺 ) 。 每组 10 只 , 苦味酸标记 ,正常饮食饮
水 。 参考文献方法口除正常对照组外 ,其余四组于实
验开始 日一次性予以腹腔注射环磷酞胺 ( 3仪ha g /
k g )
,诱导建立小鼠免疫功能低下模型 。 自实验首日
起 , 分别用新疆紫革溶液高 、 中 、低剂量给相应的各
组小鼠灌 胃 ( .0 5 n 】U 只 ) ,正常组与模型组给予生理
盐水灌胃 ( .0 s m L / 只 ) ,连续给药 7 天 ,每 日 1 次 ,
每日 10 点 一 1 点灌胃 。 实验第 8 日处死小鼠侧定
各项免疫指标 。
Z J 指标测定及结果
.2 .2 1 对小鼠脾指数的影响 实验第 8 日 , 称小鼠
体重 ,颈椎脱臼处死小鼠 ,取小鼠脾脏用电子分析
天平称其湿重 ,计算脾指数 :脾指数 二 脾湿重 (m g )/
体重 ( g )。
对于脾指数 ,该指标符合正态性方差齐 。 对五
组小鼠的脾指数进行方差分析 , 有统计学意义
(万七4 . 106 ,作刁 . 0 7) , 可认为五组小鼠的脾指数总
体有差别 。 如表 1所示 :新疆紫草的高 、 中 、低剂量
组均可增加免疫低下小鼠的脾指数 。
衰 1 五组小限牌相傲比较情况《牙” )
组 别 例数 牙幻 ( m砂g ) F值 p值
正常对照组 10 9. 86 士 2 . 5 7 7 。 吞
模型组 9 .6 21 土 .0 7 0 ,*
新获紫草高剂 t 组 10 .9 73 土 .2 49 2“ .4 1肠 .0 0() 7
新扭萦草中剂 t 组 10 .9 10 : 1·卯 5“
新班萦草低剂最组 10 .8 5 士 .2 65 2“
注 : △尸父0 . 05 , △△尸兮0 .01 与模型组相比 ; *. 1 ,< 0 . 01 , 与正常对照
组相比。
2 2 ) 对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 实
验第 6 日给小鼠腹腔内注射淀粉肉汤 , 每只小鼠
l m L
,在实验第 8 日给小鼠腹腔注射 1%鸡红细胞 ,
每只小鼠 l m L , 间隔 3m0 in 后 , 再腹腔注射生理盐
水 l m L然后颈椎脱臼处死小鼠 , 切开小鼠腹部皮
肤 ,经腹膜用移液枪吸取腹腔液 ,低于载玻片上 , 均
匀涂片 , :1 1丙酮甲醇固定 s m in , ic m es a 染色 , 蒸馏
水漂洗 、 晾干 ,在油镜下观察 ,每份标本油镜下观察
10 个巨噬细胞 ,计算巨噬细胞的吞噬百分率 。 吞噬
率 二 (吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数 / 10 个巨噬细
胞 ) x lX() % 。
本指标属于计数资料 ,对五组巨噬细胞及吞噬
细胞(即吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞 )进行犷检验 ,
结果有统计学意义份二7 .9 32 1沪任。 ,仪刃 ) , 可认为五
组吞噬率有差别 。 如表 2 所示 :新疆紫草高 、低剂 t
组均可提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能 。
2 J 3 对小鼠淋巴细胞增殖作用的影响 M T T法 ,
襄 2 五组小咬吞叹率比较情况
组 别 例数 细 胞巨噬细胞 吞曦细胞 合计 吞曦率 (% )
新班萦草高剂 t 组 10 一18一 370 1 15 1 3 1. 33护
新扭萦草中剂 t 组 10 125 6 肠 9 16乃 29 .3 8*.
新扭萦草低剂 t 组 10 12 1 4 9 167 0 36 .7 “ .
正常对照组 10 一17 1 5 7 6 1747 49 . 19八吞
模型组 9 1 36 292 14 28 25 . 7 .0 .
