全 文 ： ·850· Chin JMAP, 2013 August, Vol.30 No.8 中国现代应用药学 2013年 8月第 30卷第 8期
表 1 不同溶剂中比卡鲁胺相关物质 B的溶解度
Tab 1 The solubility of bicalutamide related compound B
in different solvents
溶剂 四氢 呋喃 丙酮 甲醇 乙醇 水
HCl (0.1
mol·L1)
NaOH (0.1
mol·L1)
溶解度/
μg·mL1 112.51 92.62 14.97 19.78 0.123 6 0.234 7 0.207 9
4 结论
总收率达到 74.6%，纯度为 99.58%。通过溶
解度的测定说明其在醚、醇、酮等有机溶剂中有
一定的溶解度，但在不同 pH值的水介质中几乎不
溶。本合成方法操作简单、反应条件温和，能容
易地制备比卡鲁胺有关物质 B，在此基础上测定的
物化数据可为相关研究提供有益参考。
REFERENCES
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收稿日期：2013-01-11



新疆紫草不同极性部位的抗氧化活性研究

祁英，刘玉梅*(新疆大学化学化工学院，乌鲁木齐 830046)

摘要：目的 比较新疆紫草不同极性部位提取物的抗氧化活性。方法 采用超临界 CO2 萃取得到超临界提取物后，萃余
物依次用 95%乙醇和 60%的乙醇提取，对得到的乙醇提取物分别采用不同极性的溶剂分步萃取得到紫草不同极性部位的
8 个提取物，对上述 9 个提取物的清除羟基自由基、清除 DPPH 自由基、总抗氧化活性、抑制脂质过氧化能力等进行了
评价。结果 超临界 CO2 萃取物的总抗氧化活性在所有试样中居中，在 1 mg·mL1 的浓度下，其清除羟基自由基和 DPPH
自由基的活性接近或略低于对照品芦丁和 BHT，而中等极性部分的乙酸乙酯提取物的抗氧化活性最强，高于同等浓度的
对照品 BHA 和芦丁，但极性较大的部位试样的抗氧化活性总体上相对较弱。结论 紫草提取物的各极性部位均具有不同
程度的抗氧化能力。
关键词：新疆紫草；抗氧化活性；羟基自由基；DPPH 自由基；脂质过氧化
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1007-7693(2013)08-0850-07

Study on Antioxidant Activities of Different Polarity Parts Derived from Arnebia Euchroma (Royle)
Johnst

QI Ying, LIU Yumei*(College of Chemistry and Chemical Engineering, Xinjiang University, Urmuqi 830046, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To compare the different polarity extractions’ antioxidant activity from Arnebia euchroma (Royle)
Johnst. METHODS The sample was extracted by using supercritical CO2 extract, and then the residue was eluted followed by
95% ethanol and 60% ethanol, which was concentrated and fractional solvent extracted by different polarity solvents to obtain
eight extracts derived from Arnebia euchroma (Royle) Johnst. Antioxidant activities of 9 samples above-mentioned were
evaluated using four complementary in assays: the inhibition of protection of β-carotene-linoleic acid model system，hydroxyl
radicals scavenging, DPPH radicals scavenging, ferric thiocyanated method (FTC), and thiobarbituric acid(TBA) method.
RESULTS The total antioxidant activities of supercritical CO2 extract was placed in the middle in all samples. At 1 mg·mL1,
antioxidant activity of acetic ether extracts was strong in some of experiment systems and other polar components were weak
compared with a comparison (BHA or rutin), and CO2 extract was nearly BHT or rutin for hydroxyl radicals scavenging and

基金项目：新疆大学博士启动基金项目(BS080114)
作者简介：祁英，女，硕士生 Tel: 15160892137 E-mail: 448161058@qq.com *通信作者：刘玉梅，女，博士，教授级高工 Tel:
(0991)8582940 E-mail: xjdxlym@163.com
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DPPH radicals scavenging. CONCLUSION All the different polar fraction from extract showed varying degrees of antioxidant
activities.
KEY WORDS: Arnebia euchroma (Royle) Johnst; antioxidant activities; OH·; DPPH·; lipid peroxidation

