全 文 ：6 1 10 福建分析测试 研究简报 20 0 2, 11 ( 3 )
气相色谱法测定水溶性美味牛肝菌多糖中单糖的组成
赵彩红 , 林 春 ,
(鞍山师范学院化学系 , 辽宁 ,
田 莹
鞍山 1 1 4 0 0 5 )
摘 要 用糖佩乙酸醋衍生物气相色谱法测定了美味牛肝菌多糖中单糖的组成 , 为美味牛肝菌的结构和功能的研
究提供更有用的信息 。
关锐词 多糖 ; 乙酞化 ; 气相色谱 ; 单糖
C o m P o n e n t a n a l y s i s o f m o n o s a e e h a r i d e s in P o ly s a e e h a r id e s f o r b o l e t u s e d u l i s b u l l
by g a s e h r o m a t o g r a P h y
Z h a o C a ih o n g
,
L i n C h u n
,
T i a n Y i n g
( eD p
a r t m e n t o f C h e m i s t r y
,
A n s h a n N o r m a l oC l l
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n s h a n
,
L i
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,
1 14 0 0 5 )
A bs t r a e t D e t e r m i n a t io n o f m o n o s a e e h a r id e s i n p o ly s a e e h a r id e s 15 r e p o r t e d b y g a s e h r o m a t o g r a p h y
·
M o n o s a e e h a r id e s f r o m p o ly s a e e h a r id e s i n b o l e t u s e d u li s b u l l a r e h y d r o ly z e d in a q u e o s t r i f u o r o
一a e e t ie a e i d
.
T h e n t h e
m o n o s a e e h a r i d e s a r e d e r iv a t iz e d in t o a e e t y la e d a ld o n o n i t r i le s
.
T h e r e s u l t s o f d e t e r m in a t io n s h o w e d t h a t
m
o n o s a e c h a r i d e s i n p o l y s a e e h a r id e s i n e l u d e d m a n n o s e
,
g a l a e t o s e
, x y lo s e a n d g lu e o s e f o r oB l
e t u s e d
u l is B u ll b y T F A
h y d r o ly s is
.
K e y w o r d s P o l y s a e e h a r i d e s ; A e e t y la t i o n ; G a s e h r o m a t o g r a p h y ; M
o n o s a e e h a r id e s
美味牛肝菌别名粗腿磨 、 大腿磨 , 是著名食用
菌 , 营养丰富 , 文献记载有抗癌作用 , 而对其中美
味牛肝菌多糖组分中单糖的分析尚未见报道 。 糖类
分析常用气相色谱法 , 先制备具有挥发性的糖的衍
生物 ,再进行色谱分析 。 衍生方法中硅烷化 1j[ 和三氟
乙酞化 z[] 均有异构体产生 , 进行色谱测定时常易产
生多峰而影响组分的分离和定性 ; 糖醇乙酞化是在
衍生化之前先用硼氢化钠将糖还原为糖醇 , 再转变
为乙酸酷衍生物的方法 , 此法可避免异构体的产生 ,
但除去硼氢化钠非常耗时且麻烦 a[J 。 本文采用糖氰
乙酸酷衍生方法 , 此法克服了由异构体而产生的多
峰现象 , 衍生物制备简单 , 是一种较好分析多糖中
单糖组分的方法 。 本实验分析了水溶性美味牛肝菌
多糖中单糖的组成 。
1 实验部分
L l 主要仪器和试剂
气相色谱一质谱联用仪
普公司 ) 。 半乳糖 、 葡萄糖 、
H P 6 8 9 o / 5 9 7 3 (美国惠
甘露糖 、 木糖 、 岩藻糖 、
鼠李糖和肌醇为分析纯或生化试剂 ; 盐酸轻胺 、 乙
酸醉和三氟乙酸 ( T F A ) 均为分析纯 ; 多糖样品由本
单位生化实验室所制 。
1
.
2 多糖的水解
称取水溶性美味牛肝菌多糖 2 . o m g , 加入 Zm L
的 4m ol / L T F A 溶液中 , 充氮气后密封 , 置 10 ℃水
解 4 h 。 反应完成后 60 ℃减压旋转蒸发除去水解液 。
1
.
3 糖肪的生成
在水解后的多糖中各加入 2 . o m g 盐酸轻胺和
1
.
4m g 肌醇六乙酸醋 ,加入 0 . l m L 毗吮 , 封管 , 90 ℃
水浴 10m i n , 冷至室温 。
1
.
4 单拍的乙酸化
在上述反应瓶中加人 0 . Zm L 醋酸醉 , 90 ℃水浴
Zo m i n
, 然后 9 0℃减压旋转蒸发 , 加 0 . s m L 氯仿即
可进行气相色谱一质谱分析 。
L S 气相色谱一质谱分析条件 [’j
G C 一 M S 条 件 : H P 一 5 ( 3 o m x 0 . 2 5m m X
。 . 25 拌m )弹性石英毛 细管柱 ; 柱温以 15 ℃ /m in 从
1 5 0℃升至 2 4 0 ,C ,保持 3m i n ;气化室温度 28 0℃ ;检
作者简介 : 赵彩虹 (l 9“ 一 ) , 女 , 讲师 .
