全 文 ：食用蔺 D E B E I L F UNG I2 0 02 (5 )
华美牛肝菌的组织分离及其
栽 ~培 ~初 ~探
吴金荣
(浙江省庆元县职业高中 , 3 23 8 00)
养基配方 :在 p H 为 5 . 5 的 l , o 0 m L 水中 ,加人 3 0 09 松针叶 ,
煮沸至绿黄色 ,过滤后加人 p H S . o 的水至 1 . o 0 m L ,加人啤
酒酵母 g5 , 牛肉膏或维生素 B , 1 5 9 , 砂糖 109 ,加热煮沸后冷却
作为营养液备用 。 接着用松木屑混合 13/ 的阔叶树木屑 50 % ,
玉米粉 20 % ,该菌发生地壤土 30 %拌匀 ,加人营养液 , 将含水
量调至 60 % 即可 。 立即装瓶 、 灭菌 、 接种 ,在 18 ~ 2 ℃下培养 ,
2 个月左右菌丝长满瓶时 ,就可播于 8 0 o m 以上 马尾松林间缓
坡处的须根附近 ,定期观察 。
文章编号 1 00 0一 8 35 7 ( 2 00 2 ) 0 5一 0 0 1 4一 0 1
庆元县是山地辽 阔 , 土地肥沃 , 气候温和 , 它有着得天独
厚的 自然条件 ,其境内马尾松林资源丰富 , 孕育了丰富多彩的
菌根菌 . 其中有一种味道极鲜美的华美牛肝菌 ( B ol et u : sP ic -o
su : F or st )
, 每年发生 于 秋季 ,是一项大宗林特产 品 , 在海拔
SOOm 以上的马尾松林中都有分布 。 该菌主要与马尾松幼根形
成共生关系 , 以 6~ 50 年的树龄为适宜 , 且多生长在马尾松与
栋树 、 杜鹃等乔木组成郁闭度在 0 . 8 左右的混交林 、 砂粒偏酸
性 ( p H S . 5 左右 )壤土的缓坡地面上 , 菌丝每年以 15 一 20c m 的
范围向外扩展 , 当年生长的菌丝要到第二年才能出菇 。 土温为
20 ~ 23 C
, 子实体生长的温度最高在 19 ~ 20 ℃ , 土壤湿度以
6。%较为适宜 。
华美牛肝菌是一种外生菌根菌 。 鉴于菌根菌至今未能实
现人工栽培 。 针对华美牛肝菌这一野生资源的开发利用 ,我们
进行 了菌根菌组织分离及其栽培试验 , 现将结果介绍如下 :
1 华美牛肝菌的组织分离
1
.
1 培养基的配方 ①马铃薯 5 o g( 去皮 )取煮汁 s o m L , 麦
芽 汁 l o o m L , 葡 萄糖 1 5 9 , 维 生 素 B , s o m g , 琼 脂 2 0 9 , 水
l
,
o o o m L
,
p H S
.
5
。 ②取华美牛肝菌生长的山地土壤 2 0 0 9 ,加
人 1 , 0 o m L 水 , 煮沸过滤 ; 另取马 尾松青针叶 3 0 09 , 加人
1
.
0 0 0 m L 水煮沸至松针叶变绿黄色过滤 。 两种滤液混合保持
1
.
0 o m L
。 加人琼脂 209 , 文火煮至琼脂熔化后 ,倒人葡萄糖
209
、 维生素 B : 50 m g 。 稍捣拌 , 即可离火 , 趁热分装试管 , 塞上
棉塞 。 在 1. s k g c/ m ,压力下灭菌 1 小时 , 取 出趁热摆成斜面 ,冷
凝后备用 。
1
.