新疆紫草[Arnebia euchroma (Royle) Johnst]，
习称软紫草，为新疆特有的紫草科多年生草本植
物，主要生长在天山山脉阳坡草丛中，以根入药，
因其根呈紫色而得名[1]。新疆紫草高约 15~35 cm，
全株覆有白色硬糙毛，根呈圆锥形，是现有药用
紫草品种中有效成分含量最高的[2]。作为传统中
药，紫草的药用始载于《神农本草经》中，其味
苦、性寒，具有凉血活血、清热解毒、消炎透疹
等功效，用于血热毒盛、班疹紫黑、麻疹不透、
疮疡、湿疹、吐血尿血、水火烫伤等症[3-5]。中国
药典 1995年版将新疆紫草列为正品，《中药志》、
《全国中药汇编》和《中药大辞典》等书也把新
疆紫草列为首位[6]。现代药理学研究表明，新疆紫
草含有多种生理活性成分，其中以紫草素及其衍
生物研究最为集中，不仅具有抗菌、抗氧化、抗
癌、抗生育、抗甲状腺、降血糖、保肝护肝和提
高免疫力等多种作用，而且还是一种高品质的天
然色素，因此已广泛应用于医药、化妆品和印染
工业中[7-9]。传统提取紫草素及其衍生物主要采用
溶剂浸泡或高温回流提取等方法，这些方法提取
周期长、工序多，提取率低，主要用于对紫草中
紫草素的提取和分离。然而，除紫草素类外，紫
草中还含有多糖、苷、氨基酸 、鞣质等，这些组
分中也常常含具有生理活性的药效成分，目前对
其应用尚未加以重视。本研究采用超临界 CO2 萃
取技术提取紫草中的脂溶性紫草素及其衍生物，
并对超临界提取的萃余物质进一步采用 95%和
60%的乙醇水溶液进行分级提取，共得到 9个不同
的紫草提取物，通过对羟基自由基、DPPH自由基
清除能力、β-胡萝卜素-亚油酸乳化液法和抑制脂
质过氧化能力的测定等几个不同的抗氧化活性评
价体系的研究，确定其中抗氧化活性成分的分布，
为进一步从中筛选活性组分提供数据参考和理论
指导。
1 材料与方法
1.1 仪器
超临界 CO2萃取装置(江苏海安华达石油仪器
有限公司)，设计压力 50 mPa；WFZ-25型紫外光
谱仪(天津市光学仪器厂)；超声波清洗机(天鹏电
子新技术(北京)有限公司)；BS210S型电子天平(德
国赛多利斯)；旋转蒸发仪(上海申科机械研究所)。
1.2 试剂
新疆紫草(新疆医药公司，批号：20090823)，
由新疆林业科学园王爱静研究员鉴定为 Arnebia
euchroma (Royle) Johnst。二苯代苦味酰基自由基
(DPPH·)、硫代巴比妥酸酸、 BHA、 BHT 等
(Sigma-Aldrich 公司)；芦丁(中国药品生物制品检
定所，批号：060313-200302)；邻二氮菲溶液、硫
氰酸胺、乙醇等常用试剂均为分析纯(化学试剂公
司)。
1.3 样品制备
新疆紫草，粉碎，在萃取温度 50 ℃、萃取压
力 30 mPa、分离压力 6 mPa的条件下经超临界CO2
提取得到脂溶性提取物，萃余物取 100 g，依次用
95%乙醇溶液、60%乙醇溶液 500 mL提取 2次，
得到的提取物经旋转蒸发仪减压浓缩，再采用不
同极性的溶剂分级萃取，得到紫草的提取物的样
品。样品的制备流程见图 1。
1.4 抗氧化活性的评价方法
1.4.1 清除羟基自由基的活性评价 采用邻二氮
菲 -Fe2+氧化法测定 [10]。H2O2/Fe2+体系可通过
Fenton 反应产生羟基自由基，邻二氮菲-Fe2+水溶
液被羟基自由基氧化为邻二氮菲-Fe3+后，其 536
nm最大吸收峰消失。根据上述原理，可以通过比
色法监测 A536 变化来观察反应体系中羟基自由基
氧化作用的强弱。取 0.75 mmol·L1的邻二氮菲溶
液(采用无水乙醇配制成 75 mmol·L1，使用时用去
离子水稀释 100 倍，该稀释液要求每天新鲜配制)
1 mL 于试管中，依次加入磷酸盐缓冲溶液(0.2
mmol·L1，pH=7.4)2 mL和重蒸水 1 mL，充分混
匀后，加 0.75 mmol·L1硫酸亚铁溶液 1 mL，混匀，
再加入 0.01% H2O2溶液 1 mL，混合均匀后于 37 ℃
恒温箱中温育 60 min。冷却后，在 536 nm处测定
吸光值(以蒸馏水做空白)，所测得的数据为损伤管
的吸光值。未损伤管以 1 mL 蒸馏水代替损伤管中
1 mL 0.01%的双氧水(H2O2)，操作方法同损伤管，
可测得 536 nm 未损伤管的吸光值。样品管以 1 mL
样品代替损伤管中的 1 mL蒸馏水，操作方法同损
伤管，可测得 536 nm样品管的吸光值。清除率的
计算公式为：
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图 1 紫草提取物的提取流程示意图
Fig 1 Flow diagram for Arnebia euchroma (Royle) Johnst extracts
清除率 E(%)=[(A(样品组的吸光度)A(损伤管的吸光度))/
(A(未损伤管的吸光度)A(损伤管的吸光度))]×100%