合 计 49 5肠 5 2仍 6 8 0 2 1 34 .4 7
注护仗0 . 05 , △ △尸仗0 .01 与棋型组相比沪 .入0 . 01 . 与正常对照组
相比。
新班中医药 2叨 7年 第 2 5卷 第 4 期(总第 10 期 )
紫外分光光度法对几种新疆产黑加仑中维生素 C含量的测定
刘伟新 ’ , 周爱德 2
( 1
.新班维吾尔自治区药品检验所 ,新班 乌鲁木齐 83 X( X) 2 ;
.2 新班医科大学中药 2 X( 犯一 2 班 ,新粗 乌鲁木齐 83 X() 54 )
摘 要 目的 :建立对黑加仑中维生素 C 含 t 的紫外分光光度法的测定方法 ,并依据维生素 C 的含 t 初步评
价这几种产地黑加仑的质 t 优劣。 方法 :采用 p H 值 5 .2 的硫酸溶液 ,在 26 2n m 处测定其吸收度 。 结果 : 维生素 c 平
均回收率为 9 3 3 % , R sD I . 9 % 。 结论 : 所建立方法简便 ,准确 , 可靠 , 可作为黑加仑中维生紊 C 含 t 测定的方法 。 其
中以吉木萨尔产的含 t 为最高。
关抽词 黑加仑 ; 维生素 C ;紫外分光光度法
黑加仑 , 为虎耳草科植物黑茶篇 (R话e : 几够川爪
L )的成熟果实 ,为新获常用地方药 ,具有清热解毒 、
活血通络 、补益养气之功效 ,用于治疗心脑血管疾患 、
关节炎 ,抗过敏 ,抗癌和增强人体免疫功能 。 其中维生
素 C是重要的活性物质之一 ,为了初步评价黑加仑的
质最 ,本文对其中的维生素 C 含量建立了紫外分光光
度法的测定方法 。 并对来自新疆的吉木萨尔 、伊宁巩
留县 、南山的黑加仑作了初步的质量评价 。
l 仪器与试药
钊 一 19 0 型紫外分光光度计 ( 日本岛津公司 ) ;
M E丁几卫-R A E Zo 型电子分析天平 ( 日本岛津 ) ;
C x 一25 0 型超声波清洗机 (北京医疗设备二厂 ;) 水
为重蒸水 ; pH 一2 型酸度计 (上海第二分析仪器厂 ) ;
硫酸为分析纯 。 维生素 C 对照品为华世丹提供原
实验第 8 日处死小鼠 ,用 75 % 酒精浸泡 s m in , 无菌
操作取脾 , 放人装有 5mL H an k e r ’ , 液的平皿中 ,用
2加 目钢网研磨过筛 , 制成细胞悬液 。 取出 10 卜L
用于计数 。 将其余细胞悬液移人一离心管中 , 离心
15 0 印浏俪 j n , 5而n , 弃去上清 ,用完全 1翻 o 培养液
稀释 , 制成 l . o x 10 71] m L 的脾细胞悬液 ,细胞培养采
用 9 6 孔平底培养板 ,每孔加人脾细胞悬液 10 林L ,
平行 3个复孔 , 然后加入使每孔最终浓度为 5卜g /
m L 的 C O几A液 10卜L , 同时做不加 C o nA 的阴性对照
孔 , 37 ℃ , 5% CO : 培养箱中培养 48 小时 , 于培养结
束前 4 小时加人 M竹 , 每孔 10 卜L ( s m g / mL ) , 培养结束后 , 加人裂解液每孔 10 林L 的二甲基亚矾
(D MS o)
,
37 ℃ , 5% C仇培养箱中 ,放置过夜 ,用全自
动酶标仪在 5 50n m 处测定每孔 O D 值 。
对于脾淋巴细胞增殖 (O D值 ) ,该指标符合正态
性 、方差齐 ,对五组小鼠的脾淋巴细胞增殖 (O D 值 )进
行方差分析 ,有统计学意义 (=F 18 .9 54 ,=P o川X) ) 。 可认
为五组小鼠的脾淋巴细胞增殖有差别 。 如表 3 所示 :
新获紫草低剂量组可明显促进脾淋巴细胞增殖 。
3 小 结
本研究初步探讨了新疆紫草的水提取物对环
磷酞胺所致小鼠免疫功能低下的影响 ,通过三大指
标的变化 , 可以明显看出新班紫草对免疫低下小鼠
裹 3 五组小叹脾琳巴细胞增班比较情况` 相 》
组 别 例数 油 P 值 p值
正常对照组 10 1 . 25 7 土 .0 3 25 “
模型组 10 0 . 6 7 5 土 0 .乃 6* *
新扭紫草高剂 t 组 10 .0 6 3 土 .0 21 沪 . 1.8 954 .0 仪)K
新班萦草中荆 t 组 10 .0 810 上 .0 3 69*.
新班萦草低剂 t 组 10 1一64 7 土 .0 387 “ *.
注 : △△代 0 .01 与模型组相比 ;*’ 矛k 0 .0 1 ,与正常对照组相比。
的非特异性免疫 (巨噬细胞吞噬功能 ) 、特异性细胞
免疫 (脾淋巴细胞的增殖 )等功能都有上调作用 。 说
明新疆紫草对免疫低下小鼠的免疫功能有显著的
调节作用 。
, 考文蔽
【lj 中华人民共和国药典 ,一部 .北京 :人民卫生山版社 , 19如 : 3伪 .
2[] 中国医学科学院药物研究所 .中药志 ( I )北京 :人民卫生出版社 ,
197 9乃69 .
13 ] 张明远 ,刘曹 ,卢春风 ,等 .萦草大黄合剂对四级化谈致小既急性
肝损伤保护作用的观翻刀.黑龙江医药科学 , 20 3 , 26 ( l) : .4
4l[ 葛峰 , 王晓东 . 王玉春 .药用紫草的研究进展 .中草药 , 2 0 0 3 , 34
( 9 )
:附 -6 1.0
5I] 傅善林 ,尚天民 , 肖培根 .几种国产药用萦草中茶砚色素的分析
切.药学学报 , 1984 , 19 ( 12) : 92 1 .
16 卢贺起 .萦草实验研究进展 .中国中医药信息 . 19 8 , 5( 1 ) : 20 .
阴 金锐 , 等 .4 种生药提取物制剂对抗痛药环磷酸胺投予后小既之
免疫的影响 .药学杂志 , 19 94 , 1 14 (7 ) : 5 3 一 5 38 .
(收稿 日期 : 2X() 7减巧一 15 )