2 0 0 2
,
1 1 ( 3 ) 福建分析测试 16 1 1
测器 和进 样 器 温度 2 50 ℃ ; 气体流 量 l m L /m in
( H e ) ;分流比 : 4 0 : l ;进样量 : 0 . 2拜L 。 E l 离子源 ; 电
离能量为 7o e V ;离子源温度 2 3 0 ,C 。 通过 G 1 7 o 1 B A
化学工作站数据处理系统收集和记录信号 。
2 结果与讨论
本工作完成 了六种标准单糖在 O V一 1 01 毛绷
管柱的分离 ` (图 1 ) 。 多糖中单糖种类的定性采用与
标准单糖的色谱保留值相对照的方法 , 并应用 G C
一 M S s[J 进一步确定 。 测定结果表明水溶性美味牛肝
菌多糖含甘露糖 、 半乳糖 、 木糖 、 葡萄糖 (图 2 ) 。 本
实验标准单糖的色谱保留值和多糖组分中各单糖衍
生物的保留值 (表 l ) 。
时间 (分 )
图 2 水溶性美味牛肝菌中单箱的色谱
为了减少溶剂峰的 “ 拖尾 ” 对测定的干扰 , 可
将反应后所得到的溶液在 90 ℃水浴中减压浓缩至
干 , 加人 0 . s m L 氯仿使残留物溶解后 , 取样进行气
相色谱分析 。 由于衍生物浓度的提高 , 可使进样量
显著减少 , 从而减少了溶剂峰的 “ 拖尾 ” , 有利于组
分的测定 。 采用浓缩后处理的方法具有简便快速的
优点 。
时间〔分 )
图 l 标准单摊的色谱
表 l 标准单枯及水溶性美味牛肝菌中单箱的保留时间
单 糖 臀 瞥 木糖 梦 誓 蟹
标准保留时间
( m i n )
4
.
0 9 5
.
6 9 4
.
28 5
.
85 5
.
6 3 4
.
20
水溶性美
味牛肝菌 5
.
6 6 4
.
25 5
.
8 2 5
.
6 0
参 考 文 献
【1〕李铁林 , 吴昌贤 , 蒋挺大等 . 糖和搪醇的气相色谱分析 .
分析化学 , 1981 , 9 ( 3 ) : 2 9 5一 2 98 .
〔2〕张维杰 . 搪复合物生化研究技术 . 杭州 : 浙江大学出版
社 , 1 9 9 4 , 1 0 .
【3〕陶乐平 , 丁在富 ,张不昌 . 气相色谱在多搪结构测定中的
应用 . 色谱 , 19 9 4 , 12 ( s ) : 35 1一 35 4 .
〔4〕孙云霞 , 吴士兰 . 气相色谱与色 一质联用仪分析条件的
研究 . 天津化工 , 1994 , ( 4 ) : 25一 2 7 .
【5」白日破 . 质谱法测定多糖结构的机理研究 . 光谱实验室 .
2 0 0 1
,
18 ( 2 ) : 16 5一 16 7 .
(上接 第 1 6 2 3 页 )
3
.
6 准确度试验和试样的分析
选用国家标样和实际的生产样品 , 在本实验条
件下进行分析 , 其分析结果如表 4 所示 。
表 4 准确度实验 (环 )
编号
, ` , Z S HG A X HG Z S H G Z S H G Z一 2 -
一
2
一
8 28 4 1 28 6 9
标准值 0 . 0 0 22
分析值 0 . 0 0 2 2
0
.
0 0 5 2 0
.
0 0 6 6 0
.
0 2 3 0 0
.
0 0 32 0
.
0 0 2 0
内 , A l s 的分析值与标准值有较好的吻合 。
4 结 论
只要严格控制好仪器的分析参数和工作条件 ,
仔细操作 , 采用 B A IR D D V 一 5 真空直读光谱仪分析
钢中的微量酸溶铝 , 不仅分析速度快 , 且分析下限
及准确度和精度都能满足我厂生产和科研的需要 ,
目前该法已应用于生产实验中 。
0
.
0 0 5 3 0
.
0 0 6 8 0
.
0 2 26 0
.
0 0 3 3 0
.
0 0 1 8 参 考 文 献
[ 1 〕 B a i r e eS e t r o e o m P .
v e r s
i
o n s
,
6 一 28 .
o p e r t in g p
r o e e d u r e s
从表 3 可以看出 , 在 0 . 0 0 2 0 % ~ 0 . 0 2 5%范围