1.4.2 清除 DPPH·的活性评价 用甲醇配制成浓
度为 0.5 mg·mL1的 DPPH·的标准溶液，并稀释成
一系列不同浓度 0.01~0.05 mg·mL1的稀释液，于
517 nm处测定吸光值，得到 DPPH·的浓度和吸光
值的标准曲线。取浓度 0.01~2 mg·mL1样液 1 mL
于试管中，加入 3 mL浓度为 0.1 mmol·L1的DPPH
溶液，室温避光反应，反应 30 min后于 517 nm处
测其吸光值。考虑到实验样品的颜色不完全一致，
可能会给结果带来一定的误差，因此测定中采用
稀释溶剂与等体积样品做参比[11]。DPPH·自由基清
除率可通过下式计算：
清除率 E/%=[1A(加样品时 DPPH·溶液的吸光值)/
A(未加样品时 DPPH·溶液的吸光值)]×100%
1.4.3 β-胡萝卜素-亚油酸体系的总抗氧化活性评
价 采用文献报道的 β-胡萝卜素-亚油酸乳化液法[12]
测定。取 0.2 mg·mL1 的 β-胡萝卜素的氯仿溶液
1 mL加入一圆底烧瓶中，在不超过 40 ℃的水浴中
减压蒸馏除去氯仿，然后加入 20 mg 纯亚油酸、
200 mg吐温-40乳化剂，和 50 mL蒸馏水并强烈
振摇得到 β-胡萝卜素-亚油酸的乳化液。将 5 mL β-
胡萝卜素-亚油酸乳化液逐一加入含有 0.2 mL 样
品(2 mg·mL1)或标准对照物(BHT为 0.5 mg·mL1，
芦丁的浓度为 1 mg·mL1)的测试管中，控制组用
0.2 mL 的蒸馏水代替样品。混合均匀后立即转移
到比色皿中，在 470 nm 处测定其“0”时刻的吸
光值。然后将试管置入 50 ℃恒温水浴中，每间隔
10 min读取一次吸光值，直到控制组中的 β-胡萝
卜素的颜色消失(大约 120 min)。β-胡萝卜素的褪
色的程度与样品的抗氧化程度的强弱有关，样品
的抗氧化活性按照其对应于零时刻的反应动力学
曲线计算。样品的总抗氧化活性 AA(%)计算公式
为：AA(%)=[1(A0 样At 样)/(A0 控At 控)]×100%，式
中：A0 样为样品在零时刻的吸光值；At 样为样品在
50 ℃保温 120 min 后的吸光值；A0 控为控制在零
时刻的吸光值；At 控为控制在 50 ℃保温 120 min
后的吸光值。
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1.4.4 硫氰酸铁(FTC)试验 参照文献[13]报道的
方法，取 4 mL 样品(用 99.5%乙醇配制成浓度为
1 mg·mL1)和 4 mL亚油酸溶液(用 99.5%乙醇配制
成浓度为 2.51%)于一具塞的 25 mL的试管中，加
入 8 mL 0.02 mol·L1的磷酸盐缓冲溶液(pH=7.0)，
再加入 4 mL的蒸馏水以达到最终体积为 20 mL的
反应液。控制组用 4 mL 蒸馏水代替样品，4 mL
与样品相同浓度的 BHA 和 BHT 用做对照。该反
应液在 40 ℃的烘箱中避光培养。
取 0.1 mL上述反应液于一 15 mL的试管中，
加入 9.7 mL浓度为 75%的乙醇水溶液和 0.1 mL浓
度为 30%的硫氰酸铵溶液，摇匀，再加入 0.1 mL
的氯化亚铁 (用 3.5%盐酸配制成的浓度为 0.02
mol·L1的溶液)，迅速混合均匀。准确计时 3 min
后，在 500 nm下测定其吸光值。该值每间隔 24 h
测定一次，直到控制组的吸光值达到最大并开始
降低。抑制脂质过氧化的百分率计算如下：抑制
氧化的百分率 (%)=[1A(样品的吸光值 )/A(控制的吸光值 )]×
100%。
1.4.5 硫代巴比妥酸(TBA)试验 该试验也是按
照上述文献报道的方法来完成的。取 FTC 试验所
用的反应液 2 mL(控制组和标准抗氧化剂对照组
同前)，加入 1mL 20%三氯乙酸水溶液和 2 mL浓
度为 0.67%的硫代巴比妥酸溶液，混均并将混合物
置于沸水浴中反应 10 min。冷却后以 3 000 r·min1
的速度离心 20 min，取上清液于 532 nm下测定吸
光值。样品的抗氧化活性是以 FTC 试验最后一天
所测定的吸光值来计算的，即控制组的吸光值达
到最大值的第 2 天所测定的数值。抑制脂质过氧
化的百分率计算同上。
1.5 统计分析
试验数据的统计分析结果均采用 Microsoft
Excel或 OriginPro 7.0专业软件处理，每个试验至
少重复 3次，试验数据以 sx  表示。
2 结果与讨论
2.1 紫草提取物清除羟自由基的能力
由于羟基自由基氧化作用具有一定的积累
性，随着保温时间的延长，A536 nm的变化幅度逐渐
减小，60 min 趋于稳定，因此，本试验中采用的
保温时间为 60 min。紫草提取物在不同浓度时对
羟基自由基的清除率曲线见图 2，可知尽管样品对
羟基自由基的清除能力强弱不同，但各样品的浓
度和清除能力均呈正相关关系。