2 分离方法 采集较幼嫩的华美牛肝菌子实体 , 用利刀小
心削去柄基部泥土和表面脏物 , 用纱布包裹带回 , 当天采集当
天分离 。 分离最好在无菌箱内操作 , 将子实体一册为二 , 再用
解剖刀无菌操作 , 切取菌柄连接处的菌盖中心 组织块直径 3
~ sc m
, 迅速用接种针挑取移放到试管斜面上 ,将已接好的试
管 口包上牛皮纸 , 置 18 ~ 20 `C 的条件下培养观察 。 用组织分
离法获得纯培养难度大 , 根据实践外生菌根菌的组织分离需
要抓好以下三个环节 : ①培养基要新鲜 , 选用大号试管 , 装人
较多的培养基质 ,为防止脱水萎缩 ,在分离前后均要用牛皮纸
封 口包孔 。 ②采用新鲜幼嫩的子实体作分离材料 ,不 能挤压 ,
不宜用清水冲洗 , 避免雨天取样分离 ,挑取的组织块要尽量大
些 , 当天采集当天分离 。 ③要在适温 ( 18 ~ 2 亡 )和黑暗下培
养 , 培养期间不要 翻动 ,雨季 因空气湿度大 ,棉塞容易受潮 , 因
此应放在空气流通的培养室培养 。
.1 3 转管扩繁 获得华美牛肝菌纯菌丝后 , 即可进行转管繁
殖 , 并扩接到固体培养基 上 , 待菌丝发透后用于生产 。 固体培
一 1 4 一
2 栽培研究概况
有关菌根菌人工栽培难以成功 。 目前我国对这方面的研
究甚少 , 而 日本已进行了大量的研究工作 。 为推动这一工作的
开展 , 现将有关栽培方法研究作如下介绍 。
2
.
1 抱子促进法 把已成熟的菇体浸人洁净水里制成抱子
液 , 再在适宜华美牛肝菌生 长的地上 ,将其液注到 10 ~ 1 c5 m
的深孔内 ,让抱子自然萌发 。 试图使菌丝能与马尾松根形成共
生关系长出子实体 。
2
.
2 组织分离法 组织培养获得的纯菌丝 , 生长速度很慢 ,
菌丝 日长量仅 0 . Zm m 。 研究发现 , 菌根菌类菌丝大多数还 和
半知菌类伴生 , 这种伴生菌有促进菌根生长的作用 。 所以菌丝
的纯培养技术应用尚处极大的难度 。
2
.
3 移 土栽培法 此法是把采过华美牛肝菌周围的土壤 , 切
成长 x 宽 x 深为 2 0c m x 10c m x 1 5c m 的方块 ,移植到适宜华
美牛肝菌生长的土壤中 ,但此法在移植后土壤块中的菌丝成
活率较低 ,菌丝很少向外扩展 。
2
.
4 幼苗菌根感染法 就是把马 尾松幼苗移栽到华美牛肝
菌菌丝生长 的地方 ,使幼苗根部感染上菌丝 , 再将其移栽到适
宜生长的地方 ,使菌丝扩展并感染到树根上 。 目前这种方法较
有成功希望 。
在当前世界人工栽培菌根菌技术尚未成功的情况下 , 均
认为采取人工促进生长措施非常必要 ,且已取得了显著成效 。
如果通过人为措施调节林木组成 ,使郁闭度达到 0 . 7一 0 . 8 。
并于春季挖掉林地上的枯枝落叶层 , 只留 1~ 3c m 厚 。 有条件
的地方也 可在出菇前 15 ~ 20 天喷灌水 1 次 ,可增产 3~ 5倍 。
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禾麻栽培户存在的!问题母甚改进措施}
天麻是名贵的中药材 ,栽培简单 , 价格昂贵 ,是广大城乡
人民庭院致富的好门路 。 可现在 天麻栽培成功率低 , 产量不
高 ,麻质差 。 笔者通过几年的栽培和试验 , 总结出现有 天麻栽
培中存在的问题及改进办法 :
1 存在问题 ①蜜环菌衰退 . 大多栽培者都是连年用老菌材
传新菌材 ,致使蜜环菌退化 ,生命力降低 , 菌索分枝能力弱 , 生
长慢 ,扁形 , 易断等 , 对天麻营养供应减弱 。 ②天麻种多代无性
繁殖 ,产量下降 , 甚致失败 。 ③密集深层栽培 ,造成缺氧而减
产 。
2 改进措施 ①采取袍子分离或菌索分离更新复壮蜜环菌 ,
用短枝条蜜环菌菌种繁殖菌材 ,伴栽天麻 , 同时下种 。 ②天麻
种采取有性繁殖与无性繁殖交替进行 , 不断更新麻种 ,无性繁
殖不能超越 3代 。 ③改深层栽培为浅层栽培或地上栽培 ,多层
栽培为两层栽培 ,覆盖物应疏松 ,种麻靠近菌枝 。
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