全 文 ：·论著· 7Journal of China Prescription Drug Vol.13 No.12
欧亚旋覆花不同溶剂提取物总多酚、总黄酮含量及还原能力测定
何国云 1，耿红梅 2 ＊
（1 秦皇岛市山海关人民医院，河北秦皇岛 066200；2 衡水学院应用化学系，河北衡水 053000）
【摘要】目的 测定欧亚旋覆花 4 种不同溶剂提取物的总多酚含量、总黄酮含量和体外抗氧化活性。方法 以没食子酸为对照品采用福林 - 酚
试剂法测定欧亚旋覆花提取物中总多酚的含量，采用可见 - 紫外分光光度法以芦丁为对照品测定欧亚旋覆花提取物中总黄酮的含量，通过测定
DPPH 自由基清除率、氢氧基清除率和还原能力来评价欧亚旋覆花提取物的抗氧化活性。结果 在 4 种欧亚旋覆花不同溶剂提取物中，总黄酮含量
从高到低的顺序为乙酸乙酯提取物（IAEE）＞正丁醇提取物（IBE）＞石油醚提取物（IPEE）＞氯仿提取物（ICE）；总多酚含量从高到低的顺序为
IBE ＞ IAEE ＞ IPEE ＞ ICE。欧亚旋覆花提取物还原能力从高到低的顺序为 IAEE ＞ IBE ＞ IPEE ＞ ICE，与总黄酮含量顺序一致。结论 欧亚旋
覆花正丁醇提取物总多酚含量最高，欧亚旋覆花乙酸乙酯提取物总黄酮含量最高且具有很强的还原能力。
【关键词】欧亚旋覆花；总多酚含量；总黄酮含量；还原能力；测定
Determination of total phenolics contents， total flavonoids contents and antioxidant activities of four different solvent extracts of Inula Britannica L.HE
Guo-yun1， GENG Hong-mei2. 1 Qinghuangdao Shanghaiguan Peoples Hospital， Qinhuangdao， Hebei 066200， China; 2 Hengshui University， Hengshui，
Hebei 053000， China.
【Abstract】Objective To determine total phenolics contents， total flavonoids contents and antioxidant activities of four different solvent extracts of Inula
Britannica L. Methods Total phenolics contents of the extracts prepared are determined with Folin-Ciocalteau reagent according to the method using gallic acid
as a standard phenolic compound. The total flavonoids contents of the extracts prepared are determined by UV spectrophotometry and rutin was used to make the
calibration curve. Antioxidant activities of the extracts prepared are evaluated applying DPPH （1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl）radical scavenging， total reducing
power and hydroxylion scavenging assay. Results The decreasing order of total flavonoids contents is acetate ethyl extract（IAEE）＞ n-butanol extract（IBE）
＞ petroleum ether extract（IPEE）＞ chloroform extract（ICE）in four different solvent extracts. The decreasing order of total phenolics contents is IBE ＞ IAEE
＞ IPEE ＞ ICE. The decreasing order of reducing capacity is IAEE ＞ IBE ＞ IPEE ＞ ICE in all the methods which is in conformity with total flavonoids content.
Conclusion Acetate ethyl extract has highest total flavonoids content and strongest antioxidant activities， n-butanol extract has highest total phenolics content.