图 2 紫草提取物对清除羟基自由基的剂量曲线
Fig 2 Hydroxyl radical scavenging activity of Arnebia
euchroma (Royle) Johnst extracts
羟基自由基的清除能力通常用清除体系中的
50%羟基自由基的半数清除率EC50值来表示，EC50
值越小，样品清除羟基自由基能力越强。试验中
采用芦丁和合成抗氧化剂 BHT作为对照组，紫草
提取物清除羟基自由基的 EC50值见表 1。
表 1 紫草提取物清除羟基自由基的 EC50值
Tab 1 Hydroxyl radical scavenging activity (EC50) of
Arnebia euchroma (Royle) Johnst extracts
样品 EC50/mg·mL1 样品 EC50/mg·mL1
试样 1 0.082±0.008 试样 7 0.073±0.011
试样 2 0.087±0.005 试样 8 0.104±0.009
试样 3 0.056±0.005 试样 9 0.467±0.019
试样 4 0.097±0.010 BHT 0.100±0.003
试样 5 0.128±0.015 芦丁 0.080±0.006
试样 6 0.033±0.007
表中数据表明，紫草提取物中试样 6的清除
能力最强，试样 9 的清除能力最弱，两者的 EC50
值相差 14倍。其中，试样 3、试样 6和试样 7的
EC50 值均小于试验中采用的对照品芦丁 (0.08
mg·mL1)和 BHT(0.10 mg·mL1)的 EC50值，而试
样 1、试样 2和试样 7的 EC50值也均小于 BHT，
略高于芦丁。除试样 9 的 EC50值较大外，其他各
组紫草提取物对羟基自由基的清除能力均很强。
2.2 紫草提取物清除 DPPH·自由基能力的评价
二苯代苦味酰基自由基 DPPH·分析法是一种
筛选自由基清除剂、评价外源抗氧化剂和植物成
分抗氧化能力的一种快速、灵敏、简便的方法。
基本原理是基于 DPPH·为一种稳定的自由基，乙
醇溶液为深紫色，在 517 nm附近有强吸收峰。当
在 DPPH·溶液中加入自由基清除剂时，溶液颜色
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变浅，517 nm吸光度变小，而吸光度变小程度与
自由基被清除程度成线性关系。因此，可用来检
测自由基的消除效率，从而评价物质的抗氧化能
力。样品的抗氧化能力用清除率来表示，清除率
越大，抗氧化能力越强。图 3 是紫草提取物在不
同浓度下对 DPPH·的清除率。

