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天冬多糖对小鼠免疫功能影响的实验研究



全 文 :Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
第20卷 第10期
Vol.20 No.10
2014年 9月
September.2014
天冬为补阴药,其植物来源是百合科植物天冬Asparagus
cochinchinensis (Lour) Merr.的干燥块根。天冬在江浙等地的
药用历史已有数百年,其性寒味甘苦,归肺肾二经,具有养阴
润燥,清肺生津的功效,是家用良药。目前,近200种的中药多
糖具有更加广泛的应用,除了上述的功效,其在抗病毒、抗寄
生虫、抗肿瘤、抗肝炎、抗艾滋病和抗辐射等方面都发挥了巨
大的作用[1]。本实验采用天冬多糖(ACP1)对小鼠的免疫功能做
了较详细的实验研究。
1 材料与动物
1.1 天冬多糖的提取、精制与样品的配制 取天冬粉末(40目)
120 g,加蒸馏水2000 mL,按多糖提取、精制与样品的配制等
方法[2]得到精制天冬多糖。精密称取香菇多糖片和天冬多糖,
按香菇多糖片(100 mg·kg-1)组、ACP1高剂量(200 mg·kg-1)组、
中剂量(150 mg·kg-1)组、低剂量(100 mg·kg-1)组的剂量要求
加蒸馏水稀释至所需浓度,备用。
1.2 动物体重 18-22 g,雌雄各半,清洁级,均为昆明种小
白鼠,由浙江医科院实验动物中心提供,动物合格证号:SCXZ
浙201120018。
1.3 试剂与仪器 香菇多糖片(阳性药,浙江普洛康裕天然
药物有限公司,批号,090806),植物血凝素(PHA,上海伊华
临床医学科技公司);FA1004型万分之一电子天平(上海兰科
仪器有限公司);756型光栅分光光度计(上海分析仪器三
厂);FD21型冷冻干燥机(北京四环科学仪器厂);其它试剂均
为分析纯。
2 方 法
2.1 天冬多糖对正常小鼠免疫器官重量的影响[3] 本实验两
次,取均数。选取昆明种小鼠100只,雌雄各半,保持体重18-
22 g。尔后,随机将小鼠分为10组,每组10只,共分成空白对照
(蒸馏水)组,香菇多糖片(100 mg·kg -1)组,ACP1高剂量
(200 mg·kg-1)组、中剂量(150 mg·kg-1)、低剂量(100 mg·kg-1)
组。分别灌胃给药,1次/d,连续7 d。在末次给药后24 h,采用颈
椎脱臼法处死小鼠后,摘除胸腺和脾脏,称重。其标准是以胸
腺或脾脏重量(mg)与体重之比作为胸腺或脾脏指数。
2.2 天冬多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响[4] 按上
法,将小鼠100只随机分为10组,每组10只。按操作方法[4]和公
式:吞噬百分率/%=吞噬CRBC的吞噬细胞数/100个巨噬细胞
数(包括吞噬及未吞噬的巨噬细胞)×100%;吞噬指数=被吞
噬CRBC/100个巨噬细胞数来计算吞噬细胞CRBC的巨噬细胞
数和被吞噬的CRBC数。
2.3 天冬多糖对小鼠血清溶血形成的影响 按上法,随机将
天冬多糖对小鼠免疫功能影响的实验研究
汤小蕾
(浙江医药高等专科学校,浙江 宁波 315100)
[摘要] 目的:探讨天冬多糖对小鼠免疫功能的影响。方法:通过小鼠胸腺和脾脏指数的测定,确定了小鼠巨噬细胞吞噬的
功能、淋巴细胞转化率和血清溶血素的形成。结果:天冬多糖的高、中、低剂量明显能使小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率、
吞噬指数和胸腺、脾脏等免疫器官重量的增加,从而使小鼠淋巴细胞转化率及胸腺、脾脏指数的增加和小鼠血清溶血素水平的
提高。结论:天冬多糖有增强机体免疫功能的作用。
[关键词] 天冬多糖(ACP1);免疫功能;小鼠
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X(2014)10-0083-02
StudyontheEffectsofAsparagusCochinchinensisPolysaccharideonImmunityFunction inMice
TANG Xiao-lei
(Zhejiang Pharmaceutical College,Ning-bo Zhejiang 315100)
[Abstract] Objective: To study the effect of Asparagus cochinchinensis polysaccharide on the immune function of mice.
Methods: Through determining the index of thymus and spleen, the phagocgtosis of peritoneal macrophage, the levels of serum
hemolysin and the lymphocyte transformation rate in mice were obsereved. Results: ACP1, at the high, middle and low dose,
evidently increased the weight of immune organs, improved pyagocytic percentage and phagocytic index, raised the levels of
serum hemolysin and promoted lymphocyte transformation rate in mice. Conclusion: Asparagus cochinchinensis polysaccharide(ACP)
can enhance the immunity of the mice.