【Key words】Inula Britannica L.; Total phenolics content; Total flavonoids content; Reducing capacity; Detemination
活性氧自由基在自然界普遍存在，人类的 200 多种疾病，如
动脉粥样硬化、心脑血管疾病、糖尿病等，都与活性氧自由基有
关。因此从天然植物中寻找好的抗氧化剂始终是研究的热点。
研究表明，植物多酚含量及种类与抗氧化性功效有关 [1]。黄酮
类化合物是自然界中广泛存在的一大类化合物，常以游离黄酮
或黄酮苷的形式存在，具有清除自由基和抗应激反应的能力，临
床上可以治疗多种疾病。
欧亚旋覆花是一种传统的中草药，为菊科植物欧亚旋覆花
（Inula Britannica L.）的干燥头状花序，主要分布于中国、日本和韩
国，具有降气、消痰、行水、止咳的功效。中国药典收载的旋覆花有
两种，一是菊科植物旋覆花（Inula japonica Thunb.）花序，一是欧亚
旋覆花（Inula britannica L.）的花序，性味咸、温，入肾、肺经，具有降
气止呕，消痰行水等功效 [2]。欧亚旋覆花含有甾醇、倍半萜、香豆
素及黄酮类化合物等多种化学成分 [2-4]，具有抗菌、抗炎、抗病毒、
抗肝损伤、抗肿瘤、抗氧化等 [5] 多种生物活性。在前期工作的基础
上，作者继续研究不同溶剂提取物的欧亚旋覆花的还原能力，为进
一步研究欧亚旋覆花中黄酮类化合物的抗氧化机理打下基础。
1 仪器与试药
实验所用的药材均采购于山西，经河北医科大学聂风禔教
授鉴定为菊科植物欧亚旋覆花（Inula Britannica L.）。
抗坏血酸（Vc）、没食子酸、芦丁对照品均购于中国药品生
物 制 品 检 定 所，批 号 分 别 为 021225、120563-200412、100080-
200707；DPPH 自 由 基，2，6- 二 叔 丁 基 对 甲 苯 酚（BHT）购 于
Sigma-Aldrich 公司；其他化学试剂均为国产分析纯或生化试剂。
仪器：ABORTATA-4000 旋转薄膜蒸发仪（Heidolph 公司，德
国）；TU-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器
有限责任公司）； KQ-400KDB 型高功率数控超声波清洗器（昆
山市超声仪器有限公司）；FZ102 微型植物试样粉碎机（北京永
光明仪器有限公司）；DZF-6021 型真空干燥箱（上海精宏实验设
备有限公司）；BS210S 电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）。
2 方法与结果
2.1 欧亚旋覆花不同溶剂提取物的制备
取欧亚旋覆花药材室温用 95% 乙醇浸提，每次 48 h，共
3 次，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，提取液于 60℃旋转薄膜
蒸发仪浓缩，稠膏真空干燥至近恒重。将膏状物悬浮于水中
（1∶2），依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，浓缩并
真空干燥，分别得石油醚部分提取物（IPEE）、氯仿部分提取物
（ICE）、乙酸乙酯部分提取物（IAEE）、正丁醇部分提取物（IBE），
备用。用水或乙醇稀释制备下面实验所需提取液 [6]。
2.2 总多酚含量
参照文献 [7]，测定各欧亚旋覆花各提取物总多酚的含量，
采用 Folin-Ciocalteu 法，以没食子酸为对照品，绘制没食子酸
标准曲线，回归方程为 A ＝ 0.258 2 C ＋ 0.838 6（r ＝ 0.9996），
其中 A 为吸光度值，C 为没食子酸标准溶液浓度（g/L）。在
0.002 ～ 0.024 g/L 时没食子酸质量浓度与吸光值具有良好的线
性关系。对于不同处理条件下制得的样品测试溶液，各精密量
取 1.00 mL，置 50 mL 容量瓶中，测定其吸光度，根据标准曲线计
算出欧亚旋覆花多酚质量浓度 C（g/L），计算样品中总多酚含
量 W（mg/g），公式如下：
总多酚含量 W ＝ CVn/m
公式中，C（g/L）为欧亚旋覆花多酚质量浓度；V（mL）为
体积；n 为稀释倍数；m（g）为欧亚旋覆花质量；W（mg/g）为多
酚含量。
欧亚旋覆花各部分提取物 IPEE、ICE、IAEE、IBE 的总多酚
含量分别为 2.08，1.72，8.05，11.43 mg/g，测定结果表明，欧亚旋
覆花正丁醇提取物 IBE 的总多酚含量最高。
基金项目：河北省自然科学基金（303470）
＊通信作者：耿红梅，E-mail：hsghm@126.com
·论著·8 中国处方药 第 13 卷 第 12 期
表 1：欧亚旋覆花不同提取物的还原能力
浓度（g/L） 0.025 0.05 0.1 0.2 0.3
IPEE 0.165±0.006 0.193±0.004 0.259±0.003 0.371±0.007 0.532±0.005
ICE 0.140±0.003 0.175±0.002 0.232±0.002 0.347±0.003 0.445±0.003