图 3 紫草提取物在不同浓度下对 DPPH·的清除率
Fig 3 Scavenging activity of Arnebia euchroma (Royle)
Johnst extracts of different concentration on DPPH free
radical
由图 3 可知，所有紫草样品对 DPPH·的清除
率均随浓度的增加而增加，在较低浓度时 (0.1
mg·mL1)，试样 8的清除率较低(32.06%)，还不到
清除能力较强的试样 2(75.96%)、试样 6(78.89%)
和试样 7(81.50%)的一半，但当样品的浓度增加到
1.0 mg·mL1时，所有样品的清除能力均达到 80%
以上，浓度继续增加时清除率增加缓慢，在 2.0
mg·mL1时，样品的清除率均达到 90%。紫草提取
物清除 DPPH自由基的 EC50值见表 2。
表 2 紫草提取物对 DPPH自由基清除率的 EC50值
Tab 2 DPPH free radical scavenging activity (EC50) of
Arnebia euchroma (Royle) Johnst extracts
样品 EC50/mg·mL1 样品 EC50/mg·mL1
试样 1 0.102±0.034 试样 7 0.054±0.006
试样 2 0.060±0.003 试样 8 0.374±0.026
试样 3 0.079±0.014 试样 9 0.203±0.035
试样 4 0.260±0.039 BHT 0.080±0.004
试样 5 0.085±0.019 芦丁 0.075±0.005
试样 6 0.060±0.004
表 2 的数据表明，试样 2，3，5，6，7 等对
DPPH 自由基的清除率的 EC50值均小于或接近对
照品 BHT和芦丁，试样 4，8，9等 3个样品的 EC50
值则高于对照品 2.7~4.99 倍不等，说明不同的紫
草提取物的清除 DPPH 自由基的能力差异较大，
其中清除 DPPH 自由基能力最弱的试样 8 的 EC50
值是清除能力最强的试样 7 的 6.93 倍，也分别是
对照品 BHT和芦丁的 4.68倍和 4.99倍。
2.3 紫草提取物的总抗氧化活性评价
β-胡萝卜素-亚油酸乳化液法是检测食品体系
中总抗氧化活性常用的方法之一。β-胡萝卜素是一
种多烯色素，易被氧化而褪色，在反应体系中，
亚油酸氧化而产生的过氧化物等能使 β-胡萝卜素
褪色，随时间的延长吸光度越来越小，样品在 50 ℃
水浴中保温时，可以加快 β-胡萝卜素的漂白速度。
当体系中物质具有抗氧化能力的时候，β-胡萝卜素
的褪色程度与体系中物质的抗氧化能力的强弱有
关。抗氧化能力越强，吸光度下降越慢。紫草提
取物的抗氧化活性的评价结果见图 4。