[Key words] Asparagus cochinchinensis polysaccharide(ACP); Immune function; Mice
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2014.10.031
第20卷 第10期
Vol.20 No.10
2014年 9月
September.2014Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
小鼠分为10组,每组10只。按操作方法[5]取小鼠摘眼球取血的
稀释血清处理后,离心,取上清液,于分光光度计540 nm处比
色,测定其吸光度(A)值。
2.4 天冬多糖对小鼠淋巴细胞转化的影响 按上法,将小鼠
随机分为10组,每组10只。按操作方法[6]和公式计算淋巴细胞
转化率,并处死动物,剖取脾脏和胸腺称重,按公式:淋巴细
胞转化率/%=转化的淋巴细胞数/(转化的淋巴细胞数+未转
化的淋巴细胞数)×100%来计算脾脏指数和胸腺指数。
2.5 统计学方法 采用SPSS10.0统计分析软件,对两组间数
据用P检验比较其差异,结果以(x±s)表示。
3 结 果
3.1 天冬多糖对正常小鼠免疫器官胸腺和脾脏重量的影响 与
空白对照组比较,ACP高、中、低剂量组均能明显增加小鼠胸
腺指数和脾脏指数,具有细胞免疫增强作用。(见表1)
表 1 天冬多糖(ACP1)对小鼠胸腺和脾脏重量的影响 (x±s)
剂量 胸腺指数 脾脏指数
(mg·kg-1) (mg·kg-1体重) (mg·kg-1体重)
空白对照组 10 - 5.58±0.87 5.52±0.45
香菇多糖对照组 10 100 7.51±0.62b 7.45±1.22b
ACP低剂量组 10 100 6.51±0.62a 6.45±0.26a
ACP中剂量组 10 150 7.28±1.12b 7.12±1.05b
ACP高剂量组 10 200 8.10±1.06b 8.02±1.01b
注:与空白组比较,aP<0.5,bP<0.01。
3.2 天冬多糖 (ACP1)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影
响 与空白对照组比较,ACP1高中低剂量组均有明显增加
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率和吞噬指数,具有非
特异性细胞免疫增强作用。(见表2)
表 2 天冬多糖(ACP1)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能
的影响 (x±s)
组别 动物数 剂量(/mg·kg-1) 吞噬百分率(%) 吞噬指数
空白对照组 10 - 38.98± .81 0.618±0.235
香菇多糖对照组 10 100 47.8±6.2a 1.536±0.224b
ACP低剂量组 10 100 48.2±7.2a 0.85±0.265a
ACP中剂量组 10 150 49.8±1.12a 0.91±0.251a
ACP高剂量组 10 200 50.1±1.06b 1.52±0.312b
注:与空白组比较,aP<0.5,bP<0.01。
3.3 天冬多糖(ACP1)对小鼠血清溶血素形成的影响 ACP1
高中低剂量组均有明显增加小鼠血清溶血素水平,具有显著
的特异性体液免疫增强作用。(见表3)
表 3 天冬多糖(ACP1)对小鼠血清溶血素形成的影响 (x±s)
组别 动物数 剂量(/mg·k-1) 血清溶血素
空白对照组 10 - 0.288±0.235
香菇多糖对照组 10 100 1.545±0.326a
ACP低剂量组 10 100 0.886±0.255a
ACP中剂量组 10 150 1.127±0.341a
ACP高剂量组 10 200 1.524±0.372a
注:与空白组比较,aP<0.01。
3.4 天冬多糖(ACP1)对小鼠淋巴细胞转化的影响 与空白
对照组比较,ACP1高、低剂量组均有明显增加小鼠胸腺、脾脏
指数和淋巴细胞转化率,具有明显的特异性细胞免疫增强作
用。(见表4)
表 4 天冬多糖(ACP1)对小鼠淋巴细胞转化的影响 (x±s)
剂量 胸腺指数 脾脏指数 淋巴细胞
(/mg·k-1) (/mg·k-1体重) (/mg·kg-1体重) 转化率(%)
空白对照组 10 - 2.60±0.39 4.15±0.89 46.9±5.5
香菇多糖对照组 10 100 3.28±0 41a 4.89±0.68a 56.8±3.1b
ACP低剂量组 10 100 2.87±0.30 4.28±0.85 51.6±7.8
ACP中剂量组 10 150 3.08±0.41a 5.18±0.92a 55.8± .1a
ACP高剂量组 10 200 3.48±0.71a 5.68±1.05a 57.8±2.1b
注:与空白组比较 aP<0.5,bP<0.01。
4 小 结
本实验是天冬多糖ACP1对小鼠免疫功能影响的实验研
究,其结果体现了天冬多糖ACP对实验小鼠机体的细胞免疫、
体液免疫和非特异性免疫有较强的综合实力,能大大提高实
验小鼠机体免疫系统的整体功能水平[7-8]。天冬多糖ACP1具体
表现有四点,一是明显地增加了正常小鼠免疫器官重量;二
是提高了小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能;三是促进了血清溶血
素形成;四是增加了淋巴细胞的转化率及免疫器官指数。这
对天冬多糖ACP1将来临床应用具有良好的促进作用,为将来
天冬多糖ACP1的开发利用提出了很好的依据,具有重大的现
实意义和历史意义。
参考文献
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(收稿日期:2013-12-26 编辑:李海洋)
组别 动物数
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