IAEE 0.251±0.003 0.306±0.002 0.505±0.001 0.782±0.003 0.985±0.003
IBE 0.218±0.005 0.247±0.008 0.433±0.006 0.596±0.007 0.899±0.002
BHT 0.225±0.001 0.258±0.003 0.452±0.003 0.610±0.002 0.978±0.002
2.3 总黄酮含量
参照文献 [8]，测定欧亚旋覆花提取物总黄酮的含量，采用
可见 - 紫外分光光度法，以芦丁为对照品，绘制标准曲线，回归
方程为 A ＝ 103.1 C-5.285（r ＝ 0.999 7），其中 A 为吸光度值，
C 为芦丁标准溶液浓度（g/L）。芦丁浓度在 10.1 ～ 50.5 μg/mL
范围内线性关系良好。分别精密量取不同处理下制得的样品测
试溶液 2.00 mL，置于 50 mL 容量瓶中，测定其吸光度，计算出欧
亚旋覆花总黄酮的含量。欧亚旋覆花各部分提取物 IPEE、ICE、
IAEE、IBE 的总黄酮含量分别为 0.81，0.97，9.45，4.82 mg/g，结果
表明，欧亚旋覆花乙酸乙酯提取物 IAEE 的总黄酮含量最高。
2.4 还原能力 [9]
物质还原能力的测定就是对该物质将 Fe3 ＋还原为 Fe2 ＋的
能力的测定。把欧亚旋覆花提取物配制成不同浓度的乙醇溶
液，分别取溶液 1.0 mL，依次加入 2.5 mL 0.2 moL/L 磷酸缓冲液
（pH ＝ 6.6），2.5 mL 10 g/L 的铁氰化钾溶液，混匀，在 50℃水浴下
作用 30 min，然后加入 2.5 mL 100 g/L 的三氯乙酸，在 3 000 r/min
下离心 10 min，取 2.5 mL 上清液和 0.5 mL 0.1% 的氯化铁水溶液
混合，室温反应 10 min，然后在 700 nm 波长下（以溶剂代替样品
做空白）测定吸光度值，计算吸光度平均值。从表 1 可以看出，
欧亚旋覆花提取物的还原能力和提取物的浓度呈一定的线性关
系。4 种欧亚旋覆花的不同溶剂提取物中，乙酸乙酯提取物的还
原能力比对照 BHT 强。它们的还原能力大小顺序为：IAEE ＞
BHT ＞ IBE ＞ IPEE ＞ ICE。
3 讨论
氧气是人类生命中不可缺少的，生命的过程需要氧气，但氧
气和体内某些物质化学反应，生成过量的活性氧、自由基而得不
到及时消除时，将产生毒性对细胞造成伤害，甚至危及生命，在
许多疾病及衰老的发生中起着重要作用，引起人们的极大关注。
因此，寻找能清除自由基的高效抗氧化植物成为研究热点。中
草药中往往含有多种抗氧化活性成分，而不同的提取溶剂和提
取方法差异较大。
通过对欧亚旋覆花 4 种不同溶剂提取物总黄酮含量、总多
酚含量、还原能力的测定可见，总黄酮含量从高到低的顺序为：
乙酸乙酯提取物＞正丁醇提取物＞ 石油醚提取物＞氯仿提取
物，总多酚含量从高到低的顺序为：正丁醇提取物＞ 乙酸乙酯
提取物＞石油醚提取物＞氯仿提取物。欧亚旋覆花提取物各种
方法抗氧化活性的顺序与总黄酮含量顺序一致。表明，在 4 种
欧亚旋覆花不同溶剂提取物中，欧亚旋覆花乙酸乙酯提取物总
黄酮含量比其他三种高且具很强的还原能力，说明欧亚旋覆花
还原能力与总黄酮有很大关系，欧亚旋覆花中的黄酮类化合物
是主要的抗氧化活性物质。
目前对欧亚旋覆花的化学成分、含量测定等研究报道很多，
对单体黄酮的抗氧化活性的报道较少，总黄酮抗氧化活性、抗氧
化机制的研究更少。我们前期研究发现，欧亚旋覆花乙酸乙酯
部位的总黄酮经大孔树脂富集后含量很高，有可能开发成新药。
因此，我们有必要对欧亚旋覆花乙酸乙酯部分提取物的抗氧化
活性及机制进行深入研究。
参考文献
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[9] 朱会霞 . 覆盆子黄酮抗氧化活性研究 . 现代食品科技，2012，28
（10）：1302-1035.
中西药物引起荨麻疹型药疹 86 例临床分析
廖伟坚 1，黄剑清 2
（1 福建卫生职业技术学院药学系，福州 350101；2 福州市皮肤病防治院，福州 350025）
【摘要】目的 分析中西药物引起荨麻疹型药疹的临床特点及致敏药物。方法 收集 2009 年～ 2013 年间诊治的由中西药物引起的荨麻疹型药疹
86 例患者的临床资料及致敏药物进行回顾性调查分析。结果 86 例荨麻疹型药疹患者临床皮疹均表现为大小不等的风团样损害，致敏药物有 15
种，其中抗微生物药 48 例，占 55.8%，解热镇痛抗炎药 20 例，占 23.2%，生物制剂 9 例，占 10.5%，其他药物 9 例，占 10.5%。结论 引起荨麻疹型药疹
的致敏药物主要是抗微生物药和解热镇痛抗炎药，患者经糖皮质激素类和抗组织胺药等药物治疗均获痊愈。
【关键词】中西药物；荨麻疹型药疹；临床分析
Research and Analysis on 86 urticarial drug eruption cases induced by different medicines LIAO Wei-jian1， HUANG Jian-qing2. 1 Fujian Health