图 4 紫草提取物总抗氧化活性(n=3)
Fig 4 Total antioxidant activity of Arnebia euchroma
(Royle) Johnst extracts(n=3)
图 4 表明，所有紫草提取物均具有一定的抗
氧化能力，其中，试样 7 的总抗氧化活性最强
(97.0%)，高于对照品 BHT、BHA和芦丁；其次是
试样 6，接近芦丁的抗氧化活性，其余几个试样的
抗氧化活性均小于芦丁，而总抗氧化活性最弱的
是试样 4，1 mg·mL1的浓度时，其总抗氧化活性
仅为 20.78%。
2.4 紫草提取物的抑制脂质过氧化能力的评价
对脂质过氧化能力的评价是通过紫草提取物
在乙醇缓冲溶液中对亚油酸的自动氧化试验来实
现的，采用硫氰酸铁法和硫代巴比妥酸的方法同
时进行测定。这 2 种方法所得的测定结果，均以
样品的吸光值越低，表明其抗氧化能力就越强。
在反应初始阶段，由于脂质氧化会产生一定数量
的过氧化物，这些过氧化物的量采用硫氰酸铁法
每间隔 24 h测定一次，随着氧化产物的不断产生，
通常在大约 7 d 的时间内达到最高值(反应过程是
以阳性控制组在 500 nm的吸光值开始下降为标志
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的)。基于 500 nm测定的吸光值，可以计算得到各
组分采用硫氰酸铁法评价的抑制脂质过氧化的百
分率。而在上述反应过程中体系中产生的丙二醛，
在低的 pH值和高温(100 )℃ 的条件下，可以与硫
代巴比妥酸缩合，形成在 532 nm处有最大吸收的
红色产物，红色产物形成的数量与脂质过氧化反
应所产生的具有臭味的氧化物的数量是一致的，
基于此测定结果，可以得到采用硫代巴比妥酸方
法的抗脂质氧化的抑制百分率。试验结果见表 3。
表 3 紫草提取物对脂质过氧化的抑制率 (试样浓度
1 mg·mL1)
Tab 3 Inhibition lipid oxidation of Arnebia euchroma
(Royle) Johnst extracts(1 mg·mL1)
抑制率/% 样品
硫氰酸铁法/% 硫代巴比妥酸/%
试样 1 56.58±3.15 29.45±1.21
试样 2 82.45±2.11 73.58±3.43
试样 3 77.93±2.42 65.41±2.55
试样 4 66.54±1.02 45.91±2.48
试样 5 77.10±3.00 59.44±3.42
试样 6 93.58±2.49 89.56±3.06
试样 7 91.20±1.68 90.13±2.17
试样 8 89.11±2.07 82.57±3.01
试样 9  
BHT 86.32±2.64 91.68±1.57
BHA 84.46±3.01 90.55±2.05
注： 样品的吸光值高于空白，具有促进脂质氧化的作用
Note: The absorance value of sample is higher than the blank, so it
can promote the role of lipid oxidation
表 3 的数据表明，紫草中 60%的乙醇提取物
的抑制脂质氧化能力较强，除其中极性最强的试
样 9 外，其余试样 6、7、8 的抑制脂质过氧化作
用的能力均高于对照品 BHA和 BHT，也明显高于
90%乙醇提取物的样品和试样 1(超临界 CO2萃取
的紫草浸膏)，说明紫草提取物中中等极性部分的
组分抗脂质过氧化能力更强。试样 9是在 1 mg·mL1
浓度下，测试样品中唯一表现为促脂质氧化作用
的组分。
3 讨论
紫草中研究最多的是其中的脂溶性萘醌类色
素，对其抗炎、杀菌、抗病毒、抗肿瘤和免疫调
节作用的研究一直是研究热点。本实验采用超临
界 CO2 萃取首先分离出紫草中的萘醌类色素，萃
余物依次用 95%乙醇和 60%的乙醇提取，对得到
的乙醇提取物分别采用不同极性的溶剂分步萃取
得到紫草不同极性部位的 8 个提取物，并采用 4
个不同的抗氧化评价体系对上述 8 个提取物的抗
氧化活性进行了评价，同时与超临界 CO2 提取物
进行对照。由于各种抗氧化试验评价体系的作用
机理不同，因此试样在不同的抗氧化体系中表现
出的抗氧化能力不尽相同。在清除羟基自由基和
DPPH自由基的评价体系中，9个试样均具有较强
的抗氧化活性，其中乙醚提取物(试样 2和 6)和乙
酸乙酯提取物(试样 3 和 7)的清除能力与对照品
BHT和芦丁相当或更强。在总抗氧化评价体系中，
试样 7 的总抗氧化活性最强，清除能力高于对照
品 BHT 和芦丁，比抗氧化活性最弱的试样 4 高 3
倍多。在抑制脂质过氧化作用评价体系中，除试
样 9外，其他试样均呈现出不同程度的抑制作用，
其中试样 6、7、8 的抑制脂质过氧化能力接近或
好于对照品 BHT和 BHA。总体来看，所有测试试
样中，乙酸乙酯和乙醚提取物在 4 个抗氧化试样
评价体系中均表现出很强的活性，在超临界 CO2
提取物抗氧化能力适中，在 0.1 mg·mL1的浓度下
对羟基自由基和 DPPH 自由基的清除能力接近同
浓度的黄酮类物质芦丁，而其抑制脂质过氧化的
能力却明显小于对照品 BHT和 BHA；而极性相对
较大的组分所表现出抗氧化能力相对较弱。
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收稿日期：2012-04-03



萝藦果壳多糖脱蛋白方法研究

崔錾 1，韩冠英 2，马寅达 2，郭斌 2*(1.辽宁医学院，辽宁 锦州 121001；2.辽宁医学院附属第一医院，辽宁 锦州 121001)

摘要：目的 藦确定萝 果壳多糖脱蛋白的最优方法。方法 以蛋白脱除率和多糖损失率为指标，比较氯仿-正丁醇法(Sevag
法)、三氯乙酸法(TCA 法)、木瓜蛋白酶-Sevag 法和木瓜蛋白酶-TCA 法。结果 Sevag 法、TCA 法、木瓜蛋白酶-Sevag
法、木瓜蛋白酶-TCA 法的蛋白脱除率分别为 73.14%，71.55%，86.03%，75.33%，多糖损失率分别为 24.40%，25.68%，
8.47%，17.13%。结论 木瓜蛋白酶-Sevag 藦法是除去萝 果壳多糖中蛋白的最佳方法。
关键词： 藦萝 果壳；多糖；脱蛋白
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2013)08-0856-04

Study on Deproteinization Methods of Polysaccharide from Metaplexis Japonica Nutshell

CUI Zan1, HAN Guanying2, MA Yinda2, GUO Bin2*(1.Liaoning Medical University, Jinzhou 121001, China; 2.The No.1
Affiliated Hospital of Liaoning Medical University, Jinzhou 121001, China)

ABSTRACT: OBJECTIVE To elect the best deproteinization method of polysaccharide from Metaplexis Japonica nutshell.
METHODS The protein was removed by the methods of Sevag, TCA, papain-sevag and papain-TCA. The rate of
deproteinization and the loss rate of polysaccharide were detected. RESULTS The percentage of deproteinization of Sevag,
TCA, papain-Sevag and papain-TCA were 73.14%, 71.55%, 86.03%, 75.33% respectively and the loss rate of polysaccharide
were 14.40%, 9.22%, 8.47%, 7.13% respectively. CONCLUSION The best deproteinization method of polysaccharide from
Metaplexis Japonica nutshell was the papain-Sevag method.
KEY WORDS: Metaplexis japonica nutshell; polysaccharide; deproteinization


作者简介：崔錾，男，硕士生 Tel: 15641659331 E-mail: 1987tiangangbeidou@163.com *通信作者：郭斌，男，教授，硕导
Tel: (0416)4197079 E-mail: jyguobin@126.com
萝藦(Metaplexis japonica)别名白环藤，多年生
缠绕草本，有乳汁。《本草汇言》记载：“萝藦，
补虚劳，益精气之药也。”常以块根、全草和果壳
入药，目前对萝藦藤和萝藦全草研究较多。杨蕾[1]
对萝藦藤进行了系统实验的研究，确定萝藦中含
有糖类、蛋白质、生物碱类化合物等。贾琳等[2]
通过对萝藦全草粗多糖研究，证明萝藦多糖能提
高免疫抑制小鼠体质量及免疫器官指数，促进脾
淋巴细胞增殖。但目前国内外尚没有对萝藦果壳
多糖进行研究的报道。
植物多糖常混有较多蛋白，会对多糖的研究
产生较大的影响。去除植物多糖中蛋白常用的方
法有 Sevag 法、TCA 法、鞣酸法、及酶法与以上
方法结合法[3-4]，此外还有 HCl 法[5]、NaCl 法和
CaCl2法[6]。本实验比较 Sevag法、TCA法、木瓜
蛋白酶-Sevag法和木瓜蛋白酶-TCA法对萝藦果壳
多糖提取物脱蛋白效果，以确定最优脱蛋白方法，
为萝藦果壳多糖分离纯化提供依据。
1 材料、试剂及仪器
萝藦果壳(采集于锦州市周边，并由锦州市药品
检验所翟铁红主任药师鉴定为萝藦科萝藦果壳)。
考马斯亮蓝 G250(批号：20111006，天津市光
复精细化工研究所 )；葡萄糖对照品 (批号：
C14027000，上海楚定分析仪器有限公司，纯度：